大腸癌EGFR、HER-2、VEGF表達(dá)及對(duì)靶向治療的指導(dǎo)作用

張航 符改梅 張婷

大腸癌EGFR、HER-2、VEGF表達(dá)及對(duì)靶向治療的指導(dǎo)作用

張航 符改梅 張婷

目的 通過實(shí)驗(yàn)探討大腸癌中表皮生長因子受體（EGFR）、人表皮生長因子受體-2（HER-2）以及血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）表達(dá)，旨在為靶向治療提供理論指導(dǎo)。方法 選取大腸癌患者36例，取腫瘤組織，經(jīng)處理行PV-9000二步法免疫組化法檢測(cè)，觀察大腸癌腫瘤組織中EGFR、HER-2、VEGF的表達(dá)，同時(shí)分析與其余病理組織的關(guān)系。結(jié)果 EGFR陽性率為58.33%，HER-2陽性率為66.67%，VEGF陽性率為58.33%；EGFR、HER-2、VEGF與腫瘤大小、侵襲深度以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移表現(xiàn)為密切相關(guān)。結(jié)論 EGFR、HER-2、VEGF的表達(dá)與大腸癌的侵襲、生長、轉(zhuǎn)移都有較大關(guān)聯(lián)，故通過三者的聯(lián)合篩查更利于高危患者的早期判斷，同時(shí)還可為靶向治療提供用藥指導(dǎo)。

大腸癌；EGFR；HER-2；VEGF；表達(dá)

大腸癌是當(dāng)前臨床中最常見的一種消化系統(tǒng)惡性腫瘤，盡管關(guān)于大腸癌的治療方法非常多，但仍然無法對(duì)其死亡率和發(fā)病率進(jìn)行有效的控制，且仍然表現(xiàn)為逐年攀升[1]。就當(dāng)前所掌握的情況來看，腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移是導(dǎo)致大腸癌患者死亡的主要因素。截至目前為止，臨床中并無關(guān)于大腸癌轉(zhuǎn)移的預(yù)防方法。有研究報(bào)道表示[2]，表皮生長因子受體（EGFR）、人表皮生長因子受體-2（HER-2）以及血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）的表達(dá)與大腸癌的轉(zhuǎn)移和腫瘤的侵襲有著非常密切的關(guān)聯(lián)。此外，關(guān)于3種分子的靶向治療藥物已成功研制，并被用于臨床試驗(yàn)中[3]。但關(guān)于三者的綜合研究資料卻非常少，鑒于此，本文通過實(shí)驗(yàn)對(duì)大腸癌中EGFR、HER-2、VEGF表達(dá)進(jìn)行分析，旨在為靶向治療提供理論指導(dǎo)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取陜西省寶雞市金臺(tái)醫(yī)院2013年1月～2014年12月大腸癌根治術(shù)患者中選取36例，切取腫瘤組織，行石蠟包埋和甲醛固定，同時(shí)性HE染色組織學(xué)確診。所有患者均未接受放化療治療。其中女17例，男19例，年齡35～75歲，平均年齡（67.34±13.31）歲，腫瘤大小2.2～15.0cm，平均（5.02±2.84）cm；經(jīng)Dukes分期，結(jié)果顯示為6例D期，7例C期，17例B期，6例A期。

1.2 方法 取病理組織5μm厚切片，運(yùn)用兔抗人VEGF單克隆抗體、兔抗人EGFR單克隆抗體、兔抗人GER-2單克隆抗體。通過PV-9000二步法免疫組化法進(jìn)行測(cè)試，試劑盒購自北京中杉公司，且操作均嚴(yán)格按照試劑盒要求來實(shí)施。每組實(shí)驗(yàn)均同時(shí)設(shè)置2組，分別為陰性對(duì)照組和陽性對(duì)著組，同時(shí)選用PBS替代一抗來作為陰性對(duì)照組，而針對(duì)已知的陽性切片則將其作為陽性對(duì)照組。

1.3 判斷標(biāo)準(zhǔn)[4]HER-2定位在細(xì)胞漿、EGFR定位在細(xì)胞膜和細(xì)胞漿、VEGF定位在細(xì)胞膜。EGFR與VEGF均根據(jù)陽性細(xì)胞數(shù)以及染色強(qiáng)度來進(jìn)行計(jì)算，再根據(jù)得分作為其判斷依據(jù)。陽性細(xì)胞數(shù)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：4分（≧75%）；3分（51%～74%）；2分（26%～50%）；1分（≦25%）；染色強(qiáng)度評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：3分（棕褐色）；2分（棕黃色）；1分（淡棕色）；綜合評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：6～7分（+++）；4～5分（++）；2～3分（+）；0～1分（-）。

2 結(jié)果

2.1 EGFR、HER-2、VEGF在大腸癌腫瘤組織中的表達(dá) HER-2主要在胞膜上表達(dá)，并主要呈現(xiàn)為棕褐色顆粒狀；EGFR主要在細(xì)胞漿和胞膜上表達(dá)，且呈現(xiàn)為棕黃色細(xì)顆粒；VEGF同樣在胞膜上表達(dá)，且呈現(xiàn)為棕褐色顆粒狀。腫瘤的間質(zhì)均未著色。另根據(jù)陽性結(jié)果顯示，EGFR陽性患者21例，陽性率為58.33%；HER-2陽性患者24例，陽性率為66.67%；VEGF陽性患者21例，陽性率為58.33%。

2.2 EGFR、HER-2、VEGF表達(dá)與病理特點(diǎn)的關(guān)系EGFR、HER-2、VEGF與腫瘤大小、侵襲深度以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移表現(xiàn)為較大關(guān)聯(lián)。見表1。

表1 EGFR、HER-2、VEGF表達(dá)與病理特點(diǎn)的關(guān)系（n=36）

3 討論

EGFR是一種原癌基因HER-1的產(chǎn)物，屬于HER/crbB非常重要的成員，在各種重要細(xì)胞信號(hào)通路的激活中起到了決定性作用[5]。HER-2與EGFR相同，均屬于HER/crbB的成員之一，并且兩者的同源性達(dá)到了50%以上，這使得它們的功能和結(jié)構(gòu)都非常相似，其主要對(duì)細(xì)胞生長分化進(jìn)行調(diào)節(jié)[6]。VEGF屬于血管內(nèi)皮細(xì)胞刺激因子，具有較高的特異性，有研究表示，VEGF在多種腫瘤中均有不同的表達(dá)，并且與預(yù)后有著較大的關(guān)聯(lián)性[7]。根據(jù)本研究結(jié)果來看，EGFR陽性率為58.33%，HER-2陽性率為66.67%，VEGF陽性率為58.33%。這表明EGFR、HER-2、VEGF的測(cè)定可謂分子靶向治療提供用藥方向。

本研究認(rèn)為通過對(duì)EGFR、HER-2、VEGF進(jìn)行聯(lián)合檢測(cè)，可有效提高高?；颊叩暮Y查，同時(shí)還可作為大腸癌患者預(yù)后效果的判斷標(biāo)準(zhǔn)。而關(guān)于大腸癌的靶向治療，本研究認(rèn)為還需要解決以下幾點(diǎn)問題：（1）分子的生物學(xué)篩查問題。迄今為止，在文獻(xiàn)報(bào)道和臨床研究中，多運(yùn)用的是免疫組化法來實(shí)現(xiàn)對(duì)EGFR、HER-2、VEGF的測(cè)定；這種方式極易因抗體實(shí)際的操作水平和質(zhì)量等因素受到影響，同時(shí)無法進(jìn)行有效的定量檢測(cè)，為此，我們需要進(jìn)一步研究。（2）對(duì)靶向治療的用藥劑量和用藥時(shí)機(jī)進(jìn)行確定[8]。（3）進(jìn)一步了解EGFR、HER-2、VEGF與靶向治療藥物之間的關(guān)系。

綜上所述，伴隨著對(duì)大腸癌的深入了解，EGFR、HER-2、VEGF的測(cè)定有助于提高篩選率，同時(shí)也是靶向藥物治療的重要發(fā)展方向。

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10.3969/j.issn.1009-4393.2016.9.012

陜西 721000 陜西省寶雞市金臺(tái)醫(yī)院 （張航 符改梅 張婷）