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    降鈣素基因相關(guān)肽對心肌肥厚影響機(jī)制的研究

    2016-08-15 00:43:10張欣,范曉梅,納仁高娃
    中國藥理學(xué)通報 2016年2期
    關(guān)鍵詞:腫瘤壞死因子內(nèi)皮素

    ?

    降鈣素基因相關(guān)肽對心肌肥厚影響機(jī)制的研究

    張欣,范曉梅,納仁高娃,薛明明

    (內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生理學(xué)教研室, 內(nèi)蒙古 呼和浩特010110)

    Study on influence mechanism of calcitonin gene related protein on cardiac hypertrophy

    ZHANG Xin, FAN Xiao-mei, NA REN Gao-wa, XUE Ming-ming

    (PhysiologyTeachingandResearchSectionofBasicMedicalSciences,InnerMongoliaMedicalUniversity,Hohhot010110,China)

    中國圖書分類號:R-332;R322.11;R331.31;R341.6;R542.202.2

    關(guān)鍵詞:降鈣素基因相關(guān)肽;壓力超負(fù)荷;心肌肥厚; 內(nèi)皮素; 腫瘤壞死因子;左心系數(shù)

    Key words:calcitonin gene related protein; pressur overload; cardiac hypertrophy; endothelin; tumor necrosis factor; left ventricular mess index

    降鈣素基因相關(guān)肽(calcitonin gene related protein, CGRP)是迄今為止發(fā)現(xiàn)的最強(qiáng)的一種內(nèi)源性舒血管物質(zhì)[1], 對心血管系統(tǒng)具有重要的生理調(diào)節(jié)作用, 但對肥厚心肌有無逆轉(zhuǎn)作用目前尚未闡明。本研究采用外源性CGRP干預(yù)心肌肥厚大鼠,觀察干預(yù)后心肌肥厚程度的變化和心肌組織中腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)、內(nèi)皮素(endothelin, ET) 含量的變化,進(jìn)一步探討CGRP對心肌肥厚的影響及可能機(jī)制。

    1材料

    1.1動物與分組60只♂健康Wistar大鼠,3月齡,體質(zhì)量200~250 g,由內(nèi)蒙古大學(xué)實驗動物中心提供。隨機(jī)分為3組:對照組、縮窄組、CGRP干預(yù)組。

    1.2藥物和試劑戊巴比妥鈉(華北制藥廠);CGRP(批號:RP11095,金思特科技有限公司);TNF-α、ET放射免疫分析試劑盒(北京東雅生物技術(shù)研究所)。

    1.3儀器BP-6動物無創(chuàng)血壓測試儀(成都泰盟);GC-911-γ全自動放免分析儀(中國科技大學(xué)開發(fā)研究中心);Olympus光學(xué)顯微鏡(日本)。

    2方法

    2.1模型制備采用Anderson方法制作壓力超負(fù)荷心肌肥厚大鼠模型[2]。術(shù)前禁食禁水12 h,稱重后,用戊巴比妥鈉(0.06 mg·g-1)腹腔注射麻醉[3],左肋緣沿腰大肌外緣做長約2 cm的一斜行切口,于腎動脈上方分離一小段腹主動脈,用4號手術(shù)線連同8號針頭共同結(jié)扎,然后抽去針頭,往腹腔滴約1 mL的青、鏈霉素溶液,關(guān)腹。對照組實行假手術(shù),只穿線不結(jié)扎。

    2.2給藥方法術(shù)后1周給藥,CGRP干預(yù)組腹壁皮下注射CGRP 8 μg·kg-1·d-1[4],對照組與縮窄組腹壁皮下注射與體重相匹配的生理鹽水,每天1次。

    2.3動脈收縮壓(SBP)的測定術(shù)后1周開始,每天同一時間用BP-6動物無創(chuàng)血壓測試儀檢測大鼠尾動脈動脈血壓,重復(fù)測量3次, 取平均值,以kPa(1 mm Hg=0.133 kPa)為單位。

    2.4心肌組織標(biāo)本處理給藥4周后,處死大鼠,取出心臟,去除心房及右心室組織,保留左心室及室間隔,去除左室壁脂肪和結(jié)締組織,生理鹽水清洗,濾紙吸干,稱重,計算左心系數(shù)(左室重/體重比,LVW/ BW, mg·g-1) 。由左心室游離壁中部,分別縱行切取部分心肌組織,制作常規(guī)HE染色切片,Olympus光學(xué)顯微鏡下觀察左心室肌組織結(jié)構(gòu)的變化,并進(jìn)行顯微照相。其余的左心室組織用于檢測心肌中TNF-α、ET的含量,操作步驟嚴(yán)格按放免試劑盒說明書進(jìn)行。

    3結(jié)果

    與對照組相比, 縮窄組大鼠 SBP、LVW/BW 及心肌中 TNF-α與 ET水平明顯升高(P<0.05), 心肌中 TNF-α、ET水平與左心系數(shù)呈正相關(guān)。CGRP干預(yù)組與縮窄組相比, SBP、LVW/BW 及心肌中TNF-α、 ET 水平均明顯降低(P<0.05)。左心室心肌組織病理學(xué)改變也發(fā)現(xiàn)CGRP組心肌纖維橫徑及細(xì)胞核較縮窄組縮小,間質(zhì)增生程度較縮窄組明顯減輕。

    4討論

    CGRP是迄今發(fā)現(xiàn)的舒血管作用最強(qiáng)的內(nèi)源性物質(zhì),我們的實驗通過外源性補(bǔ)充CGRP,來觀察CGRP對高血壓心肌肥厚形成過程的影響。結(jié)果表明,用CGRP干預(yù)后,心肌肥厚大鼠SBP、左心系數(shù)、心肌中TNF-α、ET的含量明顯降低,提示CGRP通過其降低血壓、拮抗心肌中TNF-α、ET的生成,從而逆轉(zhuǎn)心肌肥厚,這就表明通過外源性及時補(bǔ)充因壓力超負(fù)荷引起的CGRP不足,可以預(yù)防和逆轉(zhuǎn)高血壓心肌肥厚。其機(jī)制可能一方面通過減輕心臟后負(fù)荷, 從而改善血流動力學(xué)因素對心肌重構(gòu)的影響;另一方面可能通過降低心肌組織 ET、TNF-α合成和分泌,從而阻止TNF-α、 ET、CGRP、調(diào)節(jié)紊亂的發(fā)生,而起到抑制心肌肥厚的作用。CGRP又是機(jī)體內(nèi)源性的舒血管物質(zhì), 作為抗高血壓心肌肥厚的輔助用藥安全,無副作用,具有廣闊的臨床應(yīng)用前景。

    參考文獻(xiàn):

    [1]閆麗梅,趙興勝.血漿內(nèi)皮素和降鈣素基因相關(guān)肽與高血壓左室肥厚的關(guān)系研究[J].中國心血管病研究,2008,6(5):331-3.

    [1]Yan L M,Zhao X S.Plasma endothlin and calcitonin gene related peotide and the relationship between hypertensiveleft wentricular hypertrophy[J].ChinJCardiovascRev,2008,6(5):331-3.

    [2]陳斌.大鼠壓力超負(fù)荷誘導(dǎo)的心肌肥厚和射血分?jǐn)?shù)正常心衰中甲羥戊酸途徑相關(guān)酶的研究[D].杭州:浙江大學(xué),2014.

    [2]Chen B. Myocardial induced by pressure overload in rats and normal ejection fraction heart failure one hydroxyl valeric acid pathway related enzymes[D].Hangzhou:Zhejiang University,2014.

    [3]秦旭平, 龍光, 徐立朋,等.氯沙坦和培哚普利逆轉(zhuǎn)高血壓大鼠心血管重構(gòu)的比較[J].中國藥理學(xué)通報,2004,20(10):1107-11.

    [3]Qin X P,Long G,Xu L M,et al.Chlorine and sand without perindopril split reverse comparison of hypertensive cardiovascular remodeling in rats[J].ChinPharmacolBull,2004,20(10):1107-11.

    [4]李海英,劉子泉,佟長青,齊莉.高血壓大鼠心肌肥大及逆轉(zhuǎn)過程中相關(guān)因素的探討[J].中國應(yīng)用生理學(xué)雜志,2003,19(2):127-9.

    [4]Li H Y,Liu Z Q,Tong C Q,Qi L.Hypertensive rats myocardial hypertrophy and related factors in the process of reverse discussion[J].ChinJAppliedPhysiol,2003,19(2):127-9.

    文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A

    文章編號:1001-1978(2016)02-0294-02

    doi:10.3969/j.issn.1001-1978.2016.02.029

    作者簡介:張欣(1980-),女,博士生,講師,研究方向:心血管藥理學(xué),E-mail:zxcc.aa@163.com;薛明明(1973-),女,碩士,教授,研究方向:心血管藥理學(xué),通訊作者,Tel:0471-6657031,E-mail:happybird-nmg@163.com

    基金項目:內(nèi)蒙古自治區(qū)自然科學(xué)基金資助項目(No 2012MS1125)

    收稿日期:2015-09-25,修回日期:2015-10-22

    網(wǎng)絡(luò)出版時間:http://www.cnki.net/kcms/detail/34.1086.R.20160125.1557.058.html

    網(wǎng)絡(luò)出版地址:2016-1-25 15:57

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