自制腫瘤標志物室內(nèi)質(zhì)控血清的應(yīng)用評價

張 輝,郭 瑛

(1.北京優(yōu)聯(lián)耳鼻喉醫(yī)院 檢驗科，北京100122；2.北京市朝陽區(qū)三環(huán)腫瘤醫(yī)院 檢驗科，北京100122)

自制腫瘤標志物室內(nèi)質(zhì)控血清的應(yīng)用評價

張 輝1,郭 瑛2

(1.北京優(yōu)聯(lián)耳鼻喉醫(yī)院 檢驗科，北京100122；2.北京市朝陽區(qū)三環(huán)腫瘤醫(yī)院 檢驗科，北京100122)

目的 探討患者血清作為化學發(fā)光法檢測腫瘤標志物室內(nèi)質(zhì)控品的可行性。方法 收集日常工作中無傳染性的剩余血清，自制甲胎蛋白等8個腫瘤標志物項目的高值、低值室內(nèi)質(zhì)控品，每日隨日常標本一同在Cobas8000分析儀上進行檢測，對其精密度及穩(wěn)定性等參數(shù)進行分析。并用伯樂公司(BIO-RAD)質(zhì)控品進行跟蹤比較。結(jié)果 在Cobas8000分析儀上，實驗室自制質(zhì)控品各項指標與BIO-RAD質(zhì)控品無統(tǒng)計學差別(P>0.05)。結(jié)論 自制質(zhì)控品具有制備過程簡便、穩(wěn)定性好、成本低等優(yōu)點，可以滿足室內(nèi)質(zhì)量控制的要求。

自制質(zhì)控血清；腫瘤標志物；室內(nèi)質(zhì)量控制

(ChinJLabDiagn,2016,20:2027)

血清腫瘤標志物(TM)的檢測在腫瘤輔助診斷、療效觀察及評估預(yù)后中都具有重要的臨床意義。要獲得可靠的檢測結(jié)果，必須建立一個全面的質(zhì)量控制體系，做好實驗室內(nèi)質(zhì)量控制是其中一個重要環(huán)節(jié)[1]。目前國內(nèi)實驗室使用的質(zhì)控品多是國外生產(chǎn)的凍干品，訂貨周期長且成本較高。近年來已有國內(nèi)外學者開始進行自制質(zhì)控品的應(yīng)用及穩(wěn)定性研究[2-4]。本實驗利用日常檢測剩余血清，自制腫瘤標志物室內(nèi)質(zhì)控品，并對其精密度及穩(wěn)定性等參數(shù)進行分析，評估其臨床應(yīng)用的可行性。

1 材料與方法

1.1 儀器和試劑 Cobas8000全自動羅氏電化學發(fā)光分析系統(tǒng)，校準品、試劑及耗材均為原裝配套產(chǎn)品。Thermo 905零下80℃超低溫冰箱。BIO-RAD Tumor Marker Plus Control質(zhì)控物，批號分別為54561、54562。

1.2 質(zhì)控血清制備 包括甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)、糖類抗原CA199、CA153、CA125、CA724、神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)、細胞角蛋白19片段(CYFRA211)共8個項目。收集日常檢測中感染組合(乙肝五項、丙肝、艾滋、梅毒)均呈陰性，無溶血、乳糜、黃疸的剩余血清，用已知的高濃度病人血清調(diào)整TM濃度。使各項標志物的濃度至兩個水平：一水平接近相應(yīng)TM的參考范圍上限，作為低值質(zhì)控物；另一水平和BIO-RAD Level2濃度相近，作為高值質(zhì)控物，-80℃冷凍保存。兩周后，置于4℃冰箱緩慢解凍，混勻，過濾去除血清中膠凍狀的聚集物，再行感染組合檢測后，每支0.5 ml密閉分裝，-80℃冰箱保存待用。

1.4 統(tǒng)計學處理 采用SPSS17.0軟件包進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計處理。多組間比較用F檢驗，兩組間比較用T檢驗。P<0.05為有統(tǒng)計學差異。

2 結(jié)果

2.2 與BIO-RAD定值質(zhì)控品比較 自制質(zhì)控品與BIO-RAD質(zhì)控品120天累積實測值對比見表2、表3。對高、低濃度水平120天各項TM檢測的累積變異系數(shù)與BIO-RAD質(zhì)控品的累積變異系數(shù)進行T檢驗，P值分別為0.153及0.325，無統(tǒng)計學差異。

2.3 自制質(zhì)控品穩(wěn)定性觀察 自制質(zhì)控品120天內(nèi)各月測定值見表4、表5，對各月均值進行多組間F檢驗，P值均>0.05,無統(tǒng)計學差異，說明在實驗期內(nèi)自制質(zhì)控品穩(wěn)定性良好。

表1 同日20份自制質(zhì)控品檢測各項TM的均值、標準差、變異系數(shù)

表2 自制質(zhì)控品與BIO-RAD質(zhì)控品各項TM 120天累積實測值低值的對比

表3 自制質(zhì)控品與BIO-RAD質(zhì)控品各項TM 120天累積實測值高值的對比

表4 自制低值質(zhì)控品各月TM測定值±SD)比較

表5 自制高值質(zhì)控品各月TM測定值±SD)比較

3 討論

在全面質(zhì)量管理體系中，實驗室內(nèi)質(zhì)量控制是一個重要環(huán)節(jié)，而質(zhì)控品是保證質(zhì)控工作的重要物質(zhì)基礎(chǔ)。根據(jù)衛(wèi)生部《臨床實驗室定量測定室內(nèi)質(zhì)量控制指南》[1]，質(zhì)控品物理性狀可有凍干質(zhì)控品、液體質(zhì)控品和混合血清等；質(zhì)控血清應(yīng)盡可能與人血清樣本一致，減少基質(zhì)效應(yīng)，反應(yīng)速率盡量與人血清一致，并考慮合理的成本。通過本實驗對自制質(zhì)控品日內(nèi)、日間各項指標的分析，自制質(zhì)控血清瓶間變異小，觀察期內(nèi)質(zhì)控品均值、標準差、變異系數(shù)均保持了良好的穩(wěn)定性，與BIO-RAD質(zhì)控品的各項指標比較無統(tǒng)計學差異，各項目變異系數(shù)均在不精密度要求[5]范圍內(nèi)。各項TM檢測的每月均值、累積均值各組間無統(tǒng)計學差異，無明顯漂移及趨勢變化，觀察期內(nèi)未發(fā)生由質(zhì)控品原因引起的失控。在自制質(zhì)控品做質(zhì)控物期間，8個TM項目共出現(xiàn)2次由于試劑原因引起的室內(nèi)質(zhì)控失控，自制質(zhì)控品與BIO-RAD質(zhì)控品同時出現(xiàn)報警。自制質(zhì)控品除具有無基質(zhì)效應(yīng)、制備過程簡單、成本低廉外，實驗室還可以根據(jù)實際需要，配制自己所需濃度區(qū)間的TM質(zhì)控品，本實驗配制了8個TM參考區(qū)間上限和病理值兩個濃度水平。由于本院腫瘤病人較多，配制相應(yīng)TM濃度水平質(zhì)控物方便。對于高值血清不易獲得的實驗室，可利用冷凍液體血清在緩慢解凍后，物質(zhì)濃度會產(chǎn)生梯度變化的原理制備高、低各水平的質(zhì)控物[6]。還有學者使用單份病人血清分裝制備，避免了各個抗原抗體之間的相互交叉和干擾[7]。在自制質(zhì)控品的制備過程中，必須嚴格按標準對血清進行篩選，以保證自制質(zhì)控品性狀滿足指南中對液性質(zhì)控物的基本要求。

由于本實驗觀察期較短，對于自制質(zhì)控品更長的穩(wěn)定期，還需繼續(xù)觀察。對于使用自制質(zhì)控品的實驗室，應(yīng)當根據(jù)具體條件，制定適合自己實驗室的自制質(zhì)控品制備方法、使用規(guī)程、靶值設(shè)定及相應(yīng)質(zhì)控規(guī)則選擇的標準化文件。確保實驗室管理者在合理考慮成本的同時，保證檢驗質(zhì)量，促進質(zhì)量持續(xù)改進。

[1]GB/T 20468-2006,中華人民共和國衛(wèi)生部《臨床實驗室定量測定室內(nèi)質(zhì)量控制指南》[S].

[2]Goi G,Besozzi M,Bairati C ,et al.Preparation of a Stable Liquid Material for Calibration and Quality Control for Lysosomal Enzymes in Plasma [J].Eur J Clin Chem Clin Biochem,1992,30(10):595.

[3]張麗萍，劉元明，張金紅,等.自制他克莫司室內(nèi)質(zhì)控品的制備及臨床應(yīng)用研究[J].檢驗醫(yī)學,2013(11):1021.

[4]段 勇，王玉明，趙 瀅,等.臨床化學檢驗的液性質(zhì)控血清的制備研究[J].昆明醫(yī)學院學報,2003，2：24.

[5]王治國.臨床檢驗質(zhì)量控制技術(shù)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2004:42-54.

[6]戴 卉，鐘志敏，周小棉,等.腫瘤標志物質(zhì)控血清的研制及其初步應(yīng)用[J].國際檢驗醫(yī)學雜志,2013，34(19):2557.

[7]邵青青，劉志忠，李方強,等.患者血清作為Luminex-200測定腫瘤標志物室內(nèi)質(zhì)控的探討[J].中國綜合臨床，2012,28(11):1187.

The preparation and clinical application research of home-made quality control material

ZHANGHui,GUOYing.

(DepartmentofClinicalLaboratoryofUnicareENTHospital,Beijing100122,China)

Objective To explore feasibility of home-made quality control material.Methods home-made quality control material was prepare by using routine residual serum and was run on Cobas8000 with daily serum samples and RIO-RAD control.Results home-made quality control material show good stability and have no significant difference with RIO-RAD control(P>0.05).Conclusion home-made quality control serum have advantages of low cost,good stability,and can meet the requirements of internal quality control.

Home-made quality control;Tumor marker;Internal quality control

1007-4287(2016)12-2027-03

R73-3

A

2016-01-20)