梅毒血清學檢測方法的選擇

李秀姿+梁服泉+呂慶良+廖衍強

[摘要]目的研究并探討不同梅毒血清檢測方法在產(chǎn)前梅毒常規(guī)篩查中的應用效果。方法于2014年1月～2015年6月，選取在我院進行產(chǎn)前梅毒常規(guī)篩查的500例孕婦進行研究，分別采用梅毒螺旋體明膠凝集試驗（TPPA法）、免疫膠體金法、甲苯胺紅不加熱血清反應素試驗（TRUST法）對梅毒進行檢測，對比TPPA法、免疫膠體金法、TRUST法、三種方法聯(lián)合檢測的敏感度、特異度、準確性、陽性預測值以及陰性預測值。結果500例進行產(chǎn)前梅毒常規(guī)篩查的孕婦中，有448例孕婦被確診為梅毒陽性，52例孕婦為陰性。三種梅毒血清學檢測方法的敏感度、特異度、準確性、陽性預測值以及陰性預測值均不存在統(tǒng)計學差異（P>0.05），但三種檢測方法聯(lián)合檢測的敏感度、特異度、準確性、陽性預測值以及陰性預測值均明顯高于單一的檢測方法（P<0.05）。結論在產(chǎn)前梅毒篩查中，TPPA法、TRUST法以及膠體金法具有其各自的優(yōu)勢，三種方法進行聯(lián)合檢測可提高梅毒檢出率，產(chǎn)前梅毒篩查時可進行聯(lián)合檢測。

[關鍵詞]產(chǎn)前篩查；梅毒；血清學檢測；診斷

梅毒是一種傳染性較強的人類性傳播疾病，其病原體主要為梅毒螺旋體，傳染性較強，危害性較為嚴重。梅毒通?？煞譃橄忍煨悦范竞瞳@得性梅毒，其中先天性梅毒主要傳播方式為母嬰傳播，母體攜帶的梅毒螺旋體通過胎盤組織傳染給宮內(nèi)胎兒，可能會導致胎兒早產(chǎn)、流產(chǎn)等妊娠不利結局。因此，有必要在產(chǎn)前對孕婦進行梅毒篩查，以便于及時采取相應的干預措施，以減少梅毒的傳播，改善妊娠結局。本次研究為了探討不同梅毒血清檢測方法在產(chǎn)前梅毒常規(guī)篩查中的應用效果，特于2014年1月～2015年6月選取500例進行梅毒篩查的孕婦進行研究，分別采取梅毒螺旋體明膠凝集試驗（TPPA法）、免疫膠體金法、甲苯胺紅不加熱血清反應素試驗（TRUST法）進行檢測?，F(xiàn)將研究結果分析如下。

1資料與方法

1.1一般資料

于2014年1月～2015年6月，選取在我院進行產(chǎn)前梅毒常規(guī)篩查的500例孕婦進行研究，所有孕婦均進行產(chǎn)前梅毒常規(guī)篩查，孕婦的年齡分布于20～37歲之間，平均為（29.67±6.34）歲，孕周為12～32周，平均孕周為（21.94±9.57）周，其中有427例初產(chǎn)婦、73例經(jīng)產(chǎn)婦。在進行研究前，孕婦及其家屬均對研究方法和目的進行了詳細的了解，并簽署知情同意書。此次研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會許可通過。

1.2研究方法

分別采用梅毒螺旋體明膠凝集試驗（TPPA法）、免疫膠體金法、甲苯胺紅不加熱血清反應素試驗（TRUST法）對孕婦進行梅毒血清學檢測，每例孕婦均于清晨空腹狀態(tài)時采集5mL的靜脈血液，以3000r/min的速度進行離心處理，取血清進行檢測。具體檢測方法如下：（1）TPPA法：使用微量滴管將血清稀釋液依次滴入微量反應板的第1～4孔中，每孔均滴入25μL血清稀釋液，使用移液管將25μL血清稀釋液轉(zhuǎn)移到微量反應板的第1孔中，再以2倍遞增的量依次轉(zhuǎn)移到第4孔，未致敏粒子滴入至第3孔中，將致敏粒子滴入至第4孔中，并使用平板振蕩器進行30s的振蕩，使其混合，加蓋，放置于室溫中，2h后觀察并記錄結果。當粒子環(huán)增大且外周邊緣不規(guī)則，或有均勻的凝集形成且呈膜狀延伸，表示檢測結果為陽性。（2）免疫膠體金法：將血清和膠體金試紙放置于室溫中，將試紙帶有箭頭的一端放置入血清容器中，待10s后，將其平放，15min后觀察并記錄結果。當試紙的檢測線和對照線位置均出現(xiàn)1條反應線時，表示檢測結果為陽性。（3）TRUST法：在室溫環(huán)境中，取0.05mL血清，置入試驗卡圈中，均勻涂抹，滴入1滴TRUST試劑液，以每分鐘100r的速度輕輕搖晃，8min后觀察并記錄結果。當試驗卡圈中出現(xiàn)粉紅色的凝集物質(zhì)時，表示檢測結果為陽性。

1.3觀察指標

對比三種單一的梅毒血清學檢測方法、三種方法聯(lián)合檢測的敏感度、特異度、準確性、陽性預測值以及陰性預測值。

以暗視野顯微鏡檢查和VDRL非梅毒螺旋體抗原試驗作為診斷金標準，顯微鏡下可見梅毒螺旋體，且非梅毒螺旋體抗原試驗結果為陰性，即確診為梅毒。敏感度=真陽性/（真陽性+假陰性）；特異度=真陰性/（真陰性+假陽性）；準確性=（真陽性+真陰性）/總例數(shù)；陽性預測值=真陽性/（真陽性+假陽性）；陰性預測值=真陰性/（真陰性+假陰性）。

1.4統(tǒng)計學方法

在SPSS17.0軟件中錄入數(shù)據(jù)，并進行處理。計數(shù)資料表示為[n（%）]，進行x²檢驗。三組之間的敏感度、特異度等數(shù)據(jù)采用2×3卡方表格檢驗，三組與三組聯(lián)合檢測之間的數(shù)據(jù)采用2×4卡方表格檢驗。當P<0.05時，表示數(shù)據(jù)間差異具有統(tǒng)計學意義。

2結果

500例進行產(chǎn)前梅毒常規(guī)篩查的孕婦中，有448例孕婦被確診為梅毒陽性，52例孕婦為陰性。三種梅毒血清學檢測方法的敏感度、特異度、準確性、陽性預測值以及陰性預測值均不存在顯著差異（x²=0.674、0.400、0.254、0.104、0.085，P=0.714、0.819、0.881、0.949、0.959），但三種檢測方法聯(lián)合檢測的敏感度、特異度、準確性、陽性預測值以及陰性預測值均明顯高于單一的檢測方法（x²=35.953、14.484、50.323、26.975、50.381，P=0.000、0.002、0.000、0.000、0.000）。見表1～2。

3討論

梅毒是一種由梅毒螺旋體入侵機體引發(fā)的感染性疾病，是一種較為常見的性傳播疾病，其臨床表現(xiàn)以生殖器官潰瘍?yōu)橹?。一般情況下，梅毒可分為先天性梅毒和獲得性梅毒，獲得性梅毒是指通過性行為傳播的梅毒，先天性梅毒是指妊娠期孕婦體內(nèi)的梅毒經(jīng)胎盤組織進入宮內(nèi)胎兒體內(nèi)引發(fā)的梅毒。近年來，隨著生活方式和觀念的轉(zhuǎn)變，梅毒的發(fā)病率逐漸增高，通常表現(xiàn)為潛伏性的梅毒，如孕婦攜帶有梅毒螺旋體，很可能會傳染給其宮內(nèi)胎兒，導致胎兒宮內(nèi)死亡、胎兒畸形等妊娠不利結局的發(fā)生。因此，有必要對妊娠期孕婦進行產(chǎn)前梅毒篩查，以盡早發(fā)現(xiàn)孕婦的梅毒攜帶情況，并采取相應的干預措施，能夠有效具有十分重要的意義。

目前，臨床上檢測梅毒螺旋體的方法主要有梅毒螺旋體明膠凝集試驗（TPPA法）、免疫膠體金法、甲苯胺紅不加熱血清反應素試驗（TRUST法），其中TPPA法主要是通過對梅毒病原體進行分包處理，采用致敏粒子和未致敏粒子進行對比，觀察其凝集反應，以檢測梅毒螺旋體，這種檢測方法相對較為簡單，檢測所需時間較少，可在2h內(nèi)對結果進行判斷，通常被應用于大規(guī)模的梅毒篩查；膠體金法主要是通過試紙在血清中放置后的反應線出現(xiàn)數(shù)目進行判斷，操作相對簡單，檢測較為快速，但容易受到其他因素的干擾，容易出現(xiàn)漏診；TRUST法主要是通過特制的TRUST試劑液對血清中的反應素進行檢測，操作簡單，但容易受到機體其它免疫性病變的影響，容易出現(xiàn)假陽性情況。

本次研究分別采用TPPA法、免疫膠體金法、TRUST法對500例孕婦的梅毒螺旋體進行檢測，檢測結果顯示，這三種檢測方法的敏感度、特異度、準確性、陽性預測值以及陰性預測值方面均不存在明顯差異，再對三種方法聯(lián)合檢測的檢出情況進行觀察后發(fā)現(xiàn)，聯(lián)合檢測的檢出準確性較之單一檢測明顯更高（P<0.05），提示我們在梅毒篩查時盡量進行聯(lián)合檢測。

綜上所述，在產(chǎn)前梅毒篩查中，TPPA法、TRUST法以及膠體金法具有其各自的優(yōu)勢，三種方法進行聯(lián)合檢測可提高梅毒檢出率，產(chǎn)前梅毒篩查時可進行聯(lián)合檢測。