• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    上海市番茄潰瘍病的確診及其防控對(duì)策

    2017-01-04 10:52:23羅金燕趙玉強(qiáng)姚紅梅
    浙江農(nóng)業(yè)科學(xué) 2016年12期
    關(guān)鍵詞:潰瘍病病株病菌

    陳 磊,羅金燕,趙玉強(qiáng),余 慧,姚紅梅

    (上海市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣服務(wù)中心,上海 201103)

    上海市番茄潰瘍病的確診及其防控對(duì)策

    陳 磊,羅金燕,趙玉強(qiáng),余 慧,姚紅梅

    (上海市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣服務(wù)中心,上海 201103)

    番茄潰瘍病是由密執(zhí)安棒形桿菌密執(zhí)安亞種(Clavibactermichiganensis subsp.michiganensis)引起的番茄最具毀滅性病害之一,在松江區(qū)3個(gè)大棚內(nèi)發(fā)現(xiàn)可疑番茄病株。大棚內(nèi)采集的發(fā)病植株經(jīng)南京農(nóng)業(yè)大學(xué)病原物分離培養(yǎng)和PCR檢測,檢測出番茄潰瘍病菌。為進(jìn)一步確認(rèn),筆者對(duì)分離到的菌株進(jìn)行了致病性測定,對(duì)接種病原物進(jìn)行了再分離,經(jīng)?;悦庖咴嚰垪l檢測和PCR檢測,確定為番茄潰瘍病菌。同時(shí),總結(jié)出一套適用于上海的綜合防控措施。

    番茄潰瘍??;致病性測定;免疫試紙條檢測;PCR檢測;防控措施

    番茄潰瘍病是由密執(zhí)安棒形桿菌密執(zhí)安亞種(Clavibacter michiganensis subsp.michiganensis,Cmm)引起的番茄最具毀滅性病害之一,既是我國進(jìn)境植物檢疫對(duì)象,又是全國農(nóng)業(yè)植物檢疫對(duì)象。番茄幼苗至結(jié)果期均可發(fā)生潰瘍病,主要表現(xiàn)為葉片凋萎或蜷縮,似缺水狀,莖內(nèi)部變褐,并向上下擴(kuò)展,后至中空,最后下陷或開裂呈潰瘍狀,莖略變粗,生出許多不定根,嚴(yán)重時(shí)全株枯死。在切開病株時(shí)可發(fā)現(xiàn)中間呈褐色腐爛,濕度大時(shí),莖稈中還會(huì)溢出白色菌膿。此病特有的癥狀為病果表面產(chǎn)生鳥眼狀壞死斑,稱為“鳥眼斑”[1-3]。該病自從1909年首次在美國溫室番茄上發(fā)現(xiàn)以來,現(xiàn)已廣泛分布于美國各番茄產(chǎn)區(qū),并逐漸成為世界性病害。1943—1946年期間,該病在英國大流行,使番茄罐頭工業(yè)受到嚴(yán)重影響。1991年法國因該病番茄減產(chǎn)20%~30%[4]。

    國內(nèi)有關(guān)番茄潰瘍病的記載始于1954年,當(dāng)時(shí)在大連市場上采集到2個(gè)癥狀頗似潰瘍病的番茄果實(shí)[5]。李明遠(yuǎn)等[6]于1980年6月在北京首次發(fā)現(xiàn)此?。ǔ柼枌m公社八隊(duì)病株率13%),因受條件所限,未能確認(rèn)病因,至1986年初才正式報(bào)道北京發(fā)生。隨后,山西、內(nèi)蒙古、遼寧、黑龍江、新疆、安徽、天津、廣西、江蘇、貴州、河南等地區(qū)都相繼報(bào)道發(fā)生[4,5,7-15]。2014年6月上海市農(nóng)業(yè)植物檢疫人員在松江區(qū)3個(gè)大棚內(nèi)發(fā)現(xiàn)可疑番茄病株,發(fā)病面積1 000 m2。大棚內(nèi)采集的發(fā)病植株經(jīng)南京農(nóng)業(yè)大學(xué)病原物分離培養(yǎng)和PCR檢測,檢測出番茄潰瘍病菌,這是上海市首次發(fā)現(xiàn)番茄潰瘍病疫情。為進(jìn)一步確認(rèn),筆者對(duì)分離到的菌株進(jìn)行了柯赫氏法則驗(yàn)證。疫情發(fā)生后,上海市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣服務(wù)中心在上海市范圍進(jìn)行普查,未在其他地方新發(fā)現(xiàn)疫情,但松江區(qū)發(fā)生該病的3個(gè)番茄大棚損失率均在50%以上。同時(shí),由筆者擬定的番茄潰瘍病的處置意見和防控技術(shù)方案指導(dǎo)開展相關(guān)防控處置工作,疫情處置近兩年來,上海市未再發(fā)生番茄潰瘍病,由此總結(jié)出一套適合上海地區(qū)推廣的綜合防控措施。

    1 材料與方法

    1.1 供試材料

    1.1.1 主要試劑和試劑盒

    番茄潰瘍病菌檢測試紙條購自美國Agdia公司,細(xì)菌DNA提取試劑盒購自TIANGEN公司,PCR試劑購自TaKaRa公司,引物由英濰捷基(上海)貿(mào)易有限公司合成。

    1.1.2 供試細(xì)菌菌株

    番茄潰瘍病菌標(biāo)準(zhǔn)菌株BX由中國農(nóng)業(yè)大學(xué)提供,菌株SH1406由南京農(nóng)業(yè)大學(xué)從采自松江區(qū)新浜鎮(zhèn)的發(fā)病番茄植株上分離得到。

    1.1.3 供試番茄

    致病性測定的供試番茄品種為合作908(已報(bào)道為感病品種)[3],購自上海長種番茄種業(yè)有限公司。

    1.2 方法

    1.2.1 常規(guī)細(xì)菌學(xué)鑒定

    革蘭氏染色反應(yīng)采用結(jié)晶紫草酸銨染色法,氧化酶試驗(yàn)、過氧化氫酶試驗(yàn)、明膠液化試驗(yàn)參照常規(guī)的植病研究方法[16]。

    1.2.2 過敏性反應(yīng)和致病性的測定

    將待測菌株BX、SH1406在YDC固體培養(yǎng)基平板上25℃培養(yǎng)72 h后,再用無菌ddH2O配制成108~109CFU·m L-1的菌懸液。采用打頂法[17]接種于播種后培育21~28 d的2~3片真葉期番茄幼苗(播種前種子用0.01%醋酸溶液浸泡消毒處理24 h),每菌接12株幼苗,以無菌ddH2O為空白對(duì)照(CK)。接種后植株置于人工氣候箱生長,氣候箱從7:30—18:30提供光照,且溫度保持在30℃,其余保持在24℃。接種后7~21 d觀察番茄上的發(fā)病情況。同時(shí)用菌懸液注射煙草葉片,接種36~54 h后觀察煙草葉片接種處有無過敏性反應(yīng)(Hypersensitive Reaction,HR)。

    1.2.3 發(fā)病植株病原菌的再分離及檢測鑒定

    病原菌的再分離與純化。選取顯癥植株,剪取病部1~2 cm莖段,置于滅菌后的培養(yǎng)皿內(nèi)加入無菌水200μL,擠壓出莖部組織液,用接種環(huán)蘸取組織液在LB培養(yǎng)基上畫線分離培養(yǎng),置于25℃下培養(yǎng)3~4 d,根據(jù)菌落形態(tài)選擇淡黃色的單菌落,在YDC培養(yǎng)基平板上純化。

    ?;悦庖咴嚰垪l檢測。使用從美國Agdia公司購買的檢測Cmm專用的免疫試紙條,對(duì)發(fā)病植株進(jìn)行檢測,以是否出現(xiàn)陽性反應(yīng)檢測線作為判斷依據(jù)。

    PCR檢測。對(duì)病原菌的再分離與純化中分離純化的細(xì)菌在YDC液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng),提取DNA。按照Dreier等[18]和Cho等[19]報(bào)道的番茄細(xì)菌性潰瘍病菌特異性引物Cmm5/Cmm6(引物序列:Cmm5為5′-GCGAATAAGCCCATATCAA-3′;Cmm6為5′-CGTCAGGAGGTCGCTAATA-3′)和Cmm 141F/Cmm141R(引物序列;Cmm141F為5′-CAG GCGTCCGTCGGTGAGGTGGTC-3′;Cmm141R為5′-GCGGGAGAGCGGTGCGGGAATG-3′)分別進(jìn)行PCR擴(kuò)增。反應(yīng)體系為10×PCR Buffer(Mg2+plus)2.5μL,2.5 mmol·L-1dNTP 2μL,5U·μL Taq DNA聚合酶0.2μL,上、下游引物(20μmol·L-1)各0.5μL,模板DNA 1μL,無菌ddH2O補(bǔ)充至25μL。反應(yīng)條件參照相關(guān)文獻(xiàn)[18-19]。擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)1%瓊脂糖凝膠電泳和溴化乙啶(EB)染色后用凝膠成像系統(tǒng)分析,觀測是否得到614和141 bp的特異性擴(kuò)增產(chǎn)物。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 生理生化測定

    對(duì)菌株SH1406進(jìn)行4項(xiàng)生理生化測定,結(jié)果顯示與標(biāo)準(zhǔn)菌株BX一致,即革蘭氏染色反應(yīng)陽性,氧化酶試驗(yàn)反應(yīng)陰性,氧化酶試驗(yàn)反應(yīng)陽性,明膠液化能力較弱。

    2.2 過敏性、致病性測定

    通過過敏性反應(yīng)測試,菌株SH1406與菌株BX一樣可激發(fā)煙草的HR(過敏性)反應(yīng)(圖1)。接種7 d后觀察,所接種的番茄幼苗未顯現(xiàn)明顯潰瘍病癥狀;接種后14~21 d觀察,2個(gè)菌株接種的幼苗均不同程度出現(xiàn)子葉萎蔫、莖壞死、植株死亡等典型細(xì)菌性潰瘍病癥狀(圖2),表明菌株SH1406確為番茄潰瘍病菌。

    圖1 煙草過敏性反應(yīng)檢測結(jié)果

    2.3 病原物再分離和檢測

    通過LB和YDC培養(yǎng)基分離純化顯癥植株表明,從接種的病株上能夠再次分離純化獲得培養(yǎng)性狀與BX和SH1406一致的菌落,經(jīng)純化后的分離物在YDC培養(yǎng)基上呈黃色黏稠狀菌落。而從無菌水接種處理的幼苗上未能分離獲得培養(yǎng)性狀與BX和SH1406相似的菌落。免疫試紙條檢測結(jié)果顯示表明,BX和SH1406接種處理的病株能夠使?;栽嚰垪l呈陽性反應(yīng),CK處理呈陰性反應(yīng)(圖3)。用特異性引物Cmm5/Cmm6和Cmm141F/ Cmm141R分別對(duì)從接種的病株上獲得分離物的DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)1%瓊脂糖凝膠電泳后觀察結(jié)果,可見到特異性的614和141 bp擴(kuò)增片段(圖4)。

    圖2 打頂接種21 d發(fā)病結(jié)果

    圖3 免疫試紙條檢測結(jié)果

    圖4 PCR電泳檢測結(jié)果

    3 綜合防控措施

    對(duì)松江新浜新發(fā)生番茄潰瘍病的3個(gè)大棚立即進(jìn)行封鎖,及時(shí)拔除了番茄植株并就地堆放在大棚內(nèi),待植株曬干后集中進(jìn)行深埋,同時(shí)對(duì)栽培設(shè)施進(jìn)行消毒處理,防止該病害的擴(kuò)散蔓延。根據(jù)該病的發(fā)生規(guī)律和上海市番茄的種植情況,提出以下防控策略。

    嚴(yán)格植物檢疫。番茄潰瘍病是典型的種傳病害,在番茄繁(育)種過程中須嚴(yán)格執(zhí)行產(chǎn)地檢疫,嚴(yán)禁從疫情發(fā)生區(qū)向非疫區(qū)調(diào)種。對(duì)調(diào)入的種子、秧苗、果實(shí)等要加強(qiáng)檢疫復(fù)檢,嚴(yán)禁帶菌種子銷售。對(duì)種植區(qū)加強(qiáng)普查和監(jiān)測,一旦發(fā)現(xiàn)疫情,及時(shí)向當(dāng)?shù)刂参餀z疫機(jī)構(gòu)報(bào)告,并采取有效的控制封鎖措施。

    建立無病留種田。種子繁育時(shí),要選擇無病田塊,開展田間檢驗(yàn),防止生產(chǎn)帶菌種子。

    種子消毒處理。溫湯浸種:先將種子在涼水中浸泡10 m in,撈出后將種子放入55℃溫水中浸30 min,不斷攪拌,并隨時(shí)補(bǔ)充熱水。藥劑浸種:選用0.6%醋酸溶液浸種24 h,或用72%農(nóng)用鏈霉素2 000倍液浸種2 h,或用1.5%次氯酸鈉浸種30~40 m in,取出沖凈晾干后催芽。干熱處理:將充分干燥的種子放入70℃恒溫箱中滅菌72 h,此法效果顯著。

    加強(qiáng)田間管理。選擇未種過茄科蔬菜的地塊作為苗床,避免大水漫灌,采用滴灌或滲灌,防止病菌傳播。避免露水未干時(shí)進(jìn)行整枝打杈等農(nóng)事操作,栽培管理過程中減少對(duì)番茄的機(jī)械傷害,雨后及時(shí)排水,一旦發(fā)現(xiàn)番茄潰瘍病病株,立即拔除病株及病殘?bào)w,集中帶離棚室進(jìn)行深埋,降低菌源和損失。

    高溫悶棚土壤消毒。選擇夏季溫度較高的時(shí)期,密閉溫室大棚,可殺死土壤中殘留的病菌,防止病害傳播。清除大棚內(nèi)病殘?bào)w和田間雜草后,每667 m2均勻撒施1 000 kg豬糞等腐熟或半腐熟有機(jī)肥和50 kg碳酸氫銨,翻耕整地后灌大水至土壤充分濕潤后,覆蓋地膜,封閉大棚,保持棚內(nèi)高溫高濕狀態(tài)3周。

    輪作倒茬。種植番茄等茄科作物要與非茄科植物實(shí)行輪作倒茬3年以上。

    藥劑防治。在發(fā)病初期,可選用72%農(nóng)用鏈霉素4 000倍液和77%氫氧化銅(可殺得)500倍液,對(duì)番茄地上部植株進(jìn)行噴藥,隔7~10 d噴1次,連續(xù)施藥2~3次,以徹底消滅病菌。

    [1] 羅來鑫,趙廷昌,李健強(qiáng),等.番茄細(xì)菌性潰瘍病研究進(jìn)展[J].中國農(nóng)業(yè)科學(xué),2004,37(8):1144-1150.

    [2] 王海旺,李秀文.番茄潰瘍病的發(fā)生及防治對(duì)策[C]//提高全民科學(xué)素質(zhì)、建設(shè)創(chuàng)新型國家:2006中國科協(xié)年會(huì)論文集.北京:中國科協(xié)年會(huì),2006.

    [3] 曹春梅,徐利敏,胡俊.25個(gè)番茄品種抗細(xì)菌性潰瘍病室內(nèi)測定[J].內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)科技,2008(2):30-32.

    [4] 趙永根,卞覺時(shí).海門地區(qū)番茄潰瘍病的發(fā)生與防控[J].中國蔬菜,2009(13):21-22.

    [5] 趙廷昌,王克,白金鎧,等.東北地區(qū)番茄細(xì)菌性潰瘍病的發(fā)生和病原鑒定研究[J].植物病理學(xué)報(bào),1993,23(1):29-34.

    [6] 李明遠(yuǎn).北京地區(qū)番茄潰瘍病的發(fā)生[J].中國蔬菜,2009(13):18-19.

    [7] 趙晉國.番茄潰瘍病的發(fā)生和防治[J].中國蔬菜,1988(2):53.

    [8] 塔娜.內(nèi)蒙古發(fā)現(xiàn)番茄潰瘍?。跩].植物保護(hù),1988,14(1):20.

    [9] 趙廷昌,王克,白金鎧,等.遼寧省發(fā)生番茄潰瘍?。跩].遼寧農(nóng)業(yè)科學(xué),1991(5):56-57.

    [10] 李春,金潛,李國英,等.番茄潰瘍病在我區(qū)的發(fā)生及防治對(duì)策[J].新疆農(nóng)墾科技,1996(4):15.

    [11] 湯淮明.淮南市番茄潰瘍病的發(fā)生和綜合防治對(duì)策[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技,2007(1):75.

    [12] 王海旺.番茄潰瘍病在天津地區(qū)的發(fā)生及防治[J].天津農(nóng)林科技,2007(5):17-18.

    [13] 蔡昭雄,廖家榜,羅標(biāo),等.桂林市番茄潰瘍病的發(fā)生及防治[J].中國蔬菜,2007(7):53-54.

    [14] 石延霞,張珊珊,黃大野,等.貴州省修文縣番茄“火燒疫”病原鑒定[J].中國蔬菜,2010(7):18-19.

    [15] 李江利,歐陽林杰,郭淼淼,等.河南省番茄潰瘍病的發(fā)現(xiàn)與分子確診[J].河南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2011,45(3):349-352.

    [16] 方中達(dá).植病研究方法[M].3版.北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,1998.

    [17] 羅來鑫,李健強(qiáng),Hasan B.番茄細(xì)菌性潰瘍病苗期接種新方法的研究[J].植物病理學(xué)報(bào),2005,35(2):123-128.

    [18] DREIER J,BERMPOHL A,EICHENLAUB R.Southern hybridization and PCR for specific detection of phytopathogenic Clavibacter michiganensis subsp.michiganensis[J]. Phytopathology,1995,85(4):462-468.

    [19] MIN SEOK CHO,JANG HA LEE,NAM HAN HER,et al. A quantitative and direct PCR assay for the subspecies-specific detection of Clavibacter michiganensis subsp.michiganensis based on a ferredoxin reductase gene[J].The Journal of Microbiology,2012,50(3):496-501.

    (責(zé)任編輯:張瑞麟)

    S436

    :B

    :0528-9017(2016)12-2054-04

    文獻(xiàn)著錄格式:陳磊,羅金燕,趙玉強(qiáng),等.上海市番茄潰瘍病的確診及其防控對(duì)策[J].浙江農(nóng)業(yè)科學(xué),2016,57(12):2054-2057.

    10.16178/j.issn.0528-9017.20161241

    2016-06-22

    上海市市級(jí)農(nóng)口系統(tǒng)青年人才成長計(jì)劃(滬農(nóng)青字(2015)第4-7號(hào));上海市科技興農(nóng)重點(diǎn)攻關(guān)項(xiàng)目(滬農(nóng)科攻字(2014)第7-3-1號(hào))

    陳 磊(1982—),男,上海人,農(nóng)藝師,碩士,從事植物疫情監(jiān)測與防控工作,E-mail:chenlei200524@126.com。

    猜你喜歡
    潰瘍病病株病菌
    冬季潰瘍病高發(fā) 防治須加強(qiáng)
    豌豆抗白粉病資源田間評(píng)價(jià)試驗(yàn)
    中國南北方禽流感病毒蛋白進(jìn)化差異的探究
    績溪縣水稻紋枯病發(fā)生特點(diǎn)及防治意見
    葡萄轉(zhuǎn)色期干梗掉粒 多是潰瘍病
    小病菌影響鴉片戰(zhàn)爭
    特別健康(2018年3期)2018-07-04 00:40:24
    獼猴桃潰瘍病致病根源及防控對(duì)策
    頭狀莖點(diǎn)霉病菌的新寄主高粱及病菌的檢疫鑒定(內(nèi)文第98~101頁)圖版
    油茶炭疽病菌拮抗木霉菌的分離與篩選
    病菌來了 快穿好防菌衣
    久久精品久久久久久久性| 熟妇人妻不卡中文字幕| 午夜影院在线不卡| 久久精品人人爽人人爽视色| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 日韩三级伦理在线观看| 成人无遮挡网站| 老司机影院成人| 精品久久国产蜜桃| 18在线观看网站| av有码第一页| 看免费成人av毛片| 成年人免费黄色播放视频| 大陆偷拍与自拍| 亚洲成人av在线免费| 成人毛片a级毛片在线播放| 国产极品天堂在线| 欧美性感艳星| 91精品伊人久久大香线蕉| 欧美国产精品一级二级三级| 精品国产乱码久久久久久小说| 久久精品国产亚洲av涩爱| 亚洲在久久综合| 久久久精品免费免费高清| 日本91视频免费播放| 国产成人精品福利久久| 亚洲av成人精品一二三区| 久久午夜综合久久蜜桃| 免费黄色在线免费观看| 日韩欧美一区视频在线观看| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 午夜精品国产一区二区电影| 久久精品国产亚洲av天美| 哪个播放器可以免费观看大片| 国产精品 国内视频| 久久久国产精品麻豆| 国产探花极品一区二区| 亚洲人成77777在线视频| 男的添女的下面高潮视频| 国产 一区精品| 丰满乱子伦码专区| 免费黄色在线免费观看| 日韩在线高清观看一区二区三区| 大香蕉久久成人网| 日日摸夜夜添夜夜爱| 香蕉精品网在线| 91精品三级在线观看| 午夜av观看不卡| 国产成人av激情在线播放| 天堂俺去俺来也www色官网| 宅男免费午夜| 久久免费观看电影| 一级毛片电影观看| 97人妻天天添夜夜摸| 成人午夜精彩视频在线观看| 国产黄频视频在线观看| 日日爽夜夜爽网站| 亚洲综合精品二区| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 九九在线视频观看精品| 最近最新中文字幕免费大全7| 国产亚洲最大av| 多毛熟女@视频| 免费久久久久久久精品成人欧美视频 | 丝袜美足系列| 大片免费播放器 马上看| 亚洲 欧美一区二区三区| 免费观看性生交大片5| 久久精品国产自在天天线| 亚洲精品美女久久av网站| av有码第一页| 久久久久久久久久久免费av| 伊人亚洲综合成人网| 国产国语露脸激情在线看| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 黄色毛片三级朝国网站| 高清在线视频一区二区三区| 在线看a的网站| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 久久这里有精品视频免费| 久热这里只有精品99| 国产淫语在线视频| 伦精品一区二区三区| 久久久久久久久久人人人人人人| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 日本wwww免费看| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 青春草国产在线视频| 日韩成人伦理影院| 日本wwww免费看| 国产在视频线精品| 另类亚洲欧美激情| 看非洲黑人一级黄片| 在线观看免费高清a一片| 亚洲图色成人| av网站免费在线观看视频| 免费av中文字幕在线| 亚洲精品第二区| 深夜精品福利| 色婷婷av一区二区三区视频| av女优亚洲男人天堂| 人妻 亚洲 视频| 免费人妻精品一区二区三区视频| 国产精品久久久久久av不卡| 日韩精品免费视频一区二区三区 | 免费大片18禁| 在线免费观看不下载黄p国产| 亚洲精品国产av蜜桃| 青春草国产在线视频| 在线观看www视频免费| 一边摸一边做爽爽视频免费| 久热久热在线精品观看| 欧美精品高潮呻吟av久久| 精品少妇黑人巨大在线播放| 国产免费一级a男人的天堂| 男女边吃奶边做爰视频| 99热这里只有是精品在线观看| 欧美+日韩+精品| 99香蕉大伊视频| 男男h啪啪无遮挡| 丝袜喷水一区| 丝袜人妻中文字幕| 观看美女的网站| 国产爽快片一区二区三区| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 欧美+日韩+精品| 免费人成在线观看视频色| 男女午夜视频在线观看 | 少妇人妻 视频| 国产一区二区激情短视频 | 极品人妻少妇av视频| 99久久精品国产国产毛片| 久久久精品免费免费高清| 日本av免费视频播放| 卡戴珊不雅视频在线播放| 国产色爽女视频免费观看| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 国产成人免费无遮挡视频| tube8黄色片| 男女边摸边吃奶| 午夜免费鲁丝| 日本欧美视频一区| 国产精品无大码| 精品卡一卡二卡四卡免费| 国产成人精品一,二区| 精品人妻偷拍中文字幕| 美女福利国产在线| 午夜视频国产福利| 草草在线视频免费看| 亚洲欧美清纯卡通| 亚洲国产精品999| 最新中文字幕久久久久| 国产成人aa在线观看| 久久久久精品人妻al黑| 一级片'在线观看视频| 国产亚洲一区二区精品| av.在线天堂| 国产精品欧美亚洲77777| 热re99久久精品国产66热6| 久久久国产精品麻豆| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 99热全是精品| 老司机影院毛片| 大片电影免费在线观看免费| 午夜精品国产一区二区电影| 亚洲精品,欧美精品| 搡老乐熟女国产| 18禁动态无遮挡网站| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 国国产精品蜜臀av免费| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 亚洲精品自拍成人| 中文字幕人妻熟女乱码| 国产精品免费大片| 亚洲精品国产av成人精品| 欧美亚洲日本最大视频资源| a级片在线免费高清观看视频| 99香蕉大伊视频| 2021少妇久久久久久久久久久| 欧美变态另类bdsm刘玥| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 99久国产av精品国产电影| 日韩成人伦理影院| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 国产成人aa在线观看| 黄色配什么色好看| 国产激情久久老熟女| 999精品在线视频| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 亚洲情色 制服丝袜| 十八禁高潮呻吟视频| 日韩一本色道免费dvd| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 十八禁高潮呻吟视频| 视频在线观看一区二区三区| 美国免费a级毛片| 国产精品国产av在线观看| 精品国产乱码久久久久久小说| 色婷婷久久久亚洲欧美| 国产成人精品在线电影| 久久午夜综合久久蜜桃| 久久久a久久爽久久v久久| av在线观看视频网站免费| 最后的刺客免费高清国语| 少妇的逼水好多| 少妇人妻久久综合中文| 亚洲av综合色区一区| 99国产综合亚洲精品| 日韩中文字幕视频在线看片| 五月天丁香电影| 久久亚洲国产成人精品v| freevideosex欧美| 免费观看性生交大片5| 日韩视频在线欧美| 少妇人妻久久综合中文| 欧美成人精品欧美一级黄| 日本-黄色视频高清免费观看| 久久综合国产亚洲精品| 国产av一区二区精品久久| 国产精品一国产av| 国产成人a∨麻豆精品| av在线app专区| 美女国产高潮福利片在线看| 一级毛片我不卡| av视频免费观看在线观看| 欧美日韩视频精品一区| 免费大片18禁| 亚洲精品国产av蜜桃| 夫妻性生交免费视频一级片| 又大又黄又爽视频免费| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 老熟女久久久| 午夜福利网站1000一区二区三区| 激情五月婷婷亚洲| 国产精品久久久久久精品古装| av有码第一页| 桃花免费在线播放| 国产日韩欧美视频二区| 热99久久久久精品小说推荐| a级毛片在线看网站| 久久午夜综合久久蜜桃| 韩国av在线不卡| 人妻一区二区av| 中文欧美无线码| 黄片播放在线免费| 999精品在线视频| 亚洲,欧美,日韩| 欧美日韩精品成人综合77777| 制服人妻中文乱码| 免费少妇av软件| 欧美bdsm另类| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 成年美女黄网站色视频大全免费| 久久99热这里只频精品6学生| 美女中出高潮动态图| 精品国产一区二区久久| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 成人毛片a级毛片在线播放| 精品国产国语对白av| 免费在线观看完整版高清| 国产男人的电影天堂91| 乱码一卡2卡4卡精品| 两性夫妻黄色片 | 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 美女福利国产在线| 少妇高潮的动态图| 日韩成人av中文字幕在线观看| 青春草视频在线免费观看| 国产极品粉嫩免费观看在线| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 成人手机av| 黄色视频在线播放观看不卡| 日本黄大片高清| 久久国产亚洲av麻豆专区| 宅男免费午夜| 中文字幕最新亚洲高清| 赤兔流量卡办理| 日韩三级伦理在线观看| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 视频区图区小说| 在线观看www视频免费| 母亲3免费完整高清在线观看 | 国产乱来视频区| 亚洲第一区二区三区不卡| 亚洲精品av麻豆狂野| 宅男免费午夜| 中国国产av一级| 在线观看免费视频网站a站| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 女的被弄到高潮叫床怎么办| av免费观看日本| 韩国av在线不卡| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 在线 av 中文字幕| 免费观看av网站的网址| 午夜老司机福利剧场| 国产在线免费精品| 精品少妇久久久久久888优播| 热99久久久久精品小说推荐| 精品一区在线观看国产| 18+在线观看网站| 欧美精品国产亚洲| 男人添女人高潮全过程视频| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 老女人水多毛片| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 久久久久久久大尺度免费视频| 2022亚洲国产成人精品| 少妇人妻精品综合一区二区| 午夜福利网站1000一区二区三区| 亚洲精品日本国产第一区| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 热re99久久国产66热| 在线天堂中文资源库| 亚洲国产精品一区三区| 乱码一卡2卡4卡精品| 欧美日韩成人在线一区二区| 高清av免费在线| 一本色道久久久久久精品综合| 老司机亚洲免费影院| 青春草视频在线免费观看| 欧美bdsm另类| 国产 精品1| 女性生殖器流出的白浆| 日韩三级伦理在线观看| 韩国av在线不卡| 丝袜喷水一区| a级毛片在线看网站| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 久久久久久久精品精品| 捣出白浆h1v1| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 精品少妇黑人巨大在线播放| xxxhd国产人妻xxx| 九草在线视频观看| 精品少妇内射三级| 免费av不卡在线播放| 国产精品久久久久久久电影| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 国产探花极品一区二区| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 欧美日本中文国产一区发布| 国产1区2区3区精品| 国产在线免费精品| 精品少妇内射三级| 九九在线视频观看精品| 免费日韩欧美在线观看| 亚洲av欧美aⅴ国产| 男人爽女人下面视频在线观看| 国产免费福利视频在线观看| 9热在线视频观看99| 国产成人精品无人区| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 成年美女黄网站色视频大全免费| 国产片特级美女逼逼视频| 久久国产亚洲av麻豆专区| 精品少妇黑人巨大在线播放| 高清不卡的av网站| 免费av不卡在线播放| 好男人视频免费观看在线| 亚洲经典国产精华液单| 咕卡用的链子| 亚洲第一区二区三区不卡| 久久国内精品自在自线图片| 在线看a的网站| 国产老妇伦熟女老妇高清| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 最近的中文字幕免费完整| 22中文网久久字幕| a级毛色黄片| 国产精品国产三级专区第一集| 久久久久国产精品人妻一区二区| 日本与韩国留学比较| 久久99热6这里只有精品| 大香蕉久久成人网| 久久久久久人人人人人| 一区二区av电影网| tube8黄色片| 亚洲国产欧美在线一区| 免费人成在线观看视频色| 免费久久久久久久精品成人欧美视频 | 国产成人午夜福利电影在线观看| 成人影院久久| 久久久久久久久久成人| 日日爽夜夜爽网站| 插逼视频在线观看| 老司机影院成人| 美女大奶头黄色视频| 狂野欧美激情性bbbbbb| 日本av免费视频播放| 国产精品蜜桃在线观看| 人人妻人人澡人人看| 老熟女久久久| 亚洲国产欧美在线一区| 国产又色又爽无遮挡免| 视频中文字幕在线观看| 亚洲成色77777| 美国免费a级毛片| 永久网站在线| 51国产日韩欧美| 大香蕉久久成人网| 免费黄网站久久成人精品| 国产一区二区在线观看av| 精品亚洲成国产av| 一本色道久久久久久精品综合| 成人综合一区亚洲| 久久久久人妻精品一区果冻| www.av在线官网国产| 国产成人a∨麻豆精品| 国产av精品麻豆| 国内精品宾馆在线| 日韩av在线免费看完整版不卡| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 国产一区二区三区av在线| 亚洲成人一二三区av| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 丝袜喷水一区| 欧美少妇被猛烈插入视频| a级片在线免费高清观看视频| 日韩成人av中文字幕在线观看| 伦理电影大哥的女人| 精品久久久精品久久久| 母亲3免费完整高清在线观看 | 国产乱人偷精品视频| 日韩中文字幕视频在线看片| 午夜免费男女啪啪视频观看| av在线播放精品| 国产高清不卡午夜福利| 人妻少妇偷人精品九色| 亚洲美女黄色视频免费看| 一级黄片播放器| 在线看a的网站| 99国产综合亚洲精品| 亚洲综合色惰| 春色校园在线视频观看| 国产又色又爽无遮挡免| 亚洲精品色激情综合| 婷婷成人精品国产| 在线看a的网站| 精品卡一卡二卡四卡免费| 亚洲性久久影院| 欧美另类一区| av黄色大香蕉| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 国产老妇伦熟女老妇高清| 最近中文字幕2019免费版| 国产男人的电影天堂91| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 久久免费观看电影| 大片免费播放器 马上看| 青春草视频在线免费观看| 一级毛片 在线播放| 中文字幕制服av| 一区二区三区精品91| 久久久久国产精品人妻一区二区| 国产成人精品久久久久久| 在线观看免费高清a一片| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 十分钟在线观看高清视频www| 中文字幕免费在线视频6| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 亚洲在久久综合| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 一本久久精品| 五月开心婷婷网| 日韩成人av中文字幕在线观看| kizo精华| 免费av中文字幕在线| 精品国产一区二区三区四区第35| 一级毛片 在线播放| 伊人久久国产一区二区| 免费在线观看黄色视频的| 婷婷色av中文字幕| 亚洲国产精品专区欧美| 秋霞伦理黄片| 最近中文字幕高清免费大全6| 国产熟女欧美一区二区| 麻豆乱淫一区二区| 极品人妻少妇av视频| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 午夜免费鲁丝| 天堂中文最新版在线下载| 人妻系列 视频| 国产极品粉嫩免费观看在线| 美女中出高潮动态图| 观看美女的网站| 熟女电影av网| 麻豆乱淫一区二区| 亚洲综合色惰| 日韩在线高清观看一区二区三区| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 亚洲国产av新网站| 两个人免费观看高清视频| 久久久久久久精品精品| 国产免费福利视频在线观看| 国产精品久久久久久精品古装| 99久久中文字幕三级久久日本| 热99久久久久精品小说推荐| 大片免费播放器 马上看| 伊人亚洲综合成人网| 亚洲国产成人一精品久久久| 一级片'在线观看视频| 国产探花极品一区二区| 国产精品熟女久久久久浪| 亚洲国产看品久久| 国产综合精华液| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 一级黄片播放器| 久久这里只有精品19| 国产av一区二区精品久久| 久久国产亚洲av麻豆专区| 亚洲精品aⅴ在线观看| 国产精品久久久久久精品古装| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 中国美白少妇内射xxxbb| 最近中文字幕高清免费大全6| 免费大片黄手机在线观看| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 亚洲在久久综合| 综合色丁香网| h视频一区二区三区| 国产男女内射视频| 国产色婷婷99| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 免费看av在线观看网站| 午夜av观看不卡| 欧美日韩亚洲高清精品| 欧美日韩视频精品一区| 久久久久久人人人人人| 搡女人真爽免费视频火全软件| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 国产永久视频网站| 久久国内精品自在自线图片| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 9191精品国产免费久久| 久久国产精品大桥未久av| 午夜福利影视在线免费观看| av.在线天堂| 丝袜脚勾引网站| 亚洲精品自拍成人| 一边摸一边做爽爽视频免费| 黄片无遮挡物在线观看| 如何舔出高潮| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 大香蕉久久网| 免费黄色在线免费观看| 一级毛片 在线播放| 高清视频免费观看一区二区| 色婷婷久久久亚洲欧美| 26uuu在线亚洲综合色| 人妻 亚洲 视频| 国产免费一区二区三区四区乱码| 一区二区三区精品91| 久久久久久久亚洲中文字幕| 亚洲色图综合在线观看| a级毛片在线看网站| 伊人久久国产一区二区| 国产精品女同一区二区软件| 亚洲av日韩在线播放| 中文字幕亚洲精品专区| 久久久精品94久久精品| 宅男免费午夜| 久久97久久精品| 看十八女毛片水多多多| 国产免费一区二区三区四区乱码| 精品国产露脸久久av麻豆| 99久久精品国产国产毛片| 男女下面插进去视频免费观看 | 热99久久久久精品小说推荐| 色视频在线一区二区三区| 性高湖久久久久久久久免费观看| 在线观看免费高清a一片| 亚洲av电影在线进入| 午夜福利影视在线免费观看| 免费观看av网站的网址| 久久久久精品性色| 久久免费观看电影| 性色av一级| 免费在线观看黄色视频的| 丁香六月天网| 国国产精品蜜臀av免费| 久久久久精品人妻al黑| 丰满少妇做爰视频| 男的添女的下面高潮视频| 性色av一级| 一级毛片 在线播放| 十八禁网站网址无遮挡| 97人妻天天添夜夜摸| 美女国产视频在线观看| 不卡视频在线观看欧美| 51国产日韩欧美| 一本色道久久久久久精品综合| 欧美激情极品国产一区二区三区 | 中文字幕人妻熟女乱码| 国产精品国产av在线观看| 欧美人与性动交α欧美软件 | 在线观看一区二区三区激情| 亚洲色图综合在线观看| freevideosex欧美| 国产xxxxx性猛交| 91精品伊人久久大香线蕉| 国产精品偷伦视频观看了| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| av国产久精品久网站免费入址| 国产精品成人在线| 欧美97在线视频| 丰满少妇做爰视频| 中文字幕人妻熟女乱码|