二化螟盤(pán)絨繭蜂的室內(nèi)種群飼養(yǎng)和保種

滕子文，吳順?lè)?，李秀花，?琦，葉恭銀

（浙江大學(xué)昆蟲(chóng)科學(xué)研究所，浙江杭州 310058）

二化螟盤(pán)絨繭蜂的室內(nèi)種群飼養(yǎng)和保種

滕子文，吳順?lè)?，李秀花，?琦，葉恭銀*

（浙江大學(xué)昆蟲(chóng)科學(xué)研究所，浙江杭州 310058）

介紹室內(nèi)條件下二化螟盤(pán)絨繭蜂的飼養(yǎng)方法。二化螟幼蟲(chóng)被二化螟盤(pán)絨繭蜂寄生后，間隔不同時(shí)日（0、2、4 d），再在10℃下冷藏10 d后取出，能顯著延緩其子蜂出蜂時(shí)間，且并不影響該寄生蜂的主要生物學(xué)指標(biāo)。二化螟幼蟲(chóng)被二化螟盤(pán)絨繭蜂寄生后，寄生當(dāng)日置入10℃下冷藏30和60 d后取出，雖然其子蜂出蜂率和羽化率有所下降，但能顯著延長(zhǎng)該蜂于寄主體內(nèi)的發(fā)育歷期，這為其室內(nèi)繼代飼養(yǎng)及田間大面積放蜂具有重要意義，并為用于二化螟生物防治提供理論依據(jù)。

二化螟；二化螟盤(pán)絨繭蜂；溫度；發(fā)育；寄生性天敵

二化螟Chilo suppressalis（Lepidoptera：Crambidae）是中國(guó)和其他一些亞洲國(guó)家重要的水稻害蟲(chóng)，而二化螟盤(pán)絨繭蜂Cotesia chilonis（Hymenoptera：Braconidae）是二化螟幼蟲(chóng)期的優(yōu)勢(shì)內(nèi)寄生蜂，對(duì)二化螟的田間控害作用明顯［1］。該寄生蜂主要分布于中國(guó)、日本、印度尼西亞和朝鮮等地，寄生率在10%～30%，在中國(guó)江蘇省則高達(dá)90%［2］，同時(shí)被引入一些非洲國(guó)家進(jìn)行生物學(xué)防治的嘗試［3］。因此其具有很高的生防應(yīng)用潛力，而對(duì)于其應(yīng)用概況也有所綜述［4］。

無(wú)論是田間釋放還是實(shí)驗(yàn)室內(nèi)開(kāi)展與其相關(guān)的研究，都需建立起良好的寄生蜂種群，并進(jìn)行繼代飼養(yǎng)。杭三保等［5］曾研究過(guò)該蜂在室內(nèi)的連續(xù)累代飼養(yǎng)和延緩寄生蜂發(fā)育使其與寄主發(fā)生期相互吻合等方面的相關(guān)研究，并建立了一套室內(nèi)繼代飼養(yǎng)二化螟盤(pán)絨繭蜂的方法［6］。本文旨在已有研究基礎(chǔ)上，完善并補(bǔ)充相關(guān)飼養(yǎng)和保種方法，為室內(nèi)繼代飼養(yǎng)二化螟盤(pán)絨繭蜂種群用于試驗(yàn)研究及生物防治提供支撐。

1 材料與方法

1.1 供試蟲(chóng)源

從富陽(yáng)水稻研究所采回稻樁（內(nèi)有越冬代二化螟幼蟲(chóng)），將其放入產(chǎn)卵籠（37 cm×49 cm× 67 cm）中，在其中放置一盆分蘗期稻苗，以供羽化的二化螟成蟲(chóng)棲息和產(chǎn)卵。每1～2 d收集卵塊1次。二化螟幼蟲(chóng)的飼養(yǎng)采用茭白飼養(yǎng)法［7］，具體如下：在一次性625 m L塑料打包碗的底部墊5～6層吸水紙，再放入3～4段（8 cm左右）新鮮茭白，將收集到的二化螟卵塊放在吸水紙上等待幼蟲(chóng)孵化。采用下光源照射并用黑布封塑料碗口，防止幼蟲(chóng)逃逸。當(dāng)飼養(yǎng)7 d左右，在茭白上添加新鮮茭白使幼蟲(chóng)自然轉(zhuǎn)移。在幼蟲(chóng)發(fā)育到老熟時(shí)，在茭白上加吸水紙，供老熟幼蟲(chóng)化蛹。將收集到的蛹放入上述養(yǎng)蟲(chóng)籠中按前述方法進(jìn)行繼代飼養(yǎng)。

收集從越冬代二化螟體內(nèi)嚙出的二化螟盤(pán)絨繭蜂進(jìn)行飼養(yǎng)。將3～6齡二化螟幼蟲(chóng)1頭放入底面直徑2.5 cm，管身長(zhǎng)7.8 cm的塑料管中，接入已交配的雌蜂l頭，待寄生產(chǎn)卵后取出二化螟幼蟲(chóng)，放入另一相同玻璃管中用茭白飼養(yǎng)。9 d后，將被寄生的二化螟放入培養(yǎng)皿中至蜂幼蟲(chóng)嚙出寄主體外并結(jié)繭，隨后取出寄生蜂繭放入底面直徑1.7 cm，管身長(zhǎng)7.3 cm的玻璃管中，插入塑料油壺壺身側(cè)壁提前鉆好的孔中，待成蜂羽化后，加入20%蔗糖水于上述條件下飼養(yǎng)。雌蜂充分交配后，用特制的吸管吸出按照上述方法進(jìn)行寄生產(chǎn)卵，完成1個(gè)世代的飼養(yǎng)［8］。

650 m L體積塑料油壺為網(wǎng)上購(gòu)得，購(gòu)置后在側(cè)壁打一直徑2 cm的圓孔，以便插入裝有蜂繭的玻璃管和方便對(duì)其中的寄生蜂進(jìn)行操作。壺嘴部分插入剪掉底部的1.5 m L離心管，以便塞入蘸有蔗糖水的棉花條。

1.2 飼養(yǎng)條件

二化螟成蟲(chóng)產(chǎn)卵籠置于溫度為（26±1）℃，適宜濕度為90%以上的恒溫養(yǎng)蟲(chóng)室，光周期為L(zhǎng)16∶D8。二化螟幼蟲(chóng)和寄生蜂則飼養(yǎng)于溫度為（25±1）℃，相對(duì)濕度為70%左右，光周期為L(zhǎng)16∶D8的人工氣候箱RXZ智能型人工氣候箱（寧波江南儀器廠(chǎng)）。保種條件為，人工氣候箱溫度控制在10℃，避光。

1.3 試驗(yàn)方法

將被寄生蜂寄生的二化螟在恒溫培養(yǎng)室中飼養(yǎng)不同時(shí)間后存入人工氣候箱中，處理分別是不放入、當(dāng)天放入、2 d后放入、4 d后放入及6 d后放入，在10℃保濕避光保存10 d后取出，飼以新鮮茭白，至寄生蜂嚙出羽化，并記錄相關(guān)數(shù)據(jù)。將寄生當(dāng)天的二化螟放入10℃培養(yǎng)箱中避光保濕保存，分別于1和2個(gè)月后取出，飼以新鮮茭白，并記錄相關(guān)數(shù)據(jù)。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

文中統(tǒng)計(jì)方法為單因素方差分析和Tukey’s測(cè)驗(yàn)（P＜0.05），所用軟件為Data Processing System（DPS）package（Version 9.5）［9］。

2 結(jié)果與分析

2.1 二化螟盤(pán)絨繭蜂的室內(nèi)飼養(yǎng)

二化螟盤(pán)絨繭蜂在本實(shí)驗(yàn)室繼代飼養(yǎng)8代，并未出現(xiàn)明顯退化現(xiàn)象，裝置如圖1所示。

圖1 室內(nèi)二化螟盤(pán)絨繭蜂飼養(yǎng)及繁蜂裝置

用上述方法飼養(yǎng)所羽化雌蜂，可連續(xù)產(chǎn)卵3 d，單頭產(chǎn)卵量約為30頭左右，雌雄比約為8：1，其后代胚胎發(fā)育期為2 d，幼蟲(chóng)期為10 d，產(chǎn)卵后第12天幼蟲(chóng)從寄主體內(nèi)嚙出結(jié)繭，繭期6 d。雌蜂壽命約為3 d，雄蜂為5 d。

2.2 寄生后分不同時(shí)日再冷藏對(duì)寄生蜂生物學(xué)指標(biāo)的影響

二化螟被寄生蜂寄生后與不同時(shí)日放入10℃冷藏10 d后取出?？疾炱渖飳W(xué)特性發(fā)現(xiàn)，寄生后在養(yǎng)蟲(chóng)室放置0、2、4或6 d，然后凍存對(duì)寄生蜂在寄主體內(nèi)的發(fā)育時(shí)間等指標(biāo)均無(wú)顯著差異（表1）。證明冷藏前放置時(shí)間對(duì)寄生蜂的發(fā)育影響不大。

2.3 寄生后冷藏不同時(shí)間對(duì)寄生蜂生物學(xué)指標(biāo)的影響

二化螟被寄生后當(dāng)天，放入10℃中冷藏，30和60 d后分別取出在養(yǎng)蟲(chóng)室飼以新鮮茭白，并考察相關(guān)生物學(xué)指標(biāo)。觀(guān)察發(fā)現(xiàn)，在被冷藏30或60 d后，寄主滯育的同時(shí)寄生蜂也進(jìn)入滯育，這導(dǎo)致了寄生蜂在寄主體內(nèi)的時(shí)間顯著延長(zhǎng)。把二化螟移出放入人工養(yǎng)蟲(chóng)室飼以茭白后，二化螟盤(pán)絨繭蜂依舊能夠正常從寄主體內(nèi)嚙出結(jié)繭并發(fā)育。考察其生物學(xué)指標(biāo)發(fā)現(xiàn)，冷藏對(duì)寄生蜂的育出繭量和羽化率以及雌雄性比等均有一定影響，可能是因?yàn)槔洳貢r(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致寄主營(yíng)養(yǎng)不良，從而影響了寄生蜂發(fā)育的原因，而這并不妨礙在實(shí)驗(yàn)室重新建立起二化螟盤(pán)絨繭蜂種群（表2）。

表1 被寄生后二化螟幼蟲(chóng)放置不同時(shí)日冷藏后對(duì)子蜂生物學(xué)指標(biāo)影響

表2 被寄生后二化螟幼蟲(chóng)冷藏后對(duì)子蜂生物學(xué)指標(biāo)影響

3 討論

水稻是世界上最為廣泛食用的糧食作物，全球種植面積超過(guò)1.59億hm2。中國(guó)是世界上最大的水稻生產(chǎn)和消費(fèi)國(guó)，作為水稻眾多起源中心之一，中國(guó)種植水稻已有超過(guò)7 000年的歷史。據(jù)計(jì)算，至2030年，中國(guó)水稻產(chǎn)量需達(dá)到7 850 kg·hm-2才能滿(mǎn)足屆時(shí)16億人口的需求。然而，在中國(guó)的水稻種植區(qū)，有超過(guò)200種害蟲(chóng)在水稻的不同種植區(qū)為害水稻不同的部位，主要害蟲(chóng)包括鉆蛀害蟲(chóng)三化螟、二化螟、稻縱卷葉螟和刺吸式害蟲(chóng)褐飛虱、白背飛虱。過(guò)去20年，螟蟲(chóng)造成的為害非常普遍。據(jù)統(tǒng)計(jì)，每年損失約60.3億kg水稻，約合60.5億人民幣。其中，優(yōu)勢(shì)種二化螟年發(fā)生面積在1 666.7萬(wàn)hm2以上，在我國(guó)南北稻區(qū)均廣泛分布，可為害水稻形成枯心、白穗、枯孕穗等癥狀［10］。在實(shí)際水稻種植過(guò)程中，因?yàn)槿狈?zhuān)業(yè)培訓(xùn)及對(duì)綜合治理概念的理解，為了快速看到滅蟲(chóng)效果，很多廉價(jià)人工合成殺蟲(chóng)劑被濫用，進(jìn)而出現(xiàn)害蟲(chóng)爆發(fā)、環(huán)境污染、農(nóng)藥殘留等一系列問(wèn)題。

害蟲(chóng)生物防治是指利用生物或生物代謝產(chǎn)物來(lái)控制病蟲(chóng)草害的技術(shù)，是害蟲(chóng)持續(xù)控制不可缺少的組成部分，是有害生物治理中節(jié)約、環(huán)境安全的方法。目前，生物防治技術(shù)包括以蟲(chóng)治蟲(chóng)、以微生物治蟲(chóng)、以微生物的代謝產(chǎn)物治蟲(chóng)和轉(zhuǎn)抗蟲(chóng)基因的植物殺蟲(chóng)等［11］。二化螟盤(pán)絨繭蜂作為二化螟的優(yōu)勢(shì)寄生性天敵，是一種非常有潛力的生防物種，可通過(guò)在農(nóng)田周?chē)⑻鞌彻S(chǎng)，為其量身訂制生產(chǎn)天敵昆蟲(chóng)，定時(shí)定量釋放天敵消滅害蟲(chóng)，并且可以配合諸如轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)作物等其他生防方法進(jìn)行害蟲(chóng)防治，以達(dá)到最佳防治效果。結(jié)果證明，在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)通過(guò)低溫冷藏的辦法可顯著延長(zhǎng)二化螟盤(pán)絨繭蜂在寄主體內(nèi)的發(fā)育時(shí)間，從而達(dá)到保種的目的，這將為實(shí)驗(yàn)室條件下建立起良好的二化螟盤(pán)絨繭蜂種群，從而為更好的研究該蜂與其寄主相互作用的生理生化和分子生物學(xué)特性提供蟲(chóng)源保障，并為今后利用此蜂用于生物防治提供便利。

［1］ 李秀花，姚洪渭，葉恭銀.二化螟盤(pán)絨繭蜂寄生對(duì)寄主二化螟幼蟲(chóng)免疫反應(yīng)的影響［J］.植物保護(hù)學(xué)報(bào)，2011，38（4）：313-319.

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（責(zé)任編輯：張瑞麟）

S435

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：0528-9017（2016）12-2074-03

文獻(xiàn)著錄格式：滕子文，吳順?lè)?，李秀花，?二化螟盤(pán)絨繭蜂的室內(nèi)種群飼養(yǎng)和保種［J］.浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2016，57（12）：2074-2077.

10.16178/j.issn.0528-9017.20161248

2016-09-20

公益性行業(yè)（農(nóng)業(yè)）科研專(zhuān)項(xiàng)（201303017）

滕子文（1989—），男，山東乳山人，在讀博士，研究方向?yàn)檗r(nóng)業(yè)昆蟲(chóng)與害蟲(chóng)治理，E-mail：tzwbat@126.com。

葉恭銀，教授，博士，研究方向?yàn)楹οx(chóng)生物防治及昆蟲(chóng)生理生化與分子生物學(xué)，E-mail：chu@zju.edu.cn。