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    血清IL-22水平與急性戊型肝炎病毒感染患者肝功能損害、疾病進(jìn)展及轉(zhuǎn)歸的相關(guān)性

    2016-07-28 01:33:24宋玉蓮白若岑
    肝臟 2016年5期
    關(guān)鍵詞:肝炎肝功能肝硬化

    宋玉蓮 白若岑

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    血清IL-22水平與急性戊型肝炎病毒感染患者肝功能損害、疾病進(jìn)展及轉(zhuǎn)歸的相關(guān)性

    宋玉蓮白若岑

    110032遼寧沈陽(yáng)遼寧中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心(宋玉蓮);中國(guó)醫(yī)科大學(xué)(白若岑)

    【摘要】目的探討血清白介素-22(IL-22)水平同急性戊型肝炎病毒(HEV)感染患者肝功能損害、病情及轉(zhuǎn)歸的相關(guān)性。方法研究對(duì)象為我院收治的62例急性HEV感染患者,其中32例伴有肝硬化(A組),30例為單純性HEV感染(B組),另選取同期在我院進(jìn)行健康體檢的30名健康志愿者作為健康對(duì)照組及20例單純性代償期肝硬化患者作為肝硬化對(duì)照組,對(duì)所有研究對(duì)象進(jìn)行血清干擾素-γ(IFN-γ)、IL-22、白介素-6(IL-6)檢驗(yàn),對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行對(duì)比分析。結(jié)果A、B兩組的IL-22水平均顯著高于健康對(duì)照組及肝硬化對(duì)照組(P<0.05);A組的IL-6水平顯著高于健康對(duì)照組及肝硬化對(duì)照組(P<0.05);A組患者中,有14例出現(xiàn)慢加急性肝功能衰竭(ACLF),18例未出現(xiàn)ACLF。伴ACLF患者的IL-22、IL-6水平均顯著高于不伴ACLF患者(P<0.05)。伴ACLF組患者治療9周后的IL-22水平明顯降低(P<0.05)。結(jié)論急性HEV感染引起的肝臟炎性損傷有IL-22的參與,IL-22水平的高低與患者病情的嚴(yán)重程度、預(yù)后情況存在密切聯(lián)系,臨床可將其作為評(píng)估HEV患者病情轉(zhuǎn)歸的有效指標(biāo)。

    【關(guān)鍵詞】肝功能損害;急性;HEV;血清IL-22

    急性戊型肝炎是由HEV感染引起的急性自限性肝臟疾病,HEV與其他肝炎病毒一樣,均主要由病毒介導(dǎo)的免疫反應(yīng)而引起損傷。存在慢性肝臟基礎(chǔ)疾病的患者在合并感染HEV后會(huì)造成肝病急劇進(jìn)展,導(dǎo)致嚴(yán)重的肝功能失代償、肝功能衰竭,最終造成預(yù)后不良[1]。HEV的致病機(jī)制主要為T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng),患者病情的加重與緩解均取決于Th細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子譜所產(chǎn)生的免疫應(yīng)答性質(zhì)及強(qiáng)度。IL-22由Th22、Th17細(xì)胞分泌的效應(yīng)分子,其發(fā)揮著抵御微生物入侵,修復(fù)組織損傷,促進(jìn)急性期反應(yīng)等作用[2]。本研究旨在明確IL-22水平變化與急性HEV感染患者病情、肝功能損害的相關(guān)性,現(xiàn)報(bào)道如下。

    資料和方法

    一、 一般資料

    研究對(duì)象為我院2010年10月—2015年10月收治的62例急性HEV感染患者。(1)納入標(biāo)準(zhǔn):HEV IgG滴度升高3倍以上,或HEV IgM陽(yáng)性;符合急性HEV感染診斷標(biāo)準(zhǔn),并經(jīng)臨床、超聲檢查、肝組織病理活檢確診;HEV感染前3個(gè)月無(wú)慢性乙型肝炎活動(dòng);單純HEV感染者無(wú)肝功能異?;蚋窝撞∈?。(2)排除標(biāo)準(zhǔn):合并潰瘍性結(jié)腸炎、銀屑病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡者;妊娠期女性;合并肝細(xì)胞癌或其他惡性腫瘤者;HCV、HIV、HAV及其它可引起肝臟急性炎癥的病毒感染者。62例患者中,32例合并肝硬化(A組),男27例,女5例,平均年齡(45.84±12.42)歲,30例為單純性HEV感染(B組),男24例,女6例,平均年齡(44.54±11.73)歲。另選取同期在我院進(jìn)行健康體檢的30名健康志愿者作為健康對(duì)照組,男25名,女5名,平均年齡(45.22±11.90)歲。選取20例單純性代償期肝硬化患者作為肝硬化對(duì)照組,男16例,女4例,平均年齡(45.37±11.74)歲。本研究通過(guò)了醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn),研究對(duì)象均知情,并簽署了知情同意書(shū)。

    二、 方法

    急性HEV感染患者入院后均行標(biāo)準(zhǔn)的抗病毒治療,收集患者的年齡、性別及住院期間的并發(fā)癥、常規(guī)生化指標(biāo)(WBC、PTA、PLT、Alb、ALT等)等臨床資料。同期將檢測(cè)剩余血清送入血清樣本庫(kù)保存,以備IL-22、IL-6、IFN-γ檢驗(yàn)。肝硬化對(duì)照組在入院時(shí)采集血清標(biāo)本,健康對(duì)照組在進(jìn)行健康體檢時(shí)采集血清標(biāo)本完成常規(guī)生化指標(biāo)及IL-22、IL-6、IFN-γ指標(biāo)檢測(cè)。

    IL-22、IL-6、IFN-γ指標(biāo)檢測(cè)方法:使用相應(yīng)的酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)試劑盒(IL-22、IL-6、IFN-γ)進(jìn)行檢驗(yàn),試劑盒由美國(guó)Ray Biotech 公司提供。室溫下嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,各樣本設(shè)復(fù)孔3個(gè),并設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔和空白對(duì)照,最終取3個(gè)復(fù)孔檢測(cè)結(jié)果的平均值。建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,并根據(jù)曲線計(jì)算出每個(gè)樣本的IL-22、IL-6、IFN-γ濃度。在450 nm的波長(zhǎng)下,使用全光譜酶標(biāo)儀檢測(cè)OD值。

    三、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

    研究數(shù)據(jù)運(yùn)用SPSS 20.0軟件處理,計(jì)數(shù)資料比較用卡方檢驗(yàn),計(jì)量資料比較用t檢驗(yàn),P<0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    結(jié)果

    一、 各組的IL-22、IL-6、IFN-γ水平結(jié)果比較

    A、B兩組的IL-22水平均顯著高于健康對(duì)照組和肝硬化對(duì)照組(P<0.05);A組的IL-6水平顯著高于健康對(duì)照組和肝硬化對(duì)照組(P<0.05);A組的IL-22、IL-6水平均顯著高于B組(P<0.05);4組的IFN-γ水平比較差異無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表1。

    二、ACLF與IL-22、IL-6、IFN-γ的關(guān)系

    A組患者中,有14例出現(xiàn)ACLF,18例未出現(xiàn)ACLF。伴ACLF患者的IL-22、IL-6水平均顯著高于不伴ACLF患者(P<0.05);伴ACLF與不伴ACLF患者的IFN-γ水平比較差異無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表2。

    三、 伴ACLF患者的IL-22水平變化

    對(duì)伴ACLF患者的IL-22水平進(jìn)行持續(xù)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè),每周進(jìn)行1次IL-22檢測(cè)。伴ACLF患者經(jīng)治療后,病情逐漸好轉(zhuǎn),出血、腹脹、乏力癥狀均顯著改善。伴ACLF組患者首次檢測(cè)的IL-22水平為(164.35±13.54) pg/mL,持續(xù)治療9周后,檢測(cè)的IL-22水平為(46.4±21.8) pg/mL,明顯低于首次檢測(cè)結(jié)果,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

    討論

    慢性肝炎病毒感染容易引起肝硬化和肝纖維化,對(duì)肝功能造成嚴(yán)重?fù)p害。國(guó)外研究資料顯示,肝硬化合并急性HEV感染后容易引起ACLF,而發(fā)生ACLF患者約1/2在3個(gè)月內(nèi)死亡?,F(xiàn)階段,臨床認(rèn)為急性HEV感染造成的炎癥主要與T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫性損傷有關(guān),但對(duì)于其具體的致病機(jī)制仍無(wú)完全明確的闡釋[3]。近期研究顯示[4],免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞Th22與Th17在功能、數(shù)量方面的平衡,及其分泌的關(guān)鍵效應(yīng)分子在肝炎病毒相關(guān)性肝病、移植排斥反應(yīng)、自身免疫性疾病的發(fā)生及發(fā)展過(guò)程中均發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。Th22和Th17細(xì)胞均會(huì)分泌一種重要的效應(yīng)分子IL-22,目前IL-22已被臨床證實(shí)在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、銀屑病等炎性疾病中發(fā)揮著組織修復(fù)、免疫調(diào)節(jié)、抗炎等功能,由于肝細(xì)胞等實(shí)質(zhì)細(xì)胞會(huì)特異性表達(dá)IL-22受體,所以IL-22在肝病中的作用也越來(lái)越受到臨床的關(guān)注[5]。

    關(guān)于IL-22與肝病關(guān)系的研究普遍以HBV和HCV引起的急慢性感染為焦點(diǎn),甚少有學(xué)者研究急性HEV感染患者的IL-22表達(dá)規(guī)律及臨床意義,并且對(duì)于IL-22在肝病中到底是發(fā)揮抗炎還是促炎作用均存在較大爭(zhēng)議。有學(xué)者認(rèn)為[6],IL-22在急性乙型肝炎的發(fā)生、發(fā)展中所發(fā)揮的作用以促炎為主,IL-22能夠刺激免疫細(xì)胞分化聚集達(dá)到清除被病毒感染肝細(xì)胞的目的,但是IL-22在慢性乙型肝炎的發(fā)生發(fā)展中所發(fā)揮的作用則以抗炎為主,其能促進(jìn)肝細(xì)胞增殖緩解慢性炎癥損傷。由于急性HEV感染與急性HBV感染較為相似,所以推測(cè)IL-22在急性HEV感染中所發(fā)揮的作用也可能以促炎為主,但具體是以組織修復(fù)作用還是以促炎作用為主,還與其自身濃度、局部環(huán)境、細(xì)胞來(lái)源等因素有關(guān)[7]。

    表1 4組研究對(duì)象的IL-22、IL-6、IFN-γ水平比較(±s,pg/mL)

    注:1)與健康對(duì)照組比較,P<0.05;2)與肝硬化對(duì)照組比較,P<0.05;3)與B組比較,P<0.05

    表2 伴ACLF者與未伴ACLF者的IL-22、IL-6、IFN-γ水平比較(±s,pg/mL)

    注:表示與不伴ACLF組比較,*P<0.05

    目前,臨床已證實(shí)IL-6是參與肝臟損傷修復(fù)過(guò)程的重要細(xì)胞因子,同時(shí)也是觸發(fā)CD4+T細(xì)胞向Th22細(xì)胞分化,并刺激Th22和Th17細(xì)胞分泌IL-22的調(diào)控因子,其與IL-22有共同的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,二者可發(fā)揮協(xié)同效應(yīng)[8]。IFN-γ是由Th1細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子,其具有介導(dǎo)CTL效應(yīng)的作用,IFN-γ的編碼基因與IL-22基因距離很近,且IL-22與IFN-γ轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)相同。在本研究中,選擇了IL-22及其來(lái)源細(xì)胞分化相關(guān)的細(xì)胞因子IL-6和轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)相同的IFN-γ,對(duì)其在急性HEV感染患者的表達(dá)規(guī)律進(jìn)行了分析。結(jié)果顯示,A、B兩組的IL-22水平均顯著高于健康對(duì)照組,A組的IL-22、IL-6水平均顯著高于B組(P<0.05)。說(shuō)明急性HEV感染確實(shí)會(huì)引起IL-22水平異常升高,而合并肝硬化的急性HEV感染患者的IL-22、IL-6水平比單純急性HEV感染患者更高,并且IL-22的升高幅度比IL-6更大,提示IL-22對(duì)病情的判斷能力可能比IL-6更加敏感和穩(wěn)定。研究結(jié)果還顯示,4組患者的IFN-γ水平比較差異均無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),說(shuō)明急性HEV感染并不會(huì)引起IFN-γ分泌增加,其并不會(huì)增加Th1型免疫反應(yīng)優(yōu)勢(shì),由此推測(cè)可能是因?yàn)門h17和Th22細(xì)胞在外周血的優(yōu)勢(shì)表達(dá)造成了Th1與Th17、T22細(xì)胞軸免疫失調(diào)。本研究結(jié)果還顯示,伴ACLF患者的IL-22、IL-6水平均顯著高于不伴ACLF患者,并且隨著ACLF患者病情的好轉(zhuǎn),IL-22的水平也會(huì)明顯降低[9],說(shuō)明IL-22參與了急性HEV感染后的嚴(yán)重肝損傷過(guò)程,其與患者的病情變化、預(yù)后情況有著密切的關(guān)系[10]。

    綜上所述,急性HEV感染引起的肝臟炎性損傷有IL-22的參與,IL-22水平的高低與患者病情的嚴(yán)重程度、預(yù)后情況存在密切聯(lián)系,臨床可將其作為評(píng)估HEV患者病情轉(zhuǎn)歸的有效指標(biāo)。

    參考文獻(xiàn)

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    (本文編輯:賴榮陶)

    通信作者:宋玉蓮, Email: 18102458079@163.com

    (收稿日期:2015-11-20)

    ·臨床與基礎(chǔ)研究·

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