血清PD-ECGF在伴或不伴糖尿病腦梗死患者中的差異性研究

錢淑霞 沈宇斐 張曉玲 官俏兵

血清PD-ECGF在伴或不伴糖尿病腦梗死患者中的差異性研究

錢淑霞 沈宇斐 張曉玲 官俏兵

目的 研究血清血小板衍生內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子（PD-ECGF）在伴或不伴糖尿病腦梗死患者中的差異性。方法 將73例急性腦梗死患者根據(jù)是否伴有糖尿病分為伴有糖尿病的急性腦梗死組（CI+DM組）32例和不伴糖尿病的急性腦梗死組（CI組）41例，動(dòng)態(tài)測(cè)定發(fā)病后第1、3、7、10～14天時(shí)血清PD-ECGF水平，評(píng)價(jià)入院時(shí)、發(fā)病第10～14天的美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生院神經(jīng)功能缺損評(píng)分（NIHSS）。同時(shí)測(cè)定30例伴有糖尿病非腦血管病患者（DM組）、30例不伴糖尿病非腦血管病患者（NC組）血清PD-ECGF水平作為對(duì)照。結(jié)果 與NC組相比，CI組患者在腦梗死后第1、3、7、10～14天時(shí)的血清PD-ECGF水平均明顯增高且出現(xiàn)動(dòng)態(tài)變化（P＜0.05）。與DM組相比，CI+DM組患者在腦梗死后第1、3、7、10～14的血清PD-ECGF水平不增高且無(wú)動(dòng)態(tài)變化（P＞0.05）。與NC組相比，DM組PD-ECGF水平明顯增高（P＜0.05）。CI+DM組發(fā)病第10～14天的NIHSS評(píng)分高于CI組（P＜0.05）。結(jié)論 糖尿病患者的基線PD-ECGF水平較高，當(dāng)急性腦梗死發(fā)生后，PD-ECGF反而未能像不伴糖尿病的急性腦梗死患者那樣進(jìn)一步升高并呈動(dòng)態(tài)變化。

腦梗死 糖尿病 血小板衍生內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子 血管生成

糖尿病是缺血性腦血管病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，糖尿病患者并發(fā)的腦梗死具有病情重、易進(jìn)展、愈后不理想的特點(diǎn)[1]。因此，從新的角度探尋糖尿病與腦梗死的關(guān)系，對(duì)于實(shí)施防治、改善預(yù)后具有十分重要的意義。目前已發(fā)現(xiàn)多種促血管生長(zhǎng)因子調(diào)節(jié)了腦梗死后新生血管形成、血管再通，其中血小板衍生內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子（platelet derived endothelial cell growth factor，PDECGF）與腦梗死的關(guān)系研究較少，尤其是腦梗死患者在伴有或不伴有糖尿病的情況下，其PD-ECGF是否存在差異，目前尚未見報(bào)道。因此，筆者觀察了伴有或不伴有糖尿病的急性腦梗死患者在發(fā)病后第1、3、7、10～14天時(shí)血清PD-ECGF水平的動(dòng)態(tài)變化，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料 收集2014年2至6月我院神經(jīng)內(nèi)科住院的急性腦梗死患者73例。所有患者起病時(shí)間24h以內(nèi)，經(jīng)頭顱CT或MRI檢查證實(shí)，排除嚴(yán)重感染、腫瘤、腦外傷、糖耐量異常、拒絕簽署知情同意書、中途退出者。按是否伴有糖尿?。ㄌ悄虿〉脑\斷采用1999年世界衛(wèi)生組織的診斷標(biāo)準(zhǔn)）分為兩組：伴有糖尿病急性腦梗死患者（CI+DM組）32例，其中男18例，女14例，年齡41～84（69.4±12.0）歲；不伴糖尿病急性腦梗死患者（CI組）41例，其中男23例，女18例，年齡45～80（67.6±11.2）歲。收集我科同期住院伴有糖尿病非腦血管病患者（DM組）30例和不伴糖尿病非腦血管病患者（NC組）30例，其中DM組男18例，女12例，年齡40～89（70.4±12.6）歲；NC組男16例，女14例，年齡41～82（68.8±13.3）歲。4組間年齡、性別比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05），具有可比性。本研究經(jīng)我院倫理審查委員會(huì)批準(zhǔn)，所有受試者均了解該研究的方法和目的并簽署知情同意書。

1.2 方法 測(cè)定CI+DM組、CI組患者發(fā)病后第1、3、7、10～14天血清PD-ECGF水平。所有納入對(duì)象均根據(jù)中國(guó)腦血管病防治指南進(jìn)行規(guī)范化治療，并測(cè)定入院時(shí)、發(fā)病10～14d的NIHSS評(píng)分。DM組、NC組測(cè)定住院后第1天血清PD-ECGF水平。

1.3 標(biāo)本采集及處理 清晨抽取患者空腹肘靜脈血2ml裝入空白真空管，待其自凝后3 000r/min離心10min，收集血清，-20℃保存待檢。試劑盒購(gòu)于上海西唐生物科技有限公司，酶標(biāo)儀型號(hào)：DENLEY DRAGON Wellscan MK 3，操作方法嚴(yán)格按試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行，采用雙抗夾心ELISA法測(cè)定血清PD-ECGF水平。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS15．0統(tǒng)計(jì)軟件。正態(tài)分布的計(jì)量資料以表示，多組間比較采用方差分析，兩兩比較LSD-t檢驗(yàn)；非正態(tài)分布的計(jì)量資料以M（Q25，Q75）表示，組間比較采用Mann-Whitney秩和檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料組間比較采用χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 4組患者不同時(shí)點(diǎn)血清PD-ECGF水平的比較與NC組比較，CI組腦梗死后第1、3、7、10～14天的PDECGF水平均有明顯增高，其中第3天達(dá)最高峰，兩組間及各時(shí)點(diǎn)間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）。與DM組比較，CI+DM組腦梗死后第1、3、7、10～14天的PD-ECGF水平差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05），且CI+ DM組各時(shí)點(diǎn)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。CI+DM組血清PD-ECGF水平明顯高于CI組，DM組血清PD-ECGF水平明顯高于NC組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）。詳見表1。

表1 4組患者不同時(shí)點(diǎn)血清PD-ECGF水平的比較（μg/ml）

2.2 CI+DM組、CI組患者入院前后NIHSS評(píng)分的比較 CI+DM組、CI組患者入院時(shí)NIHSS評(píng)分差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），第10～14天時(shí)CI+DM組NIHSS評(píng)分高于CI組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），表明合并糖尿病急性腦梗死患者短期預(yù)后相對(duì)較差，詳見表2。

表2 CI+DM組、CI組患者入院前后NIHSS評(píng)分的比較（分）

3 討論

急性腦梗死缺血中心區(qū)的腦組織產(chǎn)生不可逆損傷，而缺血半暗帶的腦組織損傷是可逆的，新生血管形成、閉塞血管再通、盡早恢復(fù)缺血半暗帶的血流成為治療腦梗死的一個(gè)新突破點(diǎn)、研究熱點(diǎn)。在動(dòng)物的離體、在體實(shí)驗(yàn)中，血管生長(zhǎng)因子可致新生血管形成、閉塞血管再通等作用已得到了廣泛肯定[2]。對(duì)血管生成作用較為明確的肽類血管生成因子有PD-ECGF、血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）、堿性纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子（basic fibroblast growth factor，bFGF）、血管生成素和腫瘤生長(zhǎng)因子（tumor growth factor，TGF）等[3]。

糖尿病是腦梗死發(fā)病有決定性的、獨(dú)立的因素，伴有糖尿病的腦梗死具有病情重、預(yù)后差的特點(diǎn)，給社會(huì)和家庭造成了沉重負(fù)擔(dān)[1]。本研究發(fā)現(xiàn)，伴有糖尿病急性腦梗死患者發(fā)病第10～14天時(shí)的NIHSS評(píng)分高于不伴糖尿病急性腦梗死患者，提示預(yù)后不佳。近年來(lái)，我國(guó)糖尿病的患病率呈現(xiàn)日益增高的趨勢(shì)，本研究中伴有糖尿病急性腦梗死患者占43.8%（32/73），因此，糖尿病和腦梗死的關(guān)系日益受到人們的重視。

PD-ECGF是血管生成研究領(lǐng)域一個(gè)較新的細(xì)胞生長(zhǎng)因子，分布廣泛，具有刺激內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)、促進(jìn)血管生成的作用，其表達(dá)的程度與微血管密度關(guān)系密切，在血管生成相關(guān)性疾病中起著至關(guān)重要的作用[4]。PDECGF能水解胸腺肽產(chǎn)生2-脫氧核糖-1-磷酸和脫氧核糖，這些核糖和脫氧核糖具有高度血管生成性[5]。有研究報(bào)道，糖尿病患者血清PD-ECGF水平顯著升高[6]；也有研究認(rèn)為，顯著增加的PD-ECGF水平通常在高齡、血糖控制不佳、一些微血管疾病中較為常見[7]。

本研究發(fā)現(xiàn)，CI組患者血清PD-ECGF水平在腦梗死后各時(shí)間呈現(xiàn)動(dòng)態(tài)增高，第3天達(dá)到高峰，第10～14天后仍一直維持較高水平，這與Renner[8]等的大鼠MCA-O模型實(shí)驗(yàn)吻合。Hayashi等[9]發(fā)現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)大鼠腦缺血后，缺血灶周圍PD-ECGF表達(dá)增加，并猜測(cè)PDECGF可能是一種潛在的缺血性腦梗死的治療劑。急性腦梗死引起的缺血缺氧對(duì)PD-ECGF表達(dá)有強(qiáng)烈的誘導(dǎo)作用，促使新生血管的形成和側(cè)支循環(huán)的建立，這可能是機(jī)體的代償和保護(hù)機(jī)制，從而改善了腦組織的缺血缺氧，隨著血流供應(yīng)的改善，PD-ECGF開始降低，機(jī)體對(duì)PD-ECGF的激活效應(yīng)減弱。

本研究中DM組的PD-ECGF水平較NC組明顯升高，與以往研究相一致[6-7]。動(dòng)物研究表明，大鼠在確定糖尿病后10～12周可出現(xiàn)血管的重構(gòu)[10]。高糖狀態(tài)對(duì)PDECGF有誘導(dǎo)作用，使糖尿病患者的PD-ECGF水平上調(diào)，原因可能是患者長(zhǎng)期的糖代謝紊亂損害了體內(nèi)的血管內(nèi)皮細(xì)胞，誘導(dǎo)了PD-ECGF及其受體系統(tǒng)的表達(dá)。

本研究中伴有糖尿病患者在急性腦梗死后（CI+ DM組），PD-ECGF并未如實(shí)驗(yàn)預(yù)期那樣進(jìn)一步升高，而是呈現(xiàn)完全不同的趨勢(shì)：不顯著增高，各時(shí)間點(diǎn)也不出現(xiàn)動(dòng)態(tài)變化，推測(cè)可能的原因是長(zhǎng)期的高血糖使PD-ECGF水平上調(diào)并維持高值，當(dāng)機(jī)體出現(xiàn)缺血缺氧時(shí)，PD-ECGF系統(tǒng)失去了應(yīng)激效應(yīng)的防御機(jī)制，也就失去了促進(jìn)血管新生的能力，可能是伴有糖尿病急性腦梗死患者病情重、預(yù)后差的原因之一。

總之，糖尿病患者PD-ECGF水平較非糖尿病患者高，當(dāng)急性腦梗死發(fā)生后，這類患者的血清PD-ECGF未能像不伴糖尿病急性腦梗死患者那樣進(jìn)一步升高并呈現(xiàn)動(dòng)態(tài)變化。如何通過(guò)PD-ECGF系統(tǒng)的外界調(diào)控改善伴有糖尿病腦梗死患者的預(yù)后，是今后值得繼續(xù)探索的思路之一。

[1]Matz K,Keresztes K,Tatschl C,et al.Disorders of glucose matabolism in acute stroke patients:an underrecognized problem [J].Diabetes Care,2006,29(4):792-797.

[2]Hu W,Huang Y.Targeting the platelet-derived growth factor signaling in cardiovascular disease[J].Clin Exp Pharmacol Physiol, 2015,42(12):1221-1224.

[3]Larke R P,Froese G J,Devine R D,et al.Comprehensive seroepidemiologic study of hepatitis B virus infection in the Northwest Territories ofCanada[J].Arct Med Res,1988,47(1):711-713.

[4]Abe H,Hino R,Fukayama M.Platelet-derived growth factor-A and vascular endothelialgrowth factor-C contribute to the development of pulmonary tumor thrombotic microangiopathy in gastric cancer[J].Virchows Arch,2013,462(5):523-531.

[5]Hamed E A,Zakary M M,AbdelalR M,et al.Vasculopathy in type 2 diabetes mellitus:role of specific angiogenic modulators[J].J PhysiolBiochem,2011,67(3):339-349.

[6]de Bruin M,van Capel T,Van der Born K,et al.Role of platelet-derived endothelial cell growth factor/thymidine phosphorylase in fluoropyrimidine sensitivity[J].Br J Cancer,2003,88 (6):957-964.

[7]Saharinen P,Alitalo K.Double target for tumor mass destruction [J].J Clin Invest,2003,111(9):1277-1280.

[8]Renner O,Tsimpas A,Kostin S,et al.Time amd cell-specific induction ofplatelet-derived growth factor receptor-β during cerebralischemia[J].MolecularBrain Research,2003,113(1-2):44-51.

[9]Hayashi T,Wang,Q X,Zhang H Z,et al.Induction of platelet derived-endothelial cell growth factor in the brain after ischemia[J]. Neuro Res,2007,29(5):463-468.

[10]Harris A,Hutchinson J R,Sashidanandam K,et al.Type 2 diabetes causes remodeling of cerebrovasculature via differential regulation of matrix metalloproteinases and collagen synthesis: role of endothelin-1[J].Diabetes,2005,54(9):2638-2644.

（本文編輯：嚴(yán)瑋雯）

《浙江醫(yī)學(xué)》對(duì)醫(yī)學(xué)論文中有關(guān)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物描述的要求

在醫(yī)學(xué)論文的描述中，凡涉及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物者，在描述中應(yīng)符合以下要求：（1）品種、品系描述清楚；（2）強(qiáng)調(diào)來(lái)源；（3）遺傳背景；（4）微生物學(xué)質(zhì)量；（5）明確等級(jí)；（6）明確飼養(yǎng)環(huán)境和實(shí)驗(yàn)環(huán)境；（7）明確性別；（8）有無(wú)質(zhì)量合格證；（9）有對(duì)飼養(yǎng)的描述（如飼料型、營(yíng)養(yǎng)水平、照明方式、溫度、溫度要求）；（10）所有動(dòng)物數(shù)量準(zhǔn)確；（11）詳細(xì)描述動(dòng)物的健康狀況；（12）對(duì)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的處理方式有單獨(dú)清楚的交代；（13）全部有對(duì)照，部分可采用雙因素方差分析。

本刊編輯部

Serum PD-ECGF levels in acute cerebral infarction patients with or without diabetes mellitus

QIAN Shuxia,SHEN Yufei,ZHANG Xiaoling,et al.Department of Neurology,Jiaxing Second Hospital,Jiaxing 314000,China

Objective To investigate serum levels of platelet derived endothelial cell growth factor(PD-ECGF)in cerebral infarction patients with or without diabetes mellitus(DM). Methods Seventy three consecutive patients with acute cerebral infarction were enrolled,including 32 cases with DM(CI+DM group)and 41 cases without DM(CI group).The PD-ECGF levels were detected by ELISA at d1,d3,d7 and d 10-14 after onset of stroke;the NIHSS was evaluated at d1 and d 10-14.The PD-ECGF levels were also detected in 30 DM patients without cerebrovascular disease(DM group)and 30 normal controls(NC group). Results Serum PD-ECGF levels were significantly increased in CI group at all time points compared with NC group (P＜0.05).There were no differences in serum PD-ECGF levels between CI+DM group and DM group at different time points(P＞0.05).Serum PD-ECGF levels were significantly increased in DM group compared with NC group(P＜0.05).The scores of NIHSS in CI+DM group were higher than those in CI group at d10-14,but no differences at d1. Conclusion Serum PD-ECGF levels are higher in diabetes mellitus patients,but there are no dynamic variations after stroke,which is different from those without diabetes mellitus.

Cerebral infarction Diabetes mellitus Platelet derived endothelial cell growth factor Angiogenesis

2015-08-20）

浙江省中醫(yī)藥科學(xué)研究基金計(jì)劃（2010ZB147）；嘉興市科技局科技計(jì)劃（2010AY1038）

314000 嘉興市第二醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科

官俏兵，E-mail：guanqb@126.com