洗滌式自體血回輸中不同溫度洗滌液對(duì)人紅細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響

王勇+歐陽(yáng)孟琳

[摘要] 目的 探討自體血回輸中不同溫度洗滌液對(duì)人紅細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響。方法 選擇臨床自體血回輸者60例，根據(jù)洗滌液NS溫度的不同，分為三組[4℃、24℃（常溫）、37℃]分別記錄洗滌前后的回收血液pH值、Na+、K+、血紅蛋白（Hb）、紅細(xì)胞壓積（Hct），收集回輸血液中的紅細(xì)胞，分別在電子顯微鏡下觀察紅細(xì)胞的形態(tài)變化。結(jié)果 洗滌后三組Hb、Hct、血鈉水平均較洗滌前顯著升高（P<0.01），24℃組和37℃組Hb、Hct升高幅度并不如4℃組（P<0.05）。三組洗滌后血K+濃度較洗滌前顯著下降（P<0.01）。洗滌后三組并沒(méi)有出現(xiàn)顯著紅細(xì)胞變形，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，三組棘形紅細(xì)胞均有所增加（P<0.01），而溫度越高，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，棘形紅細(xì)胞比例越高（P<0.01）。結(jié)論 自體血回輸過(guò)程中，4℃的洗滌液對(duì)紅細(xì)胞形態(tài)的維持優(yōu)于常溫和37℃，尤其隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，優(yōu)勢(shì)更加明顯。

[關(guān)鍵詞] 不同溫度； 洗滌液； 紅細(xì)胞； 形態(tài)結(jié)構(gòu)

[中圖分類號(hào)] R457.1 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 1673-9701（2014）14-0031-03

由于外科手術(shù)用血的需求量越來(lái)越大，術(shù)中自體血液回收是解決血源緊張與防止血源性傳染病的重要途徑。如何降低自體血液回收過(guò)程對(duì)紅細(xì)胞的損傷，是研究的課題之一。目前國(guó)內(nèi)外對(duì)于自體血的研究主要集中在自體血在各種手術(shù)中的應(yīng)用以及自體血回輸對(duì)于患者電解質(zhì)凝血功能等的影響，對(duì)紅細(xì)胞的功能和保護(hù)方面研究很少，洗滌液溫度對(duì)于紅細(xì)胞的影響的研究屬于空白[1]。本研究尋求更好的回收紅細(xì)胞的方法，減少自體血回輸中對(duì)紅細(xì)胞的損傷，從而達(dá)到避免患者在緊急情況下因等待交叉配血時(shí)間而貽誤搶救時(shí)機(jī)，同時(shí)降低患者因輸入庫(kù)血所帶來(lái)的風(fēng)險(xiǎn)，也減少患者使用庫(kù)血所需要花費(fèi)的高額醫(yī)療費(fèi)用，同時(shí)為社會(huì)節(jié)約寶貴的血液資源?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選擇ASAⅠ或Ⅱ級(jí)、無(wú)高血壓、糖尿病、內(nèi)分泌疾病的擇期手術(shù)患者60例，所有患者無(wú)血液系統(tǒng)疾病，肝腎功能正常，預(yù)計(jì)術(shù)中出血量≥500mL。所有患者均采用氣管插管靜吸復(fù)合麻醉下進(jìn)行手術(shù)，吸入七氟烷維持麻醉。根據(jù)洗滌液溫度分為4℃組，24℃組（常溫）和37℃組。每組20例。

1.2研究方法

入選患者采用氣管插管靜吸復(fù)合麻醉，潮氣量為（7～8） mL/kg，頻率為（12～14）次/min，吸氣呼氣比1∶2，氧流量1.5 L/min，呼氣末EtCO2 35～45 mmHg。吸入七氟烷維持麻醉維持。血壓、心率波動(dòng)幅度<基礎(chǔ)值的30%。血液回輸機(jī)為美國(guó)cellsaver自體血回輸機(jī)，負(fù)壓設(shè)定為150 mmHg，抗凝素為肝素液，125萬(wàn)U肝素加入到500 mL生理鹽水中，配成濃度為5萬(wàn)U/L，滴入的速度與回收血液速度為1∶5。離心轉(zhuǎn)速設(shè)為5600轉(zhuǎn)/min，探測(cè)到血層后，分別采用4℃、24℃和37℃生理鹽水進(jìn)行洗滌，沖洗速度相同，為500 mL/min，洗滌液為回收血液的1.5倍。洗滌液溫度采用日立可控恒溫箱進(jìn)行控制。

1.3檢測(cè)項(xiàng)目

當(dāng)首次回收機(jī)儲(chǔ)血罐內(nèi)血液達(dá)500 mL時(shí)，抽取2 mL作為洗液前血液標(biāo)本，用于待測(cè)。血液洗滌后，抽取洗滌后血液10 mL，并保存于相對(duì)應(yīng)溫度箱內(nèi)，分別于洗滌后、洗滌后1h、洗滌后2h、洗滌后4h進(jìn)行檢測(cè)。檢測(cè)項(xiàng)目包括pH值，Na+，K+，血紅蛋白（Hb），紅細(xì)胞壓積（Hct）。取洗滌后的紅細(xì)胞血樣，在電子顯微鏡下觀察各組血液中紅細(xì)胞的形態(tài)變化，記錄1000個(gè)紅細(xì)胞中變形紅細(xì)胞的數(shù)量。血?dú)夥治霾捎胕-STAT血?dú)夥治鰞x進(jìn)行檢測(cè)。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，組間比較采用成組t檢驗(yàn)或F檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2 檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1洗滌前后血?dú)夥治鼋Y(jié)果比較

洗滌后三組Hb、Hct、血鈉水平均較洗滌前顯著升高（P<0.01），而在隨后4h內(nèi)并沒(méi)有顯著的變化，而24℃組和37℃組Hb、Hct升高幅度不如4℃組（P<0.05）。三組洗滌后血K+濃度較洗滌前顯著下降（P<0.01），隨后4h內(nèi)并沒(méi)有顯著變化。三組洗滌前后血pH值沒(méi)有顯著變化（P>0.05）。見(jiàn)表1。

2.2不同溫度洗滌液洗滌前后紅細(xì)胞形態(tài)變化

不同溫度洗滌液前后紅細(xì)胞變形百分比比較見(jiàn)表2。洗滌后三組并沒(méi)有出現(xiàn)顯著紅細(xì)胞變形，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，三組棘形紅細(xì)胞均有所增加（P<0.01），而溫度越高，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，棘形紅細(xì)胞比例越高（P<0.01）。

3討論

外科手術(shù)用血的需求量越來(lái)越大，社會(huì)用血量猛增和獻(xiàn)血量的不足矛盾越來(lái)越嚴(yán)峻，術(shù)中自體血液回收是解決血源緊張與防止血源性傳染病的重要途徑，自體血回輸?shù)纳钊胙芯亢团R床上科學(xué)的應(yīng)用，不但有利于降低患者醫(yī)療成本、降低輸血風(fēng)險(xiǎn)，還可以改進(jìn)醫(yī)療質(zhì)量、提高醫(yī)療服務(wù)的社會(huì)滿意度。紅細(xì)胞作為血液中最多的血細(xì)胞，可以反映血液的保存質(zhì)量。紅細(xì)胞具有重要的生理功能，正常紅細(xì)胞的雙凹圓盤(pán)形狀對(duì)其發(fā)揮正常生理功能具有重要的意義。正常紅細(xì)胞的形態(tài)需要細(xì)胞膜以及細(xì)胞的蛋白質(zhì)保持正常的結(jié)構(gòu)，而外界的溫度、剪切力等會(huì)影響紅細(xì)胞的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，從而會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞膜功能受損，細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)棘形變[2，3]。研究顯示，紅細(xì)胞離體后，如果保持穩(wěn)定的細(xì)胞外環(huán)境和內(nèi)環(huán)境，紅細(xì)胞能夠存活，并能維持其正常生理功能[4，5]。紅細(xì)胞可以離體存活，那么盡量延長(zhǎng)其存活時(shí)間，對(duì)維持血液保存質(zhì)量具有重要的意義。

既往有研究顯示，高溫會(huì)影響紅細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)，并且溫度越高，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，棘形紅細(xì)胞的比例越高，影響紅細(xì)胞正常的生理功能[6-8]。研究顯示，隨著溫度的增加，紅細(xì)胞會(huì)發(fā)生熱穿孔而導(dǎo)致細(xì)胞膜通透性增加，導(dǎo)致熱溶血[9，10]。當(dāng)溫度超過(guò)紅細(xì)胞能夠承受的范圍時(shí)，高溫破壞細(xì)胞膜的穩(wěn)定，導(dǎo)致細(xì)胞膜骨架組織變化。在本次研究中，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，三組均有不同數(shù)量的紅細(xì)胞發(fā)生棘形變，而4℃組棘形紅細(xì)胞數(shù)量最少，其次為24℃組，37℃組最多，說(shuō)明低溫能夠盡可能延長(zhǎng)紅細(xì)胞正常形態(tài)的維持時(shí)間。本次研究均顯示，在洗滌后，血紅蛋白和紅細(xì)胞壓積均有顯著升高，但是4℃組升高更顯著，具體機(jī)制還不十分明確，但這個(gè)現(xiàn)象說(shuō)明低溫洗滌液能夠?yàn)檠夯剌斕峁└玫募t細(xì)胞功能。紅細(xì)胞的形態(tài)受到溫度、所處環(huán)境等多種因素的影響[11，12]。本次研究中所有患者均采用生理鹽水作為洗滌液，洗滌后，血鈉濃度均顯著升高，因此，在4℃環(huán)境下，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，紅細(xì)胞仍然出現(xiàn)了不同程度的棘形變化。有研究比較枸櫞酸鈉-枸櫞酸-葡萄糖-磷酸二氫鈉-氯化鈉-腺嘌呤-甘露醇（MAP液）替代生理鹽水用于自體血回收洗滌液，并與生理鹽水比較，顯示MAP液能更好地維持紅細(xì)胞的正常形態(tài)[13]。

綜上所述，自體血回輸過(guò)程中，4℃的洗滌液對(duì)紅細(xì)胞形態(tài)的維持優(yōu)于常溫和37℃，尤其隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，這些優(yōu)勢(shì)更加明顯。另外，即使在4℃，采用生理鹽水作為洗滌液，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，仍然會(huì)出現(xiàn)棘形變，因此在臨床中，應(yīng)盡量縮短血液回輸?shù)臅r(shí)間。

[參考文獻(xiàn)]

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（收稿日期：2013-12-09）

綜上所述，自體血回輸過(guò)程中，4℃的洗滌液對(duì)紅細(xì)胞形態(tài)的維持優(yōu)于常溫和37℃，尤其隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，這些優(yōu)勢(shì)更加明顯。另外，即使在4℃，采用生理鹽水作為洗滌液，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，仍然會(huì)出現(xiàn)棘形變，因此在臨床中，應(yīng)盡量縮短血液回輸?shù)臅r(shí)間。

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（收稿日期：2013-12-09）

綜上所述，自體血回輸過(guò)程中，4℃的洗滌液對(duì)紅細(xì)胞形態(tài)的維持優(yōu)于常溫和37℃，尤其隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，這些優(yōu)勢(shì)更加明顯。另外，即使在4℃，采用生理鹽水作為洗滌液，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，仍然會(huì)出現(xiàn)棘形變，因此在臨床中，應(yīng)盡量縮短血液回輸?shù)臅r(shí)間。

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（收稿日期：2013-12-09）