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    光學(xué)顯微鏡在高中生物實驗的應(yīng)用與常用技巧

    2016-11-24 13:49:20丁俊杰
    科學(xué)與財富 2016年15期
    關(guān)鍵詞:應(yīng)用

    丁俊杰

    摘要:生物學(xué)是自然科學(xué)六大基礎(chǔ)科學(xué)之一,具有較為突出的實驗科學(xué)特性,高中生物教材中增添了許多實驗教學(xué)內(nèi)容,其中光學(xué)顯微鏡在這些實驗中,發(fā)揮著十分重要的作用,因此了解光學(xué)顯微鏡的基本原理,使用技巧,不僅對于學(xué)生掌握實驗對象的生物組成、組織結(jié)構(gòu)具有明確的意義,同時還可以促進學(xué)生掌握光學(xué)顯微鏡相關(guān)光學(xué)知識,從而提高學(xué)生的實踐綜合能力。本文對光學(xué)顯微鏡在高中生物實驗中的應(yīng)用和常用技巧進行分析和探討。

    關(guān)鍵詞:光學(xué)顯微鏡;高中生物實驗;應(yīng)用

    0 引言

    教學(xué)儀器作為高中生物教學(xué)中的重要工具,其可以將奇妙的生物世界展現(xiàn)在學(xué)生面前,使師生共同探索生物的奧秘[1]。在信息化時代背景下,新概念和新技術(shù)在生物學(xué)研究領(lǐng)域的應(yīng)用更為廣泛,光學(xué)顯微鏡作為一種全新的教學(xué)工具,將其應(yīng)用于高中生物實驗中,可以讓學(xué)生了解顯微世界,為學(xué)生學(xué)習生物相關(guān)知識提供了極大便利。

    1 顯微鏡的分類、原理與結(jié)構(gòu)

    顯微鏡是由一個透鏡或幾個透鏡的組合構(gòu)成的一種光學(xué)儀器,,主要用于放大微小物體成為人的肉眼所能看到的儀器。顯微鏡宏觀上可以分為光學(xué)顯微鏡和電子顯微鏡兩個大類,根據(jù)不同應(yīng)用和組成可以細分成數(shù)十種,常規(guī)光學(xué)顯微鏡可以觀測到的分辨綠最小極限達0.2微米,電子顯微鏡則能看到更小的物體,分辨率的最小極限可以達到0.2納米左右,高中階段,主要采用光學(xué)顯微鏡進行生物實驗觀察。

    “結(jié)構(gòu)是功能的載體”,要想準確了解光學(xué)顯微鏡的使用方法,有效解決使用中存在的問題,需要事先了解光學(xué)顯微鏡的基本結(jié)構(gòu)和基本原理。通常光學(xué)顯微鏡的結(jié)構(gòu)包括機械系統(tǒng)和光學(xué)系統(tǒng),其中機械系統(tǒng)主要由鏡筒、遮光器、壓片夾、載物臺、細(粗)準焦螺旋、鏡臂、鏡柱、鏡座等組成;光學(xué)系統(tǒng)由反光鏡或調(diào)光燈、物鏡、目鏡等組成。圖1為光學(xué)顯微鏡結(jié)構(gòu)示意圖。其中物鏡的作用是讓被觀察物體形成方法倒立的實像,而目鏡的作用是再一次放大物鏡所成的實像,使其成為虛像。一般而言,光學(xué)顯微鏡的原理主要是:光源→反光鏡→光圈→通光孔→物鏡→物體放大實像的形成→目鏡→再一次放大實像→放大倒置虛像的形成。顯微鏡的放大倍數(shù)=目鏡放大倍數(shù)×物鏡放大倍數(shù)(放大倍數(shù)主要是指寬度與長度的放大倍數(shù))[2]。此外,光學(xué)顯微鏡在實際使用過程中,需要將其放置在實驗桌邊一寸左右,使用專用擦鏡紙揩試反光鏡,嚴禁隨意拆開顯微鏡部件或去下目鏡;高倍鏡使用完后需要上升鏡筒,移開鏡頭后應(yīng)去除標本,避免去玻片時造成鏡頭的擦損。

    2 光學(xué)顯微鏡在高中生物實驗的應(yīng)用

    2.1 應(yīng)用原則及方法

    2.1.1 應(yīng)用原則

    通常光學(xué)顯微鏡在高中生物實驗中的應(yīng)用,需要嚴格遵循以下幾項原則:①利用粗調(diào)節(jié)螺旋來尋找焦點的大致范圍,然后通過細調(diào)節(jié)螺旋對物像進行清晰調(diào)節(jié);②在轉(zhuǎn)換物鏡頭的過程中,應(yīng)先使用低倍鏡、后使用高倍鏡,這樣能夠?qū)δ繕诉M行準確定位;③調(diào)節(jié)載物臺的高度時,應(yīng)遵循從上往下的方式,以免壓碎載玻片。

    2.1.2 應(yīng)用方法

    ①安防與取鏡。左手托住鏡座,右手握住鏡臂,在稍左位置放置顯微鏡。②對光。對轉(zhuǎn)換器進行調(diào)整后,利用低倍鏡來準確尋找光孔;然后調(diào)整這遮光器,并選用大光圈來對準光孔;右眼睜開,左眼觀察目鏡,在此基礎(chǔ)上轉(zhuǎn)動反光鏡,直到目鏡中出現(xiàn)均勻白亮的視野。③低倍鏡觀察。標本放置于載物臺后,需要使其與鏡筒距離相接近,然后反向調(diào)焦,遵循“先粗后細”的原則,直到物像清晰為止。④高倍鏡觀察。將目標移動到視野的中央進行觀察,換上高倍鏡后,對細準焦螺旋進行調(diào)整,保證物像的清晰[3]。⑤觀察后處理。將顯微鏡上的污物用擦鏡紙進行清理,把物鏡轉(zhuǎn)離光軸,然后使反光鏡與載物臺呈垂直的角度,罩上鏡套后放回鏡箱。

    2.2 應(yīng)用問題及對策

    首先,視野亮度問題。亮度是否適宜是影響物像清晰度的重要因素,而視野的亮度會受諸多因素影響,并且標本的不同會導(dǎo)致亮度要求也有所不同。通常視野亮度保持為白色均勻方可。由光學(xué)顯微鏡的原理可以了解到,視野亮度主要取決于反光鏡反射的通光孔大小及光的強度,如果視野過暗,則采用較強的光線,擴大光圈(對通光孔大小進行調(diào)節(jié)),并使用凸面鏡來提高進入鏡頭的光線強度,確保視野亮度的增強;如果視野過亮,往往需要選用較弱光線,縮小光圈,使用平面鏡來降低光線強度,保證視野亮度的降低。

    例如:①標本顏色不同,則視野亮度不同。觀察的標本顏色較淡或沒有顏色時,視野太亮而對比不夠明顯,無法清晰觀察到標本的具體結(jié)構(gòu),這時可以采用較弱光線、平面鏡和小光圈來降低視野亮度,便于觀察;觀察的標本有顏色時,可使用凹面鏡和大光圈,這時視野較亮,顏色對比十分明顯,便于準確觀察標本的具體結(jié)構(gòu)。②用高倍鏡代替低倍鏡后,由于高倍鏡會放大倍數(shù),使觀察物體的實際面積減小,鏡筒進入的光線也相對較少,導(dǎo)致視野變暗;因此利用高倍鏡后需要調(diào)節(jié)光圈等,促使視野度增大。③如果光圈使用沒有以材料不同折光性為依據(jù),將會導(dǎo)致圖像結(jié)構(gòu)不夠完善,這時需要對光圈進行調(diào)節(jié),保證透明度的一致。

    其次,標本使用的條件。由于光學(xué)顯微鏡主要是通過反光鏡的反射來穿過通關(guān)孔,然后透過標本進入物鏡和目鏡,觀察放大倒立的虛像,這一過程需要使用透明的標本[4]。同時標本處于焦距位置時,才能保證物像的清晰度,因此觀察目標也需要在焦距上,保證標本和觀察目標處于同一平面,這就要求標本相對較薄??偠鴣碚f,標本使用時需具備的條件就是薄且透明。

    以《觀察植物細胞有絲分裂》為例,在制作臨時裝片的生物實驗過程中,需要先進行解離操作,分析細胞間隙,使細胞與細胞之間相互分散,然后進行制片操作,從而鋪成一層薄且透明的細胞。如《觀察植物細胞質(zhì)壁分離》中使用的洋蔥上表皮、《觀察葉綠體及細胞質(zhì)流動》中使用的黑藻葉片,這些標本都滿足薄且透明的要求。

    最后,其他問題與處理技巧。①污點位置判斷。視野中出現(xiàn)污點時可對裝片進行移動,如果污點也隨之移動,則表明污點在裝片上;如果污點沒有移動,則需移動目鏡,一旦污點隨目鏡的移動而移動,則表示污點在目鏡上;如果污點沒有移動,可以判斷污點在物鏡上,可以轉(zhuǎn)動物鏡來加以證明。②移片。觀察對象偏離視野中央時,需要將其移至視野中央;同時標本在顯微鏡中顯示的物像呈倒立狀態(tài),因此視野中觀察的偏離方向與標本實際所在方向相反,移動時需要嚴格按照正確的方向移片[5]。如觀察對象的視野處于右上方時,實際標本往往是偏向左下方,需要將標本沿著左上方加以移動,這樣才能使觀察對象逐漸移至視野中央。③對光時視野出現(xiàn)窗欞等遮光物體,需要對鏡筒的高度進行重新調(diào)整,以免視場中出現(xiàn)這些物體的影響,降低成像清晰度。④在實驗過程中,可以通過調(diào)整反射鏡角度,側(cè)向手電筒照明等方式,讓學(xué)生體會光學(xué)顯微鏡的明場成像和暗場成像[6]的差異性,從而進一步提高學(xué)生的科學(xué)研究興趣。

    3 結(jié)束語:

    綜上所述,在高中生物實驗在使用光學(xué)顯微鏡的過程中,需要了解顯微鏡的基本構(gòu)成,在掌握相關(guān)使用技巧的基礎(chǔ)上,靈活的使用,才能將光學(xué)顯微鏡在實驗中的作用得以充分發(fā)揮。光學(xué)顯微鏡的應(yīng)用,不僅能夠使學(xué)

    生在深入了解相關(guān)的生物知識,而且還能夠提高學(xué)生的生物學(xué)和物理相關(guān)知識的學(xué)習興趣,對于發(fā)展學(xué)生的觀察能力、動手能力等綜合能力具有重要的意義。

    參考文獻:

    [1]李志遠.顯微數(shù)碼互動實驗室在高中生物實驗教學(xué)中的優(yōu)勢與應(yīng)用[J].生物技術(shù)世界,2014,10:173.

    [2]王祥鋼.高中生物實驗分類及其特點[J].現(xiàn)代教育,2012,01:73-74.

    [3]嚴家來,孟德娣,張建軍,陳雨京,朱先梅,張發(fā)蘇.實驗教學(xué)中生物光學(xué)顯微鏡的常見問題及解決辦法[J].衛(wèi)生職業(yè)教育,2015,21:85-86.

    [4]張永紅.生物實驗教學(xué)中學(xué)生實驗?zāi)芰Φ呐囵B(yǎng)[J].濰坊學(xué)院學(xué)報,2013,06:93+117.

    [5]李元.對高中生物教材中微生物的研究[J].生物技術(shù)世界,2016,02:234.

    [6]百科ROBOT.暗場像.百度百科,2015.5.14.

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