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    白鵑梅提取物的體外抗氧化活性及黃酮類化學(xué)成分的分離鑒定

    2016-06-07 10:31:34朱玲玲張廣文鄭樹秀邱瑞霞
    食品與發(fā)酵工業(yè) 2016年2期
    關(guān)鍵詞:分離鑒定黃酮

    朱玲玲,張廣文,鄭樹秀,邱瑞霞

    (暨南大學(xué) 理工學(xué)院 食品科學(xué)與工程系,廣東 廣州,510632)

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    白鵑梅提取物的體外抗氧化活性及黃酮類化學(xué)成分的分離鑒定

    朱玲玲,張廣文*,鄭樹秀,邱瑞霞

    (暨南大學(xué) 理工學(xué)院 食品科學(xué)與工程系,廣東 廣州,510632)

    摘要文中對(duì)白鵑梅不同溶劑萃取物進(jìn)行體外抗氧化活性實(shí)驗(yàn);在此基礎(chǔ)上利用薄層層析、柱層析、高效液相色譜儀進(jìn)行黃酮類物質(zhì)的分離、純化;質(zhì)譜儀、核磁共振對(duì)所分離的化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:乙酸乙酯相萃取物的體外抗氧化活性相比其他相萃取物的活性大;從乙酸乙酯相萃取物中分離出3種黃酮類化合物,分別鑒定為——芹菜素(apigenin,化合物1)、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷(apigenin-7-O-β-D-glucopyranoside,化合物2)、蘆丁(rutin,化合物3)。

    關(guān)鍵詞白鵑梅;體外抗氧化,黃酮,分離鑒定

    白鵑梅(ExochordaserratifoliaS.Moore.)為薔薇科繡線菊亞科白鵑梅屬植物,全世界共4種,其中3種(白鵑梅、齒葉白鵑梅、紅柄白鵑梅)在我國(guó)有分布[1]。白鵑梅主要生長(zhǎng)在我國(guó)的江蘇、浙江、安徽一帶,又名繭子花、龍柏芽。該植物在《藥物植物詞典》以及《中華本草》等書籍均有記載,其根皮、樹皮入藥,用于腰骨酸痛的治療。

    白鵑梅花蕾和嫩葉均可食用,在我國(guó)民間已有悠久歷史。據(jù)《中國(guó)野菜圖譜》等文獻(xiàn)報(bào)道,其所含多種維生素和Ca、Fe、Zn等營(yíng)養(yǎng)成分之高[2],是許多常見(jiàn)蔬菜所不及的。研究表明,齒葉白鵑梅以及紅柄白鵑梅中含有豐富的黃酮類化學(xué)成分[3-4],而黃酮類化合物是一種具有生物活性的天然有機(jī)化合物,隨著對(duì)黃酮類化合物研究的深入,研究人員發(fā)現(xiàn)黃酮類化合物具有許多生理功能,如抗炎、抗病毒、抗氧化作用。

    本文對(duì)白鵑梅中的黃酮類化合物進(jìn)行提取分離,并對(duì)不同條件下白鵑梅萃取物進(jìn)行體外抗氧化活性實(shí)驗(yàn),結(jié)果證明乙酸乙酯相提取物的體外抗氧化活性較高;根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果利用柱層析、高效液相、質(zhì)譜、核磁共振等方法對(duì)白鵑梅中的黃酮類化合物進(jìn)行了分離純化和鑒定。

    1材料和方法

    1.1材料與試劑

    白鵑梅幼葉及花蕾,采于河南平頂山舞鋼市。

    無(wú)水乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、三氯乙酸、濃H2SO4、H2O2;FeCl3、FeCl2、VC、EDTA、Na2HPO4、鉬酸銨、FeSO4、水楊酸,均為分析純,購(gòu)于天津市大茂化學(xué)試劑廠。

    1.2儀器與設(shè)備

    UV-9600紫外分光光度計(jì),北京瑞利儀器有限公司;EL104電子分析天平,METTLER TOLEDD有限公司;B-260水浴鍋,上海亞榮生化儀器;RE52C52旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,上海亞榮生化儀器;薄層色譜硅膠板(TLC),青島海洋化工集團(tuán)有限公司;高效液相色譜儀Shimadzu LC-20AT ,日本島津;質(zhì)譜儀,安捷倫儀器有限公司;AVANCEⅢ型超導(dǎo)核磁共振儀,德國(guó)Bruker公司。

    1.3實(shí)驗(yàn)方法

    1.3.1白鵑梅的分部萃取

    稱取白鵑梅5 kg,用乙醇浸泡10 d,浸泡3次;旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)得到乙醇浸膏。然后分別用石油醚,乙酸乙酯,正丁醇,水依次進(jìn)行萃取,每個(gè)過(guò)程重復(fù)3次;將萃取液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)分別得到不同萃取劑浸膏。

    1.3.2白鵑梅乙醇粗提物以及分步萃取物的還原能力測(cè)定

    分別配制質(zhì)量濃度 20、40、60、80、100、120 μg/mL 的白鵑梅乙醇粗提物以及分步萃取物溶液,分別加入2.5 mL,0.2 mol/L,pH 6.6的磷酸鹽緩沖液;2.5 mL ,1.0%的K3Fe(CN)6溶液;50 ℃ 水浴20 min 后;加入2.5 mL ,1.0%的三氯乙酸溶液;然后,分別加入2.5 mL水和0.5 mL 質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.1%的FeCl3溶液;充分反應(yīng),在700 nm 下測(cè)吸光值;以VC作為陽(yáng)性對(duì)照。

    1.3.3白鵑梅乙醇粗提物以及分步萃取物總抗氧化活性測(cè)定

    分別配制質(zhì)量濃度為20、40、60、80、100、120μg/mL的白鵑梅乙醇粗提物以及分步萃取物溶液,取0.1 mL 樣品溶液于試管,分別加入0.6 mol/L 的濃硫酸,28 mmol/L 的Na3PO4溶液,4 mmol/L的鉬酸銨溶液各1 mL,試管密封,95 ℃ 水浴90 min ;然后室溫環(huán)境冷卻至25 ℃ ;695 nm 下測(cè)吸光值;以VC作為陽(yáng)性對(duì)照。

    總抗氧化活性/%=[1-(Asample/Acontrol)]×100

    1.3.4白鵑梅乙醇粗提物以及分步萃取物的DPPH自由基清除活性測(cè)定

    分別配制質(zhì)量濃度為20、40、60、80、100、120μg/mL的白鵑梅乙醇粗提物以及分步萃取物溶液,取2 mL樣品溶液于試管,依次加入2.0 mL 6 mmol/L 的FeSO4溶液,2.0 mL 6 mmol/L 的H2O2溶液,搖勻,反應(yīng)10 min ,加入2.0 mL 6 mmol/L 的水楊酸乙醇溶液,搖勻,反應(yīng)30 min ,510 nm 下測(cè)吸光值,以 VC作為陽(yáng)性參照。

    清除率/%=[1-(Asample/Acontrol)]×100

    1.3.5白鵑梅乙醇粗提物以及分步萃取物的金屬離子螯合能力測(cè)定[5]

    分別配制質(zhì)量濃度為20、40、60、80、100、120μg/mL的白鵑梅乙醇粗提物以及分步萃取物溶液,取1.0 mL的樣品溶液于試管,分別加入20 mmol/L 的FeCl2100 μL,5 mmol/L 的ferrozine溶液0.2 mL,劇烈振蕩使其充分反應(yīng),靜置10 min;在562 nm 下測(cè)其吸光值;以EDTA作為陽(yáng)性對(duì)照。

    金屬離子螯合活性/%=[1-(Asample/Acontrol)]×100

    1.3.6白鵑梅乙酸乙酯層萃取物的分離純化

    根據(jù)不同提取溶劑的體外抗氧化活性結(jié)果,對(duì)乙酸乙酯相萃取物做進(jìn)一步的分離純化。首先將乙酸乙酯層浸膏(170.4 g)上硅膠(200~300目)層析柱(900 mm×45 mm),用V(三氯甲烷)∶V(甲醇)=100∶0~0∶100進(jìn)行梯度洗脫,洗脫液每300 mL 為餾分;結(jié)合薄層色譜(TLC)檢測(cè),合并,濃縮,得到22個(gè)餾分。

    將餾分6上硅膠(200~300目)層析柱,用V(三氯甲烷)∶V(甲醇)=9∶1進(jìn)行洗脫;將洗脫液合并濃縮利用葡聚糖凝膠(SephadexLH-20)進(jìn)一步分離純化,得到化合物1(23 mg )。

    餾分8放置一段時(shí)間析出結(jié)晶,將晶體置出進(jìn)行重結(jié)晶,得到化合物2(15 mg)。

    餾分20先經(jīng)V(三氯甲烷)∶V(甲醇)進(jìn)行洗脫;然后利用制備液相制備,條件為:流動(dòng)相V(甲醇)∶V(水)= 45∶55;流速:1.0 mL/min;進(jìn)樣量:40 μL ;波長(zhǎng)267 nm;將制備樣品于50 ℃ 旋蒸,得到化合物3(18 mg)。

    1.3.7三種化合物的薄層色譜(TLC)測(cè)定

    對(duì)上述實(shí)驗(yàn)所得的化合物1~化合物3分別進(jìn)行薄層色譜檢測(cè)[6],展開劑分別為:V(三氯甲烷)∶V(甲醇)=6∶1、3∶1、2∶1;將硅膠板在碘缸中進(jìn)行顯色,計(jì)算其Rf值。

    1.3.8白鵑梅黃酮類化合物HPLC測(cè)定

    將化合物1,化合物2進(jìn)行高效液相色譜測(cè)定,HPLC實(shí)驗(yàn)條件為:DiamonsiLC18柱(5 μm , 25 mm×1.6 mm)進(jìn)樣量:20 μL;柱溫:40 ℃;檢測(cè)器:SPD-M20A示差折光檢測(cè)器;流動(dòng)相:(化合物1)V(甲醇)∶V(水)=65∶35,(化合物2)乙腈-2%冰乙酸水溶液(體積比23∶77);流速:1.0mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng);267nm。

    1.3.9利用質(zhì)譜以及核磁鑒定白鵑梅黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)

    根據(jù)薄層色譜(TLC)以及HPLC結(jié)果的初步推斷,化合物1~化合物3純度達(dá)到了95%以上;將化合物1,2分別利用質(zhì)譜以及核磁鑒定其分子質(zhì)量以及最終的結(jié)構(gòu)。

    2結(jié)果與分析

    2.1白鵑梅不同溶劑下萃取結(jié)果

    根據(jù)不同溶劑萃取分別得到石油醚萃取物(PF)200.04g,乙酸乙酯萃取物(AF)170.4g,正丁醇萃取物(BF)42.49g,水層萃取物(WF) 306.98g。

    2.1.1白鵑梅乙醇粗提物及分步萃取物的還原性

    實(shí)驗(yàn)分別對(duì)不同濃度的白鵑梅乙醇粗提物以及分步萃取物進(jìn)行了還原性測(cè)定;還原力強(qiáng)的樣品可以使Fe3+轉(zhuǎn)化成Fe2+;也可以和自由基互相作用從而阻斷鏈?zhǔn)椒磻?yīng);可以通過(guò)測(cè)定700nm波長(zhǎng)下生成的普魯士藍(lán)的吸光值進(jìn)行檢測(cè);吸光值越大,樣品還原力越強(qiáng)[7]。由圖1可以看出,不同溶液的提取物的還原力的大小為:VC>乙酸乙酯萃取物>正丁醇萃取物>水層萃取物>乙醇粗提物>石油醚萃取物;由此可以看出,乙酸乙酯層萃取物的還原能力最強(qiáng),說(shuō)明其中還原劑含較多良好的電子供體;石油醚層萃取物的還原力相對(duì)最差。

    圖1 白鵑梅乙醇粗提物以及分步萃取物的還原力Fig. 1 Reducing power of the ethyl acetate fraction (AF),butanol fraction(BF),water fraction (WF),crude ethanol fraction (EF)and petroleum ether fraction(PF) from Exochorda racemosa

    2.1.2白鵑梅乙醇粗提物及分步萃取物的總抗氧化活性

    實(shí)驗(yàn)方法的原理是樣品中的還原劑能將六價(jià)鉬還原為五價(jià)鉬,而五價(jià)鉬與磷酸鹽反應(yīng)生成綠色的磷酸鉬,該化合物在695 nm 下有最大吸收峰[8]。由圖2可以看出,白鵑梅各層萃取物都有一定的抗氧化活性,并且隨著濃度增加各層總抗氧化活性遞增;各層萃取物總抗氧化活性的大小順序?yàn)椋篤C>乙酸乙酯萃取物>乙醇粗提物>正丁醇萃取物>水層萃取物>石油醚層萃取物。各層萃取物中,乙酸乙酯萃取物的吸光值相應(yīng)最大,其總抗氧化能力最強(qiáng),乙醇粗提物層總抗氧活性高于正丁醇層,石油醚層萃取物的吸光值相應(yīng)最小,總抗氧化能力最弱。

    圖2 白鵑梅乙醇粗提物及其分步萃取物的總抗氧化活性Fig. 2 Total antioxidant activity of the ethyl acetate fraction (AF),butanol fraction(BF),water fraction (WF),crude ethanol fraction (EF)and petroleum ether fraction(PF) from Exochorda racemosa

    2.1.3白鵑梅乙醇粗提物及分步萃取物的DPPH自由基清除活性

    當(dāng)DPPH遇到自由基清除劑時(shí),其結(jié)構(gòu)中的孤對(duì)電子被配對(duì)而退色,在510 nm 處的吸光值變小,且變小程度與樣品中自由基清除劑成正比[9],可以由此作為判定標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行結(jié)果判定。由圖3可以看出,白鵑梅各層萃取物對(duì)DPPH都有一定的清除能力,并且隨著濃度的增加,清除能力也相應(yīng)的增大;白鵑梅各層萃取物DPPH自由基清除活性的大小順序?yàn)椋篤C>乙酸乙酯層萃取物>正丁醇層萃取物>水層萃取物>乙醇粗提物>石油醚層萃取物;乙酸乙酯層清除能力最強(qiáng),石油醚層相應(yīng)的最弱。

    圖3 白鵑梅乙醇粗提物及其分步萃取物的DPPH自由基清除活性Fig. 3 DPPH free radical scavenging effect of the ethyl acetate fraction (AF),butanol fraction(BF),water fraction (WF),crude ethanol fraction (EF)and petroleum ether fraction(PF) from Exochorda racemosa

    2.1.4白鵑梅乙醇粗提物及分步萃取物的金屬離子螯合活性

    由圖4可以看出,白鵑梅各層萃取物都有一定的螯合能力,并且與濃度的大小呈正相關(guān)關(guān)系;各層萃取物金屬離子螯合能力大小順序:EDTA>乙酸乙酯層萃取物>正丁醇層萃取物>水層萃取物>乙醇粗提物>石油醚層萃取物。即乙酸乙酯層最大,正丁醇層次之,石油醚層最小。

    圖4 白鵑梅乙醇粗提取以及分步萃取物的金屬離子螯合活性Fig. 4 Ferrous ion chelating capacity of the ethyl acetate fraction (AF),butanol fraction(BF),water fraction (WF),crude ethanol fraction (EF)and petroleum ether fraction(PF) from Exochorda racemosa

    2.2三種化合物的薄層層析結(jié)果

    圖5是對(duì)應(yīng)化合物1~化合物3的薄層層析板在碘缸中顯色的結(jié)果。圖1硅膠板在紫外下觀察有黃色熒光;Rf1=0.46。圖2硅膠板在紫外下棕黃色熒光Rf2=0.56。圖3是蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品與化合物3的對(duì)照,TLC檢測(cè)結(jié)果與蘆丁對(duì)照品Rf值以及斑點(diǎn)顏色一致;Rf3=0.35。

    圖5 三種化合物的薄層色譜圖Fig.5 P-silica gel TLC of compounds 1 , 2 , 3

    2.3化合物1,化合物2的HPLC結(jié)果

    從圖6-A可以看出化合物1在流動(dòng)相為V(甲醇)∶V(水)=65∶35條件下,在HPLC色譜圖上保留時(shí)間為5.403 min。圖6-B可以看出化合物2在流動(dòng)相為V(乙腈)∶V(2%冰乙酸)=23∶77條件下在HPLC色譜圖保留時(shí)間為8.887 min。

    圖6 化合物1,2的高效液相色譜圖Fig.6 HPLC of compound 1, 2

    2.4化合物1的結(jié)構(gòu)鑒定

    圖7 化合物1的氫譜、碳譜圖Fig.7 1H NMR , 13C NMR of compound 1

    化合物1為淡黃色針狀晶體(甲醇),鹽酸-鎂粉反應(yīng)結(jié)果呈陽(yáng)性。由MS結(jié)果可知,ESI-MS:m/z=269.2[M-H+],271.0[M+H+],分子式為C15H10O5。由圖7-A可以看出1HNMR(400 MHz,DMSO-d6)δ:12.66(1H,5-OH),7.92(2H,d ,J=9.0 Hz ),6.96( 2H,d,J=9.0 Hz ),6.68( 1H,s ),6.48(1H,d,J=2.0 Hz),6.12(1H,d,J=2.0 Hz),其中6.91 (2H,d,J=9.0 Hz)可以推出B環(huán)有對(duì)稱結(jié)構(gòu);由圖7 B可以看出,13C-NMR(100 MHz, DMSO-d6)δ:182.52(C-4),164.91(C-2),164.63(C-7),161.84(C-4′),161.36(C-5),158.04(C-9),128.06(C-2′,6′),121.87( C-1′),115.62(C-3′,5′),103.92(C-10),102.44(C-3),98.72(C-6),93.63(C-8);由以上數(shù)據(jù)根據(jù)文獻(xiàn)[10]報(bào)道,可以推出該物質(zhì)為芹菜素(apigenin),其結(jié)構(gòu)式為:

    2.5化合物2的結(jié)構(gòu)鑒定與分析

    圖8 化合物2的氫譜、碳譜圖Fig.8 1H NMR , 13C NMR of compound 2

    化合物2為黃色粉末(甲醇),鹽酸-鎂粉反應(yīng)結(jié)果呈陽(yáng)性,F(xiàn)eCl3反應(yīng)呈藍(lán)色。由MS結(jié)果可以看出,ESI-MS:m/z=431.3[M-H+],433.4[M+H+]。分子式為C21H20O10。由圖8-A可以看出,1HNMR(400 MHz, DMSO-d6)δ:3.32-3.97 (6H, m),5.08(1H, d,J=7.3 Hz),6.51(1 H, d ,J=2.0 Hz),6.67(1H ,d ,J=2.0 Hz),6.82(1H ,s),6.94(2H, d ,J=8.7 Hz),8.07(2H ,d,J=8.7 Hz);其中,5.08(1H, d,J=7.3 Hz)是糖的端基氫信號(hào)。由圖8-B可以看出,13C-NMR(100 MHz, DMSO-d6)δ:61.07(C-6"),69.87 (C-4"),73.33 (C-2"),76.46 (C-3"),77.00 (C-5"),94.67 (C-8) 99.79 (C-1"),100.23 (C-6),102.74 ( C-3),105.69 (C-10),115.64 (C-3′,5′),121.69 (C-1′),128.24 (C-2′,6′),157.57 (C-9),161.49 (C-5),161.53 (C-4′),163.42 (C-7),165.37 (C-2),182.69 (C-4)。由碳譜數(shù)據(jù)進(jìn)一步推測(cè)出7號(hào)位有葡萄糖,氫譜及碳譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[11]數(shù)據(jù)相符,故推測(cè)該化合物為芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷(apigenin-7-O-β-D-glucopyranoside)。結(jié)構(gòu)式為:

    2.6化合物3的結(jié)構(gòu)鑒定及分析

    為黃色粉末(甲醇),鹽酸-鎂粉反應(yīng)結(jié)果呈陽(yáng)性。由質(zhì)譜結(jié)果可知,ESI-MS:m/z=609.5[M-H+],633.4[M+,Na+]。通過(guò)UV紫外光譜掃描,在253,365 nm處有吸收,所以鑒定其為蘆丁(rutin)。結(jié)構(gòu)式為:

    3結(jié)論

    根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出,乙醇,石油醚,乙酸乙酯,正丁醇,水5種溶劑對(duì)白鵑梅進(jìn)行提取得到的提取物中,均有一定的抗氧化活性,但經(jīng)過(guò)比較,乙酸乙酯相體外抗氧化活性相對(duì)最大。通過(guò)實(shí)驗(yàn)對(duì)白鵑梅黃酮類化學(xué)成分進(jìn)行分離、純化、鑒定初步得到了3種黃酮類化合物分別為芹菜素(apigenin)、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷(apigenin-7-O-β-D-glucopyranoside)、蘆丁(rutin)。

    白鵑梅中含有多種具有活性的化學(xué)成分,本實(shí)驗(yàn)初步分離純化得到3種黃酮類化學(xué)成分;為以后提取分離純化得到更多的有效成分提供了基礎(chǔ)。

    參考文獻(xiàn)

    [1]張家佳, 李香梅, 任麗花,等. 白鵑梅化學(xué)成分[J]. 中國(guó)中藥雜志, 2011, 36(9): 1 198-1 200.

    [2]江紀(jì)武. 藥用植物辭典[M]. 天津: 天津科學(xué)技術(shù)出版社, 2005: 322.

    [3]魏學(xué)智, 劉少華, 師學(xué)琴,等. 紅柄白鵑梅營(yíng)養(yǎng)成分分析[J]. 西北植物學(xué)報(bào), 2005, 25(8): 1 657-1 660.

    [4]鄧榮華, 王穎, 王慧,等. 紅柄白鵑梅葉中黃酮類物質(zhì)的提取研究[J]. 中國(guó)野生植物資源, 2015, 2(34): 5-8.

    [5]HSU,C L, CHEN, W L, WENG, Y M, et al. Chemical composition, physical properties, and antioxidant activities of yam flours as affected by different drying methods[J]. Food Chemistry, 2003,83(1):85-92.

    [6]余婷婷, 魯小翔, 連喜軍,等. 玉米須黃酮類化合物的薄層層析及紫外光譜研究[J]. 食品科學(xué), 2008, 29(11): 477-481.

    [7]CHOU, S T, CHAO, W W, & C, Y C.Antioxidative activity and safety of 50% ethanolic red bean extract (PhaseolusradiatusL. var. Aurea) [J]. Journal of Food Science, 2003, 68(1):21-25.

    [8]ABDILLE, M H, S R P, JAYAPRAKASHA G K, et al. Antioxidant activity of the extracts from Dillenia indica fruits [J]. Food Chemistry, 2005, 90(4):891-896.

    [9]RUMBAOA R G O, CORNAGO,D F, GERONIMO, I M. Phenolic content and antioxidant capacity of Philippine potato (Solanumtuberosum) tubers [J].Journal of Food Composition and Analysis, 2009, 22(6):546-550.

    [10]宋麗麗, 李緒文, 顏佩芳,等. 芫花化學(xué)成分研究[J]. 中草藥, 2010, 41(4): 536-538.

    [11]黎路, 秦民堅(jiān). 蝴蝶花的化學(xué)成分研究[J]. 中草藥, 2006, 37(8):1 141-1 142.

    Exochorda racemosa extract’s antioxidant evaluation and its flavonoids components analysis

    ZHU Ling-ling,ZHANG Guang-wen*, ZHANG Shu-xiu, QIU Rui-xia

    (Department of Food Science and Engineering, Jinan University, Guangzhou 510632, China)

    ABSTRACTThe antioxidant activity of exochorda racemosa extracts by different extracting solution was evaluated. Then, TLC , acolumn chromatography and HPLC were used to separate and purify the extracts. MS and NMR were used to identify the chemical components of the extracts. Results showed that: (1) the vitro antioxidant activity of extract in ethyl acetate was higher than in others ; (2) three compounds were isolated and identified as apigenin, apigenin-7-O-β-D-glucopyranoside and rutin.

    Key wordsExochorda racemosa; vitro antioxidant ; flavonoids ; isolation and identification

    收稿日期:2015-06-24,改回日期:2015-09-06

    DOI:10.13995/j.cnki.11-1802/ts.201602039

    第一作者:碩士研究生(張廣文副教授為通訊作者)。

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