高效液相色譜儀的使用及故障排查

吳松亮 趙富寬

（江蘇省原子醫(yī)學(xué)研究所，無(wú)錫 214063）

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高效液相色譜儀的使用及故障排查

吳松亮 趙富寬

（江蘇省原子醫(yī)學(xué)研究所，無(wú)錫 214063）

摘 要：本文分析總結(jié)了液相色譜儀在日常使用過(guò)程中的注意事項(xiàng)、設(shè)備的保養(yǎng)以及故障的排查與維修。

關(guān)鍵詞：高效液相色譜 HPLC Waters 故障

高效液相色譜法（High Performance Liquid Chroma tography，HPLC）是20世紀(jì)中期發(fā)展起來(lái)的一種色譜方法。該方法與其他色譜法比較，具有分離效能高、分析速度快、檢測(cè)靈敏度高和應(yīng)用范圍廣的特點(diǎn)［1］。目前，該色譜法廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品、環(huán)境等各個(gè)領(lǐng)域。在儀器使用過(guò)程中會(huì)經(jīng)常遇到一些問(wèn)題，影響正常工作。本文介紹有關(guān)（Waters1525）高效液相色譜儀的一些日常使用注意事項(xiàng)以及設(shè)備日常的保養(yǎng)和維護(hù)。

1 高效液相色譜儀的使用注意事項(xiàng)

高效液相色譜法就是流動(dòng)相經(jīng)過(guò)過(guò)濾，然后由高壓泵加壓流經(jīng)進(jìn)樣器、保護(hù)柱（在線(xiàn)過(guò)濾器）、色譜柱、檢測(cè)器、收集器，最后到廢液瓶的恒流系統(tǒng)。該系統(tǒng)是否正常工作，直接影響到實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。所以，維護(hù)好該恒流系統(tǒng)至關(guān)重要。

1.1 流動(dòng)相

（1）流動(dòng)相存放容器要定時(shí)清洗、更換；（2）非HPLC級(jí)的流動(dòng)相一定要經(jīng)0.45μm濾膜過(guò)濾，HPLC級(jí)的流動(dòng)相最好也過(guò)濾一下；（3）流動(dòng)相使用前，一定要經(jīng)行脫氣處理，防止壓力不穩(wěn)；（4）流動(dòng)相的pH值最好在2～8之間（目前，有些色譜柱已經(jīng)能在pH值1～12之間正常工作）；（5）緩沖鹽流動(dòng)相一定要現(xiàn)用現(xiàn)配；（6）經(jīng)常檢查流動(dòng)相過(guò)濾器。

1.2 高壓泵

（1）定期檢查泵的密封墊是否有滲漏；（2）定期檢查活塞桿的磨損；（3）實(shí)驗(yàn)結(jié)束后需進(jìn)行沖洗。

1.3 保護(hù)柱（在線(xiàn)過(guò)濾器）

（1）定期拆開(kāi)，清洗里面的濾芯；（2）定期檢查是否有滲漏。

1.4 進(jìn)樣器

進(jìn)樣器的核心就是一個(gè)六通閥，流動(dòng)相流經(jīng)六通閥將樣品帶入恒流系統(tǒng)。（1）定期清洗定量環(huán)；（2）定期清洗進(jìn)樣管路（注：蒸餾水可以快速溶解殘留在進(jìn)樣器里的鹽）；（3）一定要使用專(zhuān)用進(jìn)樣針（非專(zhuān)用進(jìn)樣針可能會(huì)密封性能不好，導(dǎo)致進(jìn)樣體積有誤）；（4）使用結(jié)束后，清理溢流瓶。

1.5 色譜柱［2］

（1）避免柱頭污染；（2）注意樣品超載；（3）避免壓力沖擊，減少壓力波動(dòng)；（4）使用前需活化色譜柱，進(jìn)樣前先用流動(dòng)相沖洗30min；（5）盡量少用強(qiáng)容器沖洗色譜柱；（6）最好使用柱溫箱；（7）注意流動(dòng)相的pH值；（8）使用結(jié)束后需沖洗柱子30min，最后盡量用有機(jī)溶劑（乙腈）保留在柱內(nèi)。

1.6 檢測(cè)器

（1）一定要注意環(huán)境的溫濕度，濕度最好小于55%RH；（2）定期檢查氘燈的使用時(shí)間、樣品能量和參比能量；（3）定期清洗流通池；（4）準(zhǔn)備進(jìn)樣時(shí)，再打開(kāi)氘燈。

2 高效液相色譜儀的故障排查

2.1 打開(kāi)電腦無(wú)法連接儀器，打開(kāi)軟件提示故障代碼12025

（1）檢查Buslace通信板卡是否正常工作（新機(jī)器是采用網(wǎng)絡(luò)通信，沒(méi)有通信板卡）；

（2）如果通信板卡正常工作，那么檢查通信電纜接頭是否松脫；

（3）如果設(shè)備前兩項(xiàng)均正常，則可以考慮重新安裝軟件，需要注意的是，重裝軟件前需將軟件的注冊(cè)Key收回到軟盤(pán)里。

2.2 2487紫外檢測(cè)器故障

2487紫外檢測(cè)器故障的現(xiàn)象、原因及其處理方法，如表1所示。

表1 2487紫外檢測(cè)器故障的現(xiàn)象、原因及其處理方法

2.3 1525泵故障

1525泵故障的現(xiàn)象、原因及其處理方法，如表2所示。

表2 1525泵故障的現(xiàn)象、原因及其處理方法

3 總結(jié)

高效液相色譜儀是現(xiàn)代科學(xué)研究中廣泛使用的分析儀器，掌握一些必要的維護(hù)常識(shí)，對(duì)于每一位分析工作者尤為重要。只有正確使用與維護(hù)，才能更好地駕馭，從而保障工作的順暢，延長(zhǎng)儀器使用壽命，創(chuàng)造經(jīng)濟(jì)價(jià)值，最大程度地發(fā)揮HPLC技術(shù)在生物醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域中的作用。

參考文獻(xiàn)

［1］孫毓慶.現(xiàn)代色譜法及其在醫(yī)藥中的應(yīng)用［M］.北京：人民衛(wèi)生出版，1998：140-141.

［2］鄭偉，孫東方.高效液相色譜柱的選擇、使用與維護(hù)［J］.口腔護(hù)理用品工業(yè)，2011，（2）：37-39.

The Use of High Performance Liquid Chromatog raph and the Trouble Shooting

WU Songliang，ZHAO Fukuan
（Institute of atom ic medicine， Jiangsu Province， Wuxi 214063）

Abstract:This paper analyzes and summarizes the liquid chromatograph in the daily us e of the proces s of matters needing attention， equipment maintenance and troubleshooting and maintenance.

Key words:high performance liquid chromatography， HPLC，Waters， fault