• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    采后柑橘與膠孢炭疽菌互作過程中果皮成分的動態(tài)變化

    2016-12-07 07:29:35蓋智星賀明陽曾小峰黃小蘭王日葵
    食品科學 2016年10期
    關鍵詞:細胞壁果膠侵染

    蓋智星,賀明陽,2,3,曾小峰,黃小蘭,王日葵,2,3,*,周 煉,2,3,韓 冷,2,3

    (1.西南大學柑桔研究所,重慶 400712;2.中國農業(yè)科學院柑桔研究所,重慶 400712;3.國家柑桔工程技術研究中心,重慶 400712)

    采后柑橘與膠孢炭疽菌互作過程中果皮成分的動態(tài)變化

    蓋智星1,賀明陽1,2,3,曾小峰1,黃小蘭1,王日葵1,2,3,*,周 煉1,2,3,韓 冷1,2,3

    (1.西南大學柑桔研究所,重慶 400712;2.中國農業(yè)科學院柑桔研究所,重慶 400712;3.國家柑桔工程技術研究中心,重慶 400712)

    目的:探究柑橘膠孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)侵染過程中柑橘果皮細胞壁降解相關酶(cell wall degrading enzymes,CWDEs)、細胞壁成分和防御相關酶活性的動態(tài)變化,為進一步研究膠孢炭疽菌致病機理提供理論參考。方法:柑橘果實接種膠孢炭疽菌后,不同培養(yǎng)時間取樣測定,并比較分析果皮成分變化。結果:膠孢炭疽菌侵染的柑橘組織中均能產生多聚半乳糖醛酸酶(PG)、果膠甲基半乳糖醛酸酶(PMG)、纖維素酶(Cx)、β-葡萄糖苷酶(β-Glu)、角質酶,且均在侵染前期(1~3 d)達到峰值。纖維素、半纖維素、果膠等細胞壁組分含量隨膠孢炭疽菌的侵染而降低,木質素含量隨膠孢炭疽菌的侵染而升高。膠孢炭疽菌侵染后,柑橘組織中的過氧化物酶(POD)活性、過氧化氫酶(CAT)活性、丙二醛(MDA)含量總體呈上升趨勢。結論: CWDEs和角質酶在炭疽病發(fā)病前期起到重要的致病作用,其對果皮細胞壁組分的降解加速了膠孢炭疽菌的侵入;另外膠孢炭疽菌的侵染加速了寄主細胞質膜的過氧化。

    柑橘;膠孢炭疽菌;細胞壁降解酶;細胞壁成分;防御酶

    柑橘是世界第一大水果,年產量高達1億 t。我國是世界柑橘生產第一大國,2013年柑橘產量達3 276萬 t。柑橘采后易受真菌侵害,造成大量腐爛[1],導致巨大經濟損失。炭疽病是貯藏期柑橘重要的真菌病害之一,分布廣泛。引起柑橘炭疽病的病原有兩種:膠孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)和尖孢炭疽菌(Colletotrichum acutatum),柑橘采后炭疽病主要是由膠孢炭疽菌引起[2],因此以膠孢炭疽菌為研究對象,探究其與柑橘果實互作過程中的致病機制具有重要的理論和經濟價值。

    目前國內對炭疽病的研究多集中于病原菌的鑒定分類[3-5]與病害防治方面[6-7],國外對炭疽病防治[8-10]及炭疽菌致病機理[11-12]的報道較多。細胞壁降解酶(cell wall degrading enzymes,CWDEs)是植物病原菌的主要致病因子之一,其在不同寄主-病原物互作中所產生的種類、時期和活性均存在差異[13]。Jorge等[14]報道尖孢鐮刀菌分泌的細胞壁降解酶與枯萎病的發(fā)展呈正相關,分泌的主要細胞壁降解酶為多聚半乳糖醛酸酶(polygalacturonase,PG)和果膠裂解酶。Jat等[15]對侵染香蕉的膠孢炭疽菌細胞壁降解酶的分泌情況進行了報道,研究發(fā)現(xiàn)起主要作用的為多聚半乳糖醛酸反式消除酶和PG。檀根甲[16]初步明確果膠甲基半乳糖醛酸酶(polymethyl galacturonase,PMG)和纖維素酶(carboxymethyl cellulose,Cx)在炭疽菌侵染蘋果過程中起關鍵作用。寄主抵抗致病菌侵染的過程中分泌的防御酶通過清除活性氧,從而減緩寄主細胞的過氧化。Cao Shifeng等[17]報道過氧化氫酶(catalase,CAT)與采后枇杷果實的的抗病性有重要關系。Rockenbach等[18]運用蛋白質組學的方法對蘋果在膠孢炭疽菌侵染過程中的防御應答進行了研究,其中清除活性氧過程中的相關蛋白檢出較多。李欣允等[19]報道炭疽菌的侵染可加速荔枝果實氧化和過氧化作用進程,從而加速衰老和劣變。鑒于細胞壁降解酶與防御酶在不同寄主-病原物互作中其產生的時期和活性均存在差異,且柑橘炭疽菌侵染柑橘果實引起的細胞壁降解酶和防御相關酶活變化還不清楚,因此本實驗通過探討柑橘與膠孢炭疽菌互作過程中細胞壁降解酶、細胞壁組分及防御酶的變化規(guī)律,明確互作過程中主要細胞壁降解酶與防御酶的時空表達,以更加全面地理解柑橘與膠孢炭疽菌的相互作用,從而為柑橘炭疽病的防控提供理論依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    供試柑橘:北碚447#錦橙,購買于重慶市北碚區(qū);供試病原菌:柑橘膠孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides),由中國農業(yè)科學院柑桔研究所綜防課題組提供。

    1.2 儀器與設備

    SW-CJ-1F超凈工作臺 江蘇蘇凈集團;BX34光學顯微鏡 日本Olympus公司;RXZ-260C氣候培養(yǎng)箱寧波東南儀器公司;LDZX-50FBS高壓滅菌鍋 上海申安醫(yī)療器械公司;TU-1901雙管束紫外-可見分光光度計 北京普析通用儀器公司;H1850R高速冷凍離心機湖南湘儀集團。

    1.3 方法

    1.3.1 材料處理

    選擇成熟度相近、外觀整齊、無機械損傷的錦橙果實,清洗后晾干備用。膠孢炭疽菌接種于馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基,28 ℃培養(yǎng)10 d后將孢子刮下,制成濃度為2×106spores/mL孢子懸浮液。使用75%酒精對接種點處進行消毒,晾干。采用長度為2 mm的12號針頭針刺接種點,滴加10 μL現(xiàn)配孢子懸浮液,對照組滴加等量無菌水。所有材料處理后放入托盤內,盤底鋪浸潤的脫脂棉覆上保鮮膜,擺放好后,托盤口覆上保鮮膜,并置于28 ℃相對濕度95%的培養(yǎng)箱。接種后分別在不同時間取接種部位組織,經液氮速凍后保存于-80 ℃冰箱備用。

    1.3.2 細胞壁降解酶活性的測定

    參照曹建康等[20]的方法測定。PG與PMG活性單位以每小時每克樣品在37 ℃催化底物水解生成半乳糖醛酸的質量表示(mg/(h·g));Cx與β-葡萄糖苷酶(β-glucosidase,β-Glu)的酶活單位以每小時每克樣品在37 ℃催化底物水解生成還原糖的質量表示。

    1.3.3 角質酶活性的測定

    參照孫媛[21]的方法測定。以每克鮮樣每分鐘產生對硝基酚的微克數(shù)定義為1 個酶活力單位U。

    1.3.4 過氧化物酶(peroxidase,POD)活性的測定

    采用愈創(chuàng)木酚法[22]。以每克樣品每分鐘吸光度變化(ΔA470nm)0.01為一個過氧化物酶活力單位。

    1.3.5 超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性的測定

    采用對氮藍四唑光還原法[22]。以每小時每克果蔬組

    織的反應體系對氮藍四唑光化還原反應的抑制為50%為一個SOD活性單位(即U/(g·h))。

    1.3.6 CAT活性的測定

    采用高錳酸鉀滴定法[22]。CAT活性以每克果蔬組織每分鐘分解H2O2的毫克數(shù)表示。

    1.3.7 丙二醛(malonaldehyde,MDA)含量的測定

    參照王學奎[22]的方法測定。

    1.3.8 纖維素、半纖維素與木質素含量的測定

    參照李春光等[23]的方法測定。

    1.3.9 可溶性果膠與原果膠含量的測定

    參照曹建康等[20]的方法并改進。準確稱取烘干樣品0.10 g進行測定,果膠含量以生成半乳糖醛酸的質量分數(shù)表示。

    2 結果與分析

    2.1 膠孢炭疽菌侵染對柑橘果實細胞壁降解酶的影響

    圖1 膠孢炭疽菌侵染后柑橘果皮組織PG(A)、PMG(B)、Cx(C)、β-Glu(D)活性的變化Fig. 1 Changes in the activities of PG (A), PMG (B), Cx (C) and β-Glu (D) in citrus tissue infected with C. gloeosporioides

    從圖1A可看出,膠孢炭疽菌侵染柑橘果實后1~7 d內PG活性普遍高于對照,且整體呈先升后降的趨勢;在第2天被侵染的柑橘組織PG活性達到最大值,約為對照的8.65 倍。在整個培養(yǎng)過程中,對照組織PG活性相對穩(wěn)定。被膠孢炭疽菌侵染的柑橘組織在1~4 d內PMG活性明顯高于對照,且第2天達到峰值,約為對照的18.5 倍,3~7 d內侵染組織PMG活性波動較小。對照組中PMG活性在第2天出現(xiàn)最低突變點,表明針刺損傷對果實PMG活性的影響較大,果實通過降低分泌PMG從而減少果膠物質的水解(圖1B)。

    Cx與β-Glu共同作用將纖維素水解為β-葡萄糖。如圖1C所示,發(fā)病組織的Cx活性普遍高于對照組,且大體呈上升趨勢,在第1天達到最大值。由圖1D可知,發(fā)病組織的β-Glu活性普遍高于對照組。侵染前期β-Glu活性在第2天達到峰值,3~7 d呈逐步上升趨勢。2、7 d接種組織β-Glu活性分別高于對照102.74%、117.78%。β-Glu活性高峰出現(xiàn)時間晚于Cx,這可能是由于Cx在初期對纖維素大分子進行降解,為β-Glu提供底物[13]。

    圖2 膠孢炭疽菌侵染后柑橘果皮組織角質酶活性的變化Fig. 2 Changes in cutinase activities of citrus tissue infected with C. gloeosporioides

    圖2 表明,膠孢炭疽菌侵染過程中柑橘果皮角質酶活性整體高于對照,并在第3天達到高峰,在4~7 d呈逐步上升趨勢。3、7 d接種組織角質酶活性分別高于對照48.55%、50.28%。對照組角質酶活性雖然在第4天略高于實驗組,但總體呈下降趨勢。實驗表明角質酶的活性范圍為15~35 U/(g·min),這與孫媛[21]對灰葡萄孢角質酶的報道相似。膠孢炭疽菌侵染寄主過程中,角質酶活性出現(xiàn)高峰較CWDEs晚,這與病原菌侵入寄主的階段相符合。

    圖3 膠孢炭疽菌侵染的柑橘果皮組織中細胞壁降解酶活性的比較Fig. 3 The activities of cell wall-degrading-enzymes in citrus tissue infected with C. gloeosporioides

    如圖3所示,柑橘果皮本身含有少量的細胞壁降解酶,其中PG與Cx含量稍高。隨著接種時間的延長,柑橘果皮產生細胞壁降解酶的活性從高到低依次為PG、PMG、Cx、β-Glu,其中PG活性明顯高于其余3 種酶,這與Jat等[15]研究膠孢炭疽菌對香蕉致病作用的結果一致。趙景楠等[24]研究發(fā)現(xiàn)草莓褐色葉斑病菌產生的CWDEs中PG活性最強,但該菌并不產生Cx。檀根甲[16]研究發(fā)現(xiàn)炭疽菌侵染蘋果過程中,起關鍵作用的酶為PMG與Cx。可見不同的致病菌-寄主互作過程中起關鍵作用的CWDEs種類存在差異。寄主-致病菌互作過程中該4種細胞壁降解酶均呈現(xiàn)先上升后下降,隨后又呈現(xiàn)上升趨勢。其中Cx活性在第1天達到峰值,PG、PMG與β-Glu活性在第2天達到峰值,表明Cx對柑橘組織細胞壁的降解作用要早于其余3 種酶,然而有研究[16]發(fā)現(xiàn)炭疽菌與蘋果互作過程中PMG活性表達在時間上早于Cx,這可能與寄主表皮成分的差異有關。

    2.2 膠孢炭疽菌侵染對柑橘果皮細胞壁組分的影響

    圖4 膠孢炭疽菌侵染后柑橘果皮細胞壁組分的變化Fig. 4 Changes in cell wall components of citrus pericarp infected with C. gloeosporioides

    如圖4A所示,實驗組可溶性果膠的含量呈先升高后降低的趨勢,并在接種第2天達到峰值,而對照組的可溶性果膠含量呈現(xiàn)一直上升的趨勢。膠孢炭疽菌侵染過程中,原果膠與總果膠的含量均呈下降趨勢(圖4B、 4C),這可能與Cx與果膠酶的共同作用相關。原果膠是果膠物質與纖維素結合后的存在狀態(tài),這種結合態(tài)在Cx與果膠酶的共同作用下分離,從而使得可溶性果膠的含量在接種1~2 d內迅速升高,而后可溶性果膠由果膠酶水解,因此總果膠的含量在第2天有小幅度升高后明顯降低。對照組原果膠與總果膠的含量均呈先升高后降低的趨勢,并在培養(yǎng)第4天達到峰值,這可能與針刺損傷引起的果實自我修復有關。

    如圖4D所示,實驗組與對照組的纖維素含量呈先升高后降低的趨勢。膠孢炭疽菌侵染柑橘果實1~2 d間,纖維素迅速合成,纖維素含量迅速增加,4~7 d纖維素逐漸被降解,含量下降。對照組纖維素含量在2~4 d有上升趨勢,4~7 d呈下降趨勢。膠孢炭疽菌侵染過程中半纖維素含量呈先下降后上升的趨勢,并且在接種第2天迅速跌入低谷,這可能與Cx活性在第1天達到峰值有關(圖4E)。

    木質素是重要的植物抗病物質之一。膠孢炭疽菌侵染過程中柑橘果皮木質素含量呈上升趨勢,而對照組木質素含量變化較為平穩(wěn)。接菌第7天木質素含量為7.916%,為對照組的1.59 倍(圖4F)。在炭疽病發(fā)病初期木質素與纖維素的合成增加,病斑硬化;隨著細胞壁降解酶的作用,纖維素及果膠物質等被逐步降解,使得組織軟化,病斑擴大。

    2.3 膠孢炭疽菌侵染對柑橘組織膜脂過氧化的影響

    圖5 膠孢炭疽菌侵染后柑橘組織POD(A)、SOD(B)、CAT(C)活性與MDA含量(D)的變化Fig. 5 Changes in POD (A), SOD (B) and CAT (C) activities and MDA content (D) of citrus tissue infected with C. gloeosporioides

    如圖5A所示,膠孢炭疽菌侵染后柑橘組織POD活性總體呈上升趨勢,在接種1~2 d上升速度最快。由圖5B可知,膠孢炭疽菌侵染后柑橘組織SOD活性總體呈下降趨勢,在接種第4天后迅速升高,此處SOD活性為119.221 U/(g·h)。接種第7天柑橘組織SOD活性最高,為172.528U/(g·h)。CAT屬于血紅蛋白酶,可以催化植物體內積累的H2O2分解,從而減少H2O2對果蔬組織的氧化傷害。圖5C表明,膠孢炭疽菌侵染柑橘過程中,CAT活性整體呈上升趨勢。其中1~2 d上升迅速,由0.043 mg/(g·min)上升為0.142 mg/(g·min),上升了233.33%。2~7 d發(fā)病組織CAT活性變化較為平穩(wěn)。實驗表明膠孢炭疽菌侵染柑橘果實過程中,果實中的防御酶活性總體呈上升趨勢,且防御酶的作用時期遲于細胞壁降解酶。

    MDA是質膜過氧化作用的主要產物之一,它的積累能對果蔬細胞質膜和細胞器造成一定的傷害。從圖5D可知,膠孢炭疽菌侵染后柑橘組織的MDA含量在24 h內迅速下降63.06%,然后呈緩慢上升趨勢。對照組中MDA含量在第2天達到峰值后降低到平穩(wěn)水平,說明針刺損傷在前期也會使產生過氧化反應。MDA是判斷質膜過氧化的重要指標之一,其含量在膠孢炭疽菌致病過程中大量增加,這表明膠孢炭疽菌的侵染可以引起寄主的活性氧的爆發(fā),破壞細胞膜的完整性。

    3 結 論

    膠孢炭疽菌分泌的細胞壁降解酶在其致病中起到非常重要的作用,其對果皮細胞壁組分的降解加速了膠孢炭疽菌的侵入。實驗結果表明:膠孢炭疽菌與柑橘互作過程中,PG活性最高,Cx活性高峰出現(xiàn)最早,因此PG與Cx在炭疽菌侵染柑橘過程中起關鍵作用,應對其作用機理進行更加深入的研究。炭疽菌侵染初期纖維素迅速合成,侵入后期在Cx作用下被逐步降解,導致病斑組織軟化。木質素含量在整個互作過程中一直呈上升趨勢,說明植物一直處于防御狀態(tài)。另外質膜的過氧化引起的細胞膜破壞可能是引起發(fā)炭疽病的主要原因。然而,引起質膜過氧化反應的致病因子還有待深入研究。

    [1] 汪曉銀. 中國柑橘市場預警研究[D]. 武漢: 華中農業(yè)大學, 2013.

    [2] MAISA C G, CRISTINA B, ANETE P S, et al. Recent introduction and recombination in Colletotrichum acutatum populations associated with citrus postbloom fruit drop epidemics in Sao Paulo, Brazil[J]. Phytopathology, 2014, 104(7): 769-778. DOI:10.1094/PHYTO-06-13-0165-R.

    [3] 肖杰文, 劉月廉, 冉俊祥, 等. 巴西大豆中炭疽菌的分離鑒定研究[J].中國農學通報, 2011, 27(5): 333-337.

    [4] 焦雁翔, 王日葵, 胡軍華, 等. 重慶及周邊部分地區(qū)柑橘炭疽病菌鑒定[J]. 果樹學報, 2014, 31(5): 893-900.

    [5] 徐成楠, 王亞南, 胡同樂, 等. 藍莓炭疽病病原菌鑒定及致病性測定[J]. 中國農業(yè)科學, 2014, 47(20): 3992-3998. DOI:10.3864/ j.issn.0578-1752.2014.20.007.

    [6] 劉浩強, 李鴻筠, 向可海, 等. 不同保鮮劑混配對錦橙采后病菌的毒性及其貯藏效果[J]. 食品科學, 2014, 35(22): 260-264. DOI:10.7506/ spkx1002-6630-201422051.

    [7] 張萬里, 喬潤香, 尹飛, 等. 13 種植物提取物對5 種果蔬病原真菌的抑菌活性[J]. 華南農業(yè)大學學報, 2009, 30(2): 40-43.

    [8] LOPES M R, KLEIN M N, FERRAZ L P, et al. Saccharomyces cerevisiae: a novel and efficient biological control agent for Colletotrichum acutatum during pre-harvest[J]. Microbiological Research, 2015, 175: 93-99. DOI:10.1016/j.micres.2015.04.003.

    [9] ZHAO Yan, WANG Chen. Effect of calcium chloride in combination with salicylic acid on post-harvest freshness of apples[J]. Food Science and Biotechnology, 2015, 24(3): 1139-1146. DOI:10.1007/s10068-015-0145-5.

    [10] MACHOWICZ-MATEJKO E, ZALEWSKA E D. Pharmacological substances in vitro in limiting growth and development of Fungi Colletotrichum genera[J]. Journal of Ocular Pharmacology and Therapeutics, 2015, 31(5): 303-309. DOI:10.1089/jop.2014.0128.

    [11] AIELLO D, CARRIERI R, GUARNACCIA V, et al. Characterization and pathogenicity of Colletotrichum gloeosporioides and C. karstii causing preharvest disease on Citrus sinensis in Italy[J]. Journal of Phytopathology, 2015, 163(3): 168-177. DOI:10.1111/jph.12299.

    [12] R AHUL P R, GANESH K V, SATHYABHAMA M, et al. Characterization and 3D structure prediction of chitinase induced in sugarcane during pathogenesis of Colletotrichum falcatum[J]. Journal of Plant Biochemistry and Biotechnology, 2015, 24(1): 1-8. DOI:10.1007/s13562-013-0226-6.

    [13] 楊志敏, 畢陽, 李永才, 等. 馬鈴薯干腐病菌侵染過程中切片組織細胞壁降解酶的變化[J]. 中國農業(yè)科學, 2012, 45(1): 127-134. DOI:10.3864/j.issn.0578-1752.2012.01.015.

    [14] JORGE I, NAVAS-CORTES J A, JIMENEZ-DIAZ R M, et al. Cell wall degrading enzymes in fusarium wilt of chickpea: correlation between pectinase and xylanase activities and disease development in plants infected with two pathogenic races of Fusarium oxysporum f. sp. ciceris[J]. Canadian Journal of Botany, 2006, 84(9): 1395-1404. DOI:10.1139/B06-103.

    [15] JAT B L, SHARMA P, GOUR H N. Production of enzymes and culture filtrates by Colletotrichum gloeosporioides Penz. causing banana fruit rot[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences, India Section B: Biological Sciences, 2013, 83(2): 177-180. DOI:10.1007/s40011-012-0125-y.

    [16] 檀根甲. 采后蘋果與炭疽菌的相互作用及病害控制機理研究[D]. 合肥: 安徽農業(yè)大學, 2009.

    [17] CAO Shifeng, YANG Zhenfeng, CAI Yuting, et al. Antioxidant enzymes and fatty acid composition as related to disease resistance in postharvest loquat fruit[J]. Food Chemistry, 2014, 163(15): 92-96. DOI:10.1016/j.foodchem.2014.04.084.

    [18] ROCKENBACH M F, BONETI J I, CANGAHUALA-INOCENTE G C, et al. Histological and proteomics analysis of apple defense responses to the development of Colletotrichum gloeosporioides on leaves[J]. Physiological and Molecular Plant Pathology, 2015, 89: 97-107. DOI:10.1016/j.pmpp.2015.01.003.

    [19] 李欣允, 陳維信, 劉愛媛. 炭疽病菌侵染對荔枝果實生理生化變化的影響[J]. 亞熱帶植物科學, 2006, 35(1): 1-4. DOI:10.3969/ j.issn.1009-7791.2006.01.001.

    [20] 曹建康, 姜微波, 趙玉梅. 果蔬采后生理生化實驗指導[M]. 北京: 中國輕工業(yè)出版社, 2007: 68-70.

    [21] 孫媛. 灰葡萄孢角質酶的致病作用及角質酶突變菌株的基因分析[D].揚州: 揚州大學, 2011.

    [22] 王學奎. 植物生理生化實驗原理和技術[M]. 北京: 高等教育出版社, 2006: 167-172.

    [23] 李春光, 周偉鐸, 田魏, 等. 甘蔗渣纖維素提取及木質素與半纖維素脫除工藝探討[J]. 中國農學通報, 2011, 27(4): 316-320.

    [24] 趙景楠, 馬喆, 耿文龍, 等. 新病害草莓褐色葉斑病病原菌細胞壁降解酶研究[J]. 中國農學通報, 2014(31): 261-266.

    Dynamic Changes in Chemical Components of the Pericarp of Postharvest Citrus Fruit Inoculated with Colletotrichum gloeosporioides

    GE Zhixing1, HE Mingyang1,2,3, ZENG Xiaofeng1, HUANG Xiaolan1, WANG Rikui1,2,3,*, ZHOU Lian1,2,3, HAN Leng1,2,3
    (1. Citrus Research Institute, Southwest University, Chongqing 400712, China; 2. Citrus Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Chongqing 400712, China; 3. National Citrus Engineering Research Center, Chongqing 400712, China)

    Objective: To examine dynamic changes in the activities of various cell wall-degrading enzymes (CWDEs), the contents of cell wall components and the activities of defense-related enzymes in citrus pericarp tissues infected with Colletotrichum gloeosporioides, aiming to gain more knowledge on the interaction between C. gloeosporioides and citrus fruits. Methods: Chemical components of the pericarp of citrus fruit inoculated with C. gloeosporioides were detected and comparatively analyzed during different sampling periods. Results: The activities of CWDEs including polygalacturonase (PG), polymethyl-galacturonase (PMG), carboxymethyl cellulose (Cx) and β-glucosidase (β-Glu) were detected in the infected tissue. The activities of CWDEs and cutinase remained at higher levels during the early infection period (day one to three post infection). The cell wall components including cellulose, hemicellulose and pectin showed a declining trend, but lignin content showed a rising trend during the infection of C. gloeosporioides. The activities of peroxidase (POD) and catalase (CAT) and the content of malonaldehyde (MDA) showed a rising trend in the citrus pericarp tissues infected with C. gloeosporioides. Conclusion: The CWDEs and cutinase play an important pathogenic role during the early stage of anthracnose, which accelerates the infection of pathogenic fungi by degrading the cell wall components. In addition, the infection of C. gloeosporioides accelerates membrane lipid peroxidation in host cells.

    citrus; Colletotrichum gloeosporioides; cell wall-degrading enzymes; cell wall components; defense-related enzymes

    10.7506/spkx1002-6630-201610045

    S609.3;S666.4

    A

    1002-6630(2016)10-0266-06

    蓋智星, 賀明陽, 曾小峰, 等. 采后柑橘與膠孢炭疽菌互作過程中果皮成分的動態(tài)變化[J]. 食品科學, 2016, 37(10): 266-271. DOI:10.7506/spkx1002-6630-201610045. http://www.spkx.net.cn

    GE Zhixing, HE Mingyang, ZENG Xiaofeng, et al. Dynamic changes in chemical components of the pericarp of postharvest citrus fruit inoculated with Colletotrichum gloeosporioides[J]. Food Science, 2016, 37(10): 266-271. (in Chinese with English abstract) DOI:10.7506/spkx1002-6630-201610045. http://www.spkx.net.cn

    2015-07-02

    公益性行業(yè)(農業(yè))科研專項(201203034);中央高?;究蒲袠I(yè)務費專項(XDJK2013C014);

    重慶市應用開發(fā)計劃項目(cstc2013yykfA80008);重慶市科技支撐示范工程項目(cstc2014fazktjcsf80007)

    蓋智星(1990—),女,碩士研究生,研究方向為農產品貯藏工程。E-mail:gezhixing@sinocitrus.com

    *通信作者:王日葵(1962—),男,副研究員,研究方向為果蔬采后理論及應用技術。E-mail:ewrk@163.com

    猜你喜歡
    細胞壁果膠侵染
    揭示水霉菌繁殖和侵染過程
    當代水產(2022年1期)2022-04-26 14:35:30
    從五種天然色素提取廢渣中分離果膠的初步研究
    卵磷脂/果膠鋅凝膠球在3種緩沖液中的釋放行為
    中成藥(2018年6期)2018-07-11 03:01:12
    紅花醇提物特異性抑制釀酒酵母細胞壁合成研究
    茄科尖孢鐮刀菌3 個?;图毎诮到饷傅谋容^
    蕓薹根腫菌侵染過程及影響因子研究
    甘藍根腫病菌休眠孢子的生物學特性及侵染寄主的顯微觀察
    提取劑對大豆果膠類多糖的提取率及性質影響
    北五味子果實中果膠的超聲提取工藝研究
    酶法破碎乳酸菌細胞壁提取菌體蛋白的研究
    久久久久性生活片| 国产极品天堂在线| 校园人妻丝袜中文字幕| 国产片特级美女逼逼视频| 啦啦啦啦在线视频资源| 国产91av在线免费观看| 国内揄拍国产精品人妻在线| 精品人妻偷拍中文字幕| 中文字幕av成人在线电影| 亚洲精品久久久久久婷婷小说 | 波多野结衣高清无吗| 亚洲国产精品sss在线观看| 欧美日本亚洲视频在线播放| 伦理电影大哥的女人| 在线观看66精品国产| 一个人看的www免费观看视频| 亚洲成人av在线免费| 日韩国内少妇激情av| 国产又色又爽无遮挡免| 国产精品久久久久久久电影| 亚洲精品久久久久久婷婷小说 | 久久久久性生活片| 亚洲图色成人| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 三级经典国产精品| 免费看a级黄色片| 欧美精品国产亚洲| 国产高清有码在线观看视频| 一本久久精品| 如何舔出高潮| 亚洲成av人片在线播放无| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 日本-黄色视频高清免费观看| 欧美日本亚洲视频在线播放| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 精品一区二区免费观看| 在线观看美女被高潮喷水网站| 成人性生交大片免费视频hd| 国产91av在线免费观看| 中文在线观看免费www的网站| 中文字幕久久专区| 看免费成人av毛片| 国产熟女欧美一区二区| 两个人的视频大全免费| 91久久精品电影网| av播播在线观看一区| 日本色播在线视频| 亚洲自拍偷在线| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 国产精品爽爽va在线观看网站| 午夜精品在线福利| 男人狂女人下面高潮的视频| 精品久久久久久久久久久久久| 亚洲在久久综合| 伊人久久精品亚洲午夜| 在线天堂最新版资源| 免费观看a级毛片全部| 爱豆传媒免费全集在线观看| 国产视频首页在线观看| 中文乱码字字幕精品一区二区三区 | 麻豆成人午夜福利视频| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 99热这里只有是精品50| 免费观看精品视频网站| 成人一区二区视频在线观看| 国产精品不卡视频一区二区| 精品少妇黑人巨大在线播放 | 日日啪夜夜撸| 国产不卡一卡二| 日韩大片免费观看网站 | 亚洲自拍偷在线| 亚洲av男天堂| av在线天堂中文字幕| 免费黄色在线免费观看| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 久久这里只有精品中国| 国产片特级美女逼逼视频| 国产欧美日韩精品一区二区| 亚洲精品aⅴ在线观看| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 在现免费观看毛片| 亚洲成av人片在线播放无| 2021天堂中文幕一二区在线观| 中国国产av一级| 韩国av在线不卡| 国产亚洲精品av在线| 国产极品天堂在线| 搡老妇女老女人老熟妇| 老女人水多毛片| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 国产精品一区www在线观看| 久久这里有精品视频免费| 亚洲av中文av极速乱| 成人特级av手机在线观看| 三级国产精品片| av在线亚洲专区| 日韩欧美精品v在线| 日本av手机在线免费观看| 亚洲av不卡在线观看| www.av在线官网国产| 在线观看一区二区三区| 亚洲四区av| 国产成人精品一,二区| 久久久久久九九精品二区国产| 久久久久久久午夜电影| 晚上一个人看的免费电影| 精品酒店卫生间| 免费播放大片免费观看视频在线观看 | 国产精品久久久久久久久免| 大香蕉久久网| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 国产真实乱freesex| 久久久欧美国产精品| 午夜日本视频在线| 久久6这里有精品| 精品久久久久久成人av| 欧美日韩综合久久久久久| 日韩欧美三级三区| 99热这里只有是精品在线观看| av在线亚洲专区| 免费播放大片免费观看视频在线观看 | 国产av一区在线观看免费| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 亚洲av福利一区| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 欧美日本视频| 精品一区二区免费观看| 麻豆乱淫一区二区| 免费看光身美女| 亚洲美女视频黄频| 2021少妇久久久久久久久久久| 青春草视频在线免费观看| 九九在线视频观看精品| 久久99热6这里只有精品| 简卡轻食公司| 亚洲精品一区蜜桃| 久久久久久久久中文| 亚洲经典国产精华液单| 成人毛片60女人毛片免费| 永久免费av网站大全| 亚洲精品亚洲一区二区| 又粗又爽又猛毛片免费看| 国产三级在线视频| 欧美精品国产亚洲| 日韩欧美精品免费久久| 精品无人区乱码1区二区| 夜夜爽夜夜爽视频| 网址你懂的国产日韩在线| 亚洲精品日韩av片在线观看| 国产一区二区在线av高清观看| 日本欧美国产在线视频| 99热这里只有是精品50| 国产av码专区亚洲av| 色吧在线观看| 国产视频内射| av.在线天堂| 久久精品综合一区二区三区| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 欧美+日韩+精品| 黄色日韩在线| 午夜福利成人在线免费观看| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 最近中文字幕2019免费版| 在线观看一区二区三区| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄 | 国国产精品蜜臀av免费| 天天躁日日操中文字幕| 丝袜美腿在线中文| 久久精品久久久久久久性| 欧美丝袜亚洲另类| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 伦理电影大哥的女人| 日韩欧美精品v在线| 亚洲欧洲日产国产| 一级毛片我不卡| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 人人妻人人看人人澡| 九九在线视频观看精品| 久久亚洲精品不卡| 午夜福利在线观看吧| 联通29元200g的流量卡| 免费播放大片免费观看视频在线观看 | 午夜久久久久精精品| 日韩欧美 国产精品| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 亚洲久久久久久中文字幕| 午夜福利网站1000一区二区三区| 日韩欧美在线乱码| 久久久久久久久大av| 乱系列少妇在线播放| www.av在线官网国产| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 免费看av在线观看网站| 中文天堂在线官网| 好男人视频免费观看在线| 看片在线看免费视频| 精华霜和精华液先用哪个| 亚洲欧美清纯卡通| 日韩,欧美,国产一区二区三区 | 欧美日本视频| 天堂√8在线中文| a级毛色黄片| 小说图片视频综合网站| 天堂√8在线中文| 亚洲欧美清纯卡通| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 亚洲自拍偷在线| 观看美女的网站| 久久人妻av系列| 国产极品天堂在线| 国产精品熟女久久久久浪| 91狼人影院| 黑人高潮一二区| 国产69精品久久久久777片| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 三级毛片av免费| av天堂中文字幕网| 免费看美女性在线毛片视频| 国产探花在线观看一区二区| 国产成人91sexporn| 三级毛片av免费| 亚洲成人av在线免费| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 老女人水多毛片| 午夜福利网站1000一区二区三区| 日韩欧美 国产精品| 99久久精品一区二区三区| 在线观看66精品国产| av国产免费在线观看| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 免费搜索国产男女视频| 色视频www国产| 亚洲人成网站在线观看播放| 两个人的视频大全免费| 国产亚洲91精品色在线| 大香蕉97超碰在线| 亚洲国产精品国产精品| 亚洲av二区三区四区| 精品一区二区免费观看| 一个人观看的视频www高清免费观看| 91精品国产九色| 搞女人的毛片| 久久99精品国语久久久| 欧美精品国产亚洲| 国产精品久久视频播放| 亚洲av电影不卡..在线观看| 一个人看视频在线观看www免费| 亚洲伊人久久精品综合 | 中文乱码字字幕精品一区二区三区 | 丰满乱子伦码专区| 人妻少妇偷人精品九色| 午夜久久久久精精品| 波野结衣二区三区在线| 日韩欧美精品v在线| 一个人免费在线观看电影| 亚洲精品国产av成人精品| 亚洲国产精品国产精品| 大香蕉久久网| 国产伦精品一区二区三区视频9| 欧美激情在线99| 老司机福利观看| www.av在线官网国产| 久久久成人免费电影| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 老女人水多毛片| 国产免费一级a男人的天堂| 97在线视频观看| 国产 一区 欧美 日韩| eeuss影院久久| 精品欧美国产一区二区三| 看十八女毛片水多多多| 我要搜黄色片| av在线亚洲专区| 亚洲内射少妇av| av黄色大香蕉| 亚洲国产精品专区欧美| 中文字幕免费在线视频6| 亚洲精品亚洲一区二区| 国产成人aa在线观看| 日本免费在线观看一区| 最后的刺客免费高清国语| 伊人久久精品亚洲午夜| 超碰av人人做人人爽久久| 亚洲三级黄色毛片| 国产精品av视频在线免费观看| 久久精品国产亚洲网站| 久久欧美精品欧美久久欧美| 人妻少妇偷人精品九色| 中文天堂在线官网| 午夜精品在线福利| 国产极品精品免费视频能看的| 日日摸夜夜添夜夜爱| 亚洲性久久影院| 国产av不卡久久| 别揉我奶头 嗯啊视频| 精品人妻视频免费看| 国产麻豆成人av免费视频| 熟女电影av网| 成人无遮挡网站| 精品酒店卫生间| 在线观看美女被高潮喷水网站| 看片在线看免费视频| 99久久中文字幕三级久久日本| 国产乱来视频区| 国产精品女同一区二区软件| 国产成人aa在线观看| 免费看光身美女| 中文欧美无线码| 插阴视频在线观看视频| 国产精品电影一区二区三区| 国产精品综合久久久久久久免费| 偷拍熟女少妇极品色| 超碰97精品在线观看| 免费av不卡在线播放| 黑人高潮一二区| 日本欧美国产在线视频| 在线播放无遮挡| 亚洲自拍偷在线| 亚洲国产最新在线播放| 亚洲在线观看片| 日韩av不卡免费在线播放| 一级毛片久久久久久久久女| 亚洲av电影不卡..在线观看| av.在线天堂| 麻豆国产97在线/欧美| 亚洲精品456在线播放app| h日本视频在线播放| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 亚洲18禁久久av| 能在线免费看毛片的网站| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 久久久精品欧美日韩精品| 99久久精品一区二区三区| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 99热精品在线国产| 亚洲欧洲日产国产| 久久久久久久久中文| 久久精品综合一区二区三区| 久久这里有精品视频免费| 长腿黑丝高跟| 99热精品在线国产| 成年女人永久免费观看视频| 国产精品人妻久久久久久| 国产精品日韩av在线免费观看| 联通29元200g的流量卡| 男女边吃奶边做爰视频| 国产精品人妻久久久久久| 亚洲精品国产成人久久av| 国产伦精品一区二区三区四那| 高清av免费在线| 中文字幕久久专区| 国产亚洲午夜精品一区二区久久 | 国产片特级美女逼逼视频| 国产成人精品久久久久久| 国产亚洲精品久久久com| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 日韩av在线大香蕉| 国内精品一区二区在线观看| 欧美激情在线99| 不卡视频在线观看欧美| 最近视频中文字幕2019在线8| 久久久欧美国产精品| 国产亚洲最大av| 看片在线看免费视频| 久久久久久国产a免费观看| 中文字幕久久专区| 国国产精品蜜臀av免费| 国产精品不卡视频一区二区| 校园人妻丝袜中文字幕| 三级经典国产精品| 久久久久九九精品影院| 国产免费一级a男人的天堂| 好男人在线观看高清免费视频| 99视频精品全部免费 在线| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 日韩高清综合在线| 你懂的网址亚洲精品在线观看 | 日韩精品青青久久久久久| 久久精品夜色国产| 亚洲自拍偷在线| 91精品国产九色| 久久精品国产自在天天线| 成年av动漫网址| 午夜a级毛片| 99久久人妻综合| 七月丁香在线播放| 亚洲在线观看片| 天堂√8在线中文| 99久久精品一区二区三区| 一级毛片电影观看 | 少妇的逼好多水| 免费一级毛片在线播放高清视频| 听说在线观看完整版免费高清| 亚洲性久久影院| 一夜夜www| 99久久九九国产精品国产免费| 99国产精品一区二区蜜桃av| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 欧美3d第一页| 成人毛片60女人毛片免费| 亚洲五月天丁香| 91精品一卡2卡3卡4卡| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 国产中年淑女户外野战色| 麻豆久久精品国产亚洲av| 性色avwww在线观看| 国产精品.久久久| 精品免费久久久久久久清纯| 最近最新中文字幕大全电影3| www日本黄色视频网| 免费黄色在线免费观看| 亚洲电影在线观看av| 国产黄片视频在线免费观看| 成人一区二区视频在线观看| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄 | 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 99久久精品热视频| 亚洲欧美一区二区三区国产| 老司机影院毛片| 深爱激情五月婷婷| 精品久久久噜噜| 亚洲av成人精品一二三区| 精品欧美国产一区二区三| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 亚洲美女视频黄频| 麻豆av噜噜一区二区三区| 亚洲中文字幕日韩| 久久99热这里只频精品6学生 | 亚洲精品,欧美精品| 国产精品熟女久久久久浪| 亚洲经典国产精华液单| 激情 狠狠 欧美| 日本一本二区三区精品| 成人国产麻豆网| 国产单亲对白刺激| 亚洲伊人久久精品综合 | 国产精品久久久久久精品电影| 久久久久久久亚洲中文字幕| 97在线视频观看| 欧美+日韩+精品| 天天躁日日操中文字幕| 精品一区二区三区人妻视频| 国产视频内射| 草草在线视频免费看| 国产成人a区在线观看| 久久久久久久午夜电影| 亚洲最大成人中文| 一级毛片我不卡| 永久免费av网站大全| 国产精品国产三级国产专区5o | 国产探花在线观看一区二区| 免费看美女性在线毛片视频| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 日韩亚洲欧美综合| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄 | 久久国产乱子免费精品| 99久久成人亚洲精品观看| 欧美精品国产亚洲| 91狼人影院| 六月丁香七月| 国产精品一区二区性色av| 国产乱来视频区| 日韩精品有码人妻一区| 精品国内亚洲2022精品成人| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 99久久九九国产精品国产免费| 春色校园在线视频观看| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 99久国产av精品| 精品久久久久久电影网 | 久久精品久久精品一区二区三区| 高清午夜精品一区二区三区| 国产中年淑女户外野战色| 中文欧美无线码| 亚洲精品一区蜜桃| 欧美一区二区国产精品久久精品| 欧美激情久久久久久爽电影| 久久久色成人| 国产一区二区三区av在线| 精品久久久久久久久久久久久| 精品久久久久久久久av| 国产精品99久久久久久久久| 国产在视频线精品| 国产精品国产三级专区第一集| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片 精品乱码久久久久久99久播 | 老司机影院成人| 亚洲精品久久久久久婷婷小说 | 国产真实伦视频高清在线观看| 别揉我奶头 嗯啊视频| 亚洲内射少妇av| 免费看光身美女| 禁无遮挡网站| 久久久午夜欧美精品| 欧美成人精品欧美一级黄| 国产成人免费观看mmmm| 国产激情偷乱视频一区二区| 一二三四中文在线观看免费高清| 不卡视频在线观看欧美| 午夜免费激情av| 日韩一本色道免费dvd| 亚洲av电影不卡..在线观看| 亚洲伊人久久精品综合 | 亚洲精品日韩在线中文字幕| 亚洲国产精品久久男人天堂| 我的女老师完整版在线观看| 国产日韩欧美在线精品| 久久久久久国产a免费观看| 黄色一级大片看看| 成人av在线播放网站| av免费观看日本| 亚洲在线自拍视频| 偷拍熟女少妇极品色| 人体艺术视频欧美日本| a级毛色黄片| 国产成人免费观看mmmm| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 一级毛片我不卡| 国产极品天堂在线| videos熟女内射| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 色网站视频免费| 少妇熟女欧美另类| 搡女人真爽免费视频火全软件| 久久这里有精品视频免费| 日日摸夜夜添夜夜爱| 国产高潮美女av| 国产一级毛片在线| 亚洲精品色激情综合| 特级一级黄色大片| 禁无遮挡网站| 哪个播放器可以免费观看大片| 成人美女网站在线观看视频| 国产黄片视频在线免费观看| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 干丝袜人妻中文字幕| 免费电影在线观看免费观看| 亚洲,欧美,日韩| 亚洲欧美清纯卡通| 亚洲精品日韩av片在线观看| 青春草视频在线免费观看| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 国产免费一级a男人的天堂| 亚洲欧美精品综合久久99| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 黄色配什么色好看| 国产成人aa在线观看| 国产伦精品一区二区三区视频9| 国产午夜精品一二区理论片| 亚洲精品影视一区二区三区av| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 九九爱精品视频在线观看| 色哟哟·www| 国产精品1区2区在线观看.| 国产中年淑女户外野战色| 国产成人免费观看mmmm| 欧美+日韩+精品| 1024手机看黄色片| 看非洲黑人一级黄片| 麻豆一二三区av精品| 99久久无色码亚洲精品果冻| 在线观看av片永久免费下载| 内地一区二区视频在线| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 色网站视频免费| 亚洲一区高清亚洲精品| 久久人人爽人人爽人人片va| 亚洲国产精品合色在线| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 亚洲av男天堂| 一个人看视频在线观看www免费| 麻豆成人午夜福利视频| 亚洲怡红院男人天堂| 日韩欧美在线乱码| 国产亚洲精品久久久com| 国产一区二区在线观看日韩| 国产午夜精品一二区理论片| 春色校园在线视频观看| 婷婷色综合大香蕉| 赤兔流量卡办理| 午夜免费激情av| 亚洲精品成人久久久久久| 日韩视频在线欧美| 性插视频无遮挡在线免费观看| 日本五十路高清| 午夜精品一区二区三区免费看| 日韩成人av中文字幕在线观看| 国产精品综合久久久久久久免费| 国产乱人偷精品视频| 99九九线精品视频在线观看视频| 身体一侧抽搐| 韩国高清视频一区二区三区| 在线观看一区二区三区| 欧美成人免费av一区二区三区| 看黄色毛片网站| 国产亚洲最大av| 成年女人看的毛片在线观看| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 亚洲精品久久久久久婷婷小说 | 一级爰片在线观看| 麻豆国产97在线/欧美| 国产久久久一区二区三区| 国产成人免费观看mmmm| 久久久久久久久中文| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 亚洲国产高清在线一区二区三| 老司机影院成人| 久久欧美精品欧美久久欧美| 国产精品伦人一区二区| 婷婷六月久久综合丁香| 久久久精品大字幕| 亚洲av成人av| 午夜视频国产福利|