中性粒細(xì)胞3個(gè)平均參數(shù)在細(xì)菌感染中的臨床應(yīng)用

高淑芳，邵華卿，胡曉波

(上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬龍華醫(yī)院檢驗(yàn)科　200032)

中性粒細(xì)胞3個(gè)平均參數(shù)在細(xì)菌感染中的臨床應(yīng)用

高淑芳，邵華卿，胡曉波△

(上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬龍華醫(yī)院檢驗(yàn)科200032)

目的探討中性粒細(xì)胞3個(gè)平均參數(shù)在細(xì)菌感染中的臨床應(yīng)用。方法美國(guó)貝克曼-庫爾特公司LH750血細(xì)胞分析儀檢測(cè)細(xì)菌感染組(54例)、對(duì)照組(48例)的外周血中性粒細(xì)胞平均體積(MNV)、中性粒細(xì)胞平均傳導(dǎo)率(MNC)、中性粒細(xì)胞平均散射值(MNS)參數(shù)及白細(xì)胞計(jì)數(shù)(WBC)、血清超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)、降鈣素原(PCT)等感染指標(biāo)，并進(jìn)行比較。結(jié)果將細(xì)菌感染患者按WBC分為3組：WBC<10.0×109/L組，10.0×109/L≤WBC<15.0×109/L組，WBC≥15.0×109/L組。與對(duì)照組相比，3組患者M(jìn)NV明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。10.0×109/L≤WBC<15.0×109/L組、WBC≥15.0×109/L組患者與對(duì)照組比較，其MNC明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與對(duì)照組相比，WBC≥15.0×109/L組患者的MNS明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。WBC<10.0×109/L組、10.0×109/L≤WBC<15.0×109/L組MNS與對(duì)照組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，細(xì)菌感染患者按NE分為2組：NE<80%組；NE≥80%組；與對(duì)照組相比，NE≥80%患者M(jìn)NV明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，而MNC與MNS的變化不明顯(P>0.05)。細(xì)菌感染組MNV與hs-CRP、PCT相關(guān)系數(shù)分別為0.801、0.887，呈顯著正相關(guān)(P<0.05)，與WBC相關(guān)系數(shù)為0.509。結(jié)論中性粒細(xì)胞3個(gè)平均參數(shù)在細(xì)菌感染中能特異而靈敏地反映中性粒細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化，MNV與hs-CRP、PCT相關(guān)性較好，聯(lián)合檢測(cè)hs-CRP、PCT等指標(biāo)，對(duì)判斷細(xì)菌感染更有臨床價(jià)值。

中性粒細(xì)胞平均體積；中性粒細(xì)胞平均傳導(dǎo)；中性粒細(xì)胞平均散射；細(xì)菌感染

臨床上引起發(fā)熱的病因有很多，對(duì)臨床判斷造成一定困難。鑒定感染或非感染、病毒性或細(xì)菌性感染，除依靠臨床表現(xiàn)、生化、免疫、細(xì)菌學(xué)檢測(cè)外，血細(xì)胞分類計(jì)數(shù)和細(xì)胞形態(tài)觀察也起著重要作用[1]。細(xì)菌感染后，白細(xì)胞除數(shù)量上變化外，常伴隨細(xì)胞形態(tài)改變，如中性粒細(xì)胞出現(xiàn)中毒顆粒、空泡、核左移、染色質(zhì)疏松等。Beckman Coulter LH750血細(xì)胞分析儀使用體積、傳導(dǎo)、散射(VCS)技術(shù)分析白細(xì)胞，反映白細(xì)胞體積大小、細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)及胞質(zhì)內(nèi)顆粒和核結(jié)構(gòu)特征[2-4]。當(dāng)發(fā)生細(xì)菌感染時(shí)，白細(xì)胞計(jì)數(shù)(WBC)和中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)(NE)增多，并出現(xiàn)中性粒細(xì)胞核左移和中毒改變，進(jìn)而導(dǎo)致中性粒細(xì)胞平均體積(MNV)、中性粒細(xì)胞平均傳導(dǎo)率(MNC)、中性粒細(xì)胞平均散射值(MNS)參數(shù)變化。本研究擬通過對(duì)感染性疾病患者中性粒細(xì)胞3個(gè)參數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，找出其變化規(guī)律及與超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)、降鈣素原(PCT)的相關(guān)性，以便為臨床有效治療感染性疾病提供科學(xué)依據(jù)。

1資料與方法

1.1一般資料2014年11月1日至2015年6月30日上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬龍華醫(yī)院確診為細(xì)菌感染的54例患者納入細(xì)菌感染組，其中男30例，女24例，年齡24～87歲，中位年齡59歲；48例成年健康體檢者納入對(duì)照組，其中男26例，女22例，年齡22～54歲，中位年齡36歲。

1.2儀器與試劑美國(guó)貝克曼-庫爾特公司LH750血細(xì)胞分析儀及原裝配套試劑、定標(biāo)液、質(zhì)控液。按儀器說明書進(jìn)行校準(zhǔn)、質(zhì)量控制、保養(yǎng)及維護(hù)。

1.3檢測(cè)方法采集受試者空腹靜脈血2.0 mL于含乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)的真空采血管中，終濃度為20 mg/mL，充分混勻，2 h以內(nèi)檢測(cè)WBC、MNV、MNC、MNS、PCT、hs-CRP。

2結(jié)果

2.1不同WBC分類組與對(duì)照組結(jié)果比較將細(xì)菌感染患者按WBC分為3組：WBC<10.0×109/L組，10.0×109/L≤WBC<15.0×109/L組，WBC≥15.0×109/L組。與對(duì)照組相比，3組患者M(jìn)NV明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。10.0×109/L≤WBC<15.0×109/L組、WBC≥15.0×109/L組患者與對(duì)照組比較，其MNC明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與對(duì)照組相比，WBC≥15.0×109/L組患者的MNS明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。WBC<10.0×109/L組，10.0×109/L≤WBC<15.0×109/L組MNS與對(duì)照組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表1。

表1　不同WBC分類組與對(duì)照組結(jié)果比較±s)

注：與對(duì)照組比較，*P<0.05。

2.2不同NE分類組與對(duì)照組結(jié)果比較細(xì)菌感染患者按NE分為2組：NE<80%組、NE≥80%組；與對(duì)照組相比，NE≥80%患者M(jìn)NV明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，而MNC與MNS的變化不明顯(P>0.05)，見表2。

2.3細(xì)菌感染組各項(xiàng)指標(biāo)診斷性能比較細(xì)菌感染組MNV、PCT、hs-CRP、WBC的受試者工作特征(ROC)曲線下面積(AUC)比較，MNV為0.937，明顯高于WBC。另外，當(dāng)取截點(diǎn)為152.4時(shí)，其靈敏度與特異度分別為90.32%和84.44%，明顯高于其他指標(biāo)。計(jì)算相關(guān)系數(shù)，細(xì)菌感染組MNV與hs-CRP、PCT相關(guān)系數(shù)分別為0.801、0.887，呈顯著正相關(guān)(P<0.05)。與WBC相關(guān)系數(shù)為0.509，相關(guān)性不佳，見圖1和表3。

表2　不同NE分類組與對(duì)照組結(jié)果比較±s)

注：與對(duì)照組比較，*P<0.05。

圖1　 MNV、PCT、hs-CRP、WBC的ROC曲線

參數(shù)AUCCut-off值靈敏度(%)特異度(%)MNV0.937>152.40fL90.3284.44PCT0.880>1.52ng/mL82.2676.30hs-CRP0.850>18.05mg/L80.3075.60WBC0.554>15.00×109/L29.0388.15

3討論

白細(xì)胞為機(jī)體主要防御細(xì)胞，當(dāng)機(jī)體發(fā)生局限性輕度細(xì)菌感染時(shí)，WBC可在正常范圍內(nèi)，僅NE有所上升；中度細(xì)菌感染時(shí)，WBC可升高至(10～20)×109/L，NE升高，并伴有核左移；嚴(yán)重全身細(xì)菌性感染時(shí)，WBC可明顯升高，并可出現(xiàn)中毒顆粒、空泡、大小不均等病理改變[5]。本次研究發(fā)現(xiàn)，細(xì)菌感染者，MNV與對(duì)照組有明顯差異，特別是WBC<10.0×109/L組與對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，表明在WBC還未發(fā)生明顯變化情況下，中性粒細(xì)胞體積已發(fā)生了變化，可能是由于外周血中會(huì)出現(xiàn)體積、形態(tài)不同的不成熟粒細(xì)胞、活化粒細(xì)胞及成熟粒細(xì)胞，導(dǎo)致中性粒細(xì)胞大小不一，中性粒細(xì)胞平均體積增大。當(dāng)白細(xì)胞升高至10.0×109/L以上時(shí)，MNC與對(duì)照組存在明顯差異，可能是由于胞質(zhì)中出現(xiàn)中毒顆粒和空泡，以及胞核體積增大和染色質(zhì)疏松等核左移改變，這些改變導(dǎo)致核質(zhì)比和胞質(zhì)內(nèi)復(fù)雜性發(fā)生變化，以及外周血出現(xiàn)不同程度不成熟粒細(xì)胞(如桿狀核、幼粒細(xì)胞等)，中性粒細(xì)胞核質(zhì)比升高所致。MNS在感染組和對(duì)照組比較中，只有當(dāng)WBC≥15.0×109/L時(shí)，才存在明顯差異，可能是由于核左移后引起散射光減少而中毒顆粒增多引起散射光增大，散射值存在相互抵消，或由于中性粒細(xì)胞體積增大，胞內(nèi)單位體積內(nèi)顆粒數(shù)相對(duì)減少，且幼稚型中性粒細(xì)胞核染色質(zhì)較疏松[6]，導(dǎo)致數(shù)值上變化差異并無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。MNV、MNC和MNS參數(shù)變化與國(guó)內(nèi)研究結(jié)果基本一致[7-8]。當(dāng)MNV Cut-off值為152.4 fL時(shí)，診斷靈敏度和特異度分別為90.32%和84.44%，表現(xiàn)優(yōu)于CRP和PCT。CRP作為人類感染急性期反應(yīng)蛋白，其Cut-off值為18.05 mg/L時(shí)，診斷敏感度和特異度分別為80.30%和75.60%，均低于PCT。PCT是目前應(yīng)用較多的診斷膿毒血癥指標(biāo)，PCT Cut-off值為1.52 ng/mL時(shí)，診斷靈敏度和特異度分別為82.26%和76.30%，較國(guó)內(nèi)相關(guān)研究結(jié)果低。三者AUC分別為0.937、0.880和0.850。細(xì)菌感染組MNV與hs-CRP、PCT相關(guān)系數(shù)分別為0.801、0.887，呈顯著正相關(guān)，且相關(guān)性較好。聯(lián)合檢測(cè)hs-CRP、PCT能夠有效地幫助臨床進(jìn)行疾病診斷。

細(xì)菌感染，特別是急性細(xì)菌感染的準(zhǔn)確和快速診斷對(duì)臨床對(duì)癥治療意義重大，為明確診斷，一般方法為通過檢測(cè)WBC、NE%和絕對(duì)值、桿狀核計(jì)數(shù)升高等指標(biāo)，聯(lián)合人工顯微鏡下血細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查觀察中性粒細(xì)胞是否核左移、胞質(zhì)內(nèi)有無中毒顆粒、Dohle小體等提示是否存在急性細(xì)菌感染或敗血癥[9]，此外，還需做許多實(shí)驗(yàn)室檢查和輔助檢查，費(fèi)時(shí)費(fèi)力。雖然細(xì)菌培養(yǎng)陽性是診斷細(xì)菌感染的金標(biāo)準(zhǔn)，但受病原菌檢出率較低，且細(xì)菌培養(yǎng)周期較長(zhǎng)(一般最短需18～24 h培養(yǎng)出菌落)，4～7 d培養(yǎng)周期常滯后于病情變化等因素影響，臨床醫(yī)生常在獲得細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果前，經(jīng)驗(yàn)性大量使用抗菌藥物治療，從而加劇細(xì)菌耐藥性[10]，MNV、MNC和MNS數(shù)據(jù)源于血常規(guī)分析，兼具快速、客觀、準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)，有很好的臨床應(yīng)用前景。臨床上，有很多疾病可引起機(jī)體WBC升高，細(xì)菌感染最常見，但也并非所有感染者都會(huì)升高。同樣也不是所有WBC升高都由細(xì)菌感染引起。如能同時(shí)給予臨床MNV、MNC和MNS參數(shù)，對(duì)臨床疾病及時(shí)診斷將有較大輔助作用。此外，國(guó)外已有關(guān)于MNV、MNC和MNS參數(shù)在白血病、瘧疾診斷等方面的應(yīng)用研究[11-12]，在細(xì)菌感染預(yù)后判斷方面的應(yīng)用還有待進(jìn)一步研究。

[1]孟嬋群,徐偉文,影萍.發(fā)熱患者外周血白細(xì)胞形態(tài)觀察臨床意義[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志,2008,17(13)：2030．

[2]Chaves F,Tiemo B，Xu DS.Neutrophil volume distribution width;a new automated hematologic parameter for acute infection[J].Arch Pathol Lab Med,2006,130(3)：378-380．

[3]Chaves F,Tierno B,Xu D.Quantitative detemination of neutrophil VCS parameters by the Coulter automted hematology analyzer:new and reliable indicator for acute bacterial infection[J].Am J Clin Pathol,2005,124(3):440-444．

[4]許東升.血細(xì)胞分析儀臨床應(yīng)用進(jìn)展[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2008,31(7):747-750．

[5]熊立凡.臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)[M].3版.北京：人民衛(wèi)生出版社,2003:36-49．

[6]樂家新,王芳,王成彬.急性細(xì)菌感染時(shí)中性粒細(xì)胞體積、傳導(dǎo)率和光散射參數(shù)的變化與臨床意義[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2010，20(5):614-617.

[7]呂美艷,王明山,楊麗紅，等.細(xì)菌感染性疾病患者白細(xì)胞VCS參數(shù)的變化及臨床意義[J]．檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2007,22(5):578-580．

[8]金艷慧,王明山,楊麗紅，等.中性粒細(xì)胞體積與漿核復(fù)雜性在感染和應(yīng)激性疾病的變化及意義[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2009,32(3):326-330．

[9]葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].3版.南京:東南大學(xué)出版社,2006:134-135．

[10]Tromp M,Lansdorp B,Bleeker-Rovers CP,et al.Serialand panel analyses of biomarkers do not improve the prediction of bacteremia compared to one procalcitonin measurement[J].J Infe,2012，65(4):292-301.

[11]Bruno A,DelPoeta G,Venditti A,et al.Diagnosis of acute myeloid leukemia and system Coulter VCS[J].Haematologicat,1994，79(1):420-428．

[12]Briggs C,DaCosta A,Freeman L，et al.Development of an automated malaria discriminant factor using VCS technology[J].Am J Clin Pathol，2006,126(1):691-698．

2016-01-24修回日期：2016-03-26)

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.12.029

A

1673-4130(2016)12-1672-03

·臨床研究·