急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎患者治療前后外周血單核細(xì)胞NLRP3炎性體mRNA表達(dá)及血清IL-18水平的研究

丁煥發(fā)* 徐曉辰王尚云劉淑娟蘭立強(qiáng)韋涌濤

（1 青島市第八人民醫(yī)院內(nèi)分泌科，山東 青島 266100；2 青島市第八人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，山東 青島 266100）

急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎患者治療前后外周血單核細(xì)胞NLRP3炎性體mRNA表達(dá)及血清IL-18水平的研究

丁煥發(fā)1* 徐曉辰1王尚云2劉淑娟1蘭立強(qiáng)1韋涌濤2

（1 青島市第八人民醫(yī)院內(nèi)分泌科，山東 青島 266100；2 青島市第八人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，山東 青島 266100）

目的 檢測(cè)急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎（acute gouty arthritis，AGA）患者治療前后外周血單核細(xì)胞（peripheral blood monocytes，PBMCs）中NLRP3炎性體［NLRP3、凋亡相關(guān)斑點(diǎn)樣蛋白（ASC）、半胱天冬酶-1（caspase-1）］mRNA表達(dá)水平及血清白細(xì)胞介素（IL）-18水平的變化，探討該炎性體及IL-18在AGA發(fā)病中可能的作用機(jī)制。方法 用RT-PCR法檢測(cè)100名健康查體者（對(duì)照組，C）和100例AGA患者（觀察組，T）治療前（D0）及應(yīng)用藥物治療后第3天（D3）、第7天（D7）、第14（D14）天NLRP3炎性體mRNA表達(dá)水平，同時(shí)用ELISA法測(cè)定相應(yīng)IL-18水平。觀察組與對(duì)照組比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，一般生理指標(biāo)及血生化指標(biāo)用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。計(jì)量資料用（±s）表示。采用IBM SPSS 19.0軟件包對(duì)所有數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果 觀察組NLRP3 mRNA表達(dá)水平D0、D3及D7vs C顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），D14 vs C差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；觀察組各階段ASC mRNA表達(dá)水平與對(duì)照組相比顯著升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其中D0、D3及D7 vs C（P＜0.01）、D14 vs C（P＜0.05）；觀察組caspase-1 mRNA表達(dá)水平，D0及D3 vs C顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），D7及D14 vs C差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。觀察組D0、D3、D7、D14血清IL-18水平與對(duì)照組相比顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均為P＜0.01）。結(jié)論 NLRP3炎性體及IL-18在AGA患者治療過(guò)程中水平異常，提示它們?cè)贏GA發(fā)病中參與了炎性反應(yīng)過(guò)程，在炎癥機(jī)制中可能發(fā)揮了重要作用。

凋亡相關(guān)斑點(diǎn)樣蛋白；半胱天冬酶-1；NLRP3；炎性體；痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎

隨著社會(huì)的發(fā)展，人們的生活水平、飲食結(jié)構(gòu)及社交行為方式發(fā)生了很大的改變，同時(shí)人類壽命也在延長(zhǎng)，痛風(fēng)的患病率逐年上升，急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎（acute gouty arthritis，AGA）患病率隨年齡的增長(zhǎng)有逐漸增高的趨勢(shì)，且常伴有糖尿病、肥胖、心腦血管病、腎臟病等，發(fā)病高峰年齡為40歲左右，臨床上以男性患者多見，女性約占5%［1］，且多為絕經(jīng)期后婦女。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)單核/巨噬細(xì)胞系統(tǒng)在急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎啟動(dòng)、進(jìn)展及緩解中均發(fā)揮了關(guān)鍵作用，其中IL-1β是單鈉尿酸鹽（monosodium urate，MSU ） 晶體誘導(dǎo)炎癥的關(guān)鍵因子，NLRP3炎性體通過(guò)促進(jìn)IL-1β的生成在AGA發(fā)作中發(fā)揮不可替代的作用［2］，其介導(dǎo)的炎性因子的活化不僅涉及IL-1β，還包括IL-18。在AGA患者，血IL-18可能來(lái)源于軟骨和滑膜細(xì)胞以及內(nèi)皮細(xì)胞，在炎性反應(yīng)中發(fā)揮重要作用。本研究即對(duì)此進(jìn)行研究、探討，以期發(fā)現(xiàn)NLRP3炎性體及IL-18在AGA啟動(dòng)、進(jìn)展及緩解的各個(gè)階段的表達(dá)水平及意義，指導(dǎo)AGA的早期防治及優(yōu)化治療方案。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象。觀察組（T）：隨機(jī)選取符合以下診斷標(biāo)準(zhǔn)和剔除標(biāo)準(zhǔn)的患者100例（男95例，女5例），年齡（47.25±10.99）歲，全部來(lái)自本院2014年8月至2016年2月的門診患者。①急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎診斷標(biāo)準(zhǔn)：應(yīng)用美國(guó)風(fēng)濕病協(xié)會(huì)（ACR）1997年制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)。②入選和剔除標(biāo)準(zhǔn)：a.符合ACR診斷標(biāo)準(zhǔn)的急性原發(fā)性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎。b.排除心血管、腎臟、血液疾病、腫瘤疾病引起的繼發(fā)性痛風(fēng)。c.排除合并感染性疾病患者。d.排除自身免疫性疾病及全身系統(tǒng)疾病患者。e.年齡18～75歲。f.一般情況良好。g.未服用降尿酸藥物治療者。對(duì)照組（C）：隨機(jī)選取青島本地居民健康查體者100例（男95例，女5例），年齡（46.15±11.80）歲，排除高尿酸血癥患者。高尿酸血癥的診斷標(biāo)準(zhǔn)：是指正常嘌呤飲食狀態(tài)下，非同日2次空腹血清尿酸水平（37 ℃）男性＞420 μmol/L ，絕經(jīng)前女性＞360 μmol/L，絕經(jīng)后女性的診斷標(biāo)準(zhǔn)同男性。

1.2 治療方案：在低嘌呤飲食、足量飲水前提下，AGA藥物治療方案：①鎮(zhèn)痛：為主要治療措施。秋水仙堿片，服藥療程14 d：前3 d 0.5毫克/次，3次/天，餐后服；然后0.5毫克/次，2次/天，餐后服，連續(xù)用藥7 d；后4 d 0.5毫克/次，1次/晚，睡前服。依托考昔片，服藥療程10 d：前3 d 120毫克/次，1次/天，餐后服；3 d后60毫克/次，1 次/天，餐后服，連續(xù)用藥7 d。②堿化尿液：抑制尿酸在腎臟形成晶體，促進(jìn)尿酸腎臟排泄。尿pH值維持在6.2～6.8。給予口服枸櫞酸鉀鈉顆粒（逍適檸）2.5克/次，4次/天（三餐后及睡前）。治療過(guò)程中若出現(xiàn)肝、腎功能異常及胃腸道反應(yīng)則予以排除。

1.3 觀測(cè)指標(biāo)：①測(cè)定兩組的一般生理指標(biāo)：年齡（Age）、身高（BH）、體質(zhì)量（BW）、收縮壓/舒張壓（SBP/DBP）、腰圍（WC）、臀圍（HC）。計(jì)算腰臀比（WHR）及體質(zhì)量指數(shù)（BMI）。BMI=體質(zhì)量（kg）/身高（m）2。②測(cè)定兩組的空腹血清丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶（AST）、尿酸（UA）、空腹血糖（FPG）、三酰甘油（TG）、總膽固醇（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、C-反應(yīng)蛋白（CRP）、肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）。測(cè)定兩組全血白細(xì)胞總數(shù)（WBC）、中性粒細(xì)胞數(shù)（NEUT）、中性粒細(xì)胞百分比（NEUT%）。③測(cè)定觀察組治療前（第0天，D0）及治療后第3天（D3）、第7天（D7）、第14天（D14）PBMCs中NLRP3 mRNA、ASC mRNA及 caspase-1 mRNA。測(cè)定相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)的空腹血清IL-18水平。同時(shí)測(cè)定對(duì)照組上述指標(biāo)，與觀察組治療前指標(biāo)進(jìn)行比較研究。

1.4 主要檢測(cè)方法：所有入選者由專人進(jìn)行一般生理指標(biāo)測(cè)量并記錄。實(shí)驗(yàn)中血清ALT、AST、UA、FPG、TG、TC、LDL-C、HDL-C、CRP、 Cr、BUN的檢測(cè)用全自動(dòng)生化分析儀，IL-18的檢測(cè)采用ELISA試劑盒。PBMCs中NLRP3、ASC及 caspase-1 mRNA采用RT-PCR檢測(cè)。血分析采用SYSMEX XT-2000i全自動(dòng)血液分析儀檢測(cè)。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：觀察組與對(duì)照組NLRP3炎性體mRNA比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，一般生理指標(biāo)、血生化指標(biāo)及全血分析白細(xì)胞數(shù)等用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。計(jì)量資料用 （±s）表示。采用IBM SPSS 19.0軟件包對(duì)所有數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，以P＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

2 結(jié) 果

2.1 一般臨床資料及實(shí)驗(yàn)室檢查指標(biāo)比較：觀察組與對(duì)照組比較，兩組性別、Age、AST差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；與對(duì)照組相比，觀察組BH、BW、BMI、SBP、DBP 、WC、HC、WHR、FPG、UA、ALT、Cr、BUN、TG、TC、LDL-C、HDL-C、C-RP、WBC、NEUT、NEUT%均明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05～0.01），見表1。

表1 兩組一般資料及實(shí)驗(yàn)室檢查指標(biāo)水平（±s）

表1 兩組一般資料及實(shí)驗(yàn)室檢查指標(biāo)水平（±s）

注：*觀察組與對(duì)照組相比（T vs C）P＜0.01，#觀察組與對(duì)照組相比（T vs C）P＜0.05

項(xiàng)目　　組別觀察組（T）　　對(duì)照組（C）性別（Sex，Male/Female）　95/5　95/5年齡（Age，Year）　47.25±10.99　 46.15±11.80身高（BH，cm）　171.97±5.61* 162.82±6.34體質(zhì)量（BW，kg）　79.76±11.01*　 65.08±9.71體質(zhì)量指數(shù)（BMI，kg/m2）　26.87±3.54*　 24.48±2.87收縮壓（SBP，mm Hg）　138.96±14.90* 132.61±16.74舒張壓（DBP，mm Hg）　88.24±11.22*　 83.65±8.95腰圍（WC，cm）　96.77±8.29*　 87.10±8.90臀圍（HC，cm）　104.74±6.56* 101.11±7.65腰臀比（WHR）　0.92±0.05*　 0.86±0.05空腹血糖（FPG，mmol/L）　6.48±1.49*　 5.99±0.98尿酸（UA，μmol/L）　432.21±127.56* 275.93±69.47丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（ALT，U/L）　29.40±19.37* 20.05±13.18天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶（AST，U/L）　20.72±9.62　 19.79±7.27血肌酐（Cr，μmol/L）　83.37±28.59* 61.78±13.35尿素氮（BUN，mmol/L）　5.97±2.36*　 4.50±0.87三酰甘油（TG，mmol/L）　2.56±2.19*　 1.46±0.85總膽固醇（TC，mmol/L）　5.91±1.35*　 5.21±1.17低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C，mmol/L）　3.72±0.97*　 3.06±0.96高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C，mmol/L）　1.31±0.21*　 1.45±0.28 C-反應(yīng)蛋白（CRP，mg/L）　7.36±3.66*　 3.55±0.84白細(xì)胞總數(shù)（WBC，×109/L）　8.80±1.45*　 6.24±1.01中性粒細(xì)胞（NEUT，×109/L）　7.40±1.57*　 4.41±0.93中性粒細(xì)胞百分比（NEUT%）　0.84±0.10*　 0.70±0.07

2.2 兩組NLRP3 mRNA表達(dá)水平比較：觀察組NLRP3 mRNA表達(dá)水平D0、D3及D7vs C顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），D14 vs C差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；觀察組各階段ASC mRNA表達(dá)水平與對(duì)照組相比顯著升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其中D0、D3及D7 vs C（P＜0.01）、D14 vs C（P＜0.05）；觀察組caspase-1 mRNA表達(dá)水平，D0及D3vs C顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），D7及D14 vs C差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表2。

2.3 兩組IL-18水平比較：觀察組D0、D3、D7、D14血清IL-18水平與對(duì)照組相比顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均為P＜0.01）。見表3。

3 討 論

痛風(fēng)（Gout）是因嘌呤代謝障礙和（或）尿酸排泄減少、血UA持續(xù)升高而導(dǎo)致MSU 晶體析出并沉積于組織或器官引起的一組臨床癥候群，屬于代謝性風(fēng)濕?。?］。報(bào)道顯示，國(guó)內(nèi)痛風(fēng)的患病率目前在1%～3%，2009年山東沿海地區(qū)當(dāng)?shù)鼐用裢达L(fēng)患病率為1.96%，2007年～2008年美國(guó)痛風(fēng)患病率上升至3.9%［4］。AGA可發(fā)生于任何年齡，發(fā)病高峰年齡為40歲左右，且常伴有糖尿病、肥胖、心腦血管病、腎臟病等，患病率隨年齡的增長(zhǎng)有逐漸增高的趨勢(shì)。本研究中，與對(duì)照組相比，觀察組BH、BW、BMI、SBP、DBP 、WC、HC、WHR、FPG、UA、ALT、Cr、BUN、TG、TC、LDL-C、HDL-C均明顯升高（P＜0.01）亦支持上述觀點(diǎn)。AGA臨床上以男性患者多見，女性約占5%［1］，且多為絕經(jīng)期后婦女。AGA發(fā)作時(shí)疼痛劇烈，患者異常痛苦，嚴(yán)重影響日常工作和生活。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)單核/巨噬細(xì)胞系統(tǒng)在AGA啟動(dòng)、進(jìn)展及緩解中均發(fā)揮了關(guān)鍵作用，發(fā)作涉及IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α等多種炎性因子，其中IL-1β是MSU晶體誘導(dǎo)炎癥的關(guān)鍵因子，IL-18作為一個(gè)重要的調(diào)節(jié)因子，促進(jìn)及加速炎性反應(yīng)。

表2 兩組NLRP3 mRNA表達(dá)水平（±s）

表2 兩組NLRP3 mRNA表達(dá)水平（±s）

注：*觀察組與對(duì)照組相比（T vs C）P＜0.01，#觀察組與對(duì)照組相比（T vs C）P＜0.05

對(duì)照組（C）D0　D3　D7　D14 ASC mRNA　0.028±0.016*　0.030±0.020*　0.017±0.012*　0.013±0.007#　0.011±0.006 csapase -1 mRNA　0.047±0.030*　0.052±0.030*　0.113±0.057　0.124±0.066　0.119±0.061 NLRP3 mRNA　0.077±0.039*　0.086±0.046*　0.103±0.054*　0.123±0.078　0.130±0.070注：*觀察組與對(duì)照組相比（T vs C）P＜0.01，#觀察組與對(duì)照組相比（T vs C）P＜0.05 表3 兩組IL-18水平比較（±s）NLRP3炎性體mRNA　　觀察組（T）對(duì)照組（C）D0　D3　D7　D14 IL-18（pg/mL）　198.48±21.40*　177.75±22.04*　122.68±28.87*　74.74±17.46*　55.09±16.36*炎性因子　觀察組（T）

NLRP3炎性體，即Nod樣受體蛋白3 （nod-like receptor protein 3，NLRP3）炎性體是位于細(xì)胞內(nèi)的一種蛋白質(zhì)復(fù)合體，主要功能為活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1（Caspase-1）以間接調(diào)控IL- lβ、IL-18［5］、和IL-33等的成熟和分泌，具有調(diào)控機(jī)體炎性反應(yīng)的功能。NLRP3炎性體是由核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域樣受體（nucleotide-binding oligomerization domain-like receptors，NLRs）家族成員NLRP3 （NLR family，pyrin domain containing 3）、凋亡相關(guān)斑點(diǎn)樣蛋白（apoptosisassociated speck-like protein containing CARD，ASC）和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1（cysteine-requiring aspartate protease-1，caspase-1）組成的復(fù)合體，是內(nèi)源性或外源性危險(xiǎn)信號(hào)的胞質(zhì)內(nèi)感受器，是活化caspase-1的分子平臺(tái)，調(diào)控IL-lβ和IL-18等促炎細(xì)胞因子的成熟和分泌。IL-lβ是一個(gè)經(jīng)典的促炎性細(xì)胞因子，活化的IL-lβ與靶細(xì)胞上的IL-1受體結(jié)合，激活I(lǐng)L-1信號(hào)通路和髓樣分化因子（myeloid differentiation factor，MyD88）依賴的NF-κB通路，促進(jìn)IL-1等促炎因子轉(zhuǎn)錄，誘導(dǎo)機(jī)體炎性反應(yīng)。研究證實(shí)，IL-lβ是促進(jìn)多種代謝性疾病發(fā)生發(fā)展的重要炎性因子，阻斷其生物學(xué)效應(yīng)能有效緩解代謝性疾病的進(jìn)展。NLRP3是模式識(shí)別胞內(nèi)受體Nod樣受體蛋白家族的成員，廣泛表達(dá)于樹突細(xì)胞、單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞，具有識(shí)別病原體的功能。ASC是NLRP3炎性體的雙重銜接蛋白，能夠以某種橋梁的形式將NLRP3和caspase-1前體連接起來(lái)，最終形成具有酶活性的異二聚體caspase-1。caspase-1作為炎性體的效應(yīng)蛋白，能夠?qū)o(wú)活性的IL-18和IL-1β前體剪切為成熟的IL-18和IL-1β，促進(jìn)其成熟分泌。

目前研究認(rèn)為，NLRP3炎性體是MSU 導(dǎo)致痛風(fēng)的核心機(jī)制。Martinon等［6］研究顯示，NLRP3介導(dǎo)MSU誘導(dǎo)痛風(fēng)發(fā)生發(fā)展，其機(jī)制可能與MSU誘導(dǎo)K+外流有關(guān)，還可能與線粒體來(lái)源的活性氧（reactive oxygen species，ROS）釋放有關(guān)，溶酶體破裂也可能是MSU激活NLRP3炎性小體的機(jī)制之一。本研究結(jié)果顯示，AGA發(fā)病時(shí)及治療后第3天，NLRP3 mRNA、ASC mRNA及caspase-1 mRNA表達(dá)水平均顯著高于對(duì)照組（P＜0.01），說(shuō)明在炎癥早期，NLRP3炎性體參與了疾病過(guò)程。治療后第7天，患者NLRP3 mRNA、ASC mRNA表達(dá)水平仍高于對(duì)照組（P＜0.01），caspase-1 mRNA表達(dá)水平與對(duì)照組無(wú)明顯差異，提示在炎癥持續(xù)存在期間，NLRP3炎性體持續(xù)參與炎癥過(guò)程，隨病程進(jìn)行，炎癥消退過(guò)程中，抑制炎癥的調(diào)控因素可能逐漸出現(xiàn)。治療第14天NLRP3 mRNA及caspase-1 mRNA表達(dá)水平與對(duì)照組無(wú)明顯差異，ASC mRNA表達(dá)水平仍高于對(duì)照組（P＜0.05），較前已明顯降低，結(jié)果顯示AGA炎癥消退，趨于正常，ASC表達(dá)可能存在其他途徑及意義。

AGA的前炎性介質(zhì)來(lái)源于常駐的滑膜細(xì)胞和遷移的單核巨噬細(xì)胞，而NEUT的侵入和活化是最重要的環(huán)節(jié)。發(fā)病時(shí)關(guān)節(jié)滑液和滑膜中出現(xiàn)的大量NEUT甚至可與急性化膿性關(guān)節(jié)炎時(shí)相當(dāng)［7］。本研究中，發(fā)病時(shí)的WBC、NEUT、NEUT%及CRP均顯著高于對(duì)照組，提示AGA發(fā)病時(shí)WBC及NEUT在炎癥初期就參與了反應(yīng)。

IL-18是AGA炎性反應(yīng)過(guò)程中的重要炎性因子，其可能主要來(lái)源于痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎患者的軟骨和滑膜細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞［7］。IL-18發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)的活性成分，由單核/巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞和Kupffer細(xì)胞，以及一些成骨細(xì)胞和角質(zhì)形成細(xì)胞分泌，是在NLRP3炎性體介導(dǎo)caspase-1的活化，水解激活I(lǐng)L-18的前體釋放出來(lái)。作為AGA一個(gè)重要的調(diào)節(jié)因子，IL-18通過(guò)促進(jìn)NEUT的聚集，促進(jìn)炎性反應(yīng)，具有促進(jìn)T細(xì)胞增殖的作用，增強(qiáng)TH1細(xì)胞和NK細(xì)胞的細(xì)胞毒活性，是一種多效能炎性細(xì)胞因子［8］。IL-18最終作用是產(chǎn)生干擾素-γ，從而加速炎性反應(yīng)，成熟IL-18對(duì)IFN-γ的產(chǎn)生過(guò)程和對(duì)促溶細(xì)胞性NK細(xì)胞的活性有重要影響。本研究中，觀察組各階段血清IL-18水平與對(duì)照組相比顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均為P＜0.01），提示IL-18參與了AGA炎性反應(yīng)的全過(guò)程，在AGA啟動(dòng)、進(jìn)展及緩解中均發(fā)揮了重要作用。

總之，本研究結(jié)果表明，NLRP3炎性體及IL-18在AGA患者發(fā)病及治療過(guò)程中水平異常，提示它們?cè)贏GA發(fā)病中參與了炎性反應(yīng)過(guò)程，在炎癥機(jī)制中可能發(fā)揮了重要作用。結(jié)果亦提示，NLRP3炎性體及IL-18在炎癥過(guò)程存在與多種炎性因子的共同作用，相互影響，亦存在相關(guān)負(fù)向調(diào)節(jié)，它們?cè)谘装Y發(fā)生、進(jìn)展及緩解中的負(fù)面作用亦可能存在，需要在今后的研究中進(jìn)一步探討。

［1］ Wallace K，Riedel A，Joseph-Ridge N，et al.In creasing prevalence of gout and hyperuricemia over 10 years among older adults in a managed care population［J］.J Rheumatol，2004，31（8）:1582-1587.

［2］ Sidiropoulos PI，Goulielmos G，Voloudakis GK，et a1.Inflammasomes and rheumatic diseases: evolving concepts［J］.Ann Rheum Dis，2008，67（10）:1382-1389.

［3］ Riehette P，Bardin T.Gout［J］.Lancet，2010，375（9711）:318-328.

［4］ Zhu Y，Pandya BJ，Choi HK.Prevalence of gout and hyperuricemia in the US general population: the National Health and Nutrition Examination Survey 2007-2008［J］.Arthritis Rheum，2011，63（10）:3136-3141.

［5］ Akahoshi T.Pathologicalm echanisms of gouty arthritis［J］.Nihon Rinsho，2008，66（4）:705-710.

［6］ Martinon F，Petrilli V，Mayor A，et al.Gout-associated uric acid crystals activate the NALP3 inflammasome［J］.Nature，2006，440（7081）:237-241.

［7］ 伍滬生.痛風(fēng)與晶體性關(guān)節(jié)?。跰］.北京:人民衛(wèi)生出版社，2014:62.

［8］ Sugimoto T，Ishikawa Y，Yoshimoto T，et a1.Interleukin l8 acts on memory T helper cells type l to induce airway in flammation and hyper-responsiveness in a naive host mouse［J］.J Exp Med，2004，l99（4）:535-545.

Expression of NLRP3 Inflammasome mRNA in PBMCs and Serum Level of IL-18 of Patients with Acute Gouty Arthritis in the Course of Disease Process

DING Huan-fa1*， XU Xiao-chen1，WANG Shang-yun2， LIU Shu-juan1， LAN Li-qiang1， WEI Yong-tao2
（1 Department of Endocrinology， Qingdao Eighth People's Hospital， Qingdao 266100， China； 2 Laboratory Department， Qingdao Eighth People's Hospital， Qingdao 266100， China）

Objective To study the expression level of NLRP3 （NLR family， pyrin domain containing 3） inflammasome （NLRP3， ASC， caspase-1） mRNA in peripheral blood monocytes （PBMCs） and serum level of interleukin-18 （IL-18） of patients with acute gouty arthritis （AGA） in the course of it， and the roles of them in pathogenesis in AGA. Methods NLRP3 inflammasome mRNA was measured using reverse transcription-polymerase chain reaction （RTPCR） in PBMCs. The expression of NLRP3 inflammasome mRNA in PBMCs was compared between patients with AGA （T， n=100 ） and healthy controls （C， n = 100）. T consisted of four stages of disease process?: pretherapy （D0）， 3rd day after medications （D3）， 7th day after medications （D7） and 14th day after medications （D14）. IL-18 was measured accordingly using Enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA） in the two groups. The statistical data were analyzed by IBM SPSS 19.0 software. Result The expression of NLRP3 mRNA in D0， D3 and D7 increased significantly when compared to C（P＜0.01）. It was no significant difference in D14 when compared to C（P＞0.05）. The expression of ASC mRNA in AGA increased significantly when compared to healthy controls. D0， D3 and D7 vs C（P＜0.01）， D14 vs C（P＜0.05）. The expression of caspase-1 mRNA in D0 and D3 increased significantly when compared to C（P＜0.01）， while it was in D7 and D14 increased insignificantly when compared to C（P＞0.05）. Serum level of IL-18 in D0， D3， D7and D14 increased significantly when compared to C （P＜0.01）. Conclusion Dysregulated expression of the NLRP3 inflammasome and IL-18 level are involved in the inflammatory response and play key roles in the pathogenesis of the process of AGA.

Apoptosis-associated speck- like protein； Caspase-1； NLRP3； Inflamm-asome； Arthritis， gouty

R589.7

B

1671-8194（2016）14-0001-03

青島市衛(wèi)生科技發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目，項(xiàng)目編號(hào)：2014-WJZD103

E-mail： huanfadings@163.com