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    免疫治療不明原因習(xí)慣性流產(chǎn)對(duì)封閉抗體表達(dá)的影響及意義

    2012-04-29 00:44:03丁莉周蕾
    中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)生 2012年2期
    關(guān)鍵詞:封閉抗體免疫治療

    丁莉 周蕾

    [摘要] 目的 探討免疫治療不明原因習(xí)慣性流產(chǎn)(URSA)對(duì)封閉抗體(BA)表達(dá)的影響及臨床意義。 方法 設(shè)110例URSA患者為治療組,選擇健康對(duì)照組90例及妊娠對(duì)照組80例,檢測(cè)和比較三組BA、IL-6、IL-10、CD4+CD25+highTreg,采用免疫治療BA陰性URSA患者。 結(jié)果 治療前治療組BA陽(yáng)性率、IL-6、IL-10、CD4+CD25+highTreg顯著低于健康對(duì)照組、妊娠對(duì)照組(P<0.05);治療后治療組BA陽(yáng)性率顯著高于治療前(P<0.01);IL-6、IL-10、CD4+CD25+highTreg與健康對(duì)照組無(wú)顯著差異(P>0.05);治療組96例BA陽(yáng)性者中94例(97.92%)成功妊娠,顯著高于BA陰性患者(P<0.01)。 結(jié)論 URSA與免疫因素有關(guān),通過(guò)免疫治療能夠有效提高URSA患者BA陽(yáng)性率及妊娠成功率。

    [關(guān)鍵詞] 不明原因習(xí)慣性流產(chǎn);封閉抗體;免疫治療

    [中圖分類(lèi)號(hào)] R714.21[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B[文章編號(hào)] 1673-9701(2012)02-0027-02

    Significance and effect of immunotherapy on blocking antibody expression in unexplained recurrent spontaneous abortion

    DING LiZHOU Lei

    Department of Obstetrics and Gynecology, People's Hospital of Beilun District in Ningbo City in Zhejiang Province, Ningbo 315806, China

    [Abstract] Objective To investigate the significance and effect of immunotherapy on blocking antibody (BA) expression in unexplained recurrent spontaneous abortion (URSA). Methods Study group (A) had 110 cases of URSA, healthy group (B) had 90 healthy women, and pregnant group (C) had 80 healthy pregnant women. The BA, IL-6, IL-10, CD4+CD25+highTreg of 3 groups were detected and compared. The cases of BA negative URSA were treated by immunotherapy. Results Before immunotherapy, the BA, IL-6, IL-10, CD4+CD25+highTreg of A group were significantly lower than B and C (P<0.05). After 3 courses, the BA of A were significantly higher than before treatment (P<0.01), IL-6, IL-10, CD4+CD25+highTreg of A group were similar to B (P>0.05), but were higher than before treatment (P<0.05). There were 96 cases of BA positive in A after treatment,94 cases (97.92%) were successful pregnancy, and the pregnancy success rate was significantly higher than the cases of BA negative (P<0.01). Conclusion URSA is related to immune factors. Immunotherapy could improve the BA positive rate and the pregnancy success rate of women with URSA.

    [Key words] Unexplained recurrent spontaneous abortion; Blocking antibody; Immunotherapy

    復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)病因復(fù)雜,其中40%~60%是不明原因習(xí)慣性流產(chǎn)(unexplained recurrent spontaneous abortion,URSA)。目前認(rèn)為URSA與免疫因素相關(guān),封閉抗體(blocking antibody,BA)是維持正常妊娠的關(guān)鍵,約80%的URSA患者存在BA缺乏[1]。本研究通過(guò)觀察URSA患者BA表達(dá)及血清學(xué)指標(biāo),并采用主動(dòng)免疫的方式進(jìn)行治療,觀察URSA患者妊娠結(jié)局,現(xiàn)報(bào)道如下。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料

    選擇2009年1月~2010年9月我院收治的URSA的患者110例為治療組,年齡24~41歲,平均年齡(31.45±5.28)歲;選擇同期體檢健康非妊娠婦女90例為健康對(duì)照組,既往均有1次妊娠史,年齡23~40歲,平均年齡(29.67±6.39)歲;選擇同期我院收治正常早孕要求人工流產(chǎn)婦女80例為妊娠對(duì)照組,孕周8~12周,年齡22~38歲,平均年齡(27.95±5.97)歲,本次妊娠無(wú)先兆流產(chǎn)征象。三組均無(wú)自然流產(chǎn)、死胎、死產(chǎn)史,排除染色體、生殖器解剖結(jié)構(gòu)、內(nèi)分泌異常,感染等,排除自身免疫性疾病,一般資料差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),具可比性。

    1.2 研究方法

    治療組及健康對(duì)照組、妊娠對(duì)照組于治療前后清晨空腹抽取肘靜脈血5mL,別用采酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定BA、IL-6、IL-10;FACSCalibur流式細(xì)胞儀檢測(cè)CD4+CD25+highTreg。BA、IL-6、IL-10試劑盒由美國(guó)Biosource公司生產(chǎn),CD4+、CD25+指標(biāo)熒光抗體由美國(guó)Becton Dickinson公司生產(chǎn)。

    1.3 治療方法

    在無(wú)菌條件下將配偶肘靜脈血30 mL提取、洗滌淋巴細(xì)胞并濃縮為(20~40)×106/mL。將1 mL配偶淋巴細(xì)胞懸液于患者手臂分6~10點(diǎn)接種,2~3周接種1次,4次為1個(gè)療程。每個(gè)療程后檢測(cè)BA,陽(yáng)性者鼓勵(lì)其于6個(gè)月內(nèi)受孕,確定受孕后維持治療至孕20周,陰性者進(jìn)行下一療程治療,3個(gè)療程后BA陰性患者指導(dǎo)受孕。

    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

    數(shù)據(jù)采用SPSS16.0軟件包進(jìn)行分析,計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn),計(jì)數(shù)資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(χ±s)表示,采用方差分析,P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 三組BA檢測(cè)結(jié)果比較

    治療前治療組BA陽(yáng)性率顯著低于健康對(duì)照組、妊娠對(duì)照組(χ2=7.865,7.213,P<0.01),兩對(duì)照組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=1.658,P>0.05);治療3個(gè)療程后,治療組BA陽(yáng)性率較治療前顯著升高(χ2=6.974,P<0.01)。見(jiàn)表1。

    2.2 三組IL-6、IL-10、CD4+CD25+highTreg檢測(cè)情況

    治療組治療前外周血IL-6、IL-10、CD4+CD25+highTreg顯著低于健康對(duì)照組(t=4.738,4.138,3.785,P<0.05)和妊娠對(duì)照組(t=4.865,4.485,4.012,P<0.01);兩對(duì)照組間有顯著差異(t=3.146,3.067,3.023,P<0.05);治療后治療組IL-6、IL-10、CD4+CD25+highTreg與健康對(duì)照組無(wú)顯著差異(t=1.325,1.267, 1.089,P>0.05),而低于妊娠對(duì)照組(t=3.246,3.107,3.086,P<0.05),高于治療前(t=4.868,4.368,4.142,P<0.01),見(jiàn)表2。

    2.3 妊娠結(jié)果情況

    3個(gè)療程后治療組96例BA為陽(yáng)性,均在6個(gè)月內(nèi)受孕,其中94例(97.92%)成功妊娠,2例發(fā)生早期流產(chǎn);14例陰性均受孕,2例(14.29%)成功妊娠,12例發(fā)生早期流產(chǎn)。兩組妊娠成功率間差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=25.894,P<0.01)。

    3 討論

    母體產(chǎn)生的BA能阻斷機(jī)體內(nèi)對(duì)胚胎的主動(dòng)免疫作用,保護(hù)胚胎免受排斥,成功存活并生長(zhǎng)發(fā)育。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)URSA患者BA陽(yáng)性率僅為20.91%,顯著低于同期健康對(duì)照組及妊娠對(duì)照組,說(shuō)明BA缺乏與URSA的發(fā)生存在相關(guān)性。針對(duì)URSA婦女BA的缺乏,通過(guò)提純濃縮后的配偶淋巴細(xì)胞,主要是T淋巴細(xì)胞,以皮下接種的方式激活患者體內(nèi)體液免疫功能,對(duì)T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體?;颊咴俅问茉泻螅贵w能識(shí)別來(lái)自配偶的抗原并與之結(jié)合產(chǎn)生封閉作用,從而起到保護(hù)胚胎的作用。本研究進(jìn)行3個(gè)療程的免疫治療后有96例患者BA為陽(yáng)性,陽(yáng)性率為87.27%,顯著高于治療前,說(shuō)明免疫治療能有效提高患者體內(nèi)BA水平。同時(shí)陽(yáng)性患者妊娠成功率達(dá)97.92%顯著高于陰性組,證明BA避免因免疫排斥反應(yīng)造成的早期胚胎的死亡及流產(chǎn);對(duì)BA陰性的URSA患者進(jìn)行主動(dòng)免疫治療可以有效的提高患者的妊娠成功率。

    研究認(rèn)為輔助T淋巴細(xì)胞Th1/Th2的調(diào)節(jié)紊亂與URSA的發(fā)生存在相關(guān)性[2]。Th1型細(xì)胞對(duì)T淋巴細(xì)胞主導(dǎo)的細(xì)胞免疫有激活的作用,Th2型細(xì)胞主要介導(dǎo)體液免疫反應(yīng),釋放IL-6、IL-10等細(xì)胞因子。BA的封閉作用屬于體液免疫反應(yīng),正常妊娠時(shí)Th1/Th2向Th2偏移,Th1處于抑制狀態(tài),體液免疫作用激活具有保護(hù)胚胎的作用。CD4+CD25+highTreg淋巴細(xì)胞對(duì)調(diào)節(jié)Th1/Th2向Th2偏移有重要作用[3],本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),URSA患者CD4+CD25+highTreg顯著低于對(duì)照組,與文獻(xiàn)報(bào)道的研究結(jié)果相似[4],說(shuō)明URSA患者體內(nèi)CD4+CD25+high Treg缺乏,提示在URSA患者受孕后CD4+CD25+highTreg對(duì)Th1/Th2的調(diào)節(jié)作用減弱,體液免疫狀態(tài)較低。結(jié)果中URSA患者IL-6、IL-10顯著低于對(duì)照組,進(jìn)一步說(shuō)明體液免疫被抑制,免疫治療后IL-6、IL-10、CD4+CD25+highTreg的水平均接近健康對(duì)照組,提示免疫治療可能通過(guò)上調(diào)體液免疫水平起到保護(hù)胚胎的作用,而CD4+CD25+highTreg上調(diào)與免疫治療之間的關(guān)系仍需進(jìn)一步研究證明。

    本研究認(rèn)為URSA的發(fā)病原因與免疫反應(yīng)調(diào)節(jié)失衡有關(guān),體液免疫的抑制導(dǎo)致細(xì)胞免疫的激活,對(duì)胚胎產(chǎn)生免疫傷害導(dǎo)致多次妊娠失敗。通過(guò)檢測(cè)BA陽(yáng)性率可以篩查免疫相關(guān)因素的URSA患者,通過(guò)免疫治療能夠有效提高BA陽(yáng)性率及妊娠成功率。

    [參考文獻(xiàn)]

    [1]丁克文,宋燕,劉娟,等. 反復(fù)自然流產(chǎn)患者經(jīng)配偶淋巴細(xì)胞免疫治療后外周封閉抗體水平變化[J]. 中國(guó)免疫學(xué)雜志,2009,25(2):157-158.

    [2]彭婀娜. 不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)主動(dòng)免疫治療前后封閉抗體的變化及其意義[J]. 實(shí)用婦產(chǎn)科雜志,2010,26(10):773-775.

    [3]夏革清,王澤華,吳超英. Th1/Th2型細(xì)胞因子在不明原因早期自然流產(chǎn)絨毛和蛻膜組織中的表達(dá)[J]. 實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志,2009,25(17):2852-2854.

    [4]高勇,宋月,安萬(wàn)新,等. 外周血Th17及CD4+CD25+FoxP3+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞失衡與不明原因反復(fù)自然流產(chǎn)的相關(guān)性研究[J]. 國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2011,32(10):1036-1038.

    (收稿日期:2011-09-29)

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