淺析羅漢果組織培養(yǎng)新技術(shù)的探索

潘利青

摘 要：自200年前開(kāi)始羅漢果就已經(jīng)在我國(guó)種植，在一百多年前羅漢果被發(fā)現(xiàn)有極強(qiáng)的藥用價(jià)值。正是因?yàn)橛凭玫姆N植歷史，才使得人們積累了豐富的集育種、種植和管理于一體的生產(chǎn)模式。羅漢果的價(jià)值被人們發(fā)現(xiàn)后逐漸地改良和優(yōu)化，在優(yōu)化的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)了羅漢果的栽培方法非常的多從有性到無(wú)性。現(xiàn)在不斷更新的技術(shù)也對(duì)羅漢果的育種、繁殖產(chǎn)生了深遠(yuǎn)的影響。本文先是從傳統(tǒng)的羅漢果育種方式出發(fā)，進(jìn)而引出植物組織培養(yǎng)在羅漢果品種優(yōu)化和育種方面的應(yīng)用，并介紹了羅漢果在新興技術(shù)植物組織培養(yǎng)方面的探索。

關(guān)鍵詞：羅漢果；探索；生物新技術(shù)；植物組織培養(yǎng)

中圖分類(lèi)號(hào)： S336 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼： A 文章編號(hào)： 1673-1069（2016）34-90-2

0 引言

近年來(lái)，科學(xué)家在生態(tài)學(xué)的研究引起了人們特別的關(guān)注。目前人類(lèi)在全世界的生態(tài)條件惡化，生態(tài)學(xué)正與其他學(xué)科聯(lián)合起來(lái)，一起研究地球，研究動(dòng)植物努力實(shí)現(xiàn)改善人們生態(tài)生活環(huán)境。近幾年隨著分子生物學(xué)的出現(xiàn)和技術(shù)上的不斷突破，生物學(xué)家也逐漸把“生物與環(huán)境”方面的研究轉(zhuǎn)移到分子水平上。就生物技術(shù)而言科學(xué)家研究出了非常多的新方法新技術(shù)，在動(dòng)物方面有動(dòng)物細(xì)胞融合、基因工程、核移植、胚胎移植、胚胎分割、克隆技術(shù)等，在植物方面有著植物體細(xì)胞雜交、植物組織培養(yǎng)等，這些新技術(shù)不斷地被用到實(shí)際生活中。

1 羅漢果的價(jià)值

羅漢果是桂林的著名特產(chǎn)之一，它又有漢果、長(zhǎng)壽果、假苦瓜等名字。羅漢果是葫蘆科藤本植物，葉心形，雌雄不同株，夏開(kāi)花，秋結(jié)果。在衛(wèi)生部首批公布的藥食兩用名貴中藥材中就有羅漢果，羅漢果含有甜苷、多種氨基酸和維生素等多種藥用成分。中醫(yī)以其果實(shí)入藥，羅漢果主治肺熱咳嗽、扁桃體炎還有便秘等。羅漢果不僅甜度高而且還不產(chǎn)生熱量，因此羅漢果的糖可以用做糖尿病患者和肥胖者代用糖。如圖1所示。

2 羅漢果傳統(tǒng)的繁殖方式

200多年前人們開(kāi)始種植羅漢果，經(jīng)過(guò)兩百多年的種植人們對(duì)其繁殖方式是非常的熟悉。有性繁殖和無(wú)性繁殖是羅漢果主要的繁殖方式，而無(wú)性繁殖在實(shí)際生產(chǎn)中用得較多。

2.1 羅漢果的有性繁殖

有性生殖是一種較為傳統(tǒng)的繁殖方式，這種繁殖方式又被稱(chēng)為種子繁殖，簡(jiǎn)單而言就是利用羅漢果的種子進(jìn)行繁殖。與大多數(shù)種子繁殖的植物一樣，采收的羅漢果的種子經(jīng)過(guò)晾干，來(lái)年春天播種。用此方法繁殖羅漢果比較簡(jiǎn)單，繁殖的系數(shù)比較高，而且繁殖的成苗的適應(yīng)能力也強(qiáng)，但是用此方法繁殖周期比較長(zhǎng)，需要3至4年才能獲得高產(chǎn)，所以很難大規(guī)模的生產(chǎn)。

2.2 羅漢果的無(wú)性繁殖

雌雄不同株并且雌花和雄花花期不同的葫蘆科植物的羅漢果，長(zhǎng)期以來(lái)因?yàn)橛行苑敝炒嬖谝欢ǖ恼系K，所以它的繁殖多以無(wú)性繁殖為主。羅漢果在大規(guī)模種植的時(shí)候這種弊端更容易體現(xiàn)出來(lái)，有性繁殖幼苗成活率只占70%以上，而且生長(zhǎng)時(shí)間比較長(zhǎng)，這時(shí)候羅漢果無(wú)性繁殖的作用就體現(xiàn)出來(lái)了，無(wú)性繁殖是一種不經(jīng)過(guò)受精作用就能繁殖植株的方法。

羅漢果的壓蔓繁殖和嫁接、扦插：羅漢果是一種很容易就從莖段生長(zhǎng)出不定根的植物，八、九月份的雨水過(guò)后，在羅漢果植株旁邊挖出大概10厘米的淺坑，將藤蔓的苗端放入淺坑中，回填松土10厘米左右，用地膜包裹泥土來(lái)保證土壤溫度，十幾天的時(shí)間就培育成功了。在生長(zhǎng)旺盛的6月上旬，選用適應(yīng)性強(qiáng)的品種作為砧木，葉片大、莖粗壯、無(wú)病蟲(chóng)的藤蔓作為接穗來(lái)嫁接繁殖羅漢果。劈接、插接和合接這三種嫁接方法是我們比較常見(jiàn)的。采用嫁接方式培育羅漢果能增加植株的抗旱、抗鹽堿等抗逆性，增加植株的異地適應(yīng)性，提高存活率。選用半實(shí)木化的羅漢果藤蔓作為插穗，用適宜濃度的生根誘導(dǎo)劑涂抹插穗底部，扦插在適宜溫度的土壤中，大約30天就能形成種苗。

3 羅漢果的組織培養(yǎng)

由于長(zhǎng)期的無(wú)性繁殖導(dǎo)致羅漢果的品種退化、產(chǎn)量降低還有嚴(yán)重的病蟲(chóng)害，于是依據(jù)現(xiàn)在的新的生物技術(shù)羅漢果的組織培養(yǎng)便應(yīng)運(yùn)而生。如圖2所示，羅漢果的組織培養(yǎng)技術(shù)就是把離體的組織、器官或者細(xì)胞放在無(wú)菌、無(wú)毒并且環(huán)境適宜的培養(yǎng)基上，嚴(yán)格控制各項(xiàng)操作，利用各種激素使其脫分化產(chǎn)生愈傷組織，然后繼續(xù)誘導(dǎo)再分化產(chǎn)生羅漢果幼苗的過(guò)程。

3.1 羅漢果組織培養(yǎng)的探索與存在的問(wèn)題

林榮等人早在20世紀(jì)80年代，就利用羅漢果的莖尖等部位開(kāi)始對(duì)羅漢果組織培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行了初步的探索與研究。他們當(dāng)時(shí)對(duì)“芽的形成與細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素不同濃度的組合有關(guān)”這個(gè)話題進(jìn)行了比較系統(tǒng)的研究。研究表明，KT（激動(dòng)素，不是植物本身含有的一種細(xì)胞分裂素）與BA（芐氨基腺嘌呤，一種細(xì)胞分裂素）都能誘導(dǎo)離體組織產(chǎn)生愈傷組織，但是BA作用對(duì)于愈傷組織誘導(dǎo)產(chǎn)生不定芽很重要。

羅漢果組織培養(yǎng)苗在正式的生產(chǎn)中使用，也是近幾年才開(kāi)始的事情，由于組織培養(yǎng)技術(shù)還不夠完善，所以在生產(chǎn)中會(huì)存在下面幾個(gè)問(wèn)題：容易感染病毒；穩(wěn)產(chǎn)豐產(chǎn)等優(yōu)良性狀遺傳的不穩(wěn)定；對(duì)羅漢果的生長(zhǎng)規(guī)律掌握得不清楚，導(dǎo)致品種抵抗自然災(zāi)害能力不夠；對(duì)于幼苗是否是脫毒這方面的技術(shù)跟不上。羅漢果產(chǎn)量受影響的另外一個(gè)重要的因素就是病毒病害，比如花葉病毒。有研究表明越小的羅漢果莖尖組織脫毒的效果就會(huì)越明顯，但是組織培養(yǎng)所用的時(shí)間會(huì)增多可成活率卻在降低。

3.2 羅漢果離體組織在組織培養(yǎng)過(guò)程前的殺菌、消毒

長(zhǎng)期暴露在戶外的羅漢果，容易受到污染，在進(jìn)行組織培養(yǎng)之前必須要進(jìn)行消毒處理。普通的消毒方法達(dá)不到試驗(yàn)要求，對(duì)材料的預(yù)處理能有效地解決這個(gè)問(wèn)題。在一定的范圍之內(nèi)，如果對(duì)羅漢果離體組織殺菌、消毒處理的時(shí)間越長(zhǎng)，那么培養(yǎng)基上的污染率不增反會(huì)減。如果處理時(shí)間超過(guò)15分鐘，消毒劑里的氯化汞能使材料的蛋白質(zhì)失活，導(dǎo)致死亡。

3.3 對(duì)羅漢果愈傷組織的再分化處理

NAA（α-萘乙酸）、6-BA （6-芐氨基嘌呤）、IBA（3-吲哚丁酸）、IAA（3-吲哚乙酸）是常見(jiàn)的誘導(dǎo)羅漢果愈傷組織再分化的激素。大量的實(shí)驗(yàn)表明影響羅漢果愈傷組織再分化的主要因素是激素的種類(lèi)和濃度的比例，而光照強(qiáng)度、光照時(shí)間、濕度、溫度等對(duì)于羅漢果愈傷組織的再分化也有一定的影響。實(shí)驗(yàn)表明選用1.0mg/L的6-BA 加上0.05mg/L的IAA的培養(yǎng)基，可使誘導(dǎo)效果達(dá)到最好。

4 結(jié)束語(yǔ)

本文在羅漢果的傳統(tǒng)繁殖方法和組織培養(yǎng)技術(shù)方面做了一定程度的解釋和探索，分析了羅漢果在傳統(tǒng)繁殖方面的優(yōu)劣還較為簡(jiǎn)單地說(shuō)明了羅漢果組織培養(yǎng)在育種方面的優(yōu)點(diǎn)和不足。這種新興的育種方法為羅漢果的繁殖打開(kāi)了新的渠道，相信隨著技術(shù)的不斷突破，羅漢果組織培養(yǎng)育種方式一定會(huì)越來(lái)越完善。

參 考 文 獻(xiàn)

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