• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    細胞分裂素合成關鍵基因ipt應用研究進展

    2016-11-30 11:26:03皮照興廉玉利李依娜孟德勇
    中國科技縱橫 2016年17期
    關鍵詞:基因工程

    皮照興+廉玉利+李依娜+孟德勇

    【摘 要】本文介紹了細胞分裂素的種類和生物合成過程,闡述了異戊烯基轉移酶是細胞分裂素生物合成過程中的重要限速酶,其編碼基因ipt已被克隆并在植物基因工程得到廣泛應用。重點綜述了轉化ipt基因可增加植物內源細胞分裂素的含量,在延緩葉片衰老、提高作物產量、誘導單性結實、抗旱、抗病蟲害、抗寒等方面起到了顯著作用,并分析了ipt基因在植物基因工程中應用研究方向。

    【關鍵詞】細胞分裂素 異戊烯基轉移酶 基因工程

    【Abstract】In this paper, the species and biosynthetic process of cytokinins are introduced. Isopentenyl-transferases catalyze the rate-limiting step of cytokinin biosynthesis, and its coding genes have been cloned and used widely in plant genetic engineering .The overview of the ipt gene transformation can be increased endogenous cytokinin content which has significant effect in retard leaf senescence, increase crop yield, induced parthenocarpy, drought resistance, disease resistance and insect resistance, cold resistance and other aspects.At the same time, the paper analyzed the application and research direction of the ipt gene in plant gene engineering.

    【Key words】Cytokinin; Isopentenyl-transferase gene (ipt); genetic engineering

    細胞分裂素是植物生長發(fā)育過程中五大類植物生長調節(jié)劑之一,在促進細胞分裂和擴大、誘導器官分化、延緩葉片衰老進程以及在種子萌發(fā)和逆境應答等重要生理生化反應方面均發(fā)揮著重要的作用。異戊烯基轉移酶是催化細胞分裂素生物合成的關鍵酶,也是最重要的限速酶。本文就細胞分裂素的合成、異戊烯基轉移酶基因(簡稱ipt基因)以及其在植物基因工程上應用進行了綜述,旨在為探索細胞分裂素生理作用機理及異戊烯基轉移酶基因在植物基因工程上應用奠定理論基礎,同時也為通過調整植物激素進行作物遺傳育種展示了廣闊的應用前景。

    1 細胞分裂素的生物合成與 ipt基因

    細胞分裂素在植物種子萌發(fā)、去黃化現象、葉綠體分化、頂端優(yōu)勢、植物抗逆反應、花和果實的發(fā)育和葉片衰老等生長發(fā)育都具有十分重要作用。Lethan在1963年報道的從未成熟玉米種子中分離出的反式玉米素是發(fā)現最早并純化的細胞分裂素(t-Zeatin)[1]。細胞分裂素主要包括嘌呤型和苯基脲型兩種類型,至今尚未在植物體內發(fā)現天然存在的苯基脲型細胞分裂素或有活性代謝物。

    1.1 細胞分裂素的生物合成

    細胞分裂素的生物合成包括tRNA合成途徑與從頭合成途徑。其中tRNA合成途徑是以tRNA分解釋放出來的順式玉米素為底物,在順反異構酶的催化下合成高活性的反式玉米素[2,3],該途徑是細胞分裂素合成的次要途徑。從頭合成途徑是細胞分裂素生物合成的主要途徑,包括ATP/ADP途徑、AMP途徑和旁路途徑如圖1所示。

    1.2 ipt基因

    Taya等[4]和Akiyoshi等[5]分別從黏菌(Dictyostelium discoideum)和致癌農桿菌(Agrobacterium tumefaciens)中鑒定出一種酶,該酶可催化AMP和IPP合成有活性的細胞分裂素iPMP,該酶稱之為IPT酶,它是細胞分裂素從頭生物合成限速酶,編碼該酶的基因稱為ipt基因。隨后在其它細菌和植物中也發(fā)現有ipt基因,2001年,Takei等[6]和 Kakimoto等[7]從擬南芥中鑒定出9個ipt同系物,命名為AtIPT1~AtIPT9。經系統(tǒng)發(fā)育分析表明AtIPT2和AtIPT9編碼準tRNA-異戊烯基轉移酶(tRNA合成途徑),而其它的7個基因在大腸桿菌中的表達可導致異戊烯基腺嘌呤和玉米素的分泌,表明這7個基因在擬南芥中是編碼細胞分裂素生物合成的基因且具有組織特異性。Sakamoto等在水稻中鑒定出8個ipt基因(OsIPT1~OsIPT8)編碼異戊二烯基轉移酶并參與到細胞分裂素生物合成的過程中[8]。

    從圖1可以看出,細菌中純化到的IPT酶利用AMP為底物合成玉米素,而擬南芥中純化得到的AtIPT酶優(yōu)先利用ATP和ADP作為底物,推測該酶可能先合成iPTP和iPDP,再經羥基化合成嘌呤型的細胞分裂素[9]。近年來研究表明,在擬南芥中存在一個不依賴于iPTP/iPDP、iPMP的細胞分裂素合成途徑,該途徑可能是由ATP、ADP、AMP和萜類化合物前體(HMBDP)直接完成的[10],在農桿菌、大腸桿菌和黃木樨根瘤菌也分離鑒定出了間接途徑合成異戊烯基轉移酶基因——miaA基因[11]。

    2 IPT基因在植物基因工程上的應用

    已有研究表明通過轉化ipt基因可增加植物內源的細胞分裂素含量,可以延緩植物葉片的衰老,增強植物對非生物逆境的抗性,使植株保持高水平的光合作用,以提升農作物的產量、改善品質。

    2.1 延緩葉片衰老

    植物葉片衰老的遺傳機制是通過細胞核基因表達調控和環(huán)境因子影響來啟動衰老程序發(fā)揮作用的,它已成為一個重要指標來增加作物遺傳改良的潛力。Huang[12]等認為植物葉片在衰老過程中,內源激素含量可能最先發(fā)生變化,由此導致葉綠體和蛋白質降解,光合速率下降。在20世紀30年代末就有科學家發(fā)現細胞分裂素延緩葉片衰老的效應,其主要通過轉錄因子調控途徑、信號轉導途徑和代謝途徑等提高細胞抗氧化酶的活性、減少膜脂類的過氧化作用、促進活性氧的清除、增加光合作用、降低對乙烯和脫落酸的敏感性延緩植物葉片的衰老[13,14]。王哲[15]用PSAG12-ipt融合基因轉化煙草,全株青葉片數明顯增多,植株下部葉片衰老得到明顯延緩。李秋慶[16]用PSAG12-IPT基因轉化辣椒,實驗結果表明陽性植物出現葉片衰老延緩及植株生命周期延長等現象,花的衰老也有所延緩。

    2.2 提高作物產量

    細胞分裂素對植物的生理功能和作用是多方面的,具有誘導營養(yǎng)物質向其含量高的部位運輸的能力,是提高灌漿效率的重要調控因子。在生產實踐中,施用外源細胞分裂素可有效增加籽粒的重量,提高座果率以及增大果實等[17]。ipt基因在水稻醇溶蛋白種子特異性表達啟動子驅動下的表達使得煙草種子的iPA含量提高了4.73 倍,種子的重量增加了12.8%[18]。毛自朝等[19]將果實專一性啟動子2A12驅動ipt基因在番茄中的表達,發(fā)現果實中的細胞分裂素增高,番茄的坐果率、產量以及果實中的干物質和粗蛋白均有不同程度的提高,且果實采摘后貯藏保鮮時間延長了1-2周。很多科學工作者已把這項技術應用于轉化水果、農作物、花卉和蔬菜等研究之中,這為提高農作物、果蔬的產量與品質提供了新的途徑。

    2.3 誘導單性結實

    外源細胞分裂素能夠促進黃瓜、西瓜、梨和蘋果的未授粉果實的發(fā)育,從而產生無籽果實。在番茄中利用果實特異性啟動子大量表達ipt基因能得到穩(wěn)定的單性結實株系[20],這為細胞分裂素調控植物的單性結實提供了直接證據。毛自朝等[19]將果實專一性啟動子2A12驅動ipt基因在番茄中的表達,也得到了無籽番茄。黃瓜ipt基因CsIPT2在授粉后的黃瓜果實發(fā)育中表達量上調,且在黃瓜天然單性結實前期和人工誘導的單性結實后期表達量均有增加,推測其在黃瓜單性結實果實發(fā)育中發(fā)揮著重要作用[21]。

    2.4 參與抗逆反應

    編碼異戊烯基轉移酶基因在作物中表達,誘導植物體內產生活體酶和逆境脅迫蛋白等生理變化,促進光合作用,產生次生代謝物質,使細胞對環(huán)境脅迫因子、機械損傷或昆蟲咬傷等作出響應。

    2.4.1 抗旱

    在干旱條件下,細胞分裂素可誘導過氧化氫體生成過氧化氫酶,葉綠素含量增加,促進了光呼吸作用,提高了植物的抗旱能力,同時抑制了脫落酸的作用,延緩了葉片的衰老。張雷等[22]研究轉ipt基因四季海棠中發(fā)現,陽性植株細胞分裂素濃度增加,植株變矮,節(jié)間變短,葉片面積、氣孔密度和直徑均有不同程度的減小,主根發(fā)達且長度增加,在滲透脅迫條件下,植株體內脯氨酸含量和SOD活性較野生植株都明顯增加,抗旱能力增強。玉山江·麥麥提[23]研究也表明,在干旱脅迫條件下ipt轉基因水稻的細胞分裂素和葉綠素含量顯著升高、葉面溫度稍低、葉片衰老延緩、抗旱性增加、作物產量增加。

    2.4.2 抗病蟲害

    細胞分裂素在調控植物的超越補償反應調控系統(tǒng)中起著重要作用,遭受昆蟲取食的葉片,細胞分裂素含量增加,有效地促進氣孔開放,降低氣孔的擴散阻力而提高光合作用,促進傷口愈合;同時導致植株體內的次生代謝過程發(fā)生了變化,產生抗蟲效應的毒害或趨避作用的化合物,從而產生抗蟲效應。李海林等[24]研究表明轉CaMV35S-ipt基因的甘藍型油菜自交品種S65表現高抗蚜蟲,T1-3較野生型對蚜蟲的抑制率均為100%,而野生型植株表現高感蚜蟲,極易受到蚜蟲侵害。Smigocki等[25]將蛋白酶抑制劑II基因啟動子-ipt融合基因轉化煙草,發(fā)現轉基因植株能明顯抑制桃蚜的生長發(fā)育。這種方法與導入抗蟲基因相比更接近于植物的天然防御能力,這將為植物基因工程技術研制抗蟲新品種提供新的的基因和思路。

    2.4.3 抗寒

    外源ipt基因的表達,細胞分裂素含量增加,葉片葉綠素含量、脯氨酸含量、可溶性糖含量、可溶性蛋白含量以及根系活力均增加,POD、SOD活性降低速率減慢,有利于植物抵抗低溫環(huán)境。張曉等[26]利用基因槍法將Leafy-ipt基因導入高羊茅草,轉基因株系植株的抗寒性明顯提高。王婷婷[27]研究表明轉ipt基因的草地早熟禾耐冷性顯著提高,隨著氣溫的降低,細胞膜受損傷程度低,出現凍害表型的時間晚,持綠期較長,具有很好的應用前景。李書欽[28]將ipt-bar雙元基因轉入水稻,也得到了強抗冷性植株,且千粒重和有效穗均有所增加。

    2.5 其他作用

    ipt基因轉化植物提高細胞分裂素的含量,除了具有延緩植物葉片衰老、誘導單性結實、提高農作物的產量與品質、參與抗逆反應外,還能提高轉化率和誘導率[29]、產生雄性不育后代、增強作物耐澇的能力[30],還能作為選擇標記基因篩選轉化子[31]。但過量表達ipt基因將導致花不同程度的敗育和種子的萌發(fā)率降低[32]。

    3 展望

    分子生物學和基因工程技術的發(fā)展及應用大力推動了細胞分裂素和異戊烯基轉移酶基因在植物基因工程的研究與應用,但解析植物中細胞分裂素的合成代謝與器官發(fā)生發(fā)育過程的關系還需進一步探討,尤其是細胞分裂素表達量以及細胞分裂素與其他激素的相互作用對植物生理代謝的調控以及器官發(fā)生發(fā)育過程的作用關系還需進一步研究。我們期待今后利用特異啟動子與異戊烯基轉移酶基因融合培育出更多品質優(yōu)良的作物新品種。

    參考文獻:

    [1]Lethan D S. A factor inducing cell division from Zea mays[J].Life Sci,1963,8: 569-573.

    [2]Mok DW,Mok MC.Cytokinin metabolism and action[J].Annu Rev Plant Physiol Plant MolBiol, 2001,52:89-118.

    [3]Tatsuo Kakimoto.Biosynthesis of cytokinins[J].J Plant Res, 2003,116:233-239.

    [4]Taya Y,Tanaka Y,Nishimura S. 5′-AMP is a direct precursor of cytokinin in Dictyostelium discoidum[J]. Nature, 1978, 271:545-547.

    [5]Akiyoshi DE, Klee H, Amasino RM. et al. T-DNA of Agrobacterium tumefaciens encodes an enzyme of cytokinin biosynthesis[J].Proc Natl Acad Sci USA, 1984, 81:5994-5998.

    [6]Takei K, Sakakibara H, Sugiyama T. Identification of genes encoding adenylate isopentenyltransferase, a cytokinin biosynthesis enzyme, in Arabidopsis thaliana[J]. J Biol Chem, 2001, 276: 26405-26410.

    [7]Kakimoto T. Identification of plant cytokinin biosynthetic enzymes as dimethylallyl diphosphate: ATP/ADP isopentenyl transferases[J]. Plant Cell Physiol, 2001, 42:677~685.

    [8]Sakamoto T, Sakakibara H, Kojima M, et al. Ectopic expression of KNOTTED1-like homeobox protein induces expression of cytokinin biosynthesis genes in rice. Plant Physiol, 2006 (142):54-62.

    [9]Kakimoto T. Identification of plant cytokinin biosynthetic enzymes as dimethylallyl diphosphate:ATP/ADP isopentenyl transferases[J].Plant Cell Physiol,2001,42:677~685.

    [10]Astot C, Nordstror MA. An alternative cytokinin biosynthesis pathway[J].ProcNatl Acad Sci USA,2000,97:14778-14783.

    [11]崔巍巍.IPT基因及GmSAPK啟動子的克隆、表達載體構建及植物轉化[D].吉林農業(yè)大學,2012.

    [12]Huang Y,Chen CT,Kao C,H.Senescence of rice leaves XXIV, Involvement of calcium and calmodulin in the regulation of senescence.Plant Physiol,1990,31:1015~1020.

    [13]趙佩,高成香,張娜,等.轉IPT基因棉花衰老相關基因的差異表達分析[J].分子植物育種,2012,10(3):324-330.

    [14]楊曉紅,陳曉陽,劉克鋒.細胞分裂素對植物衰老的延緩作用[J].熱帶亞熱帶植物學報,2006,14(3):256-262.

    [15]王哲.PSAG12-ipt基因轉化煙草抑制早衰的研究[D],河南農業(yè)大學,2007.

    [16]李秋慶,陳國菊,曹必好,等.農桿菌介導PSAG12-IPT基因轉化辣椒的研究[J].辣椒雜志,2015,2:23-29.

    [17]羅正榮.新植物生長調節(jié)劑CPPU及其在果實和蔬菜上的應用[J].植物生理學通訊,1993,29(1):297-299.

    [18]申佩弘,喬越美,武波,等.水稻醇溶蛋白啟動子驅動下的ipt基因表達及對煙草種子iPAs含量和種子重量的影響[J].中國農業(yè)科學,2004,37(12):1938-1941.

    [19]毛自朝,于秋菊,甄偉,等.果實專一性啟動子驅動ipt基因在番茄中的表達及其對番茄果實發(fā)育的影響[J].科學通報,2002,47(6):444-448.

    [20]Mao ZC, Yu QJ,Zhen W, et al. Expression of ipt gene driven by tomato fruit specific promoter and its effects on fruit development of tomato. Chinese Science Bulletin,2002,47(11):928-933.

    [21]張停林,李季,崔利,等.黃瓜異戊烯基轉移酶基因(CsIPT2)的克隆及特征分析[J].南京農業(yè)大學學報,2014,37(1):21-26.

    [22]張雷,鮑平秋.轉ipt基因四季海棠植株抗旱性分析[J].湖北農業(yè)科學,2012,51(1):83-87.

    [23]玉山江·麥麥提.水稻HD-ZIP轉錄因子Oshox4,Oshox6和IPT基因在水稻中的表達及其抗旱功能研究[D].中國農業(yè)科學院,2012.

    [24]李海林,趙德剛.轉IPT基因油菜提高抗蚜蟲能力[J].分子植物育種,2011,9(3):343-349.

    [25]Smigocki A, Neal JW,McCanna I, et al. Cytokinin-mediated insect resistance in Nicotiana plants transformed with the ipt gene[J].Plant Molecular Biology,1993,23(2):325-335.

    [26]張曉,楊麗莉,楊曉玲.轉Leafy-ipt基因高羊茅草生育后期SOD,POD,MDA的變化[J]山西農業(yè)科學,2008,36(9):26-28.

    [27]王婷婷.轉ipt基因及細胞工程草地早熟禾的抗逆性分析[D].山東大學,2008.

    [28]李書欽.轉ipt-bar雙元基因水稻的遺傳與抗冷性研究[D].貴州大學,2008.

    [29]李巖,趙德剛.ipt基因促進杜仲遺傳轉化不定芽再生[J].北京林業(yè)大學學報,2011,33(06):90-93.

    [30]劉曉忠,李建坤,王志霞,等.應用細胞分裂素類物質提高玉米抗?jié)衬芰Φ男Чc作用[J].作物學報,1996,22(4)403-408.

    [31]Endo S,Kasahara T,Sugita K,et al.The isopentenl-transferase gene is effective as a selectable marker gene for plant transformation in tobacco (Nicotiana tabacum cv.Petite Havana SRI)[J].Plant Cell Reports,2001,20: 60-66.

    [32]胥珊,孫一銘,賈之春,等.超量表達IPT和KN1基因對轉基因煙草生長發(fā)育的影響[J].植物生理學報,2009,45(06):537-543.

    猜你喜歡
    基因工程
    基因工程小鼠飼養(yǎng)繁育及鑒定策略
    水稻育性發(fā)育與基因工程實驗室
    “自然科學—人文探討”在基因工程課程思政中的應用
    福建輕紡(2022年4期)2022-06-01 06:26:10
    基因工程菌有什么本領?
    軍事文摘(2020年14期)2020-12-17 06:27:28
    “實境課堂”為青少年點亮前行之光——泰興市少先隊實施紅色基因工程
    少先隊活動(2020年9期)2020-10-28 08:03:36
    基因工程菌有什么本領?
    口蹄疫基因工程疫苗研究進展
    普萊柯:多款豬禽用疫苗即將推出
    基因工程在作物抗蟲育種中的應用研究
    山西農經(2016年5期)2016-02-28 14:24:36
    基因工程菌K88-K99融合蛋白高密度發(fā)酵工藝的初步研究
    国产一区二区三区在线臀色熟女| 国产成人av教育| 久久人妻av系列| 搡老熟女国产l中国老女人| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 波多野结衣av一区二区av| 亚洲精品粉嫩美女一区| 在线观看免费日韩欧美大片| 中文字幕最新亚洲高清| 麻豆成人av在线观看| 99国产极品粉嫩在线观看| АⅤ资源中文在线天堂| 久久九九热精品免费| 校园春色视频在线观看| 美女国产高潮福利片在线看| 搡老岳熟女国产| 在线天堂中文资源库| www.www免费av| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 国产亚洲精品一区二区www| 国产一级毛片七仙女欲春2 | 特大巨黑吊av在线直播 | 伦理电影免费视频| 欧美激情久久久久久爽电影| 波多野结衣高清无吗| 免费电影在线观看免费观看| 又大又爽又粗| 日韩欧美国产在线观看| 免费无遮挡裸体视频| 精品久久久久久,| 美女高潮到喷水免费观看| 国产精品久久视频播放| 久久香蕉激情| 巨乳人妻的诱惑在线观看| av在线播放免费不卡| 99热只有精品国产| 免费高清在线观看日韩| 亚洲av熟女| 制服丝袜大香蕉在线| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 性色av乱码一区二区三区2| 色播亚洲综合网| 丝袜人妻中文字幕| tocl精华| 亚洲成a人片在线一区二区| 人妻久久中文字幕网| 日韩欧美国产在线观看| 成人精品一区二区免费| 国产成+人综合+亚洲专区| 亚洲国产精品合色在线| 国产精品国产高清国产av| 不卡一级毛片| 啦啦啦 在线观看视频| 久久九九热精品免费| 最近最新中文字幕大全电影3 | 一进一出好大好爽视频| 久久精品91无色码中文字幕| 亚洲天堂国产精品一区在线| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 亚洲av电影在线进入| 精品欧美国产一区二区三| 精品久久久久久久久久久久久 | 国产精品精品国产色婷婷| 可以在线观看的亚洲视频| 黄色a级毛片大全视频| 国产视频一区二区在线看| 国产高清激情床上av| 国产成人精品无人区| 国产精品亚洲av一区麻豆| netflix在线观看网站| 亚洲 国产 在线| 欧美激情极品国产一区二区三区| 亚洲成a人片在线一区二区| 久久精品国产综合久久久| 亚洲 国产 在线| 久久久久久久午夜电影| 久久这里只有精品19| 看片在线看免费视频| 麻豆久久精品国产亚洲av| 88av欧美| 国产极品粉嫩免费观看在线| 热re99久久国产66热| 久久精品人妻少妇| 十八禁网站免费在线| 青草久久国产| 波多野结衣巨乳人妻| 亚洲专区中文字幕在线| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 欧美色欧美亚洲另类二区| 亚洲av成人一区二区三| 午夜福利在线在线| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 欧美日本视频| 精华霜和精华液先用哪个| 午夜亚洲福利在线播放| 性欧美人与动物交配| 成人永久免费在线观看视频| 男女下面进入的视频免费午夜 | 国产1区2区3区精品| 白带黄色成豆腐渣| 日本成人三级电影网站| 国产在线精品亚洲第一网站| 无限看片的www在线观看| 老司机靠b影院| 国产不卡一卡二| 日韩三级视频一区二区三区| 国产成人精品无人区| 国产国语露脸激情在线看| 精品一区二区三区av网在线观看| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 成人三级黄色视频| 亚洲无线在线观看| 一级作爱视频免费观看| 在线播放国产精品三级| 亚洲最大成人中文| 久久精品91蜜桃| 午夜a级毛片| 欧美性猛交黑人性爽| 午夜亚洲福利在线播放| 国产av又大| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 国产激情偷乱视频一区二区| 老司机在亚洲福利影院| 久久精品人妻少妇| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 欧美日韩乱码在线| 制服诱惑二区| 成人亚洲精品av一区二区| 色播在线永久视频| 亚洲电影在线观看av| 精品久久久久久,| 亚洲久久久国产精品| 麻豆成人午夜福利视频| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 1024香蕉在线观看| 好男人在线观看高清免费视频 | 1024香蕉在线观看| 老司机午夜十八禁免费视频| 麻豆成人av在线观看| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 亚洲第一青青草原| 久久久国产成人免费| 精品卡一卡二卡四卡免费| 色在线成人网| 香蕉国产在线看| 国产激情偷乱视频一区二区| 一区福利在线观看| 亚洲成av人片免费观看| 欧美国产精品va在线观看不卡| 婷婷六月久久综合丁香| 国产真实乱freesex| 亚洲av成人一区二区三| 91麻豆精品激情在线观看国产| 欧美成狂野欧美在线观看| 中文字幕av电影在线播放| 男女午夜视频在线观看| 人成视频在线观看免费观看| 看片在线看免费视频| 亚洲国产精品sss在线观看| 色精品久久人妻99蜜桃| 一级毛片精品| 一a级毛片在线观看| 亚洲精品久久国产高清桃花| 亚洲精品av麻豆狂野| 日本五十路高清| 国产高清有码在线观看视频 | 精品国产乱子伦一区二区三区| 神马国产精品三级电影在线观看 | 久久草成人影院| 国产精品亚洲一级av第二区| 一二三四社区在线视频社区8| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 黄片播放在线免费| 人人妻人人看人人澡| 成年女人毛片免费观看观看9| 人人澡人人妻人| 成年版毛片免费区| 亚洲成人国产一区在线观看| 久久九九热精品免费| www.熟女人妻精品国产| 激情在线观看视频在线高清| 99re在线观看精品视频| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | www.www免费av| 国产久久久一区二区三区| 国产免费男女视频| 国产在线观看jvid| 欧美成人性av电影在线观看| 欧美另类亚洲清纯唯美| 午夜日韩欧美国产| 自线自在国产av| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区| 三级毛片av免费| 久久精品国产综合久久久| 亚洲美女黄片视频| 亚洲九九香蕉| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 岛国在线观看网站| 一级a爱片免费观看的视频| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 狂野欧美激情性xxxx| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 亚洲片人在线观看| 18美女黄网站色大片免费观看| 色av中文字幕| 欧美激情久久久久久爽电影| 午夜福利欧美成人| 亚洲国产精品成人综合色| 精品欧美一区二区三区在线| 色播在线永久视频| 欧美日韩黄片免| 欧美激情 高清一区二区三区| 两个人视频免费观看高清| 国产区一区二久久| 久久人妻av系列| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 又大又爽又粗| 久久草成人影院| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| av中文乱码字幕在线| 国产成年人精品一区二区| 给我免费播放毛片高清在线观看| 伦理电影免费视频| 国产精品99久久99久久久不卡| 欧美午夜高清在线| 嫁个100分男人电影在线观看| 怎么达到女性高潮| 老汉色∧v一级毛片| 黄色女人牲交| 日本免费a在线| 好男人在线观看高清免费视频 | 欧美日本亚洲视频在线播放| 国产成年人精品一区二区| 免费搜索国产男女视频| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 久久人妻av系列| 日本成人三级电影网站| 日韩欧美三级三区| 在线观看免费午夜福利视频| 啦啦啦韩国在线观看视频| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 日韩精品青青久久久久久| 天堂√8在线中文| 精品欧美国产一区二区三| 国产高清videossex| 激情在线观看视频在线高清| 日本 av在线| 国产精品 国内视频| 精品免费久久久久久久清纯| 搡老妇女老女人老熟妇| 国内精品久久久久久久电影| 91九色精品人成在线观看| 精品电影一区二区在线| 欧美性猛交黑人性爽| 久99久视频精品免费| 怎么达到女性高潮| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 国产一卡二卡三卡精品| 桃红色精品国产亚洲av| 我的亚洲天堂| 精品电影一区二区在线| 久久久久久大精品| 国产视频内射| 中文字幕精品免费在线观看视频| 国产又色又爽无遮挡免费看| 老鸭窝网址在线观看| 久久国产精品人妻蜜桃| 国产成人精品无人区| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 国产黄片美女视频| 国产精品九九99| 99久久精品国产亚洲精品| 窝窝影院91人妻| 亚洲全国av大片| 听说在线观看完整版免费高清| 国产成人欧美在线观看| 白带黄色成豆腐渣| 性色av乱码一区二区三区2| 国产激情欧美一区二区| 99热只有精品国产| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 亚洲成人精品中文字幕电影| aaaaa片日本免费| 国产99白浆流出| 大型av网站在线播放| 99久久99久久久精品蜜桃| 亚洲久久久国产精品| 国产成人啪精品午夜网站| 国产亚洲精品第一综合不卡| 日本一区二区免费在线视频| 久久婷婷成人综合色麻豆| av超薄肉色丝袜交足视频| 在线观看舔阴道视频| 波多野结衣高清作品| 国产成人啪精品午夜网站| 亚洲自拍偷在线| 亚洲成人久久爱视频| 在线观看免费视频日本深夜| 国产亚洲精品久久久久5区| 可以在线观看毛片的网站| 国产一卡二卡三卡精品| 久久久久精品国产欧美久久久| 91成人精品电影| 午夜精品久久久久久毛片777| 一级a爱视频在线免费观看| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 人人妻人人看人人澡| 免费高清视频大片| 两个人看的免费小视频| 久久精品国产清高在天天线| 亚洲成人久久爱视频| 亚洲国产精品合色在线| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 亚洲专区字幕在线| 欧美日本亚洲视频在线播放| 两个人视频免费观看高清| 欧美大码av| 久久精品人妻少妇| 香蕉丝袜av| 黑人欧美特级aaaaaa片| 亚洲精品一区av在线观看| 久久精品国产亚洲av高清一级| 欧美色欧美亚洲另类二区| av免费在线观看网站| 色综合站精品国产| 亚洲av电影不卡..在线观看| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 日韩免费av在线播放| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 亚洲成av人片免费观看| 精品卡一卡二卡四卡免费| av在线播放免费不卡| 久久九九热精品免费| 精品卡一卡二卡四卡免费| av欧美777| 麻豆国产av国片精品| 香蕉久久夜色| 黄色女人牲交| 18禁黄网站禁片午夜丰满| av免费在线观看网站| 两个人视频免费观看高清| 搞女人的毛片| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 可以在线观看毛片的网站| 国产主播在线观看一区二区| 最近在线观看免费完整版| 国产亚洲精品av在线| 亚洲片人在线观看| 香蕉国产在线看| 欧美乱色亚洲激情| 黄片小视频在线播放| 免费在线观看成人毛片| 免费无遮挡裸体视频| 亚洲精品粉嫩美女一区| 色av中文字幕| 12—13女人毛片做爰片一| 两个人视频免费观看高清| 精品国产乱子伦一区二区三区| 村上凉子中文字幕在线| 老鸭窝网址在线观看| 免费一级毛片在线播放高清视频| 国产成人系列免费观看| 成人手机av| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 黄色女人牲交| 天堂影院成人在线观看| 精品乱码久久久久久99久播| xxx96com| 免费电影在线观看免费观看| 国产成人av激情在线播放| 99热只有精品国产| 免费观看精品视频网站| 国产精品日韩av在线免费观看| 日日夜夜操网爽| 亚洲熟妇熟女久久| 中文字幕高清在线视频| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 久久精品国产综合久久久| 精品久久久久久久毛片微露脸| 色播在线永久视频| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 欧美国产精品va在线观看不卡| 日本a在线网址| 搞女人的毛片| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 天天一区二区日本电影三级| 国产成人精品久久二区二区91| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 国产成人精品无人区| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 亚洲精品久久国产高清桃花| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 后天国语完整版免费观看| 亚洲精品国产区一区二| 可以在线观看的亚洲视频| 好男人电影高清在线观看| 午夜老司机福利片| 免费看a级黄色片| 成人国语在线视频| avwww免费| 成人18禁在线播放| 男女床上黄色一级片免费看| 免费一级毛片在线播放高清视频| 成在线人永久免费视频| 757午夜福利合集在线观看| 免费人成视频x8x8入口观看| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| a在线观看视频网站| 男人舔女人的私密视频| 1024视频免费在线观看| 18美女黄网站色大片免费观看| a级毛片在线看网站| 757午夜福利合集在线观看| 国产精品av久久久久免费| 看免费av毛片| 国产精品免费一区二区三区在线| 国产区一区二久久| 久久久久亚洲av毛片大全| 成年人黄色毛片网站| 国产精品国产高清国产av| 叶爱在线成人免费视频播放| 黄片播放在线免费| 两个人免费观看高清视频| 99久久综合精品五月天人人| 国产野战对白在线观看| 国产国语露脸激情在线看| 国产爱豆传媒在线观看 | av视频在线观看入口| www日本黄色视频网| 99在线视频只有这里精品首页| 动漫黄色视频在线观看| 色精品久久人妻99蜜桃| 手机成人av网站| 亚洲人成77777在线视频| 成人欧美大片| 在线免费观看的www视频| 亚洲国产中文字幕在线视频| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 久久性视频一级片| 国产视频一区二区在线看| 亚洲av第一区精品v没综合| 人人妻人人看人人澡| 亚洲熟妇熟女久久| 日本在线视频免费播放| 美女免费视频网站| 桃色一区二区三区在线观看| 波多野结衣高清无吗| 可以在线观看的亚洲视频| 999精品在线视频| 午夜精品在线福利| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 精品久久久久久,| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 999久久久精品免费观看国产| a级毛片在线看网站| 757午夜福利合集在线观看| 亚洲性夜色夜夜综合| 久久 成人 亚洲| 亚洲成人国产一区在线观看| 两个人看的免费小视频| 午夜福利免费观看在线| 99国产精品一区二区三区| 最近最新免费中文字幕在线| 亚洲成人久久性| 午夜激情福利司机影院| 国产在线观看jvid| 最新美女视频免费是黄的| 国产一区二区在线av高清观看| 久久久久久久久中文| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 亚洲三区欧美一区| 很黄的视频免费| 美女午夜性视频免费| 精品久久久久久久久久久久久 | 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 午夜免费观看网址| 看黄色毛片网站| 国产成人精品无人区| 日韩中文字幕欧美一区二区| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 精品久久久久久久久久久久久 | 亚洲天堂国产精品一区在线| 国产精品日韩av在线免费观看| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 一边摸一边抽搐一进一小说| 亚洲专区中文字幕在线| 色av中文字幕| 十八禁网站免费在线| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 亚洲国产欧美一区二区综合| 欧美一区二区精品小视频在线| 性欧美人与动物交配| 一进一出好大好爽视频| 麻豆一二三区av精品| 日韩欧美免费精品| 午夜两性在线视频| 精品无人区乱码1区二区| 丁香欧美五月| 国产成人av激情在线播放| 俄罗斯特黄特色一大片| 在线观看免费视频日本深夜| 午夜激情福利司机影院| 日本 av在线| 亚洲 欧美一区二区三区| 性色av乱码一区二区三区2| 午夜两性在线视频| av片东京热男人的天堂| 亚洲激情在线av| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 狠狠狠狠99中文字幕| 欧美三级亚洲精品| 国产视频内射| 亚洲成人国产一区在线观看| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 12—13女人毛片做爰片一| 亚洲成国产人片在线观看| 宅男免费午夜| 99久久99久久久精品蜜桃| a级毛片在线看网站| 日本免费一区二区三区高清不卡| 欧美一级毛片孕妇| 天堂√8在线中文| 国产精品乱码一区二三区的特点| 午夜免费激情av| 韩国精品一区二区三区| 国产成人啪精品午夜网站| 欧美激情极品国产一区二区三区| 亚洲一区中文字幕在线| 欧美日韩福利视频一区二区| 男女下面进入的视频免费午夜 | 亚洲成人国产一区在线观看| 中文资源天堂在线| 丝袜人妻中文字幕| 国产三级在线视频| 欧美久久黑人一区二区| 国产亚洲精品久久久久5区| 精品国产亚洲在线| 国产97色在线日韩免费| 亚洲激情在线av| 在线观看舔阴道视频| 国产成人影院久久av| 最好的美女福利视频网| xxx96com| 亚洲七黄色美女视频| 丝袜在线中文字幕| 久久久久国产一级毛片高清牌| 十八禁网站免费在线| www日本在线高清视频| 久9热在线精品视频| 国产又色又爽无遮挡免费看| 免费一级毛片在线播放高清视频| 国产精品 国内视频| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 久久伊人香网站| 亚洲av电影在线进入| 国产亚洲av高清不卡| 亚洲成a人片在线一区二区| 欧美激情 高清一区二区三区| 欧美乱色亚洲激情| 99在线视频只有这里精品首页| 午夜福利欧美成人| 麻豆一二三区av精品| 欧美成人一区二区免费高清观看 | 国产精品电影一区二区三区| 精品久久久久久久毛片微露脸| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 一级片免费观看大全| 亚洲精品在线美女| 美女 人体艺术 gogo| 国产亚洲精品第一综合不卡| 99热这里只有精品一区 | 国产成人啪精品午夜网站| 丰满的人妻完整版| 脱女人内裤的视频| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 亚洲色图av天堂| 男人的好看免费观看在线视频 | 97人妻精品一区二区三区麻豆 | 亚洲精品中文字幕在线视频| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 精品久久久久久,| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 波多野结衣高清作品| 在线国产一区二区在线| 两个人视频免费观看高清| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 男人操女人黄网站| 国产男靠女视频免费网站| 校园春色视频在线观看| 在线免费观看的www视频| 亚洲av中文字字幕乱码综合 | 一本综合久久免费| 免费人成视频x8x8入口观看| 久久精品91蜜桃| 三级毛片av免费| 啦啦啦免费观看视频1| 国产又黄又爽又无遮挡在线| АⅤ资源中文在线天堂| av电影中文网址| 亚洲黑人精品在线| 成人特级黄色片久久久久久久| 久久香蕉激情| 波多野结衣av一区二区av| 欧美中文综合在线视频| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 人人妻人人看人人澡| 久久久久久久精品吃奶| 妹子高潮喷水视频| xxxwww97欧美| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 国产99久久九九免费精品| 欧美日韩乱码在线|