異常黑膽質(zhì)成熟劑對(duì)病癥結(jié)合乳腺增生癥模型大鼠性激素受體的影響研究

米熱古麗·艾乃都, 祖拉亞提·庫(kù)爾班, 麥麗帕提·木哈巴提, 努爾買(mǎi)買(mǎi)提·艾買(mǎi)提

(新疆醫(yī)科大學(xué)1維吾爾醫(yī)學(xué)院， 烏魯木齊　830011; 2第一附屬醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科， 烏魯木齊　830054)

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·維醫(yī)維藥·

異常黑膽質(zhì)成熟劑對(duì)病癥結(jié)合乳腺增生癥模型大鼠性激素受體的影響研究

米熱古麗·艾乃都1, 祖拉亞提·庫(kù)爾班2, 麥麗帕提·木哈巴提1, 努爾買(mǎi)買(mǎi)提·艾買(mǎi)提1

(新疆醫(yī)科大學(xué)1維吾爾醫(yī)學(xué)院， 烏魯木齊830011;2第一附屬醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科， 烏魯木齊830054)

目的探討異常黑膽質(zhì)成熟劑對(duì)異常黑膽質(zhì)型乳腺增生癥大鼠模型的干預(yù)作用及其可能的作用機(jī)制。方法選取Wistar大鼠80只，隨機(jī)分為正常對(duì)照組、乳腺增生癥模型組、陽(yáng)性對(duì)照組、異常黑膽質(zhì)模型組、異常黑膽質(zhì)型乳腺增生癥組及異常黑膽質(zhì)成熟劑高、中、低劑量組。采用經(jīng)典造模方法建立異常黑膽質(zhì)證動(dòng)物模型，采用雌激素聯(lián)合孕激素的方法，建立異常黑質(zhì)型乳腺增生癥動(dòng)物模型。應(yīng)用異常黑膽質(zhì)成熟劑方藥干預(yù)，觀察各組大鼠的生物表征，測(cè)量各組大鼠乳頭高度，利用放射免疫測(cè)定法檢測(cè)大鼠血清雌二醇(E2)、孕酮(P)及睪酮(T)的含量，取乳腺組織做病理切片，觀察病理學(xué)變化，檢測(cè)組織中的雌激素受體(ER)及孕激素受體(PR)的表達(dá)并比較分析。結(jié)果與正常對(duì)照組相比，異常黑膽質(zhì)型乳腺增生癥組大鼠乳頭高度增高，E2水平明顯升高，P和T水平明顯降低，ER、PR表達(dá)上調(diào)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與異常黑膽質(zhì)型乳腺增生癥組比較，異常黑膽質(zhì)成熟劑給藥組大鼠的生物表征趨于改善；異常黑膽質(zhì)成熟劑中、高劑量大鼠乳頭高度縮小，大鼠血清E2水平降低， P和T水平升高，模型大鼠乳腺組織ER、PR的表達(dá)水平下調(diào)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，異常黑膽質(zhì)成熟劑低劑量組雖也有此變化，但與正常對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論異常黑膽質(zhì)成熟劑可改善異常黑膽質(zhì)型乳腺增生癥模型大鼠的生物表征，通過(guò)糾正雌孕激素比例失調(diào)及下調(diào)雌孕激素受體的表達(dá)而減輕模型大鼠乳腺增生的程度。

乳腺增生癥； 異常黑膽質(zhì)證； 異常黑膽質(zhì)成熟劑； 性激素受體

Urumqi830054,China)

乳腺增生癥是婦女常見(jiàn)病、多發(fā)病，占全部乳腺疾病的75%。近年來(lái)，隨著乳腺增生癥發(fā)病率的日趨上升，乳腺癌的發(fā)病率也隨之升高[1]，因此提前干預(yù)乳腺增生癥在預(yù)防乳腺癌方面有極其重要的作用。維吾爾醫(yī)體液論認(rèn)為，乳腺增生癥主要由異常黑膽質(zhì)引起[2]。異常黑膽質(zhì)成熟劑是由破布木果、紅棗、牛舌草、香青蘭、薰衣草、鐵線厥、小茴香、地錦草、甘草根及刺糖等藥材組成的復(fù)方藥，具有成熟體內(nèi)的異常黑膽質(zhì)體液、開(kāi)通阻滯、增強(qiáng)免疫之功效，主要用于異常黑膽質(zhì)體液引起的疾病[3]。多年的臨床應(yīng)用結(jié)果表明，異常黑膽質(zhì)成熟劑治療乳腺增生癥療效顯著[4-6]。在本課題組前期動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中通過(guò)建立乳腺增生癥動(dòng)物模型，并進(jìn)行異常黑膽質(zhì)成熟劑治療，得到異常黑膽質(zhì)成熟劑可能通過(guò)調(diào)節(jié)激素紊亂狀態(tài)而減輕乳腺增生程度的結(jié)果[7]。為了有效模擬臨床，客觀評(píng)價(jià)異常黑膽質(zhì)成熟劑的治療效果及闡明其作用機(jī)制，本研究建立異常黑膽質(zhì)型乳腺增生癥動(dòng)物模型，并予以異常黑膽質(zhì)成熟劑干預(yù)，觀察其對(duì)大鼠模型的干預(yù)效果，探討其可能的部分作用機(jī)制。

1　材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物清潔級(jí)10 w雌性未孕Wistar大鼠110只，體質(zhì)量180～220 g，由新疆醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供[動(dòng)物許可證號(hào)：SCXK(新)2011-0003]。實(shí)驗(yàn)前動(dòng)物適應(yīng)性普通飼料飼養(yǎng)1 w。

1.2實(shí)驗(yàn)藥物和主要試劑異常黑膽質(zhì)成熟劑由新疆奇康哈博維藥有限公司生產(chǎn)提供。按照文獻(xiàn)[8]專(zhuān)利號(hào)：ZL02130082.8)制備異常黑膽質(zhì)成熟劑(顆粒劑)。苯甲酸雌二醇注射液(廣州明興制藥有限公司，規(guī)格1 mL：5 mg，批號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字H31021297)，黃體酮注射液(浙江仙琚制藥股份有限公司，規(guī)格1 mL：20 mg，國(guó)藥準(zhǔn)字H33020828)，三苯氧胺片(揚(yáng)子江藥業(yè)集團(tuán)有限公司，規(guī)格10 mg/60片，國(guó)藥準(zhǔn)字H32021472)。干寒飼料的制備：在普通飼料中加芫荽子和大麥(1∶1)，普通飼料與干寒飼料按7∶3的比例制成顆粒狀干寒飼料，委托新疆醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心加工。多聚甲醛(天津津美化學(xué)試劑廠，批號(hào)：20040219)，無(wú)水乙醇(天津津美化學(xué)試劑廠，批號(hào)：20041115)，二甲苯(沈陽(yáng)化學(xué)試劑廠，批號(hào)：20040315)。碘[125I]孕酮放免試劑盒、碘[125I]孕雌二醇放免試劑盒、碘[125I]睪酮放免試劑盒均購(gòu)自北京北方生物技術(shù)研究所，雌激素受體(ER)免疫組化測(cè)試盒由美國(guó)賽默飛世爾科技公司(Thermo Fisher Scientific)生產(chǎn)，孕激素受體(PR)免疫組化測(cè)試盒由美國(guó)Cloud-Clone Corp生產(chǎn)。

1.3實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1動(dòng)物分組取健康Wistar大鼠110只，每籠5只，普通環(huán)境，自然光照，自由進(jìn)食水，穩(wěn)定飼養(yǎng)1 w后，完全隨機(jī)分為兩組，A組(30只)正常飼養(yǎng)[普通鼠飼料250 g/d，滅菌食用水500 mL/d，隨機(jī)飲食水]，室溫下喂養(yǎng)，溫度(25土3)℃，相對(duì)濕度60%～80%，未受任何刺激，共21 d。B組(80只)采用干寒屬性飼料，每籠大鼠提供250 g/d(普通飼料與干寒屬性飼料按7∶3的比例制成顆粒狀干寒飼料，干寒屬性飼料中大麥和芫荽的比例為 1∶1)+放人工氣候箱 [溫度(6±1)℃，相對(duì)濕度25%～32.8%，每日11∶00 AM～9∶00 PM將動(dòng)物置于人工氣候箱中]+間斷足底電刺激[第1周每次25 min，電壓25 V，1 次/d；第2周每次30 min，電壓30 V，1 次/d； 第3周每次40 min，電壓35 V，1 次/d]+強(qiáng)迫游泳[水溫(20±5)℃ ，1次/d， 每次5 min] 復(fù)合作用建立異常黑膽質(zhì)載體動(dòng)物模型[9]，共21 d。A、B組從6∶00 AM～6∶00 PM均提供光線。以異常黑膽質(zhì)證模型的評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)[10]進(jìn)行評(píng)估，將符合標(biāo)準(zhǔn)的大鼠納入異常黑膽質(zhì)證組(50只)。隨后A和B組隨機(jī)再次分組，即A組分為正常對(duì)照組(n=10)、乳腺增生癥模型組 (n=10)和陽(yáng)性對(duì)照組(n=10)。B組，已經(jīng)建立異常黑膽質(zhì)證的大鼠再次隨機(jī)分為3個(gè)組：異常黑膽質(zhì)證模型組(n=10)、異常黑膽質(zhì)型乳腺增生癥組 (n=10)、異常黑膽質(zhì)型乳腺增生癥+異常黑膽質(zhì)成熟劑給藥組(高、中、低劑量組，每組各10只)。

1.3.2異常黑膽質(zhì)證的評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)(生物表征)[10](1)體質(zhì)量下降，消瘦；(2)易激怒，咬斗；(3)背毛枯槁無(wú)光澤；(4)糞便干燥；(5)肛溫下降；(6)進(jìn)食量、飲水量多。

1.3.3病證結(jié)合動(dòng)物模型的制作實(shí)驗(yàn)第22天，將乳腺增生癥模型組、陽(yáng)性對(duì)照組、異常黑膽質(zhì)型乳腺增生癥組和異常黑膽質(zhì)成熟劑給藥組大鼠，肌內(nèi)注射苯甲酸雌二醇 0.5 mg·kg-1·d-1，連續(xù)25 d，隨后肌內(nèi)注射黃體酮4 mg·kg-1·d-1，連續(xù)5 d，復(fù)制大鼠乳腺增生模型。其他組大鼠肌內(nèi)注射生理鹽水。異常黑膽質(zhì)模型組、異常黑膽質(zhì)型乳腺增生癥組和異常黑膽質(zhì)成熟劑給藥組大鼠繼續(xù)干寒飼養(yǎng)環(huán)境、干寒屬性的特殊飼料、間斷足底電刺激、強(qiáng)迫游泳等。

1.3.4藥物干預(yù)造模后第2天異常黑膽質(zhì)成熟劑給藥組給予異常黑膽質(zhì)成熟劑顆粒灌胃，低、中、高劑量組分別給予2、 4及8 g/kg體質(zhì)量，按大鼠體質(zhì)量1 mL/100 g每日灌胃，陽(yáng)性對(duì)照組給予三苯氧胺 1.8 mg·kg-1·d-1，連續(xù)45 d。其他各組每日予生理鹽水灌胃。實(shí)驗(yàn)期間所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均自由飲水，正常飲食。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中全程觀察異常黑膽質(zhì)證的生物表征，每周測(cè)量大鼠體質(zhì)量及大鼠第二對(duì)乳頭直徑1次。1.3.5樣本的采集實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，動(dòng)物禁食、不禁水12 h，腹腔注射2%戊巴比妥鈉(45 mg/kg體質(zhì)量)麻醉，腹腔動(dòng)脈采集血液，放入離心管中，3 000 r/min離心5 min，分離血清置入-80℃冰箱中備用以檢測(cè)性激素水平，同時(shí)用打孔器取下第二對(duì)完整乳房，直徑約8 mm，4%多聚甲醛固定，石蠟包埋切片。

1.4指標(biāo)檢測(cè)4%多聚甲醛中固定的乳腺組織，進(jìn)行脫水、石蠟包埋、切片和蘇木素—伊紅染色，鏡下觀察各組乳腺組織病理學(xué)變化并進(jìn)行比較。應(yīng)用放射免疫檢測(cè)法測(cè)定大鼠血清雌二醇(E2)、孕酮(P)、睪酮(T)水平。按照ER、PR免疫組化測(cè)試盒的說(shuō)明檢測(cè)激素受體表達(dá)。結(jié)果判定：ER、PR的免疫組化陽(yáng)性產(chǎn)物為細(xì)胞核著黃色或棕黃色，以兔血清和PBS代替一抗體染色，作為陰性對(duì)照。在光學(xué)顯微鏡下觀察細(xì)胞染色的情況，評(píng)估染色的程度和范圍，在高倍視野(×40)計(jì)算200個(gè)細(xì)胞，統(tǒng)計(jì)陽(yáng)性細(xì)胞的百分比，<25%為(-)，陽(yáng)性細(xì)胞率<25%，但部分區(qū)域有較強(qiáng)著色陽(yáng)性細(xì)胞者為(±)，25%～50%為(+)，51%～75% 為(++)，>75%為(+++)，分別積分為1、2、3、4、5分[11]。

2　結(jié)果

2.1各組大鼠生物表征的對(duì)比在異常黑膽質(zhì)證模型階段，與A組比較，B組大鼠造模第7天開(kāi)始，體質(zhì)量增長(zhǎng)緩慢，體形漸消瘦。第14天出現(xiàn)舌干呈淡紫色，有瘀斑;皮毛枯燥欠光澤；精神不振或煩躁不安，易怒，反應(yīng)遲鈍，爭(zhēng)食爭(zhēng)水；大便干燥，小便色清，量多。第21天表現(xiàn)出舌干暗紫，有瘀斑，少苔；皮毛暗淡無(wú)光澤，蜷縮少動(dòng)，易怒，反應(yīng)遲鈍，倦怠嗜睡，易驚；爭(zhēng)食爭(zhēng)水，大便成形，干濕適中；小便淺黃色，量少。A組大鼠皮毛光澤，體態(tài)活潑，反應(yīng)敏捷，食欲好，大便正常，體質(zhì)量增長(zhǎng)正常。病證結(jié)合模型階段及藥物干預(yù)階段，異常黑膽質(zhì)成熟劑給藥組大鼠皮毛尚可，較前變光澤，與異常黑膽質(zhì)型乳腺增生癥模型組相比，體質(zhì)量上升，反應(yīng)良好，舌苔舌質(zhì)變淡，趨于正常。乳腺增生癥模型組身體消瘦或體質(zhì)量增長(zhǎng)迅速，皮毛欠光澤，煩躁不安，易激惹，反應(yīng)遲鈍，活動(dòng)減少或增加。異常黑膽質(zhì)模型組和異常黑膽質(zhì)型乳腺增生癥組上述生物表征更趨惡化，異常黑膽質(zhì)型乳腺增生癥組死亡2只。

2.2各組大鼠第二對(duì)乳頭高度比較與正常對(duì)照組比較，乳腺增生癥模型組和異常黑膽質(zhì)型乳腺增生癥組第二對(duì)乳頭高度顯著增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。與異常黑膽質(zhì)型乳腺增生癥組比較，陽(yáng)性對(duì)照組和異常黑膽質(zhì)成熟劑給藥組第二對(duì)乳頭高度顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，尤其是異常黑膽質(zhì)成熟劑中、高劑量組更明顯(P<0.01),見(jiàn)表1。

2.3各組大鼠血清E2、P、T水平比較與正常對(duì)照組比較，乳腺增生癥模型組及異常黑膽質(zhì)型乳腺增生癥組大鼠血清E2水平明顯升高(P<0.01)，P和T明顯降低(P<0.05～0.01)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與乳腺增生癥模型組比較，異常黑膽質(zhì)型乳腺增生癥組大鼠血清E2水平更高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05～0.01)。與異常黑膽質(zhì)型乳腺增生癥組比較，異常黑膽質(zhì)成熟劑中、高劑量組E2水平明顯降低(P<0.05～0.01)；異常黑膽質(zhì)成熟劑高劑量組P水平和中、高劑量組T水平明顯增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05～0.01)，見(jiàn)表2。

表1　各組大鼠第二對(duì)乳頭高度比較(±s， mm)

注：與正常對(duì)照組比較，**P<0.01； 與乳腺增生癥模型組比較，#P<0.05；與異常黑膽質(zhì)型乳腺增生癥組比較，ΔP<0.05，ΔΔP<0.01。

表2　各組大鼠血清E2、P、T水平比較(±s)

注：與正常對(duì)照組比較，*P<0.01,**P<0.05； 與乳腺增生癥模型組比較，#P<0.05；與異常黑膽質(zhì)型乳腺增生癥組比較，ΔP<0.05，ΔΔP<0.01。

2.4異常黑膽質(zhì)成熟劑對(duì)異常黑膽質(zhì)型乳腺增生癥模型大鼠ER、PR的影響與正常對(duì)照組相比，乳腺增生癥模型組和異常黑膽質(zhì)型乳腺增生癥組ER、PR陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)明顯增多，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；與異常黑膽質(zhì)型乳腺增生癥組比較，異常黑膽質(zhì)成熟劑中、高劑量組ER、PR的表達(dá)下調(diào)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；與異常黑膽質(zhì)型乳腺增生癥組相比，異常黑膽質(zhì)成熟劑低劑量組ER、PR陽(yáng)性表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；與異常黑膽質(zhì)型乳腺增生癥組比較，陽(yáng)性對(duì)照組ER、PR陽(yáng)性細(xì)胞率明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),見(jiàn)表3。雌激素受體在正常對(duì)照組(圖1a)中幾乎未表達(dá)，在異常黑膽質(zhì)模型組(圖1d)中表達(dá)很少，而在乳腺增生癥模型組(圖1b)，尤其在異常黑膽質(zhì)型乳腺增生癥組(圖1c)中表達(dá)明顯增多；在陽(yáng)性對(duì)照組(圖1e)和異常黑膽質(zhì)成熟劑中、高劑量組(圖1g和圖1h)中表達(dá)不同程度減少，在異常黑膽質(zhì)成熟劑低劑量組表達(dá)未明顯減少。

表3　異常黑膽質(zhì)成熟劑對(duì)各組大鼠乳腺組織中ER、PR表達(dá)的影響/只

注：與正常對(duì)照組比較，**P<0.01； 與異常黑膽質(zhì)型乳腺增生癥組比較，ΔP<0.05，ΔΔP<0.01。

a: 正常對(duì)照組(HE×100)

b：乳腺增生癥模型組(HE×40)

c: 異常黑膽質(zhì)型乳腺增生癥組(HE×200)

d: 異常黑膽質(zhì)模型組(HE×100)

e: 陽(yáng)性對(duì)照組(HE×40)

f: 異常黑膽質(zhì)成熟劑低劑量組(HE×40)

g：異常黑膽質(zhì)成熟劑中劑量組(HE×100)

h：異常黑膽質(zhì)成熟劑高劑量組(HE×40)

圖1異常黑膽質(zhì)成熟劑對(duì)各組大鼠乳腺組織中ER表達(dá)的影響

3　討論

3.1病證結(jié)合動(dòng)物模型的建立及異常黑膽質(zhì)成熟劑對(duì)模型大鼠生物表征的影響辨證論治是維醫(yī)理論體系的特色和維醫(yī)治療疾病的精華，證候則是所有傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)認(rèn)識(shí)和治療疾病的依據(jù)。病證結(jié)合模型的建立是繼承、發(fā)展維醫(yī)以及實(shí)現(xiàn)維醫(yī)現(xiàn)代化的基礎(chǔ)，是維西醫(yī)結(jié)合研究的重要環(huán)節(jié)。病證結(jié)合模型則強(qiáng)調(diào)“病”和“證”的有機(jī)結(jié)合，更符合臨床實(shí)際，保留了維醫(yī)傳統(tǒng)理論體系的精髓。因此建立病證結(jié)合動(dòng)物模型是中藥、維藥復(fù)方研究的必要途徑。在維醫(yī)病證結(jié)合動(dòng)物模型的研究方面已經(jīng)成功建立了異常黑膽質(zhì)證型肝癌、異常黑膽質(zhì)證型癡呆和異常黑膽質(zhì)證型哮喘等大鼠動(dòng)物模型，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)乳腺增生癥與異常黑膽質(zhì)證的密切聯(lián)系[12-14]。本研究在此基礎(chǔ)上采用異常黑膽質(zhì)證經(jīng)典造模方結(jié)合雌激素聯(lián)合孕激素的方法建立了異常黑膽質(zhì)證型乳腺增生癥病證大鼠模型，并用異常黑膽質(zhì)成熟劑干預(yù)，觀察各組大鼠的生物表征變化及異常黑膽質(zhì)成熟劑對(duì)大鼠生物表征的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)異常黑膽質(zhì)成熟劑對(duì)異常黑膽質(zhì)證生物表征有明顯的改善作用。維吾爾醫(yī)學(xué)認(rèn)為，乳腺增生癥以黑膽質(zhì)體液的異常為發(fā)病之本，以七情過(guò)度、情志異常為發(fā)病之因，以機(jī)體干寒屬性偏盛為發(fā)病之標(biāo)。異常黑膽質(zhì)體液屬性干寒，作用于腦，使腦的干寒屬性增加，影響腦的情志調(diào)節(jié)功能。維吾爾醫(yī)治療本病，首先給予異常體液的成熟劑即異常黑膽質(zhì)成熟劑，異常黑膽質(zhì)成熟劑的主要功能是成熟異常黑膽質(zhì)，使異常黑膽質(zhì)體液聚集在體內(nèi)的各種排泄部位，易被清除劑排出體外，從而恢復(fù)體液的平衡，改善異常黑膽質(zhì)所致的生物表征。

3.2異常黑膽質(zhì)成熟劑對(duì)病證結(jié)合大鼠模型激素水平的調(diào)節(jié)作用乳腺增生癥是育齡期婦女的常見(jiàn)病，關(guān)于乳腺增生癥的確切原因至今尚未完全明了?，F(xiàn)代研究目前比較公認(rèn)的觀點(diǎn)是體內(nèi)性激素水平紊亂，尤其是雌激素水平過(guò)量或孕激素分泌不足、雌孕激素比例失調(diào)所致。乳腺組織受到雌激素的長(zhǎng)期刺激又缺乏孕激素對(duì)抗時(shí)，E2作用于敏感的乳腺組織細(xì)胞，誘導(dǎo)乳腺實(shí)質(zhì)的大量增生。維吾爾醫(yī)體液論認(rèn)為，異常黑膽質(zhì)體液作用于肝臟，導(dǎo)致肝臟對(duì)激素失活功能的減弱[15]。本研究結(jié)果顯示，與正常對(duì)照組相比，異常黑膽質(zhì)型乳腺增生癥組大鼠血清E2水平明顯升高，P和T水平明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P <0.05)。與異常黑膽質(zhì)型乳腺增生癥組比較，異常黑膽質(zhì)成熟劑中、高劑量組大鼠血清E2水平降低， P和T水平升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，低劑量組雖也有此變化，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，作用呈劑量依賴(lài)性，說(shuō)明異常黑膽質(zhì)成熟劑可降低異常黑膽質(zhì)型乳腺增生癥組大鼠血清E2水平，升高P和T水平。此結(jié)果與張琳等[16]與孫二虎等[17]的研究結(jié)果相似，異常黑膽質(zhì)成熟劑一方面降低E2水平，另一方面使P和T水平增高，從而起到對(duì)抗雌激素的作用，更好地糾正體內(nèi)激素水平紊亂。

3.3異常黑膽質(zhì)成熟劑對(duì)ER、PR表達(dá)的下調(diào)作用ER、PR的表達(dá)及乳腺組織自身對(duì)激素敏感性的增高在乳腺增生癥的發(fā)生、發(fā)展中起重要的作用[18]。過(guò)多的E2導(dǎo)乳腺實(shí)質(zhì)增生，增生的細(xì)胞通過(guò)激素受體系統(tǒng)促使ER、PR合成增多，提高乳腺上皮對(duì)雌激素的敏感性，就此形成惡性循環(huán)，導(dǎo)致乳腺上皮的病理性增生甚至惡變。本研究結(jié)果顯示，與正常對(duì)照組相比，病證結(jié)合模型組ER、PR表達(dá)上調(diào)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。與病證結(jié)合模型組比較，異常黑膽質(zhì)成熟劑中、高劑量組大鼠乳腺組織ER、PR的表達(dá)水平下調(diào)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05～0.01)，低劑量組雖也有此變化，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明異常黑膽質(zhì)成熟劑可下調(diào)大鼠乳腺組織中ER、PR的表達(dá)，可抑制其表達(dá)。本研究結(jié)果與相關(guān)研究結(jié)果相符[19-20]?？梢?jiàn)，異常黑膽質(zhì)成熟劑通過(guò)下調(diào)ER、PR的表達(dá)而降低乳腺組織對(duì)雌激素的敏感性。

綜上所述，維吾爾醫(yī)現(xiàn)代研究表明，異常黑膽質(zhì)成熟劑對(duì)神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫網(wǎng)絡(luò)有較好的調(diào)節(jié)作用，異常黑膽質(zhì)成熟劑可改善病證結(jié)合模型大鼠的生物表征，減輕乳腺增生的程度，其作用機(jī)理可能通過(guò)下調(diào)ER、PR的表達(dá)，調(diào)節(jié)體內(nèi)激素水平，糾正雌孕激素失調(diào)，間接作用于靶器官乳腺，從而達(dá)到治療乳腺增生癥的目的。乳腺增生癥是病因尚未完全明了的復(fù)雜疾病，其發(fā)病機(jī)制與多因素、多途徑有關(guān)，且異常黑膽質(zhì)成熟劑為復(fù)方制劑，其作用機(jī)制尚需進(jìn)一步研究。

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(本文編輯楊晨晨)

Study on the effect of Abnormal Savda Munziq on rat model of mammary gland hyperpalsia with abnormal savda syndrome

Mireguli Ainaidu1, Zulayati Kuerban2, Mailipati Muhabati1, Nuermaimaiti Aimaiti1

(1CollegeofTraditionalUyghurMedicine,XinjiangMedicalUniversity,Urumqi830011,China;2NuclearMedicineDepartment，TheFirstAffiliatedHospitalofXinjiangMedicalUniversity,

ObjectiveTo explore the intervention of Abnormal Savda Munziq formula to rat model of mammary gland hyperplasia with Abnormal Savda Syndrome and the possible mechanism. Methods80 Wistar rats were randomly divided into normal control group, model group, positive control group, Abnormal Sawda Syndrome model group, mammary gland hyperplasia with Abnormal Sawda Syndrome group, Abnormal Sawda Munziq high, middle and low dose group. The rat model of abnormal savda syndrome was established by using classical method, then using combined estrogen and progesterone method to establish the rat model of mammary gland hyperpalsia with abnormal savda syndrome, finally to intervene applying of abnormal savda munziq formula, to observe the biological characterization of each group,to measure rat′s nipple height, using immunoradiometric assay to detect estradiol (E2), progesterone (P) and testosterone (T) in serum,make pathological slices, to observe the pathological changes of breast tissue, and to test expression of estrogen receptor (ER) and progesterone receptor (PR) and analyse its comparation. ResultsMammary gland hyperplasia with Abnormal Sawda Syndrome group compared with normal control group, rat′s nipple height increased, E2levels increased significantly, P and T levels significantly decreased, ER, PR expression presents up-regulation, the difference had statistical significance (P<0.05). Abnormal Sawda Munziq dosage groups compared with mammary gland hyperplasia with Abnormal Sawda Syndrome group, abnormal sawda munziq can improve the biological characterization of rats of mammary gland hyperplasia with Abnormal Sawda Syndrome group. In Abnormal Savda Munziq middle and high dose group, rats nipple height were shrinked , rat serum E2level were reduced, P and T levels were rised, breast tissue ER, PR expression level presents down-regulation, the difference had statistical significance (P<0.05), abnormal sawda munziq low dose group also have this change, but no statistical significance. ConclusionAbnormal Savda Munziq formula can improve the biological characterization of rat model of mammary gland hyperplasia with Abnormal Sawda Syndrome, by correcting the estrogen and progesterone imbalance and cut the estrogen and progesterone receptor expression to alleviate the degree of mammary gland hyperplasia in rat models.

mammary gland hyperplasia; Abnormal Savda Syndrome; Abnormal Savda Munziq; sex hermone receptor

新疆維吾爾自治區(qū)高?？蒲杏?jì)劃(青年啟動(dòng)基金)(XJEDU2013S18)

米熱古麗·艾乃都(1978-)，女(維吾爾族)，碩士，講師，研究方向：維吾爾醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)研究。

努爾買(mǎi)買(mǎi)提·艾買(mǎi)提，男(維吾爾族)，博士，教授，博士生導(dǎo)師，研究方向：新疆重大疾病的維吾爾醫(yī)干預(yù)，E-mail：oglan1972@126.com。

R29

A

1009-5551(2016)06-0686-06

10.3969/j.issn.1009-5551.2016.06.006

2016-01-07]