PIP化合物對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化大鼠腎臟結(jié)構(gòu)和功能的影響

姚恩輝　陳良龍　方軍　石黎明　葉洪　范林

【摘要】 目的 探討毗咯-咪唑聚酰胺類化合物（PIP）對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化大鼠腎臟結(jié)構(gòu)和功能的影響。方法 60只動(dòng)脈粥樣硬化大鼠， 按照數(shù)字隨機(jī)法分為對(duì)照組和觀察組， 每組30只。對(duì)照組大鼠不做任何處理， 觀察組大鼠則注射PIP化合物。比較兩組大鼠的腎臟結(jié)構(gòu)和功能的變化。結(jié)果 觀察組大鼠腎小球肥大明顯減輕， 系膜基質(zhì)增生明顯減輕， 腎小管修復(fù)現(xiàn)象明顯；觀察組大鼠腎臟功能中腎小球硬化指數(shù)（GSI）和間質(zhì)纖維化指數(shù)（IF）及轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β（TGF-β）的檢測(cè)結(jié)果均顯著優(yōu)于對(duì)照組， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 PIP化合物對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化大鼠腎臟結(jié)構(gòu)和功能無(wú)明顯不良影響， 甚至有改善跡象， 應(yīng)用于人體還需作進(jìn)一步研究。

【關(guān)鍵詞】 毗咯-咪唑聚酰胺類化合物；動(dòng)脈粥樣硬化；大鼠；腎臟結(jié)構(gòu)；功能

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.22.206

動(dòng)脈粥樣硬化是臨床上的常見(jiàn)病， 在全球的發(fā)病率和病死率均較高， 是冠心病、腦梗死以及外周血管疾病的主要原因， 嚴(yán)重影響患者的身體健康和生命安全[1]。目前， 臨床治療多以西藥為主， 但是不良反應(yīng)較明顯， 且依從性差， 因此找到一種效果良好的藥物極為重要[2]。隨著醫(yī)學(xué)的發(fā)展， 學(xué)者開始研究PIP化合物對(duì)于動(dòng)脈粥樣硬化的效果， 并在大鼠身上進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。鑒于此， 本院也做了相關(guān)實(shí)驗(yàn)， 旨在探究PIP化合物對(duì)于動(dòng)脈粥樣硬化大鼠腎臟結(jié)構(gòu)和功能的影響， 現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 隨機(jī)選取60只動(dòng)脈粥樣硬化大鼠作為研究對(duì)象， 要求6～7周大， 體重（180±20）g。將滿足上述條件的大鼠按照數(shù)字隨機(jī)法分為對(duì)照組和觀察組， 每組30例。對(duì)照組大鼠平均周齡（6.58±0.39）周， 平均體重（181.34±13.37）g；觀察組大鼠平均周齡（6.71±0.28）周， 平均體重（181.22±14.29）g。兩組大鼠一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）， 具有可比性。

1. 2 研究方法 所有大鼠均進(jìn)行1周的適應(yīng)性飼養(yǎng)， 然后對(duì)照組大鼠不做任何改變， 給予常規(guī)飼養(yǎng)；觀察組大鼠則給予PIP化合物注射：將0.4 mg莫索尼定溶于生理鹽水注射于大鼠體內(nèi)， 1次/d。除去PIP化合物注射后， 兩組大鼠試驗(yàn)期間均自由攝食飲水。12周后對(duì)所有大鼠均進(jìn)行腎組織檢查， 具體如下：大鼠麻醉取血， 快速切開左側(cè)腎臟， 剝離包膜， 沿縱軸切開， 一側(cè)進(jìn)行液氮凍存， 用來(lái)進(jìn)行免疫組化分析， 檢測(cè)TGF-β；另一次用10%的福爾馬林進(jìn)行固定， 24 h

后再用70%、80%、90%、95%、100%的乙醇進(jìn)行梯度脫水， 二甲苯透明， 石蠟包埋。每一個(gè)組織蠟塊均連續(xù)6張4 μm

切片， 在蘇木精-伊紅染色法（HE）染色后進(jìn)行常規(guī)光學(xué)顯微鏡觀察、拍照， 過(guò)碘酸雪夫氏染色法（PAS）染色觀察腎小球和小管間質(zhì)的病理變化， 分別采用Caij等半定量方法評(píng)估GSI和IF， 半定量分析評(píng)估腎小球和小管間質(zhì)的病理改變。

1. 3 觀察指標(biāo) 比較兩組大鼠的HE染色結(jié)果；比較兩組大鼠的腎臟功能的檢測(cè)結(jié)果， 包括GSI、IF以及TGF-β。

1. 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 兩組大鼠的HE染色結(jié)果比較 12周后， 對(duì)照組大鼠HE檢測(cè)顯示腎小球肥大， 且部分出現(xiàn)萎縮現(xiàn)象， 系膜基質(zhì)增生較為明顯， 毛細(xì)血管擴(kuò)張以及腎小管管腔擴(kuò)張明顯， 纖維化程度較高；觀察組大鼠腎小球肥大明顯減輕， 系膜基質(zhì)增生明顯減輕， 腎小管修復(fù)現(xiàn)象明顯。

2. 2 兩組大鼠的腎臟功能的檢測(cè)結(jié)果比較 觀察組大鼠腎臟功能中GSI、IF及TGF-β的檢測(cè)結(jié)果均顯著優(yōu)于對(duì)照組， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表2。

3 討論

PIP是由具有芳香結(jié)構(gòu)的N-甲基吡咯和N-甲基咪唑單體合成的一類化合物， 在農(nóng)藥和醫(yī)藥領(lǐng)域應(yīng)用的較為廣泛[3]。動(dòng)脈粥樣硬化是冠心病、腦梗死以及外周血管疾病的主要原因， 發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜， 一旦發(fā)展到足以阻塞動(dòng)脈腔的時(shí)候則很容易導(dǎo)致該動(dòng)脈供應(yīng)的組織和器官缺血或壞死， 嚴(yán)重影響患者的生命安全， 找到良好的治療藥物極為重要。隨著醫(yī)學(xué)的發(fā)展， 有學(xué)者提出利用PIP化合物進(jìn)行動(dòng)脈粥樣硬化的治療， 為了安全， 進(jìn)行了大量的實(shí)驗(yàn)， 尤其是對(duì)患者腎臟結(jié)構(gòu)和功能進(jìn)行研究探討。

在本次研究中， 通過(guò)對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化大鼠進(jìn)行PIP化合物注射治療發(fā)現(xiàn)， 觀察組大鼠在腎小球、腎小管、毛細(xì)血管， 系膜基質(zhì)等腎臟結(jié)構(gòu)相較于對(duì)照組大鼠均有明顯的改善， 即PIP化合物對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化大鼠的腎臟結(jié)構(gòu)具有改善作用；此外觀察組大鼠腎臟功能檢測(cè)結(jié)果包括GSI、IF以及TGF-β均顯著優(yōu)于對(duì)照組， 提示PIP化合物對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化大鼠腎臟功能也無(wú)不良影響。目前臨床上常采用西藥進(jìn)行動(dòng)脈粥樣硬化的治療， 但是大量臨床資料表明在治療過(guò)程中患者的依從性較低， 且不良反應(yīng)較多， 尤其對(duì)腎臟結(jié)構(gòu)和功能的影響較大[4]。在此次研究中， 觀察組大鼠腎臟結(jié)構(gòu)和功能均未收到影響， 甚至有改善的跡象， 說(shuō)明PIP化合物的可用性較高。

綜上所述， PIP化合物對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化大鼠腎臟結(jié)構(gòu)和功能無(wú)明顯不良影響， 甚至有改善跡象， 應(yīng)用于人體還需作進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn)

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[3] 江世坤， 王普， 吳艷玲， 等.脂肪鏈在吡咯-咪唑聚酰胺及其結(jié)合物與B-DNA鍵合中的作用. 化學(xué)進(jìn)展， 2011， 23（11）：2339-2352.

[4] 常露， 王應(yīng)霞， 楊桂梅， 等.動(dòng)脈粥樣硬化模型大鼠血液生化指標(biāo)變化. 昆明醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)， 2015， 36（9）：13-16.

[收稿日期：2016-03-07]