熒光定量PCR檢測淋球菌、沙眼衣原體和解脲脲原體結(jié)果分析

張欠欠，仵恒立，胡軍婷，成俊珍，任　勇，楊　晗，馬　瑩

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熒光定量PCR檢測淋球菌、沙眼衣原體和解脲脲原體結(jié)果分析

張欠欠1，仵恒立1，胡軍婷1，成俊珍2，任勇2，楊晗1，馬瑩1

1.延安大學(xué)醫(yī)學(xué)院，延安716000；2.延安大學(xué)附屬醫(yī)院，延安716000

摘要：目的了解延安市皮膚性病科門診患者泌尿生殖道淋球菌(NG)、沙眼衣原體(CT)及解脲脲原體(UU)的感染現(xiàn)狀及其特點(diǎn)，為臨床提供依據(jù)。方法采用實(shí)時(shí)熒光聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)( FQ-PCR)對784例患者的泌尿生殖道分泌物的NG、CT和UU核酸進(jìn)行檢測。結(jié)果784例患者中，NG、CT和UU的陽性檢出率分別為15.43%、34.69%和30.87%，女性UU感染率明顯高于男性(P<0.01)，男性CT感染率明顯高于女性(P<0.05)，NG感染率男性雖高于女性，但無性別差異(P>0.05)。混合感染檢出率為19.64%，其中CT+UU雙重感染的陽性檢出率最高，為10.20%。不同年齡感染情況顯示，感染率以21～40歲年齡段最高。結(jié)論泌尿生殖道感染患者NG、CT和UU陽性檢出率不盡相同，陽性患者大多年齡在青壯年時(shí)期, 應(yīng)作為性傳播疾病防治工作中的重點(diǎn)對象?；旌细腥据^為常見，臨床應(yīng)進(jìn)行3種病原體的檢測。

關(guān)鍵詞：淋球菌；沙眼衣原體；解脲脲原體；實(shí)時(shí)熒光聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)

Supported by the Scientific Research Project of Henan Education Department (No. 14JK1836), the Yan’an University Youth Special Fund to Support the Project (UTI) Pathogens Detection (No. YDQ2013-03), and the 2015 Shaanxi Province College Students’ Innovation and Entrepreneurship Training Program (No. 1415)

淋球菌(Neisseria gonorrhoeae,NG)、沙眼衣原體(Chlamydozoa trachomatis,CT)和解脲脲原體(Ureaplasma urealyticum,UU)是目前引起性傳播疾病最常見的3種病原體，可引起尿道炎、附睪炎、子宮內(nèi)膜炎、盆腔炎及輸卵管炎等，嚴(yán)重的可導(dǎo)致不孕不育[1]。但由于檢測方法、檢測人群、數(shù)量及地區(qū)流行性的差異，各研究報(bào)告結(jié)果存在較大差異。為了解目前延安市皮膚性病科門診患者泌尿生殖道NG、CT和UU的感染狀況，對2013年7月至2014年12月784例泌尿生殖道標(biāo)本進(jìn)行了病原體檢測并對結(jié)果進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)分析，現(xiàn)報(bào)告如下。

1材料與方法

1.1研究對象選取2013年7月至2014年12月本院皮膚性病科門診患者784例，其中男480例，女304例，年齡16～71歲，平均年齡34.2±5.1歲。大多數(shù)患者有尿頻、尿痛、尿道刺癢及分泌物增多等癥狀，患者在檢測前均未服用抗生素治療。

1.2標(biāo)本采集所有標(biāo)本均按無菌操作進(jìn)行采集，男性取尿道分泌物，用細(xì)小無菌男性一次性棉拭子深入尿道約2～4 cm取分泌物，前列腺液由醫(yī)生按摩后取出；女性用無菌棉簽擦凈宮頸分泌物，再用無菌棉拭子插入宮頸內(nèi)，停留幾秒，旋動棉拭取出。所有采集好的標(biāo)本立即置入一次性專用試管中加蓋密閉備檢。

1.3檢測方法檢測均采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)(FQ-PCR)，NG、CT和UU檢測試劑盒由中山醫(yī)科大學(xué)安達(dá)基因診斷中心提供，有效期內(nèi)使用，操作及結(jié)果判斷嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。儀器為美國ABI公司7700自動熒光PCR檢測儀。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理所有數(shù)據(jù)采用SPSS16.0軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)。

2結(jié)果

2.1NG、CT和UU總的感染情況(見表1)784例患者中，總陽性率為80.99%，男女感染率性別差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，NG、CT和UU的陽性檢出率分別為15.43%、34.69%和30.87%，女性UU感染率明顯高于男性(P<0.01)，男性CT感染率明顯高于女性(P<0.05)，NG感染率男性雖高于女性，但無性別差異(P>0.05)。

2.2NG、CT和UU分類感染情況和年齡與性別分布(見表2和表3)結(jié)果顯示，單一感染檢出率為39.29%(308/784)，男性以CT檢出率最高，為21.25%，男女性別差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，女性以UU檢出率最高，為20.72%，其感染率明顯高于男性，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；混合感染檢出率為19.64%(154/784)，以CT+UU二重感染最高。不同年齡感染情況顯示，感染率以21～40歲年齡段最高。

表1　 NG、CT和UU總的感染情況/n(%)

表2　NG、CT、UU分類感染情況/n(%)

3討論

STD是目前國際上流行最廣的一類傳染病，在性病病原體中，NG、CT和UU所致的泌尿生殖系感染，已成為我國各地區(qū)主要的性傳播病癥[2]。常用的檢測方法包括涂片法、培養(yǎng)法和免疫法等由于其敏感性差，可靠性低，檢測時(shí)間長等缺點(diǎn)，無法及時(shí)準(zhǔn)確地給臨床提供依據(jù)。而熒光定量PCR操作簡便、反應(yīng)時(shí)間短、重復(fù)性好、結(jié)果準(zhǔn)確性和靈敏度高。

本次檢測結(jié)果顯示，784例患者中CT感染率最高(34.69%)，其次是UU(30.87%)和NG(15.43%)，與李百靈等[3]報(bào)道的西安地區(qū)CT感染率高于UU相一致，有文獻(xiàn)[4]報(bào)道CT 所致的泌尿生殖系感染是目前世界范圍內(nèi)最為流行的性傳播疾病，本文結(jié)果與上述觀點(diǎn)相符。表2結(jié)果顯示，單一感染檢出率為39.29%，低于國內(nèi)報(bào)道的54.27%[5]；混合感染檢出率為19.64%，與史云珍等[6]報(bào)道的

表3　784例患者的年齡與性別分布/n(%)

17.5%基本相似，但高于賀望嬌[7]的報(bào)道(10.59%)，可能是一些GU患者在治療后出現(xiàn)病情反復(fù)、遷延、久治不愈的一大原因?；旌细腥疽訡T與UU的二重感染率最高，這與文獻(xiàn)報(bào)道的CT與UU合并感染在混合感染中占首位相符[7-8]，UU本身并不致病，但當(dāng)合并感染CT，常引起男性的NGU和女性的宮頸炎。在性別感染率比較中，就診患者中女性UU感染率明顯高于男性(P<0.01)，而男性CT感染率高于女性(P<0.05)。原因可能是:第一，女性生殖系統(tǒng)生理特點(diǎn)造成感染后癥狀不明顯，無特異性，常被忽視而不能及時(shí)就診導(dǎo)致檢出率偏低，而男性更容易患無癥狀UU感染，導(dǎo)致男性UU感染的檢出率偏低；第二，女性的生理結(jié)構(gòu)更適合UU生存，也可能與生活習(xí)慣及社會角色不同有關(guān)，從而導(dǎo)致UU感染高發(fā)于女性。

不同年齡感染情況顯示，感染率以21～40歲年齡段最高，這與國內(nèi)外報(bào)道的NG、CT和UU感染人群主要集中在青壯年一致[9-10]，說明中青年就診者泌尿生殖道病原體陽性率高。這是由于該年齡段人群正處于性活躍期、流動性大，是重要傳染源和高危人群，可以增加混合感染的機(jī)率，因此應(yīng)作為性傳播疾病防治工作中的重點(diǎn)對象。由于NG、CT和UU感染是導(dǎo)致男女不孕不育的重要原因，而生殖道的混合感染比單一感染危害大，建議臨床醫(yī)師在診治泌尿生殖系疾病過程中，應(yīng)對3種病原體同時(shí)檢測，力求早發(fā)現(xiàn)、早治療，提高治愈率。

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DOI:10.3969/j.issn.1002-2694.2016.03.020

通訊作者：張欠欠，Email：zhangqianyd@163.com

中圖分類號：R374

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：C

文章編號：1002-2694(2016)03-0312-03

Corresponding author:Zhang Qian-qian, Email: zhangqianyd@163.com

收稿日期：2015-07-07；修回日期:2015-12-08

Detection and analysis of NG, CT and UU by fluorescence quantitative PCR

ZHANG Qian-qian1,WU Heng-li1,HU Jun-ting1,CHENG Jun-zhen2, REN Yong2,YANG Han1, MA Ying1

(1.MedicalCollege,Yan′anUniversity,Yan’an716000,China;2.Yan’anUniversityAffiliatedHospital,Yan’an716000,China)

Abstract:We investigated the prevalence of Neisseria gonorrhoeae (NG), Chlamydozoa trachomatis (CT) and Ureaplasma urealyticum (UU) infections in Yan′an, China. The genital tract infections in 784 patients were deteeted by using FQ-PCR for providing clinical treatment evidence of NG, CT and UU. The positive rates of NG, CT and UU were 15.43%, 34.69% and 30.87%, respectively. The incidence of Ureaplasma urealyticum (UU) was significantly higher in male group than in female group (P<0.01), while was lower in case of Chlamydozoa trachomatis (CT) infection (P<0.05). Mixed infection was 19.64%, CT and UU mixed infection was dominant in urogenital tract infection (UTI) patients (10.20%). This study also showed that infection rate in age group 21-40 years was higher. There was significant difference in positive rate of NG, CT and UU in Urogenital tract infection (UTI) patients. The most affected age group was young adults, indicating significant sexual transmitted diseases. Mixed infection was common, and more attention should be paid to these three kinds of pathogenic diseases detection clinically.

Keywords:Neisseria gonorrhoeae; Chlamydozoa trachomatis; Ureaplasma urealyticum; fluorescence quantitative PCR

陜西省教育廳科研項(xiàng)目(No.14JK1836),延安大學(xué)青年專項(xiàng)基金資助項(xiàng)目(No.YDQ2013-03),陜西省大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃項(xiàng)目(No.1415)