• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    銀杏果淀粉酶解條件研究

    2016-11-25 09:04:46楊冬梅王艷張學(xué)兵胡佳琪
    科技視界 2016年25期
    關(guān)鍵詞:酶解銀杏果淀粉

    楊冬梅 王艷 張學(xué)兵 胡佳琪

    【摘 要】為了研究銀杏果實中淀粉水解的條件,分別采用液化酶和糖化酶對銀杏果實中的淀粉進行酶解試驗,考察不同工藝條件(如溫度、時間、用量)對液化酶、糖化酶酶解銀杏淀粉效果影響。結(jié)果表明:液化酶最佳酶解工藝條件:液化溫度60℃、液化時間30min、液化酶添加量0.03%;糖化酶最佳酶解工藝條件:糖化溫度60℃、糖化時間90min、銀杏漿液糖化酶添加量0.01%,最后的酶解率可達到74%。該課題的研究為銀杏飲料的研究奠定了一定的基礎(chǔ)。

    【關(guān)鍵詞】銀杏果;淀粉;酶解

    Hydrolysis Conditions of Enzyme on Starch in Gingko

    YANG Dong-mei WANG Yan ZHANG Xue-bing HU Jia-qi

    (Wan Xiang polytechnic,Hangzhou Zhejiang 310023,China)

    【Abstract】In order to explore the conditions of enzymolysis of starch in gingko,liquifying enzyme and saccharifying enzyme were used to catalyze amylolysis respectively, and the proper temperature,time and dosage were studied.Results showed that the optimum conditions were:for liquifying enzyme,60℃,30min,0.03%;and for saccharifying enzyme,60℃,90min and 0.01%.

    【Key words】Gingko;Starch;Enzymolysis

    銀杏(Ginkgobiloba L.)系侏羅紀的孑遺植物,素有裸子植物的“活化石”之稱,為世界珍貴的藥食兼用的植物資源[1]。銀杏果,又名白果,內(nèi)含多種生物活性營養(yǎng)物質(zhì),每100g干果中含蛋白質(zhì)13.4g、脂肪3g、碳水化合物71.2g、鈣19.6mg、胡蘿卜素0.2mg、硫胺素0.44mg、尼克酸2.6mg,另外還含有少量的赤霉素和細胞分裂素等[2]。雖然銀杏果在中國的食用歷史已有1000余年歷史,但一直以來,銀杏果吃法僅限于制作成家庭菜肴,未有進行深加工開發(fā),且這種家庭做法往往不能保證將其中的微量氫氰酸破壞,偶爾會造成中毒現(xiàn)象的發(fā)生[3]。近年來,銀杏果的深加工已經(jīng)被重視起來,銀杏果酒、銀杏葉飲料、銀杏果脯等發(fā)面的研究,但是將銀杏果制作成飲料的研究并不多見。這是因為銀杏果實富含淀粉,淀粉經(jīng)加熱后大多以糊化的狀態(tài)存在,糊化的淀粉易老化而產(chǎn)生混濁或分層沉淀,而且不易過濾,制成飲料后穩(wěn)定性差。因此,如何解決銀杏果實中淀粉等大分子物質(zhì)的溶解性問題,將是關(guān)系到飲料品質(zhì)的關(guān)鍵因素。

    本試驗采用液化酶、糖化酶酶解銀杏果淀粉,使其中的淀粉含量減少,可溶解的成分增加。淀粉酶解產(chǎn)生的糊精和糖類都有良好的溶解性,還原糖在固體飲料中往往充當著分散劑的作用,對于改善產(chǎn)品的沖調(diào)性也有明顯作用,這樣銀杏果飲料的穩(wěn)定性就大大的提高了。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    銀杏果:市售,購買后放冰箱中冷藏;

    阿拉丁α-中溫淀粉酶(4645.76μ\ml)、

    阿拉丁糖化酶(99600μ\ml)、可溶性淀粉、碘、碘化鉀、磷酸氫二鈉、檸檬酸、糊精、淀粉、冰醋酸、醋酸鈉、鹽酸、氫氧化鈉、DNS試劑

    1.2 實驗儀器

    HH-S21-4-S(新苗)恒溫水浴鍋、pHS-3C數(shù)字酸度計、TGL-16G臺式離心機、TM-768打漿機、772型可見分光光度計、分析天平、電爐。

    1.3 銀杏漿液制備

    新鮮銀杏果→預(yù)煮20分鐘→去殼去皮去芯→打漿(料水比1:6)→放冰箱儲存。

    本實驗銀杏漿液打漿時,采用巴氏殺菌后的冷水打漿并盡量在48小時內(nèi)使用完。打漿后的銀杏漿液較為粘稠,顏色呈乳白色略帶淺黃色。計量方式采用稱重。

    1.4 實驗方法

    本次實驗首先采用可溶性淀粉為反應(yīng)底物,測得其酶活性為實驗提供基礎(chǔ)依據(jù)并對其用量進行粗略的預(yù)測。再以銀杏進行酶解條件研究。

    1.4.1 α-淀粉酶活力測定[5]

    α-淀粉酶能將淀粉分子鏈中的α-1,4葡萄糖苷鍵隨機切斷成長短不一的短鏈糊精、少量麥芽糖和葡萄糖,而使淀粉對碘呈藍紫色的特異性反應(yīng)逐漸消失。其顏色消失的速度與酶活力有關(guān)。故可以通過固定反應(yīng)的時間計算其酶活力。

    取2mL標準終點溶液(標準糊精溶液與標準稀碘液)于白瓷板空穴內(nèi),作為比較終點顏色的標準。取5.5%可溶性淀粉20mL和pH6.0磷酸氫二鈉一檸檬酸緩沖溶液5mL裝入大試管中,在60℃恒溫水浴中預(yù)熱4~5min.然后加入預(yù)先稀釋好的α-淀粉酶酶液0.5mL,立即記錄時間,充分搖勻,定時用吸管取出反應(yīng)液0.5mL,滴于預(yù)先充滿稀碘液(約1.5mE)的白瓷板空穴內(nèi),當穴內(nèi)顏色由藍紫色漸變?yōu)樽丶t色,與標準終點色相同時,即為反應(yīng)終點,并記錄時間。

    1.4.2 糖化酶活力測定

    糖化型淀粉酶(即淀粉-1,4-葡萄糖苷酶,簡稱糖化酶)能將淀粉從分子鏈非還原性末端開始,分解a-1,4-葡萄糖苷鍵生成葡萄糖。糖化酶的活力:用1g固體酶粉(或1ml液體酶),于40℃、pH值為4.6的條件下,1h分解可溶性淀粉產(chǎn)生1mg葡萄糖,為1個酶活力單位,以u/g(u/ml)表示[6]。故可以通過一定時間內(nèi)產(chǎn)生的葡萄糖計算其酶活力。

    吸取液體酶1.00ml移入容量瓶中,用緩沖液定容至刻度(估計酶活力在100~250u/ml范圍內(nèi)),搖勻。測定于甲、乙兩支50ml比色管中,分別加入可溶性淀粉25ml及緩沖液5ml,搖勻后,于40℃恒溫水浴中預(yù)熱5min。在甲管(樣品)中加入待測酶液2ml,立刻搖勻,在此溫度下準確反應(yīng)30min,立刻各加入氫氧化鈉溶液0.2ml,搖勻,將兩管取出迅速冷卻,定容到250ml,取1ml使用DNS法測得其葡萄糖含量。

    1.4.3 銀杏漿液酶解

    準確稱取銀杏漿液40g于小燒杯中,蒙上保鮮膜,沸水浴滅菌5分鐘,冷卻,預(yù)熱。準備已經(jīng)用緩沖液稀釋好的α-淀粉酶酶液,在恒溫水浴鍋中,預(yù)熱5分鐘后,加入小燒杯中。完成酶解后,沸水浴滅菌5分鐘,冷卻,加入稀HCl將酶液調(diào)節(jié)至4.25左右,預(yù)熱。準備已經(jīng)用緩沖液稀釋好的糖化酶酶液,在恒溫水浴鍋中,預(yù)熱5分鐘后,加入小燒杯中。完成酶解后,沸水浴滅菌5分鐘,冷卻。

    1.4.4 DNS法測定總糖和還原糖 [7]

    1)樣品中含糖量(OD值)的測定

    樣品葡萄糖的含量檢測:

    將酶解好的銀杏漿液定容的100ml,取一部分進行離心后,取上層清液10ml定容到100ml,定容至刻度,混勻,即為稀釋1000倍,用于還原糖的測定。

    樣品總糖的水解及提?。?/p>

    準確稱取15g銀杏漿液,放在小燒杯中,加入6mol/L HCl 10ml,蒸餾水15ml,在沸水浴中加熱0.5h,取出1~2滴置于白瓷板上,加1滴I-KI溶液檢查水解是否完全。如果已經(jīng)水解完全,則不呈現(xiàn)藍色。水解完成后,冷卻至室溫加入1滴酚酞指示劑,以NaOH稀溶液中和至溶液呈微紅色,并定容到100ml,過濾取濾液10ml于100ml容量瓶中,定容至刻度,混勻,即為稀釋1000倍,用于總糖測定。測定后,取樣品的光吸收值在標準曲線上查出相應(yīng)的糖量。

    2)結(jié)果處理

    按下式計算出樣品中還原糖和總糖的百分含量:

    2 結(jié)果與討論

    銀杏果。又名白果,內(nèi)含多種生物活性營養(yǎng)物質(zhì),每100g干果中含蛋白質(zhì)13.49g、脂肪3g、碳水化合物71.2g、鈣19.6mg、胡蘿卜素0.2mg、硫胺素0.44mg、尼克酸2.6mg,另外還含有少量的赤霉素和細胞分裂素等,另外含有17種氨基酸、白果醇(10-廿九烷醇)、白果酮、廿八醇、B-谷甾醇、豆甾醇、生物堿等[8]。銀杏種仁中淀粉占了種子成分干重的很大一部分,這種組分也是導(dǎo)致銀杏果飲料不穩(wěn)定的主要因素,因此,選用酶將它降解成適當相對分子質(zhì)量的物質(zhì),以提高它們的溶解性。

    2.1 α-中溫淀粉酶條件篩選

    淀粉酶分為內(nèi)切酶、外切酶、糖化酶等,本實驗選用的α一淀粉酶是一類內(nèi)切酶,它從分子內(nèi)部任意切開α-1,4葡萄糖苷鍵,生成大分子糊精和低聚糖,達到使淀粉液化的目的[10]。

    DE值表示淀粉的水解程度或糖化程度。 糖化液中還原性糖全部當作葡萄糖計算,占總糖的百分比即為DE值。因此,需要計算出銀杏果中的總糖含量。

    實驗采用酸水解[9]的方法將銀杏果中的糖類全部水解后,采用DNS法測出其中的糖含量,測得1:6的銀杏漿液中含總糖的量為2.151mg/ml。

    2.1.1 α-中溫淀粉酶用量

    雖然對于α-中溫淀粉酶的活性做了大概的預(yù)測,但是運用在銀杏淀粉上會有一些差異,因此,需要對其進行多次試驗,先從大范圍到小范圍進行篩選,最后得到最適宜的用量。實驗中為了避免銀杏漿液中本來就存在的還原糖或其他的原因會引起實驗誤差,本實驗還設(shè)計了空白實驗。實驗中的空白對照,對照組中在未加入α-中溫淀粉酶酶液。以便更好的了解各種介質(zhì)條件對于酶解的影響。

    實驗中共分為5個樣品,α-中溫淀粉酶酶液用量為0.8ml、1.0ml、1.3ml、1.6ml,酶解溫度為60℃,酶解時間為60min,糖化酶酶解溫度為60℃,用量為0.4ml,酶解時間為60min。DE值是溶液中還原糖占總糖含量的比值,當溶液中DE值增大時,表明其中的一部分不可溶解的淀粉或者糊精等酶解成了可溶解的還原糖,這樣使用DNS法就能通過檢測出的DE值,得出銀杏漿液中淀粉是否被酶解以及被酶解的程度,篩選出更為適宜的酶解條件。

    實驗證明,酶液的用量對于酶解程度有很大的影響,溶液中DE值隨著α-中溫淀粉酶使用量增大而增大,當α-中溫淀粉酶使用量達到1.3ml以后,DE值就不再增加了。說明淀粉分子能被α-中溫淀粉酶切斷的已經(jīng)全部被切斷。因此,選擇α-中溫淀粉酶酶液的使用量為1.3ml進行酶解。

    2.1.2 α-中溫淀粉酶溫度

    通過一些資料及預(yù)實驗,將溫度設(shè)計為50℃、60℃、70℃、80℃,酶液用量為1.3ml,酶解時間為60min,糖化酶酶解溫度為60℃,用量為0.4ml,酶解時間為60min。對比酶解后的DE值得到的最佳的酶解溫度。酶解時,溫度的控制采用溫度計。由于溫度相差較小時,差別不大,因此,選用10℃的間隔。

    實驗證明,溫度對于酶解的程度影響較大,當溫度過高或過低時,都會影響酶解的效果。當溫度達到70℃以上時,酶的活性大部分都被抑制,DE值只達到了46.9%,當酶解溫度為60℃時,銀杏淀粉被酶解程度最高DE值為69.1%,因此,選擇α-中溫淀粉酶酶液的酶解溫度為60℃進行酶解。

    2.1.3 α-中溫淀粉酶酶解時間

    通過預(yù)實驗預(yù)測酶解時間20min-60min左右達到最佳,故將酶解時間設(shè)計為20min、30min、40min、50min,酶液用量為1.3ml,酶解溫度為60℃,糖化酶酶解溫度為60℃,用量為0.4ml,酶解時間為60min。對比酶解后的DE值得到最佳的酶解時間。

    由表3中可知,酶解20min后溶液中的還原糖含量達到總糖含量的48%,酶解30min后溶液中的還原糖含量達到總糖含量的55.3%,相比較未加入α-中溫淀粉酶的空白試驗提高了19%。當酶解時間達到30min以上時,DE值不再增加。因此,α-中溫淀粉酶酶液酶解最佳時間設(shè)為30min。

    2.2 糖化酶條件篩選

    α-中溫淀粉酶只能將淀粉分子鏈中的α-1,4葡萄糖苷鍵隨機切斷成長短不一的短鏈糊精、少量麥芽糖和葡萄糖,單一使用α-中溫淀粉酶酶解效率較低,而糖化酶能將淀粉從分子鏈非還原性末端開始,分解a一1,4-葡萄糖苷鍵生成葡萄糖。因此,采用糖化酶配合酶解。

    2.2.1 糖化酶用量

    通過預(yù)實驗預(yù)測,糖化酶酶液酶解時用量為0.8ml、1.0ml、1.3ml、1.6ml,酶解溫度為60℃,酶解時間為60min,α-中溫淀粉酶酶解溫度為60℃,用量為1.3ml,酶解時間為30min。本實驗設(shè)計的空白實驗,對照組中在未加入糖化酶酶液。可利用空白中的值來反映酶解試驗是否有效,以及糖化酶在整個酶解過程中作出的貢獻占比。酶解時,采用稀HCl溶液將pH值調(diào)節(jié)至4.25左右,并每隔5分鐘進行搖晃,根據(jù)最后的DE值,篩選出更為適宜的酶解條件。

    由表4中可見,酶液的用量對于酶解程度有很大的影響,溶液中DE值隨著糖化酶使用量增大而增大,當糖化酶使用量達到0.8ml以后,DE值就幾乎不再增加了。0.8ml用量糖化酶酶解后銀杏漿液的DE值為67.7%,相比較α-中溫淀粉酶酶解DE值有了比較明顯的增加,1.0ml用量糖化酶酶解后銀杏漿液的DE值為67.8%,0.8ml用量的效率比較高,因此,選擇糖化酶酶液的使用量為0.8ml進行酶解。

    2.2.2 糖化酶酶解時間

    通過資料查找的預(yù)測酶解時間30-120min時左右達到最佳,故將酶解時間設(shè)計為30min、60min、90min、120min,酶液用量為0.8ml,酶解溫度為60℃,α-中溫淀粉酶酶解溫度為60℃,用量為1.3ml,酶解時間為30min。對比酶解后的DE值得到最佳的酶解時間。

    2.2.3 糖化酶酶解溫度

    通過一些資料及預(yù)實驗,將溫度設(shè)計為50℃、60℃、70℃、80℃,酶液用量為0.8ml,酶解時間為90min,α-中溫淀粉酶酶解溫度為60℃,用量為1.3ml,酶解時間為60min。對比酶解后的DE值得到的最佳的酶解溫度。酶解時,溫度的控制采用溫度計。由于溫度相差較小時,差別不大,因此,選用10℃的間隔。

    實驗證明,溫度對于酶解的程度影響較大,當溫度過高或過低時,都會影響酶解的效果。當溫度達到80℃以上時,酶的活性被抑制,DE值只達到了53.0%,當酶解溫度為60℃時,銀杏淀粉被酶解程度最高DE值為73.8%,因此,選擇糖化酶酶液的酶解溫度為60℃進行酶解。(見表6)

    表6 糖化酶的酶解溫度對銀杏淀粉酶解的影響

    Tab.6 Effect of saccharifying enzyme α-amylase enzymolysis temperature on ginkgo starch

    3 結(jié)論

    經(jīng)過α-中溫淀粉酶和糖化酶的酶解后,銀杏漿液中的可溶性物質(zhì)增加,沉淀物降低,穩(wěn)定性提高,銀杏漿液相較于未酶解時澄清,香味更濃郁。酶解DE值提高至70%以上。

    通過單因素實驗,已確定雙酶法酶解銀杏淀粉的條件。液化酶最佳的工藝條件:液化溫度60℃、液化時間30min、銀杏漿液液化酶添加量0.03%。糖化酶最佳的工藝條件:糖化溫度60℃、糖化時間90min、銀杏漿液糖化酶添加量0.01%,酶解率能達到74%(DE值)。

    【參考文獻】

    [1]宋永芳.銀杏的化學(xué)成分和用途[J].林產(chǎn)化學(xué)與工業(yè),1986(3):91-94.

    [2]梁立興.中國當代銀杏大全[M].北京:北京農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社,1993.

    [3]李先光.嬰幼兒白果中毒36 臨床例分析[J].中國中醫(yī)藥資訊,2010,2(30):71-72.

    [4]銀杏熱中的冷思考[C].中國綠色時報,2000.

    [5]姜錫瑞,段鋼.新編酶制劑實用技術(shù)手冊[M].北京:中國輕工業(yè)出版社,2002.

    [6]GB 8276-2006食品添加劑糖化酶制劑第3條第2款[S].中國人民共和國國家質(zhì)量檢驗檢疫總局,國家標準化管理委員會.

    [7]孫偉偉,曹維強,王靜.DNS法測定玉米秸稈中總糖[J].食品研究與開發(fā),2006,(6):120-123.

    [8]潘慧生,葉務(wù)志.純天然銀杏汁的研制[M].廣州食品工業(yè)科技,1997,13(1):26-28.

    [9]黃偉坤.食品檢驗與分析[M].北京:中國輕工業(yè)出版社,1989:34-36.

    [10]姜錫瑞.酶制劑應(yīng)用手冊[M].北京:中國輕工業(yè)出版社,1999:35.

    [11]敖自華,王璋,許時嬰.銀杏淀粉的分離和純化[J].食品科學(xué),2001,22(1):23-26.

    [12]敖自華,王璋,許時嬰.銀杏淀粉特性的研究[J].食品科學(xué),1999(10):35-39.

    [責任編輯:田吉捷]

    猜你喜歡
    酶解銀杏果淀粉
    街邊的銀杏果千萬別亂吃
    從人工合成淀粉說開去
    臭臭銀杏果
    孩子和銀杏的故事
    低次煙葉蛋白質(zhì)—多酚復(fù)合物的成分及抗氧化性分析
    MMT/淀粉-g-PAA的制備及其對鉻(Ⅵ)的吸附
    蕉藕淀粉與薯類淀粉特性對比研究
    響應(yīng)曲面法優(yōu)化板栗酶解工藝研究
    結(jié)腸給藥新制劑的研究進展
    海參蛋白酶解工藝初步研究
    熟女少妇亚洲综合色aaa.| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 欧美不卡视频在线免费观看 | 日本精品一区二区三区蜜桃| 久久亚洲真实| 成人影院久久| 女同久久另类99精品国产91| 免费在线观看完整版高清| 久久人妻熟女aⅴ| 老司机午夜十八禁免费视频| 国产亚洲精品一区二区www| 丝袜在线中文字幕| 美女高潮到喷水免费观看| 在线观看免费日韩欧美大片| 成人影院久久| 麻豆久久精品国产亚洲av | 亚洲中文日韩欧美视频| 波多野结衣高清无吗| 亚洲熟妇中文字幕五十中出 | 老熟妇仑乱视频hdxx| 99精品欧美一区二区三区四区| 久久久久国内视频| 国产成人av激情在线播放| 又黄又爽又免费观看的视频| 色在线成人网| 亚洲七黄色美女视频| 桃色一区二区三区在线观看| 咕卡用的链子| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 狠狠狠狠99中文字幕| 美女 人体艺术 gogo| 日日夜夜操网爽| 成人特级黄色片久久久久久久| 午夜福利一区二区在线看| 国产一区二区三区在线臀色熟女 | 国产精品98久久久久久宅男小说| 亚洲一区中文字幕在线| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 又黄又爽又免费观看的视频| 亚洲欧美激情在线| 亚洲成人精品中文字幕电影 | 国产91精品成人一区二区三区| 波多野结衣av一区二区av| 色在线成人网| 国产欧美日韩一区二区三| 久久久久久大精品| 成人国语在线视频| 色婷婷久久久亚洲欧美| 免费av毛片视频| 电影成人av| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 老司机在亚洲福利影院| 国产精品免费一区二区三区在线| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 亚洲免费av在线视频| 最新美女视频免费是黄的| 久99久视频精品免费| 精品无人区乱码1区二区| 成熟少妇高潮喷水视频| 91大片在线观看| 一级毛片女人18水好多| 午夜福利影视在线免费观看| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 超碰97精品在线观看| 亚洲成人国产一区在线观看| 99精品久久久久人妻精品| 高潮久久久久久久久久久不卡| 热re99久久精品国产66热6| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 超色免费av| 国产精品永久免费网站| 精品卡一卡二卡四卡免费| 久久午夜综合久久蜜桃| 欧美另类亚洲清纯唯美| 午夜日韩欧美国产| 午夜两性在线视频| 不卡一级毛片| 男女午夜视频在线观看| 日韩欧美三级三区| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 女人精品久久久久毛片| 精品国产乱子伦一区二区三区| 国产亚洲av高清不卡| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 国产av一区二区精品久久| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 免费在线观看黄色视频的| 国产人伦9x9x在线观看| 欧美性长视频在线观看| www.自偷自拍.com| 亚洲男人天堂网一区| 人成视频在线观看免费观看| a级毛片黄视频| 一进一出抽搐gif免费好疼 | 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 欧美人与性动交α欧美软件| 日韩欧美国产一区二区入口| 一二三四社区在线视频社区8| 最近最新免费中文字幕在线| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 极品人妻少妇av视频| 欧美另类亚洲清纯唯美| 夫妻午夜视频| 中文字幕精品免费在线观看视频| 精品福利观看| 亚洲 国产 在线| 亚洲成人精品中文字幕电影 | 亚洲免费av在线视频| 日日爽夜夜爽网站| 中文欧美无线码| 国产成人啪精品午夜网站| 国产成+人综合+亚洲专区| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 欧美黑人精品巨大| а√天堂www在线а√下载| 亚洲人成伊人成综合网2020| 中文字幕色久视频| 国产高清videossex| 国产亚洲精品综合一区在线观看 | 国产亚洲精品第一综合不卡| 国产免费av片在线观看野外av| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 一进一出抽搐动态| 级片在线观看| 搡老熟女国产l中国老女人| 国产精品98久久久久久宅男小说| 午夜a级毛片| 亚洲av熟女| 国产97色在线日韩免费| 国产1区2区3区精品| 国产精品免费视频内射| 亚洲片人在线观看| 国产亚洲精品久久久久5区| 久9热在线精品视频| 最新在线观看一区二区三区| 国产成人免费无遮挡视频| 精品一区二区三区视频在线观看免费 | a级毛片在线看网站| 欧美在线一区亚洲| 国产色视频综合| 国产区一区二久久| 91大片在线观看| 国产精品久久久久成人av| 身体一侧抽搐| 在线观看一区二区三区| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 色综合婷婷激情| 国产xxxxx性猛交| 一级片免费观看大全| 久久草成人影院| 亚洲 欧美一区二区三区| 丝袜在线中文字幕| 午夜福利欧美成人| www.999成人在线观看| 亚洲av熟女| 操美女的视频在线观看| 99久久99久久久精品蜜桃| 成人精品一区二区免费| 又黄又爽又免费观看的视频| 日韩免费av在线播放| 一进一出好大好爽视频| 久久亚洲真实| 高清av免费在线| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 成人特级黄色片久久久久久久| 国产野战对白在线观看| 91精品三级在线观看| 最近最新中文字幕大全免费视频| 国产av又大| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 亚洲色图av天堂| 亚洲熟妇中文字幕五十中出 | av中文乱码字幕在线| 一级片免费观看大全| 国产精品电影一区二区三区| 午夜a级毛片| 麻豆国产av国片精品| 精品久久久精品久久久| 久久精品影院6| 狂野欧美激情性xxxx| 女同久久另类99精品国产91| 精品免费久久久久久久清纯| 啦啦啦在线免费观看视频4| 国产成人系列免费观看| 视频区图区小说| 亚洲色图av天堂| 久久香蕉国产精品| 亚洲人成伊人成综合网2020| 国产成+人综合+亚洲专区| 丁香欧美五月| 五月开心婷婷网| 精品久久久久久电影网| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 欧美日本亚洲视频在线播放| av在线天堂中文字幕 | 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 电影成人av| 亚洲情色 制服丝袜| 12—13女人毛片做爰片一| 国产真人三级小视频在线观看| 俄罗斯特黄特色一大片| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 一级毛片精品| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 免费高清视频大片| 午夜精品在线福利| 美女国产高潮福利片在线看| 国产亚洲欧美在线一区二区| 精品无人区乱码1区二区| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 国产成人影院久久av| 精品第一国产精品| 亚洲精品中文字幕在线视频| 国产黄a三级三级三级人| 黄片大片在线免费观看| 日日爽夜夜爽网站| 久热这里只有精品99| 热99re8久久精品国产| 国产精品免费视频内射| 亚洲av第一区精品v没综合| 日韩大尺度精品在线看网址 | 亚洲人成77777在线视频| 久久久久精品国产欧美久久久| 久久人人97超碰香蕉20202| 免费搜索国产男女视频| 国产伦一二天堂av在线观看| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 自线自在国产av| 18美女黄网站色大片免费观看| 精品国产国语对白av| 午夜免费观看网址| 亚洲男人的天堂狠狠| 999久久久国产精品视频| 国产精品久久视频播放| 日韩精品中文字幕看吧| 精品国产乱码久久久久久男人| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 男女下面进入的视频免费午夜 | 精品久久久久久久毛片微露脸| 搡老乐熟女国产| 午夜影院日韩av| 男人操女人黄网站| 亚洲中文字幕日韩| 一级,二级,三级黄色视频| 韩国av一区二区三区四区| 99热只有精品国产| 欧美中文综合在线视频| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 日本一区二区免费在线视频| 久久久久久免费高清国产稀缺| 在线看a的网站| 久久 成人 亚洲| 精品国产美女av久久久久小说| 99久久精品国产亚洲精品| 中文亚洲av片在线观看爽| 中文字幕人妻丝袜制服| 在线观看舔阴道视频| 另类亚洲欧美激情| 久久久国产一区二区| 好男人电影高清在线观看| 啪啪无遮挡十八禁网站| 伦理电影免费视频| 999久久久精品免费观看国产| 亚洲熟妇中文字幕五十中出 | 午夜免费成人在线视频| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 日本wwww免费看| 久久久久久久久免费视频了| 国产xxxxx性猛交| 日韩av在线大香蕉| 欧美中文综合在线视频| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 亚洲,欧美精品.| 午夜福利免费观看在线| 亚洲欧美激情综合另类| 午夜福利影视在线免费观看| 久久久久亚洲av毛片大全| 欧美激情极品国产一区二区三区| 亚洲五月婷婷丁香| 一级毛片女人18水好多| 三上悠亚av全集在线观看| 久久中文看片网| 精品免费久久久久久久清纯| 夜夜夜夜夜久久久久| 女性被躁到高潮视频| 日韩成人在线观看一区二区三区| av福利片在线| 女性被躁到高潮视频| 精品人妻在线不人妻| 大型av网站在线播放| 色尼玛亚洲综合影院| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 久久天堂一区二区三区四区| 欧美成狂野欧美在线观看| 黄色毛片三级朝国网站| 亚洲精品在线观看二区| 18美女黄网站色大片免费观看| 搡老熟女国产l中国老女人| 精品一区二区三卡| 高清毛片免费观看视频网站 | 免费在线观看亚洲国产| 在线观看舔阴道视频| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 欧美在线黄色| x7x7x7水蜜桃| 国产高清视频在线播放一区| 欧美成狂野欧美在线观看| 欧美不卡视频在线免费观看 | 可以免费在线观看a视频的电影网站| 国产成人欧美| 国产精品成人在线| 亚洲精品成人av观看孕妇| 欧美日韩乱码在线| 亚洲午夜理论影院| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 99香蕉大伊视频| 欧美色视频一区免费| 长腿黑丝高跟| 亚洲五月婷婷丁香| 丰满迷人的少妇在线观看| 日本黄色视频三级网站网址| 免费av毛片视频| 国产极品粉嫩免费观看在线| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 国产精品 国内视频| 免费在线观看亚洲国产| 欧美日韩精品网址| 国产xxxxx性猛交| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 亚洲在线自拍视频| 在线视频色国产色| 99久久精品国产亚洲精品| 亚洲成人久久性| 亚洲人成电影观看| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 母亲3免费完整高清在线观看| 757午夜福利合集在线观看| 91av网站免费观看| 色婷婷久久久亚洲欧美| cao死你这个sao货| 国产精品98久久久久久宅男小说| 在线观看午夜福利视频| 中文亚洲av片在线观看爽| www.www免费av| 又紧又爽又黄一区二区| 亚洲五月婷婷丁香| 超碰97精品在线观看| 成人手机av| 女同久久另类99精品国产91| 大香蕉久久成人网| 不卡一级毛片| 岛国视频午夜一区免费看| 搡老乐熟女国产| 午夜免费观看网址| 淫妇啪啪啪对白视频| 男女床上黄色一级片免费看| 国产激情欧美一区二区| 露出奶头的视频| 色播在线永久视频| av在线天堂中文字幕 | 人人妻,人人澡人人爽秒播| 免费人成视频x8x8入口观看| 国产av又大| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 国产99久久九九免费精品| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 久久香蕉国产精品| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 亚洲五月色婷婷综合| 在线看a的网站| 美女国产高潮福利片在线看| 18美女黄网站色大片免费观看| 老司机在亚洲福利影院| 亚洲九九香蕉| 可以在线观看毛片的网站| 动漫黄色视频在线观看| 国产精品av久久久久免费| 在线播放国产精品三级| 男女下面进入的视频免费午夜 | 欧美国产精品va在线观看不卡| 88av欧美| 黑人猛操日本美女一级片| 自线自在国产av| 午夜福利在线观看吧| 高潮久久久久久久久久久不卡| 男女做爰动态图高潮gif福利片 | 精品熟女少妇八av免费久了| 不卡一级毛片| 91国产中文字幕| 亚洲av五月六月丁香网| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 最近最新中文字幕大全电影3 | 亚洲一码二码三码区别大吗| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 日本精品一区二区三区蜜桃| 中出人妻视频一区二区| 亚洲成人精品中文字幕电影 | 欧美日韩精品网址| 日日干狠狠操夜夜爽| 咕卡用的链子| 欧美激情极品国产一区二区三区| 两个人看的免费小视频| av在线播放免费不卡| 国产精品亚洲av一区麻豆| 亚洲全国av大片| 在线观看免费午夜福利视频| 麻豆久久精品国产亚洲av | 国产高清视频在线播放一区| 真人一进一出gif抽搐免费| 日韩中文字幕欧美一区二区| a在线观看视频网站| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 免费人成视频x8x8入口观看| 国产精品乱码一区二三区的特点 | 久久久久国内视频| 国产精品99久久99久久久不卡| 免费搜索国产男女视频| 咕卡用的链子| av有码第一页| 精品午夜福利视频在线观看一区| 新久久久久国产一级毛片| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 人人妻,人人澡人人爽秒播| av福利片在线| 91在线观看av| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 91麻豆av在线| 男人舔女人的私密视频| 日日干狠狠操夜夜爽| 不卡av一区二区三区| 国产av精品麻豆| 美女福利国产在线| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 丝袜美腿诱惑在线| 多毛熟女@视频| 97碰自拍视频| 欧美精品一区二区免费开放| 亚洲国产精品sss在线观看 | 亚洲全国av大片| 欧美日韩一级在线毛片| 亚洲少妇的诱惑av| 国产激情久久老熟女| 久久天堂一区二区三区四区| 国产1区2区3区精品| 日韩欧美免费精品| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 在线观看免费日韩欧美大片| 97碰自拍视频| 欧美一级毛片孕妇| 国产91精品成人一区二区三区| 99精品在免费线老司机午夜| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 激情在线观看视频在线高清| 国产精华一区二区三区| 日韩欧美国产一区二区入口| 一级片'在线观看视频| 午夜免费观看网址| 丝袜美足系列| 日韩av在线大香蕉| 久久婷婷成人综合色麻豆| 极品人妻少妇av视频| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 淫秽高清视频在线观看| 成年版毛片免费区| 国产欧美日韩一区二区精品| 国产三级在线视频| 天堂影院成人在线观看| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 成人手机av| av天堂在线播放| 欧美中文综合在线视频| 啦啦啦 在线观看视频| 国产熟女xx| 啪啪无遮挡十八禁网站| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 亚洲免费av在线视频| 国产高清激情床上av| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 免费高清在线观看日韩| 国产精品免费视频内射| 视频区图区小说| 成人亚洲精品av一区二区 | 国产成人精品久久二区二区免费| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 欧美日韩黄片免| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 在线观看免费视频网站a站| xxxhd国产人妻xxx| 精品国产乱码久久久久久男人| 久久国产精品影院| 99久久国产精品久久久| 一a级毛片在线观看| 亚洲情色 制服丝袜| 免费高清在线观看日韩| 少妇 在线观看| 一进一出抽搐动态| 亚洲国产看品久久| 欧美大码av| 露出奶头的视频| 国产精品一区二区精品视频观看| 女警被强在线播放| 一a级毛片在线观看| 免费观看精品视频网站| 午夜福利免费观看在线| 国产精品免费视频内射| 女警被强在线播放| 一区二区日韩欧美中文字幕| 日日爽夜夜爽网站| 精品福利永久在线观看| 免费在线观看影片大全网站| 色综合欧美亚洲国产小说| 十八禁网站免费在线| 超碰成人久久| 久久午夜亚洲精品久久| 免费少妇av软件| 日韩大尺度精品在线看网址 | 精品久久久久久成人av| av有码第一页| 九色亚洲精品在线播放| 日本wwww免费看| 另类亚洲欧美激情| 在线观看免费高清a一片| 电影成人av| 亚洲 国产 在线| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 国产精品九九99| 午夜激情av网站| 久99久视频精品免费| av欧美777| 国产1区2区3区精品| 母亲3免费完整高清在线观看| 午夜精品国产一区二区电影| 午夜久久久在线观看| 五月开心婷婷网| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 美女 人体艺术 gogo| 国产精品国产av在线观看| 在线国产一区二区在线| 一级,二级,三级黄色视频| 亚洲伊人色综图| 黄色丝袜av网址大全| www.999成人在线观看| 亚洲中文日韩欧美视频| 极品教师在线免费播放| 亚洲av片天天在线观看| 亚洲九九香蕉| 久热爱精品视频在线9| 超色免费av| 一边摸一边做爽爽视频免费| 欧美日韩视频精品一区| 午夜免费成人在线视频| 狂野欧美激情性xxxx| 天天影视国产精品| 成人国语在线视频| 99re在线观看精品视频| 黄色丝袜av网址大全| 99国产精品免费福利视频| 窝窝影院91人妻| 国产一区二区三区在线臀色熟女 | 99国产综合亚洲精品| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| avwww免费| 亚洲国产欧美网| www.www免费av| 亚洲国产精品999在线| 久久青草综合色| 人成视频在线观看免费观看| 乱人伦中国视频| 精品第一国产精品| 欧美成人性av电影在线观看| 成人国产一区最新在线观看| 最近最新中文字幕大全电影3 | 国产主播在线观看一区二区| 黑人操中国人逼视频| 高清毛片免费观看视频网站 | 99久久精品国产亚洲精品| 国产成年人精品一区二区 | 99香蕉大伊视频| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 欧美乱码精品一区二区三区| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 男人舔女人下体高潮全视频| 亚洲中文日韩欧美视频| 亚洲五月婷婷丁香| 国产又色又爽无遮挡免费看| 亚洲av成人一区二区三| 欧美成狂野欧美在线观看| 国产不卡一卡二| 精品国产国语对白av| tocl精华| 男女做爰动态图高潮gif福利片 | 看免费av毛片| 精品福利观看| 在线看a的网站| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 久久九九热精品免费| 国产av在哪里看| 大码成人一级视频| 一进一出好大好爽视频| 国产激情欧美一区二区| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 在线观看66精品国产| 一区在线观看完整版| 人人妻,人人澡人人爽秒播|