李思寧,唐善虎*,王 柳,邱 翔,楊發(fā)龍
(西南民族大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,四川 成都 610041)
凍藏物流過(guò)程中制冷故障對(duì)生鮮牦牛肉品質(zhì)的影響
李思寧,唐善虎*,王 柳,邱 翔,楊發(fā)龍
(西南民族大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,四川 成都 610041)
對(duì)生鮮牦牛背最長(zhǎng)肌進(jìn)行不同時(shí)間的制冷故障實(shí)驗(yàn),模擬凍藏物流過(guò)程中制冷故障對(duì)牦牛肉品質(zhì)及質(zhì)構(gòu)的影響,分別測(cè)定牦牛肉解凍損失率、蒸煮損失率、pH值、硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid,TBA)值、色度、彈性、咀嚼性,并觀察肌纖維組織結(jié)構(gòu)。結(jié)果表明,隨著制冷故障時(shí)間的延長(zhǎng),牦牛肉的解凍損失率、蒸煮損失率、L*值和b*值呈極顯著增加的趨勢(shì)(P<0.01),a*值、彈性呈極顯著下降的趨勢(shì)(P<0.01),pH值、咀嚼性呈顯著下降的趨勢(shì)(P<0.05),TBA值呈顯著增加的趨勢(shì)(P<0.05);肌纖維出現(xiàn)了更大程度的間隙和斷裂,肌束變得更加混亂,冰晶留下的間隙逐漸增大;制冷故障時(shí)間與各品質(zhì)及質(zhì)構(gòu)指標(biāo)間呈極顯著相關(guān)(P<0.01)。因此,牦牛肉在凍藏物流過(guò)程中,制冷故障時(shí)間的長(zhǎng)短對(duì)肉品質(zhì)有重要的影響,應(yīng)防止制冷故障引起的溫度波動(dòng)對(duì)肉品質(zhì)造成的損失。
牦牛肉;制冷故障;品質(zhì);凍藏物流
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冷凍畜禽肉在現(xiàn)代肉及肉制品加工業(yè)中起著很重要的作用,其生產(chǎn)和流通一直是肉類研究者們密切關(guān)注的課題。冷凍是貯藏原料肉最方便、有效的方法之一。肉的凍藏效果對(duì)隨后解凍過(guò)程中的汁液滲出物的多少以及食品的品質(zhì)有直接影響,因此凍藏肉最終品質(zhì)的好壞與冷凍技術(shù)及冷凍過(guò)程中的溫度波動(dòng)有很大的關(guān)系[1]。牦牛肉天然、綠色、無(wú)污染,而且是高寒地區(qū)人群不可替代的肉食品,其消費(fèi)比例逐年提高,但是牦牛基本都放牧在遠(yuǎn)離城市的高原環(huán)境,因此冷凍貯藏、物流技術(shù)在牦牛產(chǎn)業(yè)發(fā)展過(guò)程中就顯得非常重要。
生鮮牦牛肉在凍藏物流過(guò)程中,可能會(huì)存在冷庫(kù)或冷藏運(yùn)輸車制冷機(jī)組發(fā)生故障而無(wú)法制冷等情況,使得箱體內(nèi)的溫度變化[2],導(dǎo)致牦牛肉受到溫度波動(dòng)的影響,這將會(huì)影響生鮮牦牛肉的品質(zhì)。阿依木古麗等[3]研究探討了反復(fù)冷凍-解凍對(duì)牛肉品質(zhì)及組織結(jié)構(gòu)的影響,發(fā)現(xiàn)反復(fù)冷凍-解凍會(huì)嚴(yán)重破壞牛肉的組織結(jié)構(gòu),顯著降低牛肉品質(zhì)。黃鴻兵[4]研究了凍藏過(guò)程中溫度波動(dòng)對(duì)豬肉肌間冰晶顏色和新鮮度的影響,結(jié)果表明溫度波動(dòng)越劇烈,冰晶體積增大幅度越大,溫度波動(dòng)對(duì)肉的顏色、硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid,TBA)值沒有顯著影響。余小領(lǐng)[5]研究了冷凍和解凍工藝對(duì)豬肉保水性和組織結(jié)構(gòu)的影響,結(jié)果發(fā)現(xiàn)隨著凍藏時(shí)間的延長(zhǎng),冷凍豬肉的保水性逐漸降低;在不同的凍結(jié)速率條件下,凍結(jié)肉樣中所形成冰晶的大小和分布不同。目前,關(guān)于凍藏物流過(guò)程中制冷故障對(duì)生鮮肉品質(zhì)的影響研究鮮見報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)利用冰箱設(shè)置不同的故障時(shí)間,模擬了生鮮牦牛肉在凍藏物流過(guò)程中遇到制冷故障及故障解除后重新凍結(jié)的情況,通過(guò)測(cè)定影響牦牛肉加工品質(zhì)的理化、質(zhì)構(gòu)以及顯微結(jié)構(gòu)等指標(biāo),旨在探索并找到牦牛肉在凍藏物流過(guò)程中制冷故障和牦牛肉品質(zhì)間的關(guān)系,以期為其產(chǎn)業(yè)發(fā)展提供參考。
1.1 材料與試劑
牦牛肉:選取自然放牧狀態(tài)下,健康無(wú)病的3 歲齡牦牛6 頭,集中屠宰,現(xiàn)場(chǎng)采集背最長(zhǎng)肌,裝入潔凈保鮮袋中密封,放入-18 ℃冰箱急凍2 h,在0~4 ℃條件下6 h內(nèi)運(yùn)往實(shí)驗(yàn)室待測(cè)。
三氯乙酸、三氯甲烷、乙二胺四乙酸二鈉、TBA、1,1,3,3-四乙氧基丙烷、無(wú)水乙醇、多聚甲醛、二甲苯、伊紅、無(wú)水乙酸、蘇木精(均為分析純) 成都萇征化玻有限公司。
1.2 儀器與設(shè)備
TA.XT Plus質(zhì)構(gòu)儀 英國(guó)Stable Micro Systems公司;RM2235型輪轉(zhuǎn)式切片機(jī) 德國(guó)Leica公司;IX71型倒置顯微鏡 日本Olympus公司;pH-STAR胴體肌肉pH值直測(cè)儀 德國(guó)Matthaus公司;紫外分光光度計(jì)龍尼柯儀器有限公司;CR-400/410型色差儀 日本Minolta公司;BCD-243K型冰箱 河南新飛電器公司;TTX-100熱電偶測(cè)溫儀 德國(guó)Ebro公司;HH-6型恒溫水浴鍋 國(guó)華電器有限公司;HZS-H型水浴振蕩器哈爾濱市東明醫(yī)療儀器廠;電子天平 瑞士Mettler Toledo公司。
1.3 方法
1.3.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
去除牦牛背最長(zhǎng)肌的筋膜后,沿背最長(zhǎng)肌纖維方向切成1 cm厚的片狀(直徑約13 cm),分別用紫外滅菌自封袋包裝。將包裝好的牦牛肉樣置于-18 ℃冰箱中冷凍3 d至肉樣完全凍結(jié)。按表1的設(shè)計(jì)模擬牦牛肉在貯藏物流過(guò)程中遇到壓縮機(jī)停止工作引起的制冷故障及故障解除后重新凍結(jié)的情況(待故障解除后將牦牛肉放入-18 ℃冰箱中冷凍24 h),再將包裝有自封袋的肉樣放置在4 ℃冰箱解凍完全,待解凍后測(cè)定各項(xiàng)指標(biāo)。在故障時(shí)間為0、3、6、12、24 h時(shí),采用熱電偶測(cè)溫儀測(cè)定冰箱中的溫度。所有實(shí)驗(yàn)均重復(fù)3 次。
表1 制冷故障時(shí)間設(shè)計(jì)Table 1 Design of refrigerating failure time
1.3.2 指標(biāo)測(cè)定
1.3.2.1 解凍損失率的測(cè)定
用解凍前后牦牛肉的質(zhì)量變化來(lái)表示。解凍損失率按公式(1)計(jì)算:
式中:m1為凍結(jié)前的質(zhì)量/g;m2為解凍后的質(zhì)量/g。
1.3.2.2 蒸煮損失率的測(cè)定
準(zhǔn)確稱取經(jīng)解凍后的牦牛肉,放入蒸煮袋中,于100 ℃的沸水中煮制10 min,將肉樣取出冷卻后稱質(zhì)量。蒸煮損失率按公式(2)計(jì)算:
式中:m1為蒸煮前的質(zhì)量/g;m2為蒸煮后的質(zhì)量/g。
1.3.2.3 pH值的測(cè)定
用pH-STAR儀測(cè)定經(jīng)解凍后的牦牛肉樣的pH值。
1.3.2.4 TBA值的測(cè)定
TBA值的測(cè)定參照文獻(xiàn)[6]的方法。稱取經(jīng)解凍后
并絞碎的牦牛肉10 g于具塞錐形瓶,加入50 mL 7.5%三氯乙酸(含0.1%乙二胺四乙酸二鈉)溶液,水浴振蕩30 min,使其充分溶解,并用濾紙過(guò)濾2 次。吸取5 mL濾液于試管中,加入5 mL 0.02 mol/L的TBA溶液,混勻后放入90 ℃水浴鍋中保溫40 min,取出。冷卻后加入5 mL三氯甲烷,混勻,靜置分層后取上清液,在波長(zhǎng)532 nm處測(cè)定吸光度。TBA值以每千克脂質(zhì)氧化樣品中丙二醛的毫克數(shù)表示。TBA值按公式(3)計(jì)算:
式中:m1為肉樣的質(zhì)量/kg;m2為丙二醛的質(zhì)量/mg。
丙二醛含量以1,1,3,3-四乙氧基丙烷標(biāo)定后折算。稱取0.315g 1,1,3,3-四乙氧基丙烷,用蒸餾水溶解并定容至1 000 mL,此溶液為儲(chǔ)備液(100 μg/mL);準(zhǔn)確吸取10 mL儲(chǔ)備液稀釋并定容至100 mL,此溶液為標(biāo)準(zhǔn)液(10 μg/mL);準(zhǔn)確吸取標(biāo)準(zhǔn)液0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6 mL于具塞試管中,用蒸餾水定容至5 mL,分別加入0.02 mol/L TBA試劑5 mL,混勻,置90 ℃水浴中保溫40 min,冷卻,加入5 mL三氯甲烷,混勻,靜置分層后取上清液,于532 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
1.3.2.5 色度的測(cè)定
采用色差儀測(cè)定經(jīng)解凍后牦牛肉的顏色,色差儀進(jìn)行白板校正后,將色差儀探頭垂直放在樣品橫斷面上測(cè)量。記錄L*、a*、b*值[7]。
1.3.2.6 彈性、咀嚼性的測(cè)定
采用質(zhì)構(gòu)儀測(cè)定經(jīng)解凍后的牦牛肉的彈性和咀嚼性。彈性和咀嚼性測(cè)定[8]。樣品規(guī)格:長(zhǎng)、寬、高為30 mm×20 mm×10 mm。測(cè)定參數(shù)為:測(cè)前速率:1.0 mm/s;測(cè)試速率:1.0 mm/s;測(cè)后速率:1.0 mm/s;下壓距離:4.0 mm;負(fù)載類型:Auto-5.0 g;探頭:P/0.5S 球形探頭;數(shù)據(jù)采集率:200 pps。
1.3.3 顯微結(jié)構(gòu)觀察
根據(jù)文獻(xiàn)[9]方法并加以修改,用光學(xué)顯微鏡對(duì)牦牛肉樣的橫切面進(jìn)行分析。將解凍后的牦牛肉修整成0.5 cm3大小的肉樣,迅速放入4%的多聚甲醛中在室溫條件下固定4 d,然后分別用75%、85%、95%、100%乙醇進(jìn)行脫水,每次60 min。用二甲苯透明2 次,每次15 min,透蠟后用石蠟包埋。切片厚約5 μm,HE常規(guī)染色,晾片后用帶有數(shù)字?jǐn)z像頭及圖像分析軟件的光學(xué)顯微鏡進(jìn)行拍照。
1.4 數(shù)據(jù)處理
在實(shí)驗(yàn)研究的制冷故障時(shí)間范圍內(nèi)中,觀察到制冷故障時(shí)間為3、6、12 h時(shí),肉樣處于半解凍狀態(tài),制冷故障時(shí)間為24 h時(shí),肉樣完全解凍,且肉樣隨著制冷故障時(shí)間的延長(zhǎng),解凍程度不斷增加;當(dāng)故障解除后,肉樣被重新凍結(jié);在各項(xiàng)指標(biāo)測(cè)定時(shí),肉樣在4 ℃冰箱經(jīng)解凍后采集測(cè)定樣品。在故障時(shí)間為0、3、6、12、24 h時(shí),采用熱電偶測(cè)溫儀測(cè)定冰箱中的溫度分別為(-18.11±0.19)℃、(-16.02±0.87)℃、(-12.67±1.01)℃、(-6.34±1.21)℃及(3.87±1.44)℃(環(huán)境溫度約25~29 ℃)。
2.1 制冷故障對(duì)生鮮牦牛肉品質(zhì)及質(zhì)構(gòu)的影響
2.1.1 制冷故障對(duì)牦牛肉解凍損失率和蒸煮損失率的影響
圖1 制冷故障對(duì)牦牛肉解凍損失率(A)和蒸煮損失率(B)的影響Fig. 1 Effect of refrigerating failure on thawing loss percentage (A) and cooking loss percentage (B)
解凍損失率、蒸煮損失率直接影響到肉的風(fēng)味、顏色、質(zhì)地、嫩度等品質(zhì)[10],是評(píng)定肉品質(zhì)保水性能強(qiáng)弱的重要指標(biāo)。解凍損失率、蒸煮損失率增加說(shuō)明牦牛肉的持水性能下降,汁液流失較多。由圖1可得,隨著制冷故障時(shí)間的延長(zhǎng),生鮮牦牛肉的解凍損失率和蒸煮損失率呈極顯著增加的趨勢(shì)(P<0.01),這表明故障時(shí)間越久,對(duì)牦牛肉品質(zhì)的破壞越大,這可能是因?yàn)楣收蠒r(shí)間越長(zhǎng),牦牛肉解凍的程度越大,再次凍結(jié)后肌肉中形成冰晶,這些冰晶造成肌肉組織細(xì)胞的破壞,肌肉組織的破壞降低了其自身的水分保持能力[11]。
2.1.2 制冷故障對(duì)牦牛肉pH值和TBA值的影響
由圖2A可得,隨著制冷故障時(shí)間的延長(zhǎng),牦牛肉pH值呈下降的趨勢(shì)(P<0.05),這可能是由于牦牛肉中的脂肪和磷脂酶解產(chǎn)生了游離脂肪酸,也可能與蛋白質(zhì)水解有關(guān)[12]。
由圖2B可得,隨著制冷故障時(shí)間的延長(zhǎng),牦牛肉的TBA值呈顯著增加的趨勢(shì)(P<0.05)。這說(shuō)明肉中脂肪氧化程度會(huì)隨著肉樣解凍程度的增大而增大,主要是因?yàn)橛谌忸愂称分兄狙趸喟l(fā)生在細(xì)胞膜水平上[13],牦牛肉樣經(jīng)凍結(jié)-解凍-凍結(jié)-解凍過(guò)程,細(xì)胞受擠壓發(fā)生破裂,細(xì)胞中的氧化酶逐漸被釋放,使肉中的脂肪不斷發(fā)生氧化[14]。TBA值的升高也能解釋pH值下降的原因。
圖2 制冷故障對(duì)牦牛肉pH值(A)和TBA值(B)的影響Fig. 2 Effect of refrigerating failure on pH value (A) and TBA value (B)
2.1.3 制冷故障對(duì)牦牛肉顏色的影響
圖3 制冷故障對(duì)牦牛肉L*(A)、a**(BB)、b*(C)值的影響Fig. 3 Effect of refrigerating failure on L*, a*, and b* values
在冷凍貯藏過(guò)程中,肉的顏色會(huì)由于一系列反應(yīng)的發(fā)生而發(fā)生變化[15]。L*值表示肉樣的亮度,該值越大,說(shuō)明肉的光澤度越好;a*值表示肉樣的紅度,該值越高,說(shuō)明肉越新鮮;b*值表示肉樣的黃度,該值越高,說(shuō)明肉越不新鮮[16]。由圖3可得,隨著制冷故障時(shí)間的延長(zhǎng),肌肉的a*值極顯著下降(P<0.01)、L*和b*值極顯著上升(P<0.01),即牦牛肉樣的紅度減小,亮度和黃度增大,肉的新鮮程度降低,這是因?yàn)楣收蠒r(shí)間越長(zhǎng),肉樣解凍的程度越大,釋放的促氧化劑促進(jìn)了蛋白的氧化,從而肌紅蛋白(紅色)氧化成氧化肌紅蛋白(褐色)[17]。還有研究[18]表明,肉顏色的變化與脂肪氧化有關(guān)。結(jié)合圖2可以看出,牦牛肉顏色的變化與肌肉組織中脂肪氧化程度(TBA值)變化具有一致性,這與文獻(xiàn)[19]研究結(jié)果一致。
2.1.4 制冷故障對(duì)牦牛肉彈性和咀嚼性的影響
圖4 制冷故障對(duì)牦牛肉彈性(A)和咀嚼性(B)的影響Fig. 4 Effect of refrigerating failure of elasticity (A) and chewiness (B)
由圖4可得,隨著制冷故障時(shí)間的延長(zhǎng),牦牛肉的彈性呈極顯著下降的趨勢(shì)(P<0.01),咀嚼性呈下降的趨勢(shì)(P<0.05)。造成這種現(xiàn)象的原因是肉樣的解凍程度隨制冷故障時(shí)間的延長(zhǎng)而增加,重新凍結(jié)后重結(jié)晶破壞了細(xì)胞膜、細(xì)胞器及肌肉組織結(jié)構(gòu)[20],導(dǎo)致其質(zhì)地變軟,降低了肉的可塑性,造成牦牛肉持水力下降,導(dǎo)致肉樣解凍損失率和蒸煮損失增加,肉的汁液流失也相應(yīng)增加,肉樣的口感變差,即彈性和咀嚼性降低[21]。
2.2 制冷故障對(duì)牦牛肉背長(zhǎng)肌肌纖維橫切結(jié)構(gòu)的影響
Fig. 5 Effect of refrigerating failure of the microstructure ofcross-sections of yak M. Longissimus dorsi muscle fi bers (× 100)
冰晶以針狀形態(tài)存在于肌肉纖維組織之間,當(dāng)肌肉組織內(nèi)的水在結(jié)冰時(shí),體積增大8.7%左右。如果僅從冰晶破壞角度來(lái)看,直接凍結(jié)時(shí),生成的冰晶較小、數(shù)量多,對(duì)肌肉組織破壞較小;而肉經(jīng)解凍后再凍結(jié)時(shí),會(huì)發(fā)生重結(jié)晶,使肉品質(zhì)量降低[22]。由圖5可得,新鮮牦牛肉的背最長(zhǎng)肌肌纖維組織結(jié)構(gòu)均勻、致密,基本看不到肌纖維之間的間隙。制冷故障0 h的牦牛肉肌纖維間開始有間隙,但是隨著制冷故障時(shí)間的延長(zhǎng),牦牛肉肌纖維出現(xiàn)了更大程度的間隙和斷裂,肌束變得更加混亂。這是由于牦牛肉在凍藏物流過(guò)程中制冷故障及故障解除導(dǎo)致牦牛肉經(jīng)歷凍結(jié)-解凍-凍結(jié),造成冰晶成長(zhǎng)和水分遷移,對(duì)細(xì)胞膜和細(xì)胞器造成機(jī)械損傷,釋放出的酶及促氧化劑,加速了脂肪和蛋白氧化[23],造成肉的品質(zhì)下降。
2.3 制冷故障時(shí)間與各指標(biāo)間的相關(guān)性分析
表2 制冷故障時(shí)間與各指標(biāo)間相關(guān)性分析結(jié)果Table 2 Correlation analysis of refrigerating failure time and various indicators
由表2可得,制冷故障時(shí)間與解凍損失率、蒸煮損失率、TBA值、L*值、b*值呈極顯著正相關(guān)(P<0.01),相關(guān)系數(shù)r分別為0.982、0.934、0.945、0.941、0.924;制冷故障時(shí)間與pH值、a*值、彈性、咀嚼性呈極顯著負(fù)相關(guān),相關(guān)系數(shù)r分別為-0.797、-0.970、-0.807、-0.781。這表明制冷故障時(shí)間越短,對(duì)生鮮牦牛肉的品質(zhì)影響程度越小,牦牛肉的感官和食用品質(zhì)就越好。
牦牛肉隨著制冷故障時(shí)間的延長(zhǎng),解凍損失率、煮制損失率極顯著增加(P<0.01);pH值顯著下降(P<0.05)、脂肪氧化極顯著加速;L*和b*值極顯著增加,a*值極顯著下降(P<0.01);彈性和咀嚼性極顯著下降(P<0.01);肌原纖維結(jié)構(gòu)更加松散、斷裂程度更大。并且,制冷故障時(shí)間與各品質(zhì)及質(zhì)構(gòu)指標(biāo)間呈極顯著相關(guān)(P<0.01)。因此,在凍藏物流過(guò)程中,制冷故障會(huì)引起牦牛肉品質(zhì)及肌肉結(jié)構(gòu)的變化,降低肉的食用品質(zhì),破壞肌肉的組織結(jié)構(gòu),使肌肉營(yíng)養(yǎng)價(jià)值降低。所以,在凍藏物流過(guò)程中應(yīng)盡量減少運(yùn)輸和貯藏過(guò)程中發(fā)生的溫度波動(dòng),健全冷鏈技術(shù),防止制冷故障引起的溫度波動(dòng)對(duì)肉品質(zhì)造成的損失。
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Effect of Refrigerating Failure during Frozen Logistics on the Quality of Fresh Yak Meat
LI Sining, TANG Shanhu*, WANG Liu, QIU Xiang, YANG Falong
(College of Life Science and Technology, Southwest University for Nationalities, Chengdu 610041, China)
Impact of refrigerating failure during frozen logistics on the quality and texture of yak meat was simulated using refrigerating failure test for yak M. Longissimus dorsi muscle at various time points. Thawing loss percentage, cooking loss percentage, pH value, thiobarbituric acid (TBA) value, chromaticity parameters, elasticity and chewiness of the tested samples were measured and the microstructure of muscle fibers was observed with microscope. With the extension of refrigerating failure time, extremely signifi cant increases in thawing loss percentage, cooking loss percentage, L* value and b* value (P < 0.01) were found, while extremely signifi cant decreases in a* value and elasticity (P < 0.01) existed. The pH value and chewiness signifi cantly decreased (P < 0.05). TBA value signifi cantly increased (P < 0.05). In addition, muscle fi bers displayed larger gaps and they were broken down to a larger extent. The distribution of muscle bundles and the space left by ice crystals tended to be more irregular and larger, respectively. Furthermore, high correlation between refrigerating failure time and indices relevant to the quality and texture of meat was observed. Therefore, it was indicated that the time of refrigerating failure played a very important role in affecting the quality of yak meat and the harmful effect of temperature fl uctuation induced by refrigerating failure on meat quality should be avoided.
yak meat; refrigerating failure; quality; frozen logistics
10.7506/spkx1002-6630-201610042
TS251.5
A
1002-6630(2016)10-0246-06
李思寧, 唐善虎, 王柳, 等. 凍藏物流過(guò)程中制冷故障對(duì)生鮮牦牛肉品質(zhì)的影響[J]. 食品科學(xué), 2016, 37(10): 246-251. DOI:10.7506/spkx1002-6630-201610042. http://www.spkx.net.cn
LI Sining, TANG Shanhu, WANG Liu, et al. Effect of refrigerating failure during frozen logistics on the quality of fresh yak meat[J]. Food Science, 2016, 37(10): 246-251. (in Chinese with English abstract) DOI:10.7506/spkx1002-6630-201610042.
2015-10-12
“十二五”國(guó)家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(2015BAD29B02);四川省科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(16ZC2530)
李思寧(1988—),女,實(shí)驗(yàn)師,碩士,研究方向?yàn)槭称芳庸づc貯藏技術(shù)。E-mail:616906108@qq.com
*通信作者:唐善虎(1964—),男,教授,博士,研究方向?yàn)閯?dòng)物性食品加工及檢測(cè)。E-mail:stang01@126.com