淋巴細胞主動免疫聯(lián)合丙種球蛋白治療復發(fā)性流產(chǎn)效果探討*

施武媚，張蓉蓉，吳剣蘭（九江市第一人民醫(yī)院，江西332000）

·臨床研究·

淋巴細胞主動免疫聯(lián)合丙種球蛋白治療復發(fā)性流產(chǎn)效果探討*

施武媚，張蓉蓉，吳剣蘭（九江市第一人民醫(yī)院，江西332000）

目的探討淋巴細胞主動免疫聯(lián)合丙種球蛋白治療復發(fā)性流產(chǎn)的效果。方法按照隨機雙盲對照原則將2013年6月至2014年1月收治的60例復發(fā)性流產(chǎn)患者分為試驗組和對照組，每組30例。對照組患者給予單純淋巴細胞主動免疫治療，試驗組患者在此基礎上給予丙種球蛋白治療，比較兩組患者治療前后CD3+、CD4+、自然殺傷（NK）細胞、白介素10（IL-10）水平變化，以及隨訪20個月妊娠和流產(chǎn)情況。結果試驗組患者治療后CD3+、IL-10水平［（69.92±7.43）%、（1.74±0.33）pg/mL］明顯高于對照組 ［（66.71±6.29）%、（1.35±0.31）pg/mL］，CD4+、NK細胞水平 ［（41.41±2.26）%、（10.38±5.62）%］明顯低于對照組［（46.32±2.57）%、（17.46±6.65）%］，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；兩組患者治療后上述指標分別與同組治療前比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。試驗組患者妊娠成功率［90.00%（27/30）］明顯高于對照組［66.67%（20/30）］，流產(chǎn)率［10.00%（3/30）］低于對照組［33.33%（10/30）］，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。結論淋巴細胞主動免疫聯(lián)合丙種球蛋白能夠有效改善患者的免疫功能指標，提高妊娠成功率，可作為復發(fā)性流產(chǎn)的優(yōu)選治療方案。

流產(chǎn)，習慣性；免疫，主動；淋巴細胞；丙種球蛋白類；抗體，封閉

復發(fā)性流產(chǎn)指產(chǎn)婦連續(xù)出現(xiàn)2次及以上自然流產(chǎn)的情況，臨床發(fā)生率較高。臨床研究表明，復發(fā)性流產(chǎn)受免疫、內(nèi)分泌、感染、遺傳等多種因素影響，多數(shù)患者并無明確原因，臨床治療較為棘手［1］。免疫治療是目前治療復發(fā)性流產(chǎn)的主要方法，其中最常用的是淋巴細胞主動免疫治療及大劑量免疫球蛋白被動免疫治療［2］。單一手段治療已在臨床上廣泛開展，但療效不一，淋巴細胞主動免疫聯(lián)合丙種球蛋白治療報道較少。本研究擬深入分析淋巴細胞主動免疫聯(lián)合丙種球蛋白治療的臨床效果和優(yōu)勢，以期為復發(fā)性流產(chǎn)的臨床治療提供新的思路和依據(jù)，現(xiàn)將結果報道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料選取2013年6月至2014年1月本院收治的60例復發(fā)性流產(chǎn)患者作為研究對象。納入標準：符合《婦產(chǎn)科學（第8版）》［3］中復發(fā)性流產(chǎn)相關診斷標準；有連續(xù)2次及以上反復流產(chǎn)史，并結合病理診斷確診；以往未進行過主動免疫治療，內(nèi)分泌及免疫功能正常，染色體正常；夫妻雙方均能充分理解治療并自愿接受。排除標準：合并器質(zhì)性疾病，感染，家族病史，丈夫精液檢查結果異常者。按照隨機雙盲對照原則，將60例患者分為試驗組和對照組，每組30例。試驗組患者年齡22～33歲，平均（29.27±3.26）歲；流產(chǎn)2～5次，平均（3.02±1.17）次；流產(chǎn)時孕周4～13周，平均（7.97±1.22）周。對照組患者年齡22～34歲，平均（29.35±3.22）歲；流產(chǎn)2～ 5次，平均（3.04±1.06）次；流產(chǎn)時孕周4～13周，平均（8.06±1.24）周。兩組患者一般資料比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2方法

1.2.1治療方法

1.2.1.1對照組患者給予單純淋巴細胞主動免疫治療。在無菌條件下抽取患者丈夫或無關第三方肘靜脈血20 mL，利用淋巴細胞分離液（北京索奧生物醫(yī)藥科技有限公司，批號：20130529）分離獲得外周血單核細胞，并制備成細胞濃度約為20×108L-1的細胞懸濁液，取0.8mL于患者前臂內(nèi)側行9點皮內(nèi)注射，每3周1次，4次為1個療程。療程結束后2周復查封閉抗體，若仍為陰性則需再進行1個療程的治療；療程結束后2周復查封閉抗體結果為陽性者可考慮懷孕，懷孕后需每2周給予1次淋巴細胞主動免疫治療，連續(xù)治療6次。

1.2.1.2試驗組患者在對照組治療基礎上給予丙種球蛋白（南岳生物制藥有限公司，批號：20130602）400mg/ （kg·d）治療，靜脈滴注，連續(xù)3 d?；颊咴星懊?周進行1次治療，孕后改為每3周進行1次治療，至孕26周。

1.2.2觀察指標比較兩組患者治療前后CD3+、CD4+、自然殺傷（NK）細胞、白介素10（IL-10）水平變化，并進行連續(xù)20個月隨訪，記錄隨訪期間患者妊娠和流產(chǎn)情況，以妊娠達到或超過28周判定為成功妊娠。

1.2.3CD3+、CD4+、NK細胞、IL-10檢測抽取患者空腹靜脈血4mL，使用乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝后高速分離血清，使用FAC-SCatibur型流式細胞儀（美國BD公司）進行檢測。

1.3統(tǒng)計學處理應用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料以表示，采用t檢驗；計數(shù)資料以率或構成比表示，采用χ2檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2　結　果

2.1兩組治療前后CD3+、CD4+、NK細胞、IL-10水平比較兩組患者治療后CD3+、IL-10水平明顯升高，CD4+、NK細胞水平明顯降低，與同組治療前比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；試驗組患者治療后CD3+、IL-10水平明顯高于對照組，CD4+、NK細胞水平明顯低于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表1。

表1　兩組治療前后CD3+、CD4+、NK細胞、IL-10水平比較

2.2兩組妊娠和流產(chǎn)情況比較試驗組患者妊娠成功率明顯高于對照組，而流產(chǎn)率低于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表2。

表2　兩組妊娠和流產(chǎn)情況比較［n（%）］

3　討　論

復發(fā)性流產(chǎn)是婦產(chǎn)科發(fā)病率較高且較難處理的疾病，對患者的生殖健康有明顯影響。妊娠是一種同種半異體移植情況，胎兒擁有父親的抗原基因，因此能夠產(chǎn)生抗原，若母體將這種抗原判定為異物而產(chǎn)生排斥作用將發(fā)生流產(chǎn)［4］。正常母體中能夠產(chǎn)生封閉抗體，封閉異物抗原，從而保證妊娠的正常進行；而復發(fā)性流產(chǎn)正是因為母體缺乏封閉抗體而導致母體產(chǎn)生抗體排斥和攻擊胚胎，造成自然流產(chǎn)［5］。許多專家也認為，復發(fā)性流產(chǎn)主要因胚胎未得到母體足夠的封閉抗體和失去免疫防護而引發(fā)，即關鍵發(fā)病因素為胚胎抗原免疫低反應［6］。

近年來，免疫因素逐漸被臨床醫(yī)生所關注，有研究報道指出，免疫職能細胞亞群的格局變化，即輔助性T細胞Th1/Th2細胞因子失調(diào)、胎盤血管環(huán)境變化，可能是導致復發(fā)性流產(chǎn)的重要原因［7］。目前臨床上應用的免疫治療方案的主要作用機制為誘導母體對胚胎免疫產(chǎn)生耐受作用，從而保證胚胎在母體內(nèi)能夠正常存活。常用免疫治療方案包括淋巴細胞主動免疫治療、大劑量免疫球蛋白的被動免疫治療和維生素D3治療等。目前單用其中一種方法治療復發(fā)性流產(chǎn)在國內(nèi)一些大的生殖中心已開展，療效不一。

本研究所采用的淋巴細胞主動免疫治療主要是利用丈夫或無關第三方個體的外周血淋巴細胞誘導母體產(chǎn)生同種免疫反應，產(chǎn)生足夠量的封閉抗體并對再次受孕的胚胎提供免疫保護［8］。而丙種球蛋白治療則主要是通過補充丙種球蛋白中抵抗胚胎抗原的抗體成分改善母體封閉抗體缺乏情況，促進Th2等細胞因子產(chǎn)生，減少NK細胞毒性，從而起到保護胚胎的作用［9］。

本研究結果顯示，試驗組患者治療后CD3+、IL-10水平均明顯高于對照組，CD4+、NK細胞水平均明顯低于對照組，表明淋巴細胞主動免疫與大劑量丙種球蛋白被動免疫有明顯的協(xié)同作用，二者聯(lián)合治療方案在改善患者免疫系統(tǒng)功能方面臨床效果更加明顯。另外，本研究中試驗組患者妊娠成功率明顯高于對照組，也證實了淋巴細胞主動免疫與大劑量丙種球蛋白被動免疫聯(lián)合治療方案在保護胚胎、提高患者正常妊娠率方面有顯著臨床優(yōu)勢。

總之，淋巴細胞主動免疫聯(lián)合丙種球蛋白能夠有效改善患者免疫功能指標，提高妊娠成功率，可作為復發(fā)性流產(chǎn)的優(yōu)選治療方案。

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10.3969/j.issn.1009-5519.2016.02.028

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1009-5519（2016）02-0240-02

江西省衛(wèi)生和計劃生育委員會科研基金資助項目（20157067）。

2015-10-22）