武當玉蘭與望春花嫁接辛夷的抗炎鎮(zhèn)痛作用試驗

馬羚+周兵冰+馬逾英+蔣運斌

[摘要]目的探討武當玉蘭（砧木）+望春花（接穗）嫁接辛夷的抗炎鎮(zhèn)痛藥理活性。方法觀察嫁接辛夷與武當玉蘭（砧木）、望春花（接穗）對二甲苯致小鼠耳廓腫脹及醋酸致小鼠扭體的影響。結果（1）抗炎試驗：望春花具有明顯的抗炎作用，武當玉蘭+望春花嫁接品種顯示出了一定的抗炎趨勢，而武當玉蘭則未表現(xiàn)出抗炎作用。（2）鎮(zhèn)痛試驗：三種辛夷均顯示出鎮(zhèn)痛作用，其鎮(zhèn)痛作用的強度依次為望春花>嫁接品種>武當玉蘭。結論武當玉蘭（砧木）+望春花（接穗）辛夷顯示了一定的抗炎鎮(zhèn)痛效果，其作用強度優(yōu)于武當玉蘭，為其臨床應用及川辛夷基地品質(zhì)改良提供實驗依據(jù)。

[關鍵詞]武當玉蘭；望春花；嫁接；抗炎；鎮(zhèn)痛

辛夷（magnoliae flos）是一種常用中藥，具散風寒、通鼻竅等功效。用于風寒頭痛、鼻塞、鼻淵、鼻流濁等癥，為治療鼻疾之要藥。辛夷除供藥用外，尚出口作為高級香料的生產(chǎn)原料。市場需求量大?！吨袊幍洹?015版記載辛夷的來源為木蘭科植物望春花Magnolia biondii Pamp、玉蘭M、denudate Desr.、武當玉蘭M.sprengeri Pamp.的干燥花蕾。四川北川縣的川辛夷基地，為品種改良以武當玉蘭為砧木，嫁接望春花的枝條，栽培出了嫁接品種。其嫁接品種能否等同辛夷入藥亟待研究。根據(jù)現(xiàn)有報道本實驗選取鎮(zhèn)痛、抗炎藥理作用著重探討嫁接品種、望春花、武當玉蘭的藥理作用強弱程度及差異，為嫁接品種的臨床應用提供實驗依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料來源

藥材樣品來源見表1，并均經(jīng)成都中醫(yī)藥大學馬逾英教授鑒定。

1.2藥物制備

照《中國藥典》2015年版一部揮發(fā)油測定法甲法（附錄XD）提取揮發(fā)油。分別稱取三種辛夷藥材各75g，加10倍量的蒸餾水浸泡1h，加熱至沸，并保持微沸1.5h，停止加熱，放置片刻，收集揮發(fā)油；另濾過收集水提液，藥渣再加8倍量水，煎煮兩次，每次30min，合并3次水煎液，減壓濃縮至300mL，即得水提液。見表2。

分別于水提液中加入揮發(fā)油，以相當于揮發(fā)油體積40%的吐溫80助溶，混勻，備用。（樣品液每1mL含0.25g原生藥材）。

1.3陽性藥物

貝諾酯片（撲炎痛，地奧集團成都藥業(yè)股份有限公司，060215）。二甲苯（分析純，成都科龍化工試劑廠）、醋酸（分析純，成都科龍化工試劑廠）。

1.4動物

昆明種小鼠，全雄，160只，川實動管第11號。

1.5二甲苯致小鼠耳廓腫脹實驗

取健康雄性小鼠80只，按照體重隨機分為8組，分別為空白對照組，陽性藥對照組，嫁接品種高、低劑量組（5g/kg、2.5g/kg），武當玉蘭高、低劑量組（5g/kg、2.5g/kg），望春花高、低劑量組（5g/kg、2.5g/kg）；每組動物按0.2mL/10g體重連續(xù)灌胃給藥5d，空白對照組給予等體積蒸餾水，每日一次，末次給藥前禁食18h，末次給藥30min后，將20μL二甲苯涂于小鼠左耳廓兩面致炎，右耳不涂為對照，致炎4h后脫頸處死小鼠，用直徑12mm的打孔器取下左右耳片精密稱量，右耳與左耳質(zhì)量之差即為腫脹度。計算腫脹抑制百分率。計算公式：

1.6醋酸扭體法試驗

取健康雄性小鼠80只，按體重隨機分為8組，組別同上。每組動物按0.2mL/10g體重連續(xù)灌胃給藥7d，空白對照組給予等體積蒸餾水，每日一次，末次給藥前禁食18h，末次給藥30min后，每只鼠腹腔注射0.6%醋酸溶液0.2mL，記錄隨后30min內(nèi)小鼠扭體次數(shù)，計算各藥抑制率。計算公式：

1.7統(tǒng)計學處理

采用統(tǒng)計軟件SPSS16.0，各組數(shù)據(jù)均以（x±s）表示，進行方差齊性檢驗，方差齊性用單因素方差分析中的LSD法進行組間比較；方差不齊性用單因素方差分析中的Tamhane'sT2法進行組間比較。P<0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2結果

2.1對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響

望春花高低劑量組對二甲苯引起的小鼠耳廓腫脹均有顯著的抑制作用（P<0.05），高劑量組的活性最強抑制率為25%；武當玉蘭+望春花辛夷組與空白組比較無顯著性差異，但顯示出了一定的抑制趨勢抑制率為15%。從組間比較看，武當玉蘭與望春花比較有顯著性差異（P<0.05），表明武當玉蘭未顯示出抗炎藥理作用，見表3。

2.2對醋酸所致小鼠疼痛的影響

望春花的高劑量組、嫁接品種高、低劑量組、武當玉蘭高劑量組均能夠減少醋酸所致小鼠扭體次數(shù)，與空白對照組比較差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。以望春花的高劑量組為最高抑制率為52%。其次是嫁接品種的抑制率為45%。其作用強度依次為望春花>嫁接品種>武當玉蘭，見表4。

3討論

本實驗結果顯示，在抗炎試驗中，與空白對照組比較，僅望春花對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的抑制作用有統(tǒng)計學意義（P<0.05），組間比較看，望春花與武當玉蘭低劑量組有顯著性差異（P<0.05）。鎮(zhèn)痛試驗中，與空白對照組比較，除武當玉蘭低劑量組、望春花低劑量組對醋酸致小鼠疼痛的影響無統(tǒng)計學意義外，其余各組有顯著的鎮(zhèn)痛作用（P<0.05）。望春花的抗炎作用有統(tǒng)計學意義，嫁接品種有抗炎趨勢，而武當玉蘭幾無抗炎作用，可能與揮發(fā)油的含量有關；在鎮(zhèn)痛試驗中，三種辛夷都有鎮(zhèn)痛的藥理作用，以望春花和武當玉蘭+望春花辛夷為好，其次是武當玉蘭。

辛夷不僅是大宗常用中藥，也具有較高的經(jīng)濟價值，現(xiàn)在改進栽培技術提高產(chǎn)量的報道較多，但品質(zhì)評價鮮見報道。四川省北川縣是辛夷的種植基地，其主流品種是武當玉蘭，為品種改良嘗試，培育了嫁接品種。本文根據(jù)其功效及現(xiàn)有文獻報道，注重探討了武當玉蘭、望春花、嫁接辛夷三者的藥效差異。武當玉蘭+望春花辛夷其揮發(fā)油含量較武當玉蘭高了2倍。顯示了明顯的鎮(zhèn)痛作用，也表現(xiàn)出了抗炎藥理作用趨勢，且作用強度均優(yōu)于武當玉蘭，本試驗為其臨床應用提供依據(jù)，為川辛夷基地的品種改良提供參考。