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    金盞菊葉柄組織培養(yǎng)技術(shù)初探

    2016-09-23 07:36:18張艷利
    現(xiàn)代農(nóng)業(yè) 2016年2期
    關(guān)鍵詞:升汞金盞莖段

    張艷利

    河南省滑縣職業(yè)教育中心

    金盞菊葉柄組織培養(yǎng)技術(shù)初探

    張艷利

    河南省滑縣職業(yè)教育中心

    以金盞菊生長(zhǎng)期間葉柄的莖為組培材料,結(jié)果表明:愈傷組織誘導(dǎo)最佳培養(yǎng)基為:B3MS+6-BA0.5+NAA0.1;用1‰的升汞溶液消毒時(shí)間5分鐘污染率為2%,說(shuō)明5分鐘消毒時(shí)間為污染率最佳的消毒時(shí)長(zhǎng)。

    組織培養(yǎng)金盞菊培養(yǎng)基

    金盞菊(Calendula of ficinalis L.)別名金盞花、生長(zhǎng)菊,為菊科金盞菊屬。多年生草本花卉,常作二年生花卉栽培。整個(gè)植株高度約40~60厘米,整株有被毛。葉片全緣,基生葉互生,橢圓狀或倒卵形。有葉柄,上部葉抱莖生長(zhǎng)。花單生與上部,頭狀花序,花徑大約4~12厘米,花兩性,外圍舌狀花兩輪或多輪平展,里面筒狀花多層,舌狀花是其主要的觀賞部位?;ㄉ薪瘘S色和橘黃色兩種,花期2~6月份。果實(shí)7~8份成熟,瘦果彎曲呈船形,果實(shí)成熟后呈褐色帶刺。常見(jiàn)的園藝品種有重瓣和卷瓣,目前國(guó)外還育出了單瓣、重瓣的種間雜交種,還有一些10~20厘米矮生種。金盞菊原產(chǎn)于南歐,現(xiàn)全世界各國(guó)都普遍栽培。金盞菊適應(yīng)性很強(qiáng),對(duì)土壤要求不嚴(yán),尤其是幼苗在石灰性土壤上生長(zhǎng)良好,適宜的pH值為6.5~8。喜光照,耐寒冷,忌夏季的酷暑高溫,炎熱的夏季自動(dòng)停止生長(zhǎng)。金盞菊植株矮化,花朵密集,花色鮮艷,開(kāi)花早,花期長(zhǎng),常作花壇、花境、花臺(tái)、花柱材料。也可栽培于廣場(chǎng)、公園、車(chē)站、學(xué)校等公共場(chǎng)所。金盞菊對(duì)二氧化硫、氟化物、硫化氫、氯化物等有害氣體。金盞菊已在我國(guó)大范圍種植應(yīng)用,為今后園林的綠化提供更好服務(wù)。

    一、材料與方法

    1.試驗(yàn)材料

    本研究所需的材料由河南農(nóng)業(yè)職業(yè)學(xué)院花卉實(shí)驗(yàn)室提供,取生長(zhǎng)期金盞菊的葉柄段為外植體。

    2.試驗(yàn)處理

    金盞菊的葉柄段誘導(dǎo)培養(yǎng)基為:(1)B1 MS+6-BA0.5毫克/升 (單位同下)+GA30.5;(2)B2MS+6-BA0.5+GA31;(3)B3MS+6-BA0.5+NAA0.1;(4)B4MS+6-BA1+GA30.5;(5)B7MS+6-BA1+GA31;(6)B5MS+6-BA1+NAA0.1;本實(shí)驗(yàn)共設(shè)計(jì)了6組不同配比的培養(yǎng)基類(lèi)型,每組配比試驗(yàn)重復(fù)3次。本實(shí)驗(yàn)采用固體培養(yǎng)基共1200毫升,用圓口塑料瓶進(jìn)行分裝,每瓶分別裝入25~30毫升的培養(yǎng)基,一共裝40瓶。每瓶培養(yǎng)基接種5個(gè)3~5毫米的葉柄莖段,做3次重復(fù),消毒液用1‰的升汞消毒時(shí)間為4分鐘、5分鐘分鐘、6分鐘。

    3.試驗(yàn)方法

    試驗(yàn)材料用自來(lái)水下沖洗12小時(shí),后用洗潔精再次清洗再次,最后用蒸餾水在沖洗干凈。后放在接種臺(tái)上用75%的酒精滅菌3秒左右,再用蒸餾水沖洗干凈,然后用1‰的升汞溶液滅菌4分鐘、5分鐘、6分鐘,最后用蒸餾水無(wú)菌水沖洗干凈。葉柄用消毒后的吸水紙吸干多余水分,分別放在準(zhǔn)備好的培養(yǎng)皿中進(jìn)行分切,切成2~4毫米左右的小段待用。把切好的葉柄材料接種在不同配比的培養(yǎng)基上,進(jìn)行愈傷組織的培養(yǎng)。做好觀察,篩選出金盞菊愈傷組織發(fā)育好的最佳初代培養(yǎng)基類(lèi)型。

    本實(shí)驗(yàn)采用材料的消毒時(shí)間分別為4分鐘、5分鐘、6分鐘,外植體消毒液都是用1‰的升汞消毒,接種12d后觀察金盞菊葉柄的死亡指數(shù),污染率及萌芽數(shù),以便篩選出適合的金盞菊消毒的最好時(shí)間,為以后的實(shí)驗(yàn)做準(zhǔn)備。

    二、結(jié)果與分析

    1.不同配比的培養(yǎng)基對(duì)愈傷組織的影響

    生長(zhǎng)期的金盞菊葉片的葉柄段分別接種在不同配比濃度的MS培養(yǎng)基上,在培養(yǎng)室溫為25~27℃內(nèi),光照15小時(shí)/天進(jìn)行培養(yǎng),培養(yǎng)7天開(kāi)始觀察愈傷組織,愈傷組織開(kāi)始生長(zhǎng)發(fā)黃,20天后可以明顯觀察出不同配比濃度的MS培養(yǎng)基上,愈傷組織的變化情況。B3培養(yǎng)基上的愈傷組織的情況明顯好于其它培養(yǎng)基上愈傷組織。B2和B4培養(yǎng)基上愈傷組織形成的較少,顏色嫰黃、質(zhì)脆;B1和B5培養(yǎng)基上的愈傷組織黃褐、質(zhì)軟;B6培養(yǎng)基的愈傷組織嫰黃、較硬實(shí);B3培養(yǎng)基的黃色、硬實(shí)。從表1可以明顯看出B3培養(yǎng)基最適合金盞菊葉柄愈傷組織的形成。

    2.不同消毒時(shí)間對(duì)愈傷組織的影響

    不同的消毒時(shí)間對(duì)愈傷組織的污染也不同,從表2可以看出,用1‰的升汞溶液消毒時(shí)間5分鐘污染率為2%,愈傷組織形成的也最多。金盞菊葉柄莖段為外植體為組培材料在消毒處理時(shí)間上,以5分鐘消毒最佳,(詳細(xì)數(shù)據(jù)見(jiàn)表2)。

    表2  消毒時(shí)間的不同對(duì)芽的影響

    三、結(jié)論與討論

    綜合各組設(shè)計(jì)不同配比的培養(yǎng)基實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,在生長(zhǎng)期金盞菊葉柄莖段的組織培養(yǎng)中,B3MS+ 6-BA0.5+NAA0.1為最佳愈傷組織培養(yǎng)基。以葉柄段為外植體材料用1‰的升汞溶液消毒處理結(jié)果顯示,消毒時(shí)間長(zhǎng)為5分鐘是最佳消毒時(shí)間。消毒時(shí)間長(zhǎng)4分鐘和消毒時(shí)間長(zhǎng)6分鐘的污染率都明顯高于5分鐘的。由于培養(yǎng)基配比設(shè)計(jì)有限,只能篩選出適合葉柄段愈傷組織形成的最佳培養(yǎng)基,愈傷組織養(yǎng)誘導(dǎo)生根培養(yǎng)基需進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)研究。

    [1]鄭杰,李素琴等.萬(wàn)壽菊組織培養(yǎng)體系的建立[J].北方園藝,2012(06).

    [2]馮潤(rùn)東,李春輝等.孔雀草組培繁殖技術(shù)研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2012(07).

    [3]張嘉寶,李建華等.金盞菊葉片組織培養(yǎng)再生植株[J].新鄉(xiāng)師范學(xué)院學(xué)報(bào),1984.

    [4]蘇福才,錢(qián)國(guó)珍等.萬(wàn)壽菊莖段組織培養(yǎng)[J].內(nèi)蒙古農(nóng)牧學(xué)院學(xué)報(bào),1999.

    [5]謝林,鄧郡仙等.彩葉草的組織培養(yǎng)快繁技術(shù)研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2010(20).

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