16種殺菌劑及其復(fù)配對(duì)番茄晚疫病的室內(nèi)毒力測(cè)定及溫室防效

張雪王曉梅逯忠斌王巖侯志廣趙曉峰王鑫宏張浩*

（1.*吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)資源與環(huán)境學(xué)院　長(zhǎng)春　130118）（2.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院　長(zhǎng)春　130118）

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16種殺菌劑及其復(fù)配對(duì)番茄晚疫病的室內(nèi)毒力測(cè)定及溫室防效

張雪1王曉梅2逯忠斌1王巖1侯志廣1趙曉峰1王鑫宏1張浩1*

（1.*吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)資源與環(huán)境學(xué)院長(zhǎng)春130118）（2.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院長(zhǎng)春130118）

摘要：采用生長(zhǎng)速率法測(cè)定16種殺菌劑單劑藥效并篩出對(duì)番茄晚疫病增效作用較好的混劑配比。結(jié)果表明氰霜唑、咯菌腈、氨基寡糖素、吡唑醚菌酯、烯酰嗎啉的EC50值分別為0.21、0.37、0.46、0.65、0.74mg/L，抑菌效果均較好。將氰霜唑分別于其他四種殺菌劑復(fù)配，其中咯菌腈和氰霜唑以質(zhì)量比為1∶1混配時(shí)，EC50值為0.08mg/L，增效系數(shù)為3.38，增效作用明顯。在溫室防效試驗(yàn)中，采用常規(guī)噴霧法，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為40%咯菌腈·氰霜唑在100g.a.i/hm2劑量下防效最好，達(dá)到93.66%,可為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)提供有效的科學(xué)理論指導(dǎo)。

關(guān)鍵詞：番茄晚疫??；殺菌劑；毒力測(cè)定

張雪，吉林農(nóng)安人，碩士，主要從事有害生物抗藥性及綜合治理研究。

E-mail：529562839@qq.com

地址：（130118）吉林省長(zhǎng)春市新城大街2888號(hào)吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)資源與環(huán)境學(xué)院，E-mail：haozhang100@163.com。

番茄晚疫病菌是由卵菌中的致病疫霉引起的，是一種常見的植物病原真菌，侵染番茄等茄科植物。我國(guó)多數(shù)省份都有番茄晚疫病的發(fā)生現(xiàn)象,尤其是連續(xù)陰雨天氣、日夜溫差較大的地區(qū)影響番茄的正常生長(zhǎng)。對(duì)于北方保護(hù)地栽培條件來(lái)看,也較容易發(fā)生此病害[1-2]。

對(duì)該病害的防治主要采用化學(xué)藥劑[3]，主要有甲霜靈、苯霜靈等，但通過(guò)試驗(yàn)可知，許多國(guó)家已對(duì)此類藥劑產(chǎn)生抗性［4-6］。本文通過(guò)對(duì)常用防治番茄晚疫病的各種殺菌劑進(jìn)行室內(nèi)毒力試驗(yàn)，篩選出抑菌效果較好的單劑按照不同比例進(jìn)行混配，選擇增效作用最好的藥劑復(fù)配并對(duì)其進(jìn)行溫室防效試驗(yàn)，從而在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上為防治該類病害提供科學(xué)依據(jù)。

1　材料與方法

1.1材料

1.1.1供試菌株

番茄晚疫病菌，由吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)藥生物測(cè)定實(shí)驗(yàn)室分離鑒定并保存。

1.1.2供試藥劑

95%氰霜唑原藥（Cyazofamid，TC），諾農(nóng)(北京)國(guó)際生物技術(shù)公司；97%咯菌睛原藥（Fludioxonil，TC），河北冠龍農(nóng)化有限公司；90%氨基寡糖素原藥（Chitosam-oligosacchrins，TC），青島博智匯力生物科技有限公司；95%吡唑醚菌酯原藥（Pyrazole kresoxim，TC），京振農(nóng)化工有限公司，98%烯酰嗎琳原藥（Dimethomorph，TC），98%甲霜靈原藥（Metalaxyl，TC），廣州瑞豐生物科技有限公司；90%烯肟菌酯原藥（Enestroburin，TC），沈陽(yáng)科創(chuàng)化學(xué)品有限公司；95%咪鮮胺原藥（Prochloraz，TC），江蘇輝豐農(nóng)化股份有限公司；90%多抗霉素原藥（Polyoxin，TC），績(jī)溪農(nóng)華生物科技有限公司；95%甲基硫菌靈原藥（Thiophanate-methyl，TC），江蘇百靈有限公司；1萬(wàn)億活芽孢/g枯草芽孢桿菌母藥（Bacillus subtilis，TC），德強(qiáng)生物股份有限公司；96%異菌脲原藥（Iprodione，TC），湖北佳諾信生物化工有限公司；96%福美雙（Thiram,，TC），淄博華王化工有限公司；99%多菌靈原藥（Carbendazim，TC），上海開蒙環(huán)境工程有限公司；95%百菌清原藥（Chlorothalonil，TC），鄒平德睿商貿(mào)有限公司；98%苯醚甲環(huán)唑原藥（Difenoconazole，TC），石家莊伊宏化工有限公司。

1.2實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1實(shí)驗(yàn)藥劑篩選與濃度確定

將16種藥劑分別用少量有機(jī)溶劑進(jìn)行溶解，然后加入無(wú)菌水，按照實(shí)驗(yàn)需要均配制成質(zhì)量濃度為1000mg/L母液備用，然后依次稀釋不同的濃度。氰霜唑、咯菌腈、氨基寡糖素的質(zhì)量濃度為10、2、0.4、0.08、0.016mg/L；吡唑醚菌酯、烯酰嗎啉、苯醚甲環(huán)唑、烯肟菌酯的質(zhì)量濃度為40、8、1.6、0.32、0.064mg/L；咪鮮胺、多抗霉素、甲基硫菌靈、枯草芽孢桿菌的質(zhì)量濃度為50、10、2、0.4、0.08mg/L；福美雙、多菌靈、異菌脲、甲霜靈、百菌清的質(zhì)量濃度為80、16、3.2、0.64、0.128mg/L。

1.2.2單劑室內(nèi)毒力測(cè)定

測(cè)定16種藥劑的室內(nèi)毒力采用菌絲生長(zhǎng)速率法[6]。將滅菌后的PDA培養(yǎng)基自然降到60～70℃，按上面濃度加入計(jì)算好的固定藥量，使帶藥培養(yǎng)基含有不同藥量，至完全冷卻后，接種直徑為5mm的番茄晚疫病菌餅，空白對(duì)照加等量無(wú)菌水，3次重復(fù)。接種后平板放到培養(yǎng)箱中（25℃）培養(yǎng)，72小時(shí)后測(cè)量生長(zhǎng)菌落直徑采用十字交叉法，然后計(jì)算抑菌率，用DPS評(píng)價(jià)系統(tǒng)分析，從而得出毒力回歸方程、相關(guān)系數(shù)和EC50值[7-10]。

抑菌率（%）=（對(duì)照培養(yǎng)基中菌落直徑-含藥培養(yǎng)基中菌落直徑）/對(duì)照培養(yǎng)基中菌落直徑×100%

1.2.3殺菌劑復(fù)配對(duì)番茄晚疫病藥效測(cè)定

復(fù)配毒力測(cè)定實(shí)驗(yàn)用Horsfall法，在測(cè)定單劑毒力的基礎(chǔ)上，選擇機(jī)制作用不同的殺菌劑混配[11]，試驗(yàn)中對(duì)番茄晚疫病菌抑菌效果最好的氰霜唑分別和咯菌腈、生物農(nóng)藥氨基寡糖素、吡唑醚菌酯、烯酰嗎啉混配進(jìn)行聯(lián)合毒力測(cè)定。每種混劑按5∶1、3∶1、1∶1、1∶3、1∶5進(jìn)行混配，且復(fù)配劑質(zhì)量濃度梯度均為10、2、0.4、0.08、0.016mg/L，以加等體積無(wú)菌水為空白對(duì)照，3次重復(fù)。實(shí)驗(yàn)與計(jì)算方法均同單劑室內(nèi)毒力測(cè)定。

1.2.4數(shù)據(jù)處理

根據(jù)Wadley方法判斷混劑是否有增效作用[11]。按菌絲生長(zhǎng)抑制率計(jì)算單劑和混劑的EC50值，再用Wadley公式計(jì)算混劑的SR，Wadley法計(jì)算如下：

EC50（th）=（a+b）/（a/EC50A+b/EC50B)

增效系數(shù)（SR）=EC50（th）/EC50（ob）

EC50（ob）代表實(shí)際EC50，EC50(th)代表理論EC50，A、B為單劑，a、b為兩者在混劑中的質(zhì)量比。SR=0.5-1.5為相加作用；SR＞1.5為增效作用；SR＜0.5為拮抗作用。

1.2.540%咯菌腈·氰霜唑?qū)Ψ淹硪卟〉臏厥宜幮г囼?yàn)

試驗(yàn)于吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)試驗(yàn)溫室內(nèi)進(jìn)行，肥力水平均勻一致、栽培管理為中等水平[12]。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中將加工后的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為40%咯菌腈·氰霜唑懸浮劑按照150、100、50g.a.i./hm2三種劑量進(jìn)行噴施，試驗(yàn)共設(shè)計(jì)8個(gè)處理，3次重復(fù)，共24個(gè)小區(qū)。本試驗(yàn)共施藥兩次間隔為7天，第二次施藥10天后調(diào)查番茄晚疫病病況。取樣采用對(duì)角線5點(diǎn)法，記下總株數(shù)、各病級(jí)數(shù)與病株數(shù)，計(jì)算出病情指數(shù)與防治效果。

分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)與計(jì)算公式如下：

0級(jí)，無(wú)病斑；1級(jí)，病斑面積占整個(gè)葉面積5%以下；2級(jí)，病斑面積占整個(gè)葉面積6%～10%；3級(jí)，病斑面積占整個(gè)葉面積11%～20%；4級(jí)，病斑面積占整個(gè)葉面積21%～50%；5級(jí)，病斑面積占整個(gè)葉面積50%以上。

病情指數(shù)=[∑（各級(jí)病株數(shù)×相對(duì)級(jí)值數(shù)）/（最高級(jí)值×調(diào)查總株數(shù)）]×100%

防治效果=[（空白對(duì)照區(qū)病情指數(shù)-處理區(qū)病情指數(shù)）/空白對(duì)照區(qū)病情指數(shù)]×100%

2　結(jié)果與分析

2.116種殺菌劑對(duì)番茄晚疫病的EC50值測(cè)定結(jié)果

從試驗(yàn)結(jié)果（見表1）可知：在16種殺菌劑中，吡唑醚菌酯和烯酰嗎啉對(duì)番茄晚疫病有較好的抑制效果，EC50值分別為0.74、0.92mg/L，生物農(nóng)藥中氨基寡糖素表現(xiàn)出良好的抑菌效果，EC50值為0.46mg/L，擬除蟲菊酯類殺蟲劑中咯菌腈表現(xiàn)出較好的抑菌活性，EC50值為0.37mg/L，磺胺咪唑類殺菌劑中氰霜唑EC50值為0.21mg/L，對(duì)番茄晚疫病菌具有最高的抑菌活性，為混劑復(fù)配提供了有效依據(jù)。

表1　16種殺菌劑對(duì)番茄晚疫病的室內(nèi)毒力

2.2氰霜唑與其它四種殺菌劑混配對(duì)番茄晚疫病菌的試驗(yàn)效果

2.2.1咯菌腈與氰霜唑混配的試驗(yàn)結(jié)果

咯菌腈與氰霜唑藥劑復(fù)配后的結(jié)果見表2。從表可知，當(dāng)咯菌腈和氰霜唑混劑比例為5∶1、3∶1和1∶3時(shí)，增效系數(shù)為0.92、0.94 和0.92，SR在0.5～1.5之間，為相加作用；兩藥劑混劑比例為1∶5 和1∶1時(shí)，增效系數(shù)為1.53和3.38，抑菌效果較好，表現(xiàn)出增效作用。尤其當(dāng)兩藥劑質(zhì)量比為1∶1時(shí)，抑菌效果最強(qiáng)。

表2　咯菌腈與氰霜唑混配的試驗(yàn)結(jié)果

2.2.2氨基寡糖素與氰霜唑混配的試驗(yàn)效果

表3　氨基寡糖素和氰霜唑混配試驗(yàn)結(jié)果

氨基寡糖素與氰霜唑藥劑復(fù)配的實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表3。從表可知，當(dāng)氨基寡糖素和氰霜唑混劑比例為1∶1、1∶3、1∶5時(shí)，其增效系數(shù)為1.26、1.01、0.51，SR在0.5～1.5之間，為相加作用；兩藥劑混劑比例為5:1和3:1時(shí)，增效系數(shù)為2.95和1.77，SR＞1.5，抑菌效果較好，表現(xiàn)出增效作用。尤其當(dāng)兩藥劑質(zhì)量比為5∶1時(shí)，抑菌效果最強(qiáng)。

2.2.3吡唑醚菌酯和氰霜唑混配的試驗(yàn)結(jié)果

吡唑醚菌酯與氰霜唑復(fù)配的實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表4。從表可知，當(dāng)吡唑醚菌酯和氰霜唑混劑比例為5∶1、1∶1、1∶3、1∶5時(shí)，其增效系數(shù)為0.71、0.71、0.74、1.00,SR在0.5～1.5之間，為相加作用；兩藥劑混劑比例為3∶1時(shí)，增效系數(shù)為2.26，SR＞1.5，抑菌效果較好，表現(xiàn)出增效作用。

表4　吡唑醚菌酯和氰霜唑混配試驗(yàn)結(jié)果

2.2.4烯酰嗎啉和氰霜唑混配試驗(yàn)結(jié)果

烯酰嗎啉與氰霜唑復(fù)配的實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表5。從表可知，當(dāng)烯酰嗎啉和氰霜唑混劑比例為5∶1、3∶1、1∶3、1∶5時(shí)，其增效系數(shù)為1.24、1.29、1.08、0.86,SR在0.5～1.5之間，為相加作用；兩藥劑混劑比例為1∶1時(shí)，增效系數(shù)為1.65，SR＞1.5，抑菌效果較好，表現(xiàn)出增效作用。

表5　烯酰嗎啉和氰霜唑混配試驗(yàn)結(jié)果

2.3咯菌腈與氰霜唑溫室藥效試驗(yàn)結(jié)果

溫室藥效試驗(yàn)結(jié)果（見表6）。質(zhì)量分?jǐn)?shù)為40%咯菌腈·氰霜唑?qū)Ψ淹硪卟∮泻芎玫姆乐涡Ч?0、100、150g.a.i./hm2三種劑量下，防效分別為86.91%、93.66%、90.08%，與單劑相比防效顯著，其中以100g.a.i./hm2劑量下對(duì)番茄晚疫病的防治效果最好。

表6　咯菌腈與氰霜唑溫室藥效試驗(yàn)結(jié)果

3　結(jié)果與討論

氰霜唑能夠較好抑制疫霉菌不同階段的生長(zhǎng)，例如孢子囊的形成、萌發(fā)、游動(dòng)孢子的釋放、移動(dòng)以及菌絲的生長(zhǎng)等。氰霜唑用量要求低，對(duì)人及其他動(dòng)物物具有較低毒性［13］。

試驗(yàn)結(jié)果表明：氰霜唑、咯菌腈、氨基寡糖素、吡唑醚菌酯和烯酰嗎啉對(duì)番茄晚疫病菌菌絲生長(zhǎng)的抑制中濃度分別是0.21、0.37、0.46、0.65、0.74mg/L，表明氰霜唑、咯菌腈、氨基寡糖素、吡唑醚菌酯和烯酰嗎啉均具有良好的抑制效果。將氰霜唑與其他四種殺菌劑進(jìn)行混配試驗(yàn)，結(jié)果表明,四種混配藥劑中咯菌腈與氰霜唑質(zhì)量比為1∶1時(shí)，其增效系數(shù)最高，抑菌效果更好。

農(nóng)藥混配使用是目前生產(chǎn)上普通采用的藥劑混用方式，具有使用方便和靈活、易于操作等優(yōu)點(diǎn)，而且還能夠避免混劑有效成分因相互作用而失效的可能性。對(duì)番茄晚疫病的溫室防效試驗(yàn)中咯菌腈和氰霜唑質(zhì)量比為1∶1時(shí)，其防效較好，當(dāng)用量為100g.a.i./hm2時(shí)，對(duì)番茄晚疫病的防效為93.66%，優(yōu)于對(duì)照藥劑，為防治番茄晚疫病提供更多的用藥參考，可在日常農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中廣泛使用。

參考文獻(xiàn)

[1]姜莉莉，武玉國(guó).9種殺菌劑對(duì)番茄晚疫病菌的室內(nèi)毒力測(cè)定[J].世界農(nóng)藥,2015,37（2）：:59-60.

[2]鄭榜高，楊洪.幾種殺菌劑對(duì)番茄晚疫病的防治效果[J].植物醫(yī)生，2011，24（5），35-36.

[3]張成玲，張?zhí)锾铮放d濤，等.10種殺菌劑對(duì)番茄晚疫病菌的室內(nèi)毒力測(cè)定[J].植物保護(hù)，2012，44（6）：97-100.

[4] Shen J.W，YangZ.H，Zhu J.H.Detectiononthesensitivityof Phytophthora infestantoazoxystrobinandmetalaxgl-M[J].Agrochemical，2008，47:457-458.

[5] Wen-qiaoWang,Peng Zhang,Run-jie Meng.Fungitoxicity and synergism of mixtures of fluopicolide and pyraclostrobin against Phytophthora infestans[J]. Crop Protection，2014，57：48－56.

[6]路焱平，鄭服叢．農(nóng)藥學(xué)科群實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)[M].海口：海南出版社，2008.

[7]田琴，楊志輝,，朱杰華.6種殺菌劑對(duì)馬鈴薯晚疫病菌的室內(nèi)毒力測(cè)定[J].中國(guó)馬鈴薯，2012,26（2）：105-107.

[8]陶挺燕，何凡，范鴻雁，等.幾種殺菌劑對(duì)荔枝霜霉病的室內(nèi)毒力測(cè)定[J].植物保護(hù)，2010,49（1）：72-73.

[9]陳伶俐,馬洪福,李亞娟,等.10種殺菌劑對(duì)枸杞根腐病的室內(nèi)毒力測(cè)定[J].青海大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2015,33（5）：11-12.

[10]竇君霞，耿忠義，劉存宏，等.苯醚甲環(huán)唑與戊唑醇混配對(duì)水稻稻曲病菌聯(lián)合作用的測(cè)定[J].中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào)，2015,31（4）：185-189.

[11]張胡煥，謝藝賢，蒲金基.常用殺菌劑及其混劑對(duì)芒果炭疽病菌的毒力測(cè)定[J].農(nóng)藥，2010，49（1）：64-65.

[12]賈利元，田偉，劉新社.6種殺菌劑對(duì)設(shè)施番茄灰霉病的防治效果[J].河南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2012，41（9）：103－105．

[13]秦虎強(qiáng)，陳芳穎，付鼎程，等.油菜菌核病對(duì)10種殺菌劑的敏感性及不同藥劑田間防效[J].西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)(自然版學(xué)科)，2011,39（7）：117-122.

[14]許誠(chéng)，丁秀麗，李宗英，等.殺菌劑氰霜唑的合成進(jìn)展[J].農(nóng)藥科學(xué)與管理，2009,30（10）：40-41.

●園林花卉●

Toxicity Determination and Greenhouse efficacy of several Fungicides to phytophthora infestans ZHANG Xue1,WANG Xiao-mei2,LU Zhong-bin1,WANG Yan1,HOU Zhi-guang1,ZHAO Xiao-feng1,WANG Xin-hong1,ZHANG Hao1

(1.College of Resource and Environmental Jilin Agricultural University,Changchun 130118,China）（2.College of Agronomy,Jilin Agricultural University, Changchun 130118,China)

Abstract:The study aims to test sixteen effective fungicides and screens out the proportioning ratio for controlling on phytophthora infestans through indoor screening.The results showed that the EC50 value of cyazofamid、fludioxonil、chitosam-oligosacchrins、pyrazole kresoxim、dimethomorph were 0.21、0.37、0.46、0.65、0.74mg/L，had obviously inhibitory activity.The mixture of fludioxonil and cyazofamid is the most obvious synergism at the ratio of 1∶1 with EC50 value of 3.38,exhibiting obvious synergic effect.The greenhouse efficacy of the mixture at 100g.a.i/hm2was best against phytophthora infestans with the method of greenhouse was spraying,which laid a foundation for better controlling phytophthora infestans.

Key words:phytophthora infestans;fungicide;toxicity test

作者簡(jiǎn)介：10.16627/j.cnki.cn22-1215/s.2016.05.030

通訊作者：張浩，吉林洮南人，教授，博士，碩士生導(dǎo)師，主要從事農(nóng)藥環(huán)境毒理研究。

基金項(xiàng)目：長(zhǎng)春市國(guó)際科技合作計(jì)劃（13GH06）。