卵黃抗體在疾病防治中應(yīng)用的研究進(jìn)展

安芳蘭　李菁　張榮　武發(fā)菊　武永淑　董文教　馬全英　王凡　劉學(xué)榮

摘要 卵黃抗體是一種多克隆抗體，由禽類經(jīng)特異性抗原刺激后通過(guò)B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生并運(yùn)行至卵黃中所形成，具有強(qiáng)大的免疫功能。對(duì)卵黃抗體的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)、理化性質(zhì)、作用機(jī)理及其在各類動(dòng)物疾病治療預(yù)防方面的應(yīng)用進(jìn)行了綜述，并指出了目前存在的問(wèn)題。

關(guān)鍵詞 卵黃抗體；免疫；疾病治療；應(yīng)用

中圖分類號(hào) S855.3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 0517-6611（2016）05-068-04

Abstract Egg yolk antibody is a kind of polyclonalantibody by specific antigen stimulation of poultry， which is produced by B lymphocyte and migrated to the yolk of polyclonal antibody， with a strong immune function. In this research， we reviewed the application of structural characteristics， physicochemical property and action mechanism of egg yolk antibody in prevention treatment of animal disease. The existing problems were pointed at present.

Key words Egg yolk antibody； Immunity； Disease treatment； Application

卵黃抗體（IgY）又稱為卵黃免疫球蛋白（Egg yolk immunoglobulin），是禽類經(jīng)特異性抗原刺激，由B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生并移行至卵黃中的多克隆抗體，大多數(shù)為IgG，具有強(qiáng)大的免疫功能。因其具有穩(wěn)定性強(qiáng)、耐酸性、耐高溫、易于制備、可規(guī)?；a(chǎn)等優(yōu)點(diǎn)，目前卵黃抗體已被廣泛應(yīng)用于生物制品、功能食品以及獸醫(yī)等領(lǐng)域，且在動(dòng)物重大疾病的防控和治療方面具有非常廣闊的應(yīng)用前景。筆者從卵黃抗體的形成過(guò)程、結(jié)構(gòu)特點(diǎn)、理化性質(zhì)、作用機(jī)理和方向等方面分析了卵黃抗體在被動(dòng)免疫中的重要作用，并對(duì)其在各類動(dòng)物和人類疾病防治中的應(yīng)用進(jìn)行了闡述，并指出了目前存在的問(wèn)題。

1 卵黃抗體

1.1 卵黃抗體的形成

卵黃抗體是從免疫禽蛋中提取出的、針對(duì)特定抗原的抗體。法氏囊通過(guò)控制體液免疫應(yīng)答，誘導(dǎo)B細(xì)胞分化和成熟最終形成抗體，其大致過(guò)程如下：禽類受到外界抗原刺激后，體內(nèi)免疫系統(tǒng)會(huì)被激活，針對(duì)入侵的抗原會(huì)發(fā)生一系列免疫反應(yīng)并產(chǎn)生大量的特異性抗體。隨著血液循環(huán)，抗體流入到身體各個(gè)部位抑制抗原，保護(hù)機(jī)體免受危害。用同種抗原多次刺激母雞后，體內(nèi)產(chǎn)生的抗體會(huì)隨血液循環(huán)流經(jīng)卵巢，在卵巢受體的介導(dǎo)作用下抗體會(huì)逐步進(jìn)入到卵巢濾泡和輸卵管中，最終在卵黃中積聚并形成卵黃抗體[1]。

1.2 卵黃抗體的結(jié)構(gòu)

卵黃抗體（IgY）是卵生動(dòng)物所具有的免疫球蛋白，結(jié)構(gòu)呈Y字形，分子質(zhì)量約180 ku，包括2條相同的重鏈（H鏈）和2條相同的輕鏈（L鏈），通過(guò)二硫鍵將二者結(jié)合在一起。L鏈分子量為22～30 ku，H鏈分子量為60～70 ku，包括1個(gè)可變的VH區(qū)和4個(gè)不變區(qū)（CH1、CH2、CH3和CH4），沒有鉸鏈區(qū)，但是它含有鄰近包含脯氨酸和甘氨酸的CHlCH2和CH2CH3區(qū)域的邊界區(qū)域以及甘氨酸殘基，使得IgY的結(jié)構(gòu)更穩(wěn)定。

1.3 卵黃抗體的理化性質(zhì)

卵黃抗體（IgY）的等電點(diǎn)為5.7～7.6，對(duì)壓力穩(wěn)定，當(dāng)壓力高達(dá)4 000 kg/cm2時(shí)IgY的活性仍較高。IgY用不同的溫度熱處理不同時(shí)間后發(fā)現(xiàn)，隨著溫度和處理時(shí)間的增加，IgY與抗原結(jié)合的活性會(huì)降低，在60～70 ℃范圍內(nèi)比較穩(wěn)定，70 ℃下加熱90 min后活性顯著下降，高于80 ℃時(shí)大部分IgY已經(jīng)變性[2]。當(dāng)pH為3.5～11.0時(shí)，IgY活性比較穩(wěn)定，高于或低于這個(gè)范圍時(shí)IgY活性會(huì)迅速下降，這是因?yàn)樵趶?qiáng)酸或強(qiáng)堿環(huán)境中IgY上包括抗原結(jié)合位點(diǎn)的Fab部分構(gòu)象發(fā)生變化和破壞。當(dāng)IgY與胃蛋白酶發(fā)生反應(yīng)時(shí)活性不變，但與胰蛋白酶或胰凝乳蛋白酶發(fā)生反應(yīng)時(shí)活性會(huì)顯著降低。此外，卵黃抗體能耐受高滲環(huán)境且具有反復(fù)凍融的特性[3]。

1.4 卵黃抗體的優(yōu)點(diǎn)

IgY具有較多的抗原表位，哺乳動(dòng)物抗原的抗體不會(huì)與之發(fā)生反應(yīng)，也不會(huì)與Fc受體結(jié)合，因此不會(huì)在免疫檢測(cè)過(guò)程中產(chǎn)生假陰性或假陽(yáng)性結(jié)果。IgY對(duì)疾病的治療具有療效高和作用快的特點(diǎn)，不會(huì)產(chǎn)生耐藥菌和繼發(fā)感染現(xiàn)象，對(duì)病原具有特異性。當(dāng)IgY發(fā)生作用后，機(jī)體會(huì)當(dāng)做營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)將其分解吸收，無(wú)毒副作用，也不會(huì)有有害物質(zhì)殘留。家禽發(fā)生有效免疫所需要的抗原劑量小，所產(chǎn)生的卵黃抗體在機(jī)體內(nèi)能長(zhǎng)時(shí)間維持在較高水平。此外，母雞飼養(yǎng)較為方便，且具有雞蛋均一性好、收集方便快捷和價(jià)格便宜等優(yōu)點(diǎn)，并在提取卵黃抗體時(shí)無(wú)需采集動(dòng)物血液，對(duì)動(dòng)物不會(huì)造成任何損傷，也符合動(dòng)物保護(hù)原則的要求。

1.5 卵黃抗體的作用機(jī)理

特異性IgY抵御病原保護(hù)機(jī)體健康，其作用機(jī)理主要有以下方面：

①抑制病毒感染細(xì)胞。卵黃抗體與病毒顆粒表面多個(gè)受體結(jié)合時(shí)會(huì)破壞病毒的結(jié)構(gòu)，影響病毒膜與細(xì)胞表面的融合，抑制病毒核酸在細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制。IgY也可以黏附于病毒衣殼上，抑制病毒的生長(zhǎng)繁殖。

②抑制病原菌?？贵w分子黏附于病原菌的菌毛上，抑制病原菌在腸道壁上發(fā)揮作用，也使非腸道菌失去黏附宿主細(xì)胞的能力，將病原菌的完整性破壞并抑制其增殖。

③抗內(nèi)毒素。卵黃抗體能夠中和細(xì)菌、霉菌等所產(chǎn)生毒素的毒性，抑制巨噬細(xì)胞分泌腫瘤壞死因子，減輕炎癥反應(yīng)，還會(huì)抑制內(nèi)毒素與靶細(xì)胞之間的結(jié)合，避免不良后續(xù)反應(yīng)與繼發(fā)感染的發(fā)生。

④其他作用。有的IgY可被腸道消化酶降解為結(jié)合片段，該片段中包含抗體易被腸道吸收的Fab，IgY進(jìn)入血液后與特定病原菌黏附因子結(jié)合，穩(wěn)定區(qū)保留在腸道內(nèi)但會(huì)失去對(duì)易感細(xì)胞的致病性。

2 卵黃抗體在疾病防治中的應(yīng)用

2.1 在人類疾病防治中的應(yīng)用

目前，IgY被越來(lái)越廣泛地用于人的病毒性疾病與腫瘤的防治中，抗輪狀病毒雞卵黃免疫球蛋（百貝）對(duì)小兒輪狀病毒腸炎的治療效果很好[4]。Tsukamoto等[5]從禽流感病毒中提取生產(chǎn)的抗A/H1N1 2009的IgY，對(duì)人和豬的病毒株具有較強(qiáng)的交叉反應(yīng)，能在體外中和A/H1N1病毒。幽門螺桿菌是誘發(fā)胃炎及胃潰瘍發(fā)生的主要病原體，耐藥菌株的出現(xiàn)給該病的治療帶來(lái)難度，抗幽門螺桿菌IgY可以阻斷該菌對(duì)胃黏膜的黏附及損傷。研究發(fā)現(xiàn)，16 mg/mL的IgY可以完全抑制細(xì)菌生長(zhǎng)，有望成為替代抗生素的新型制劑[6]。Vaillant等[7]制備的抗人類免疫缺陷病毒（HIV）gp120IgY可特異性結(jié)合HIVgp120，為艾滋病的預(yù)防和治療帶來(lái)新途徑。IgY具有較高的特異性與穩(wěn)定性，在對(duì)哺乳動(dòng)物高保守蛋白的腫瘤靶向治療、疾病特異性檢測(cè)及放射免疫顯像與治療等方面的研究有望取得進(jìn)展。

2.2 在豬病防治中的應(yīng)用

仔豬腹瀉是困擾豬養(yǎng)殖業(yè)的難題之一，給養(yǎng)豬業(yè)帶來(lái)了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。以前，人們通過(guò)注射抗生素或疫苗治療預(yù)防仔豬腹瀉，但抗生素的長(zhǎng)期使用容易產(chǎn)生耐藥性，導(dǎo)致其療效下降。仔豬通過(guò)母乳獲得被動(dòng)免疫保護(hù)，但斷奶后母源抗體會(huì)急劇下降，導(dǎo)致其免疫力降低，極易感染大腸埃希菌或其他病原引發(fā)的仔豬腹瀉，通過(guò)在飼料中添加針對(duì)某些特定疾病的IgY，口服IgY使其獲得有效的被動(dòng)免疫保護(hù)。用豬流行性腹瀉病毒（PEDV）對(duì)仔豬進(jìn)行攻毒試驗(yàn)，對(duì)腹瀉仔豬口服IgY，結(jié)果表明對(duì)照組呈水樣腹瀉直至脫水而死，病死率為100%，而服用IgY的仔豬的腹瀉癥狀顯著減輕，83.3%的仔豬在5 d后恢復(fù)正常[8]。

豬傳染性胃腸炎（TGE）是另一個(gè)困擾養(yǎng)豬業(yè)的難題。TGE可致2周齡的仔豬大量死亡，在發(fā)生TGE的2個(gè)豬場(chǎng)口服IgY的仔豬死亡率僅為17.65%，對(duì)照組為63.16%，差異顯著[9]。引起TGE的主要病原菌之一就是幽門螺旋桿菌，研究表明口服幽門螺旋桿菌IgY可以減輕腸道炎癥。

豬鏈球菌主要感染豬的消化道、上呼吸道和生殖道，臨床病癥為敗血性和局灶性淋巴結(jié)化膿。豬鏈球菌IgY的研制也為豬鏈球菌病的防治提供了新手段，可用地方流行性的豬鏈球菌制備疫苗免疫雞獲得特定的高免IgY，專門針對(duì)地方流行性鏈球菌，具有高效、方便的特點(diǎn)。用豬鏈球菌ST17I株活菌免疫母雞后，其IgY的免疫效價(jià)可達(dá)1∶210，對(duì)發(fā)病豬注射豬鏈球菌高免IgY，可以有效控制豬鏈球菌病的發(fā)生，保護(hù)率可達(dá)100%[10]。豬圓環(huán)病毒病可以引起斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征，是引起豬免疫障礙重要傳染病之一。索江華等[11]制備的豬圓環(huán)病毒2型高免IgY，對(duì)攻毒豬圓環(huán)病毒病豬的治愈率可達(dá)96%。綜上所述，抗菌性IgY的研制在一定程度上解決了抗生素依賴性問(wèn)題，顯著降低了抗生素的使用率，為預(yù)防與治療細(xì)菌性疾病提供新視角。

2.3 在牛病防治中的應(yīng)用

引起奶牛乳腺炎病的主要致病菌有金黃色葡萄球菌、無(wú)乳鏈球菌和大腸桿菌。奶牛乳腺炎是奶牛養(yǎng)殖業(yè)中最嚴(yán)重疾病之一：發(fā)病率最高、流行最快、損失最大。目前常用的防治手段是注射抗生素，但是這會(huì)使其抗藥性和耐藥性增強(qiáng)，并且會(huì)造成動(dòng)物體內(nèi)藥物的殘留，間接危害人類健康。王林會(huì)等[12]評(píng)價(jià)了金黃色葡萄球菌外毒素特異性卵黃抗體（IgYtoxins）及5、8、336型金黃色葡萄球菌莢膜特異性卵黃抗體（IgYT5、IgYT8及IgYT336）聯(lián)合使用對(duì)奶牛乳房炎的治療效果。此外，口服IgY除了對(duì)腸道疾病有很好的效果，對(duì)非腸道疾病也有顯著效果。Dahlen等[13]應(yīng)用含IgY的全蛋口服治療小牛的乳房炎，療效顯著。輪狀病毒可以感染豬、牛、犬、貓等的幼齡動(dòng)物，德國(guó)和日本分別研制抗輪狀病毒和抗大腸桿菌多價(jià)卵黃抗體，經(jīng)口服后可以很好地治療牛輪狀病毒腹瀉病和犬、貓等的輪狀病毒腹瀉病[14]。

2.4 在禽類疾病防治中的應(yīng)用

目前，國(guó)內(nèi)應(yīng)用IgY防治禽類疾病的成功案例越來(lái)越多，雞養(yǎng)殖業(yè)中最為常見的疾病是傳染性法氏囊（IBD）和新城疫（ND），二者對(duì)雞的混合感染率高達(dá)70%～80%，致死率在80%以上。張倫[14]制備的抗IBD病毒的卵黃抗體用于動(dòng)物的攻毒保護(hù)試驗(yàn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)發(fā)病雞的保護(hù)率在80%以上，可以防止同舍傳染，臨床上用該卵黃抗體對(duì)某雞場(chǎng)的11批自然發(fā)病雞進(jìn)行治療，對(duì)發(fā)病動(dòng)物的保護(hù)率與張倫[14]的動(dòng)物攻毒保護(hù)試驗(yàn)結(jié)果相吻合，且發(fā)病后治療越早效果越好。王帥等[15]對(duì)雞免疫接種ND病毒，檢測(cè)其抗體效價(jià)，確定了制備抗雞IBD與ND高免卵黃抗體的最佳免疫程序，制備的高免卵黃抗體具有很好的臨床試驗(yàn)治療效果。宋陽(yáng)[16]用新城疫油佐劑滅活疫苗和新城疫高免卵黃抗體聯(lián)合免疫雞群，24 h后連續(xù)7 d檢測(cè)免疫雞體內(nèi)的抗體水平，發(fā)現(xiàn)自免疫24 h后體內(nèi)的抗體處于較高水平，且能維持較長(zhǎng)時(shí)間，與單獨(dú)使用疫苗免疫組相比，不會(huì)出現(xiàn)抗體陰性期，因此該方法可起到治療和緊急預(yù)防的目的，但I(xiàn)gY與疫苗聯(lián)合免疫時(shí)會(huì)出現(xiàn)所用疫苗不被抗體中和的現(xiàn)象。

卵黃抗體與滅活疫苗聯(lián)合免疫雞群可以消除疫苗免疫后的抗體空白期，對(duì)發(fā)病雞起到緊急治療和預(yù)防的作用。劉春紅等[17]采用高效價(jià)的禽流感（H5N亞型RE5株）卵黃抗體和禽流感（H5N亞型RE5株）滅活疫苗同時(shí)接種從未接受疫苗免疫的雞群后，連續(xù)檢測(cè)免疫雞體內(nèi)抗體水平，發(fā)現(xiàn)這種聯(lián)合免疫方式彌補(bǔ)了單獨(dú)使用流感疫苗后6 d內(nèi)的抗體空白期，起到了緊急預(yù)防的作用。目前，對(duì)卵黃抗體對(duì)疫苗免疫效果的影響仍在不斷研究中。

2.5 在水產(chǎn)動(dòng)物疾病防治中的應(yīng)用

目前，在水產(chǎn)動(dòng)物養(yǎng)殖過(guò)程中抗生素的濫用不僅導(dǎo)致動(dòng)物產(chǎn)品中的藥物殘留，而且增加了細(xì)菌對(duì)抗生素的抵抗力，尋找安全、高效的抗生素替代品迫在眉睫，用卵黃抗體防治水產(chǎn)動(dòng)物疾病的研究報(bào)道較少，但因其具有療效確切、使用安全、無(wú)毒副作用、制備工藝簡(jiǎn)單、生產(chǎn)成本低等優(yōu)點(diǎn)，在防治水產(chǎn)動(dòng)物疾病方面逐漸受到重視。經(jīng)口感染是水產(chǎn)動(dòng)物感染病原體的主要途徑之一，因此口服卵黃抗體在動(dòng)物胃腸道中不僅可以直接中和病原體，而且在被胃蛋白酶和胰蛋白酶降解后，其具有免疫活性的Fab片段仍然能發(fā)揮免疫作用。大量研究表明，口服IgY對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物疾病有顯著療效。

吳建[18]闡述了IgY在水產(chǎn)動(dòng)物易感的幾種病毒（如白斑綜合征病毒（WSSV）、嗜水氣單胞菌、遲緩愛德華菌及鰻利斯頓菌）中的應(yīng)用，將提純的病毒或細(xì)菌接種蛋雞，收獲抗體后免疫水產(chǎn)動(dòng)物螯蝦、大菱鲆和中華鱉等發(fā)現(xiàn)均具有有效的保護(hù)作用，免疫保護(hù)率達(dá)83.3%～100.0%。周永強(qiáng)等[19]用滅活的鰻利斯頓菌聯(lián)合弗氏佐劑分3次免疫蛋雞，收集卵黃并分離純化，得到濃度8.93 mg/mL、效價(jià)1∶1 024的IgY；攻毒試驗(yàn)結(jié)果表明，混合注射鰻利斯頓菌和特異性IgY后，IgY的保護(hù)率為33.3%，說(shuō)明抗鰻利斯頓菌IgY能一定程度延長(zhǎng)鰻利斯頓菌感染后克氏原螯蝦的存活時(shí)間，并降低克氏原螯蝦的死亡率。

使用IgY替代哺乳動(dòng)物血清、初乳的抗體及單克隆抗體可以降低治療成本。從IgY的來(lái)源來(lái)看，由于雞與哺乳動(dòng)物有著明顯的種屬差異，禽類的病原體對(duì)哺乳動(dòng)物通常無(wú)致病性，避免了使用哺乳動(dòng)物血清抗體帶來(lái)的交叉感染；對(duì)哺乳動(dòng)物蛋白而言，在禽體內(nèi)能更高效地刺激其產(chǎn)生免疫應(yīng)答，產(chǎn)生大量IgY。此外，IgY不能與人的Fc受體或哺乳動(dòng)物體內(nèi)的補(bǔ)體結(jié)合，因此應(yīng)用IgY可以避免這些因素在疾病診斷過(guò)程中造成的干擾。

2.6 在毛皮動(dòng)物疾病防治中的應(yīng)用

目前，毛皮動(dòng)物（包括兔、狐貍、水貂、貉）易感的幾種重大疾病尚無(wú)完全治療的有效藥物。兔瘟一般呈暴發(fā)性流行，是由兔瘟病毒引起的一種熱性、急性、敗血性和毀滅性的傳染病，發(fā)病率和死亡率都很高，使得每年養(yǎng)兔業(yè)遭受巨大的經(jīng)濟(jì)損失。湯少偉[20]制備的兔瘟IgY顯示出較好的預(yù)防和治療效果，可以100%緊急預(yù)防兔瘟的發(fā)生，對(duì)兔瘟的早期治愈率可達(dá)80%。譚婷婷[21]采用分離株水貂細(xì)小病毒MEVZYL1免疫蛋雞，并利用CHCl3和飽和（NH4）2SO4結(jié)合的方法提純IgY，HI效價(jià)可維持在9log2以上，為水貂MEV的預(yù)防和治療奠定了基礎(chǔ)。莊金秋等[22]用水貂犬瘟熱CDV分離毒作為抗原免疫蛋雞制備IgY，結(jié)果表明IgY的最高抗體滴度與IgG接近，3免后3～5 d可開始持續(xù)收集卵黃制備IgY。應(yīng)用IgY防治特種毛皮動(dòng)物疾病，可以避免同源或近源材料帶毒而導(dǎo)致本動(dòng)物發(fā)病的潛在危險(xiǎn)，對(duì)于有效降低毛皮動(dòng)物疾病爆發(fā)和減少經(jīng)濟(jì)損失具有重要意義。

2.7 在被動(dòng)免疫防治細(xì)菌性腸道感染中的應(yīng)用

引起腸道感染的致病菌很多，且在臨床上被不斷發(fā)現(xiàn)。國(guó)內(nèi)常見的引起腸道感染的致病菌包括沙門氏菌屬、鄰單胞菌屬、致病性大腸桿菌（EPEC）和金黃色葡萄球菌等，而沙門氏菌引起的腸道感染在世界范圍內(nèi)是一個(gè)重大的公共衛(wèi)生難題。

被動(dòng)免疫是有活性的體液免疫以現(xiàn)成的抗體形式從一個(gè)個(gè)體轉(zhuǎn)移到另一個(gè)個(gè)體。被動(dòng)免疫可以自然發(fā)生，從母體轉(zhuǎn)移到后代，也可以人工誘導(dǎo)，使得特定病原體或毒素的高水平抗體從免疫個(gè)體中獲得或從感染的病人中獲得。來(lái)自被動(dòng)免疫的免疫力一般持續(xù)的時(shí)間較短，只要抗體還在有機(jī)體內(nèi)，它會(huì)提供直接保護(hù)，在人類和其他動(dòng)物中為了建立抵抗病毒和細(xì)菌性病原體的保護(hù)性免疫力，最好的方法就是預(yù)先形成特定的抗體，控制耐藥生物數(shù)量的增加。此外，被動(dòng)免疫也可以用來(lái)抵抗對(duì)抗生素治療沒有響應(yīng)的有機(jī)體。IgY在被動(dòng)免疫中的使用已經(jīng)被廣泛研究。KovacsNolan J等[23]利用從免疫母雞卵黃中制備的免疫球蛋白，預(yù)防和治療感染彎曲桿菌空腸的雞，結(jié)果表明口服抗彎曲桿菌空腸IgY可能是工業(yè)或農(nóng)業(yè)上消除這種感染的主要預(yù)防和治療方法。Si W等[24]研究了口服抗腸炎卵黃抗體對(duì)沙門氏菌污染的蛋雞的影響，結(jié)果表明口服包含腸炎沙門氏菌特異性抗體的全蛋粉會(huì)減少腸炎沙門氏菌污染蛋雞的概率，并且為控制沙門氏菌腸炎感染提供一個(gè)潛在工具。Cook M E等[25]研究了腸炎沙門氏菌特異性IgY的接種對(duì)細(xì)菌排泄物脫落的影響，結(jié)果表明腸炎沙門氏菌特異性IgY在減少沙門氏菌對(duì)市場(chǎng)上老齡化肉雞的侵入具有良好效果。盡管IgY用于禽類被動(dòng)免疫的實(shí)例很多，但是因?yàn)闃?biāo)準(zhǔn)化IgY的生產(chǎn)成本較高，因此用最有效的方式生產(chǎn)高度特異性的IgY是證明其規(guī)模化應(yīng)用的關(guān)鍵，如通過(guò)提高免疫刺激性效果和佐劑的選擇來(lái)實(shí)現(xiàn)。這可能需要開發(fā)IgY對(duì)家禽常見病原體的混合性微生物。隨著對(duì)微生物抗生素研究阻力的增大，加強(qiáng)特異性IgY抵抗病原微生物方面的研究已經(jīng)成為最亟待解決的問(wèn)題。

3 存在問(wèn)題及展望

IgY作為一種新型抗體，已用于各種病原的檢測(cè)、疾病的預(yù)防及治療中。然而，對(duì)IgY的臨床推廣應(yīng)用還存在一系列問(wèn)題。

研究表明，IgY對(duì)革蘭氏陰性菌有抑制作用，然而對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌的研究卻鮮少報(bào)道，其作用效果還需要深入研究。半衰期短是IgY臨床應(yīng)用所面臨的另一個(gè)瓶頸，IgY在新生仔豬血清中的半衰期只有1.85 d，遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于哺乳動(dòng)物IgG的半衰期（12～14 d），仔豬對(duì)IgY的吸收量會(huì)隨著日齡的增加而逐漸減少。此外，IgY含有大量的脂類和雜蛋白，無(wú)法直接注射進(jìn)仔豬體內(nèi)并使之吸收，還會(huì)引起過(guò)敏反應(yīng)等問(wèn)題，IgY的分離需要除去脂蛋白并恢復(fù)水溶性部分（WSF），然后從其他卵黃球蛋白中純化出IgY，提取質(zhì)量（抗體活性的保存、抗體的純度和恢復(fù)）、提取規(guī)模（實(shí)驗(yàn)室或工業(yè)）、成本效益和提取技術(shù)等都會(huì)影響IgY的純度。大規(guī)模的生產(chǎn)工藝及產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制訂，因?yàn)镮gY具有較短的半衰期，需要將其制成緩釋制劑才能獲得預(yù)期效果。隨著對(duì) IgY 研究的不斷深入，如何將其成本最小化等問(wèn)題將會(huì)逐漸得到解決，IgY在水產(chǎn)動(dòng)物疾病防治中的應(yīng)用前景也將越來(lái)越廣闊。因此，研究一種經(jīng)濟(jì)、簡(jiǎn)單且有效的提取方法是將卵黃抗體在疾病治療方面得到應(yīng)用推廣的關(guān)鍵問(wèn)題之一。

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