5例急性巨核細(xì)胞白血病患者免疫表型結(jié)果分析*

曹　越,蔡元菊,楊江勇,劉春永,李佰靈,楊文娜

(韶關(guān)學(xué)院醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)技術(shù)系,廣東韶關(guān) 512026)

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·論著·

5例急性巨核細(xì)胞白血病患者免疫表型結(jié)果分析*

曹越,蔡元菊,楊江勇,劉春永,李佰靈,楊文娜

(韶關(guān)學(xué)院醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)技術(shù)系,廣東韶關(guān) 512026)

目的通過對(duì)急性巨核細(xì)胞白血病患者白血病細(xì)胞免疫表型進(jìn)行檢測(cè)來分析各種血細(xì)胞表面分化抗原(CD)在急性巨核細(xì)胞白血病診斷及鑒別診斷當(dāng)中的作用。方法應(yīng)用BD公司流式細(xì)胞儀及其配套檢測(cè)試劑盒檢測(cè)5例急性巨核細(xì)胞白血病患者血細(xì)胞CD。結(jié)果所有患者均表達(dá)CD41和CD42，陽性率100%；淋系抗原均為陰性；CD13陽性者有4例，陽性率80%；CD33陽性者3例，陽性率60%；表達(dá)CD14和CD15者各1例，陽性率各占20%。結(jié)論檢測(cè)結(jié)果顯示CD41和CD42在急性巨核細(xì)胞白血病診斷及鑒別診斷中具有重要的價(jià)值，同時(shí)也再次驗(yàn)證了急性巨核細(xì)胞白血病患者血細(xì)胞存在有“系列非專一性”的特點(diǎn)。

急性巨核細(xì)胞白血病；細(xì)胞表面分化抗原；免疫表型

急性巨核細(xì)胞白血病(AMKL) 首先由Von Boros 于1931年提出，該病具有發(fā)病率低、病程短等特點(diǎn)，各年齡組男、女均可患病，尤以兒童多見且病情兇險(xiǎn)[1-4]。臨床常以貧血、發(fā)熱起病，和其他急性白血病類型相似，但也有所不同，如肝、脾淋巴結(jié)多不腫大。AMKL屬于FAB分型中的M7，按增生巨核系細(xì)胞分化、成熟程度不同又可將AMKL分為未分化型和部分分化型，后者因除有較多的原始巨核細(xì)胞外，還有幼稚巨核細(xì)胞或成熟巨核細(xì)胞的異常增生，所以此型在光學(xué)顯微鏡下較易辨認(rèn)，而未分化型主要以原始巨核細(xì)胞為主在光學(xué)顯微鏡下不易辨認(rèn)[5-9]。通過利用單克隆抗體對(duì)其免疫表型進(jìn)行分析成為診斷巨核細(xì)胞白血病的重要手段之一。另外，由于該病在臨床上比較少見，實(shí)驗(yàn)室對(duì)其研究也比較少，但有些研究發(fā)現(xiàn)AMKL從表型上看屬于“系列非專一性”，既然可以表達(dá)髓系相關(guān)抗原也可以表達(dá)淋系相關(guān)抗原，但又有些研究否認(rèn)了以上結(jié)論。本課題主要通過AMKL患者白血病細(xì)胞免疫表型的分析來探討各種表面分化抗原(CD)在診斷該病中的地位和作用，從而為臨床診斷提供可靠的依據(jù)，同時(shí)也對(duì)現(xiàn)有的研究結(jié)論進(jìn)行驗(yàn)證，以此來推動(dòng)醫(yī)學(xué)界對(duì)該病的研究進(jìn)程。

1　資料與方法

1.1病例資料病例1：男，19歲，因近期稍有運(yùn)動(dòng)便會(huì)覺過度疲乏、流汗而就診，無其他特殊癥狀。病例2：男，35歲，乏力、面色蒼白，發(fā)熱、咽部紅腫，雙頜下淋巴結(jié)輕度腫大，前期服用過抗生素，治療無效而就診。病例3：女，47歲，面色蒼白，乏力，體表有散在出血點(diǎn)，有胸骨壓痛。病例4：男，70歲，乏力，牙齦出血，偶有黑便，下肢有散在出血點(diǎn)。病例5：女，50歲，面色蒼白，乏力，腰痛，曾疑腎臟疾病就診，曾經(jīng)從事了近12年的家具噴漆工作。

1.2儀器與試劑應(yīng)用BD公司流式細(xì)胞儀及配套檢測(cè)試劑盒檢測(cè)血細(xì)胞CD。

1.3方法在25 μL骨髓液中加入5 μL抗體，室溫孵育30 min，加入溶血素1 mL，避光10 min，1 500 r/min離心5 min，棄去上清液，加入鞘液1 mL，混勻，1 500 r/min洗滌3次，棄上清液，加入0.5 mL鞘液，上機(jī)檢測(cè)，結(jié)果以雙參數(shù)散點(diǎn)圖表示，髓系陽性率大于20%定為陽性，淋系陽性率大于30%定為陽性。所用的抗體種類有單抗巨核系CD41、CD42；髓系CD13、CD14、CD15、CD33；T細(xì)胞CD4、CD7；B細(xì)胞系CD10、CD19、CD20。

1.4診斷依據(jù)所有病例均根據(jù)張之南[10]編寫的《血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)》的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行診斷。

2　結(jié)　果

所有患者均為CD41陽性和CD42陽性；CD4、CD7、CD10、CD19及CD20淋系抗原均為陰性；CD13陽性者有4例(80%)；CD14和CD15陽性者各有1例(25%)；CD33陽性者3例(60%)。結(jié)果見表1。

表1　AMKL患者免疫表型檢測(cè)結(jié)果(%)

3　討　論

AMKL細(xì)胞缺乏較特異的形態(tài)學(xué)改變，未分化型AMKL這方面的特點(diǎn)更為突出，所以目前臨床上對(duì)于AMKL的診斷和鑒別診斷主要實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法有細(xì)胞化學(xué)染色、流式細(xì)胞儀血細(xì)胞CD檢測(cè)及血小板過氧化物酶反應(yīng)，但細(xì)胞化學(xué)反應(yīng)特異性差，血小板過氧化物酶反應(yīng)檢測(cè)技術(shù)復(fù)雜且所用設(shè)備昂貴，以上原因使得流式細(xì)胞儀血細(xì)胞CD檢測(cè)成為AMKL診斷的重要依據(jù)。本文主要是通過對(duì)5例AMKL患者免疫表型檢測(cè)結(jié)果的分析來探討各種CD在診斷及鑒別診斷AMKL過程當(dāng)中的價(jià)值。

本課題研究結(jié)果顯示所有病例均為CD41陽性和CD42陽性，進(jìn)一步驗(yàn)證了CD41和CD42在AMKL的診斷及鑒別診斷當(dāng)中具有重要的地位和作用，并且這一結(jié)論與許多實(shí)驗(yàn)室的研究結(jié)論相符[11-12]。CD13和CD33在所測(cè)病例中陽性率分別為80%和60%，說明以上兩種CD在AMKL時(shí)有較高的表達(dá)，但由于本研究所測(cè)病例較少，對(duì)兩者在AMKL診斷及鑒別診斷當(dāng)中的價(jià)值無法作出更為準(zhǔn)確的評(píng)估。

多數(shù)研究證明，AMKL具有“系列非專一性”的特點(diǎn)[13-15]，且國(guó)外有研究報(bào)道急性髓細(xì)胞白血病細(xì)胞有時(shí)既可以表達(dá)髓系相關(guān)免疫標(biāo)志也可以同時(shí)表達(dá)淋系相關(guān)免疫標(biāo)志，如果某白血病患者兩系免疫標(biāo)志均表達(dá)其預(yù)后較差[16]。本研究所測(cè)5 例AMKL患者免疫表型中無一例表達(dá)淋系相關(guān)免疫標(biāo)志，但幾乎均有髓系相關(guān)免疫標(biāo)志的表達(dá)，且從檢測(cè)結(jié)果看這種表達(dá)不應(yīng)該屬于雜合型AMKL[1]，而應(yīng)該是同一細(xì)胞表達(dá)了多種分化抗原，這一研究結(jié)果也再次驗(yàn)證了以往研究結(jié)論，AMKL患者血細(xì)胞具有“系列非專一性”的表型特點(diǎn)[17]。

AMKL臨床表現(xiàn)及形態(tài)學(xué)改變均復(fù)雜多變，且預(yù)后差，誤診率高，所以為了降低誤診率，讓醫(yī)生能夠抓住最佳治療時(shí)機(jī)，對(duì)于AMKL的研究目前仍在不斷的探索當(dāng)中，例如已有研究就該病的預(yù)后、罕見并發(fā)癥、治療方案及免疫表型等進(jìn)行了更加深入的調(diào)查研究分析[18-23]，但均由于標(biāo)本量很少使得相關(guān)研究的進(jìn)展速度很慢，我們只能夠通過少量標(biāo)本對(duì)該病的某一方面進(jìn)行評(píng)估，但這種評(píng)估的可靠性很低，只能說明某種現(xiàn)象的存在性卻不能說明其存在的普遍性。

綜上所述，實(shí)驗(yàn)室免疫表型的檢測(cè)在AMKL的診斷當(dāng)中充當(dāng)著重要的角色，不但是該病診斷及鑒別診斷的重要依據(jù)，同時(shí)也在該病的起源及分型研究中起到重要的作用。

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Analysis of immunophenotype results in 5 patients with acute megakaryoblastic leukemia*

CAO Yue，CAI Yuanju,YANG Jiangyong，LIU Chunyong，LI Bailing，YANG Wenna

(DepartmentofMedicalTechnology,MedicalCollegeofShaoguanUniversity,Shaoguan,Guangdong512026,China)

ObjectiveTo analyze the role of various blood cell surface differentiation antigens(CD) in the diagnosis and differential diagnosis of acute megakaryoblastic leukemia by detecting the immunophenotype in 5 patients with acute megakaryoblastic leukemia.MethodsThe flow cytometry produced by the BD company and its matching reagents kits were used to detect CD in 5 patients with acute megakaryoblastic leukemia.ResultsAll patients expressed CD41 and CD42 with the positive rate of 100%;the lymphoid antigens ware negative in all cases;CD13 was positive in 4 cases with the positive rate of 80%;CD33 was positive in 3 cases with the positive rate of 60%;CD14 and CD15 were expressed in each 1 case,the positive rate was 20%.ConclusionThe test results show that the CD41 and CD42 have an important value in the diagnosis and differential diagnosis of acute megakaryoblastic leukemia.At the same time,the characteristic of "series non-specificity" in the blood cells of the patients with acute megakaryoblastic leukemia is verified again.

acute megakaryoblastic leukemia;cell surface differentiation antigens;immunophenotype

2016-01-05修回日期：2016-04-26)

廣東省韶關(guān)市科技計(jì)劃項(xiàng)目(2014CX/K331)；2014年度廣東省韶關(guān)市醫(yī)學(xué)科研基金立項(xiàng)課題(Y14083)；韶關(guān)學(xué)院醫(yī)學(xué)院2013年度科技計(jì)劃項(xiàng)目(E201308)。

曹越，女，講師，主要從事臨床檢驗(yàn)及血液學(xué)檢驗(yàn)教學(xué)。

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.15.009

A

1673-4130(2016)15-2074-02