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    中山地區(qū)非缺失型α—地中海貧血基因在高危人群中的篩查結(jié)果分析

    2016-11-30 11:48:35陳泳珊周小玲何潔芙
    中國實用醫(yī)藥 2016年27期
    關(guān)鍵詞:初篩血常規(guī)貧血

    陳泳珊+周小玲+何潔芙

    【摘要】 目的 了解廣東省中山地區(qū)育齡女性中常見非缺失型α-地中海貧血(α-地貧)的基因突變類型及構(gòu)成比。方法 應(yīng)用反向斑點雜交(RDB)技術(shù)和高效液相色譜法(HPLC)對40000例受檢對象進行非缺失型α-地貧基因分析。結(jié)果 中山地區(qū)育齡婦女非缺失型α-地貧基因總攜帶率為0.41%(165/40000), 其中異常血紅蛋白QS(HbQS)111例, 發(fā)生率為0.28%, 構(gòu)成比為67.27%;異常血紅蛋白WS(HbWS)30例, 發(fā)生率為0.08%, 構(gòu)成比為18.18%;異常血紅蛋白CS(HbCS)24例, 發(fā)生率為0.06%, 構(gòu)成比為14.55%。結(jié)論 該研究首次闡述了廣東省中山地區(qū)育齡婦女中常見非缺失型α-地貧的分子流行病學(xué)情況, 為本地區(qū)開展地貧篩查工作, 降低非缺失型血紅蛋白H(HbH)病患兒出生率, 制定干預(yù)方案提供了重要的科學(xué)依據(jù)。

    【關(guān)鍵詞】 非缺失型α-地中海貧血;基因;篩查

    DOI:10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.27.081

    α-地貧是一組遺傳性血紅蛋白合成障礙性疾病, 其發(fā)病機制是由于α珠蛋白基因發(fā)生缺失或點突變, 使其編碼的α珠蛋白鏈缺如或不足, 從而引起嚴重的溶血性貧血[1]??煞譃槿笔停ㄖ饕淖儺愵愋停┖头侨笔蛢煞N, α珠蛋白基因大片段的缺失可導(dǎo)致缺失型α-地貧的發(fā)生, 而非缺失型α-地貧則是由于α珠蛋白基因或其調(diào)節(jié)序列發(fā)生點突變(包括核苷酸的缺失或插入以及單堿基置換)所致。α-地貧具有高度的遺傳異質(zhì)性, 其分子缺陷具有一定程度的種族特異性。關(guān)于缺失型α-地貧的研究既往的分子流行病學(xué)調(diào)查資料較多, 而對非缺失型α-地貧則報道甚少。因血紅蛋白(Hb) Barts水腫胎的致死性, HbH病是臨床上出生后最嚴重的α-地貧類型, 也分為缺失型和非缺失型兩種, 后者臨床表現(xiàn)更為嚴重[2]。據(jù)報道, 在我國廣西省有45.8%~53.3%的HbH病患者攜帶有非缺失型α-地貧基因[3]。因此在高危人群中篩查非缺失型α-地貧基因攜帶者尤為必要。本研究旨在初步了解中山地區(qū)非缺失型α-地貧的基因突變類型和構(gòu)成比, 以進一步提高α-地貧的總檢出率, 為本地區(qū)開展地貧篩查工作, 降低非缺失型HbH病患兒出生率, 制定干預(yù)方案提供重要的科學(xué)依據(jù)。報告如下。

    1 資料與方法

    1. 1 一般資料 受檢對象為2013年7月~2015年7月產(chǎn)前診斷門診接受咨詢的40000例已婚待孕或已孕婦女, 年齡20~40歲。所有受試者均知情同意。

    1. 2 方法 血常規(guī)初篩:使用EDTA抗凝管采集外周靜脈血2~4 ml, 采用五分類全自動血常規(guī)分析儀進行血細胞分析, 應(yīng)用血常規(guī)進行地貧初篩, 以平均紅細胞體積(MCV)≤82 fl 和(或)平均紅細胞血紅蛋白量(MCH)≤27 pg 為篩查陽性, 篩查陽性者則進一步行HPLC檢測。HPLC:篩查采用HPLC法測定HbA2和HbF的洗脫峰含量?;蛐丸b定:對可疑非缺失型α-地貧基因攜帶者進行常見非缺失型α-地貧基因檢測, 主要包括血常規(guī)初篩陽性而常見缺失型α-地貧基因未檢出異常者;α-地貧缺失型檢測為--SEA/αα, 但HPLC提示為HbH病者;血紅蛋白電泳異常;配偶為--SEA/αα攜帶者。采用反向斑點雜交法對3種非缺失型α-地貧基因(HbCS、HbQS、HbWS)進行檢測, 按DNA提取試劑盒( 北京天根生化科技有限公司)說明提取基因組DNA, 采用基因診斷試劑盒(深圳益生堂生物技術(shù)有限公司)進行基因檢測。診斷采用《血液病診斷與療效標準》中的地貧診斷標準[4]。

    2 結(jié)果

    40000例參加孕前孕期篩查的育齡婦女中有480例進行3種非缺失型α-地貧基因篩查, 共有165例檢出常見非缺失α-地中海貧血基因攜帶, 總攜帶率為0.41%(165/40000), 其中HbQS 111例(αQS α/αα 105例、-- SEA /αQSα 5例、-α3.7/αQSα 1例), 發(fā)生率為0.28%, 構(gòu)成比為67.27%;HbWS 30例(αWS α/αα 30例), 發(fā)生率為0.08%, 構(gòu)成比為18.18%;HbCS 24例 (αCS α/αα 22例、--SEA /αCSα2例), 發(fā)生率為0.06%, 構(gòu)成比為14.55%。

    3 討論

    地中海貧血是我國長江以南各省發(fā)病率最高的遺傳疾病之一, 尤以廣東、廣西、貴州、四川等省發(fā)病為高[5]??煞譃棣?地貧、β-地貧、αβ-地貧以及δ-地貧等類型。α-地貧是最主要的地貧類型之一。一份基于全國90萬人的流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果得出的總發(fā)病率為2.46%, 其中以廣西省最高, 發(fā)病率為14 .95%, 其次為廣東和江西省, 發(fā)病率分別為4.11%和2.6%[6]。α-地貧分為缺失型和非缺失型兩種。非缺失型α-地貧雖然不是主要的突變類型, 但其所占的比例不容忽視, 且在HbH病中有較高的基因攜帶率[3]。因此對高危人群進行非缺失型α-地貧篩查有著重要的意義。

    然而, 3種非缺失型α-地貧基因HbQS 、HbCS以及HbWS 因其不穩(wěn)定性在常規(guī)的血紅蛋白電泳分析中較難準確檢出, 大多只能通過基因分析確診, 以致無法進行大樣本人群的篩查, 本次研究對中山地區(qū)的高危人群開展此項檢查, 結(jié)果顯示, 常見的非缺失型α-地貧基因的總攜帶率為0.41%, 這與潘干華等[7]報道廣東省南海地區(qū)的總攜帶率結(jié)果類似(0.47%), 但不同的是, 該報道中僅以MCV<80 fl做為地貧篩查陽性表型指征, 對所有篩查陽性樣品同時進行18種中國人常見及少見β地貧基因型分析、常見缺失型α-地貧基因分析以及常見3種非缺失型α-地貧基因分析。而在本文研究中除了血常規(guī)初篩陽性者之外, 其他如α-地貧缺失型檢測為--SEA /αα, 但HPLC提示為HbH病者;血紅蛋白電泳異常者;配偶為--SEA/αα攜帶者也納入篩查范圍。此外, 在常見3種非缺失型α-地貧HbWS、HbQs、HbCS的攜帶率及構(gòu)成比上, 本研究與潘干華等[7]報道也不一致, 在本研究結(jié)果中, 三者的攜帶率(構(gòu)成比)依次為0.08%(18.18%)、0.28%(67.27%)、0.06%(14.55%), 而潘干華等[7]報道中三者的攜帶率(構(gòu)成比)則依次為0.19%(40.45%)、0.17%(35.39%)、0.11%(24.16%)。黃忠等[8]報道了廣西橫縣地區(qū)的非缺失型α-地貧基因的總攜帶率為2.14%, 周艷潔等[9]報道了南寧地區(qū)的非缺失型α-地貧基因的總攜帶率為2.44%, 均顯著高于本研究報道, 在構(gòu)成比上也有較大差異。這可能與不同的地理和人群, α-地貧基因突變存在差異有關(guān)[10]。

    綜上所述, 本研究首次闡述了廣東省中山地區(qū)育齡婦女中常見非缺失型α-地貧的分子流行病學(xué)情況, 為本地區(qū)開展地貧篩查工作, 降低非缺失型HbH病患兒出生率, 制定干預(yù)方案提供了重要的科學(xué)依據(jù), 同時也為雙方均為α-地貧攜帶者的夫婦提供了更加準確的遺傳咨詢和優(yōu)生指導(dǎo)。然而本研究的研究結(jié)果仍有待進一步研究證實。

    參考文獻

    [1] Douglas R Higgs, James Douglas Engel, George Stamatoyannopoulos. Thalassaemia. Lancet, 2012, 379(9813):373-383.

    [2] Liao C, Zhou JY, Xie XM, et al. Screening for Hb constant spring in the guangdong province, south china, using the sebia capillary electrophoresis system. Hemoglobin, 2011, 35(1):87.

    [3] Yin XL, Zhang Xh, Zhou TH, et al. Hemoglobin H disease in Guangxi province, Southern China: clinical review of 357 patients. Acta Haematol, 2010, 124(2):86-91.

    [4] 張之南, 沈悌. 血液病診斷及療效標準. 第3版.北京:科學(xué)出版社, 2007:29 .

    [5] 石之驎, 王沙燕, 戴勇.地中海貧血分子診斷的研究進展.中國生育健康雜志, 2003, 14(3):189-190.

    [6] 毛江洪, 霍曉春. α-地中海貧血的研究現(xiàn)狀.實用臨床醫(yī)學(xué), 2005, 6(3):134-136.

    [7] 潘干華, 申芫子, 黃勇, 等. 廣東南海地區(qū)非缺失型α地中海貧血分子流行病學(xué)調(diào)查.國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志, 2014, 35(1):56-57.

    [8] 黃忠, 張新華, 阮麗明, 等. 6000對新婚夫婦非缺失型α-地中海貧血檢測結(jié)果分析.檢驗醫(yī)學(xué)與臨床, 2011, 12(8):1409-1410.

    [9] 周艷潔, 阮麗明, 何桂瓊, 等.全自動瓊脂糖凝膠電泳檢測地中海貧血7500例結(jié)果分析.中國計劃生育學(xué)雜志, 2007, 6(3): 355-357.

    [10] 段山, 李洪義, 陳爭, 等.中國南方α-地中海貧血基因突變型研究.中國實驗血液學(xué)雜志, 2003, 11(1):54-60.

    [收稿日期:2016-08-03]

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