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    腫瘤壞死因子α啟動(dòng)因子基因多態(tài)性與妊娠期糖尿病的臨床研究

    2016-12-09 03:18王光慧陳書(shū)英肖衛(wèi)芬韓秋峪
    糖尿病新世界 2016年16期
    關(guān)鍵詞:妊娠基因糖尿病

    王光慧++陳書(shū)英++肖衛(wèi)芬++韓秋峪

    DOI:10.16658/j.cnki.1672-4062.2016.16.121

    [摘要] 目的 探討腫瘤壞死因子α啟動(dòng)因子基因多態(tài)性與妊娠期糖尿病間的關(guān)系。方法 選取孕婦150例,包括50例糖耐量異常孕婦、50例糖耐量正常孕婦,50例GDM孕婦;將這三組孕婦分別記為IGT組、NGT組、GDM組;通過(guò)采血提取DNA,應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)----限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性法,對(duì)其進(jìn)行TNF-α基因啟動(dòng)子-308位點(diǎn)的基因型分布頻率分析,從而對(duì)其多態(tài)性展開(kāi)研究;結(jié)果 在NcoI酶切后,GA型出現(xiàn),具體由3個(gè)片斷構(gòu)成,分別為107bp、87bp、20bp;AA型出現(xiàn),則表現(xiàn)為1個(gè)片斷,即107bp。GDM組A等位基因頻率(62%)顯著高于NGT組(28%),GA+AA型基因頻率高于NGT組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);在GA+AA基因型、A等位基因頻率表現(xiàn)方面,IGT組明顯高于NGT組,兩組數(shù)據(jù)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。GDM 組與NGT組的血清TNF-α水平分別為(10.29±2.48)ug/L、(5.21±1.03)ug/L,比較兩組數(shù)據(jù)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。GDM組與NGT組IR分別為(2.74±1.06)、(1.35±0.69),比較兩組數(shù)據(jù)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。結(jié)論 GDM的發(fā)病后,TNF-α-308G/A基因多態(tài)性會(huì)發(fā)生相應(yīng)的變化,從機(jī)制方面看,A等位基因在孕婦中會(huì)導(dǎo)致其體質(zhì)偏向肥胖,且提升其指數(shù),該次研究發(fā)現(xiàn),在這各情況下會(huì)發(fā)生胰島素抵抗現(xiàn)象,并且因其中的糖耐量遭到損害而引發(fā)GDM。

    [關(guān)鍵詞] 腫瘤;妊娠;糖尿病;基因

    [中圖分類號(hào)] R587.1 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1672-4062(2016)08(b)-0121-02

    妊娠期是婦女的關(guān)鍵時(shí)期,從臨床經(jīng)驗(yàn)來(lái)看,由于在妊娠前由于糖代謝穩(wěn)定或正常的情況下,會(huì)發(fā)生糖耐量異常情況;醫(yī)學(xué)將其命名為妊娠期糖尿病,這種疾病因其中的腫瘤壞死因子-α存在表達(dá)異?,F(xiàn)象,因此,往往會(huì)由此造成孕婦流產(chǎn)、早產(chǎn)等癥狀,是危害妊娠期婦女健康的重大隱患。因此,需要對(duì)其加強(qiáng)研究,從而找到解決對(duì)策[2],現(xiàn)報(bào)道如下。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料

    該次研究所選取徐州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院在2015年1月—2016年1月間收治的孕婦150例,其中,年齡從23~32歲,平均年齡(28.5±4.1)歲;孕周(31.2 ±4.60)周,平均年齡(28.2±1.2)歲;包括50例糖耐量異常孕婦、50例糖耐量正常孕婦,50例GDM孕婦;將這三組孕婦分別記為IGT組、NGT組、GDM組;三組患者均可排除感染因素、血液病因素,以及腫瘤或器官性的腎病因素等;對(duì)三組患者的基本資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。

    1.2 研究方法

    1.2.1 標(biāo)本采集 三組均禁食12 h,次日晨抽取肘靜脈血4 mL,加入0.5 mL乙二胺四乙酸抗凝劑抗凝,放置-80℃冰箱中儲(chǔ)存?zhèn)溆谩?/p>

    1.2.2 實(shí)驗(yàn)方法 三組采集靜脈血4 mL,其中全血2 mL用TKM提取DNA,采用聚合酶鏈反應(yīng)----限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(PCR-RFLP)的方法,確定各組TNF-α基因啟動(dòng)子-308位點(diǎn)的基因型分布頻率,確定其多態(tài)性。另2 mL血采用雙抗體夾心酶聯(lián)吸附試驗(yàn)(ELISA)測(cè)定血清TNF-α水平,具體方法按說(shuō)明書(shū)操作。以穩(wěn)態(tài)模型Homa-model公式評(píng)估IR。

    1.2.3 診斷標(biāo)準(zhǔn) GDM診斷標(biāo)準(zhǔn)按照2013年的美國(guó)糖尿病學(xué)會(huì)(American Diabetes Association, ADA)指南[3]。

    1.3 統(tǒng)計(jì)方法

    應(yīng)用SPSS 19.0軟件操作系統(tǒng)進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì),計(jì)量資料用(x±s)表示,計(jì)數(shù)資料用χ2檢驗(yàn),計(jì)量資料采用t檢驗(yàn),P<0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 TNF-α啟動(dòng)子PCR產(chǎn)物酶切后電泳結(jié)果

    在NcoI酶切后,GA型出現(xiàn),具體由3個(gè)片斷構(gòu)成,分別為107bp、87bp、20bp;AA型出現(xiàn),則表現(xiàn)為1個(gè)片斷,即107bp。

    2.2 基因多態(tài)性的分布情況

    150例孕婦子基因型、等位基因頻率GDM組A等位基因頻率(62%)顯著高于NGT組(28%),GA+AA型基因頻率(72%)也顯著高于NGT組(36%),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);在GA+AA基因型、A等位基因頻率表現(xiàn)方面,IGT組明顯高于NGT組,兩組數(shù)據(jù)比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。具體如下表1所示。

    2.3 GDM 組與NGT組的血清TNF-α水平

    GDM 組與NGT組的血清TNF-α水平分別為(10.29±2.48)ug/L、(5.21±1.03)ug/L,比較兩組數(shù)據(jù)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。(3)GDM組與NGT組IR分別為(2.74±1.06)、(1.35±0.69),兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。具體如下表2所示。

    3 討論

    3.1 TNF-α與GDM的相關(guān)性分析

    目前認(rèn)為GDM發(fā)病原因與胰島素抵抗、氧化應(yīng)激、炎性反應(yīng)等有關(guān),更多學(xué)者認(rèn)為GDM發(fā)病機(jī)制與 2 型糖尿病類似[4],在GDM發(fā)病中,居于中心環(huán)節(jié)的是胰島素抵抗和胰島β細(xì)胞功能方面的障礙問(wèn)題;以GDM孕婦為例,當(dāng)其處于高糖刺激情況之下,會(huì)出現(xiàn)一定程度的應(yīng)激反應(yīng),從而釋放出的TNF-α?xí)诹可铣霈F(xiàn)提升,這種不斷增加的TNF-α是造成胰島素抵抗不斷出現(xiàn)劇烈化的原因所在,而且,隨著這種抵抗的不斷加劇,也會(huì)參與到GDM病變之中,從發(fā)病之始到整個(gè)病程的不斷進(jìn)展,皆會(huì)有其影響。在“炎癥-胰島素抵抗-GDM”這一病理生理過(guò)程中,脂肪細(xì)胞的內(nèi)分泌調(diào)節(jié)功能障礙也起了重要作[5]。

    TNF-α可作為GDM的預(yù)測(cè)因子,從廖丹的相關(guān)研究來(lái)看,已經(jīng)通過(guò)實(shí)際臨床實(shí)例研究印證了TNF-α在GDM中升高現(xiàn)象,也有效的說(shuō)明了TNF-α可作為GDM的預(yù)測(cè)因子,因此,應(yīng)該將其應(yīng)用于復(fù)查相關(guān)疾病的一個(gè)條件或依據(jù)[6]。TNF-α導(dǎo)致IR的機(jī)制目前尚未明確,已有的研究認(rèn)為可能與TNF-α影響胰島素受體后信號(hào)的傳導(dǎo)、降低胰島素敏感細(xì)胞水平、促進(jìn)其他炎性細(xì)胞因子分泌增加,進(jìn)而介導(dǎo)IR有關(guān)[7]。

    該次研究結(jié)果表明,GDM的發(fā)病后,TNF-α-308G/A基因多態(tài)性會(huì)發(fā)生相應(yīng)的變化,從機(jī)制方面看,A等位基因在孕婦中會(huì)導(dǎo)致其體質(zhì)偏向肥胖,且提升其指數(shù),該次研究發(fā)現(xiàn),在這各情況下會(huì)發(fā)生胰島素抵抗現(xiàn)象,并且因其中的糖耐量遭到損害而引發(fā)GDM[8-10]。

    3.2 TNF-α啟動(dòng)子-308G/A 基因的多態(tài)性與GDM的相關(guān)性分析

    TNF-α存在多個(gè)多態(tài)位點(diǎn),不同的基因型可以產(chǎn)生不同的蛋白,基因多態(tài)性影響TNF-α基因產(chǎn)物的表達(dá),進(jìn)而影響正常孕婦對(duì)于糖尿病的易感性及患糖尿病的嚴(yán)重程度[11]。

    從臨床研究分析,高度的個(gè)體差異是TNF-α分泌的顯著表現(xiàn),這有力的體現(xiàn)出基因多態(tài)性與其存在關(guān)聯(lián)性;以目前的研究結(jié)果為例遺傳對(duì)IR的作用影響已經(jīng)成為了IR的候選因素,并且可以明確的得到TNF基因在其中存在影響這一事實(shí);通過(guò)對(duì)大量研究熱點(diǎn)的統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn),TNF-α基因啟動(dòng)子/增強(qiáng)子上游308處是重點(diǎn),尤其是在其影響多態(tài)性得等位基因方面,很有說(shuō)服力;另一方面,當(dāng)定義TNF1的常見(jiàn)基因型為G和定義為T(mén)NF2 的少見(jiàn)基因型為A時(shí),這種定義也對(duì)其熱點(diǎn)研究方面的影響因素進(jìn)行了有效說(shuō)明[12]。

    另外,老年人的糖尿病與TNF-α啟動(dòng)子-308G/A基因多態(tài)性相關(guān),多顯現(xiàn)為2型糖尿病[13]。根據(jù)常穎等人的研究結(jié)果,可以認(rèn)識(shí)到在TNF-α水平、胰島素抵抗指數(shù)方面,GDM組高于對(duì)照組,在GA+AA基因型出現(xiàn)頻率方面、與A等位基因出現(xiàn)頻率方面,也是如此;而且,GA+AA基因型出現(xiàn)頻率的對(duì)比研究,也證實(shí)了A等位基因出現(xiàn)頻率高于對(duì)照組[14]。

    根據(jù)該次研究的結(jié)果來(lái)看,當(dāng)TNF-α啟動(dòng)子-308G/A基因多態(tài)性后,也是造成GDM發(fā)生的重要因素,另一方面,當(dāng)孕婦攜帶A等位基因時(shí),也表明其發(fā)生了糖耐量受損,甚至嚴(yán)重時(shí)可能發(fā)生糖尿病癥狀;在最為理想的情況下,即使妊娠期不發(fā)病,患2型糖尿病的機(jī)會(huì)也比攜帶GG基因型的人高。

    綜上所述,GDM的發(fā)病后,TNF-α-308G/A基因多態(tài)性會(huì)發(fā)生相應(yīng)的變化,從機(jī)制方面看,A等位基因在孕婦中會(huì)導(dǎo)致其體質(zhì)偏向肥胖,且提升其指數(shù),該次研究發(fā)現(xiàn),在這各情況下會(huì)發(fā)生胰島素抵抗現(xiàn)象,并且因其中的糖耐量遭到損害而引發(fā)GDM。因此,進(jìn)一步研究GDM孕婦TNF-α過(guò)度表達(dá)的分子機(jī)制,以TNF-α為靶點(diǎn),通過(guò)藥物治療抑制其過(guò)度表達(dá)能夠?yàn)樵摲矫娴念A(yù)防機(jī)制研究提供新的方向與途徑。

    [參考文獻(xiàn)]

    [1] 廖丹.妊娠期糖尿病合并妊高征患者h(yuǎn)s-CRP、IL-6、TNF-α 檢測(cè)的臨床意義[J].海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào), 2013, 19(12): 1726-1729.

    [2] Ulla Kampmann, Lene Ring Madsen, Gitte Oeskov Skajaa:Gestational diabetes: A clinical update[J]. World J Diabetes,2015,6(8): S1065-1072.

    [3] 閆洪超. 妊娠期糖尿病患者血清TNF-a濃度與空腹血糖水平的相關(guān)性研究. 中國(guó)醫(yī)師進(jìn)修雜志,2006(29):6-7.

    [4] 閆洪超. 妊娠期糖尿病患者TNF-a變化的意義. 婦女保健,2006(21):1475.

    [5] 閆洪超. TNF-a在妊娠期糖尿病患者胎盤(pán)組織中表達(dá)的免疫組化研究臨床醫(yī)學(xué),2006(26):76.

    [6] 常穎,牛秀敏.腫瘤壞死因子a啟動(dòng)子基因多態(tài)性與妊娠期糖尿病的相關(guān)性研究[J].中華婦產(chǎn)科雜志,2005,10(40):676-678.

    (收稿日期:2016-05-17)

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