人胃癌組織中γδT細(xì)胞亞群變化及意義

陳新孚，劉 建，劉軍權(quán)，陳光俠，呂小婷，朱 云，費(fèi)素娟

1. 徐州市第一人民醫(yī)院消化科，江蘇 徐州 221002；2. 徐州市第六人民醫(yī)院血液科；3. 解放軍第97醫(yī)院消化科 生物治療中心；4. 徐州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院消化科

人胃癌組織中γδT細(xì)胞亞群變化及意義

陳新孚1，劉 建2，劉軍權(quán)3，陳光俠1，呂小婷3，朱 云3，費(fèi)素娟4

1. 徐州市第一人民醫(yī)院消化科，江蘇 徐州 221002；2. 徐州市第六人民醫(yī)院血液科；3. 解放軍第97醫(yī)院消化科 生物治療中心；4. 徐州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院消化科

目的 通過(guò)檢測(cè)人胃癌組織中γδT細(xì)胞及其亞群多種效應(yīng)分子、細(xì)胞因子的水平，了解γδT細(xì)胞及其亞群的功能變化及意義。方法 選取手術(shù)切除的新鮮胃癌組織和正常胃組織(距離癌灶邊緣>5 cm)標(biāo)本，采用Ⅱ型膠原酶等酶消化法分離成單細(xì)胞懸液；流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)γδT細(xì)胞顆粒酶B、穿孔素、CD107a和IL-17A、IFN-γ的水平。結(jié)果 (1)胃癌組織中CD27+γδT細(xì)胞比例顯著高于CD27-γδT細(xì)胞的比例及正常胃組織中CD27+γδT細(xì)胞比例(P<0.05)；(2)胃癌組織中γδT細(xì)胞IL-17A的分泌水平明顯高于正常胃組織(P<0.05)，而顆粒酶B、穿孔素、CD107a等抗腫瘤效應(yīng)分子的表達(dá)與正常胃組織比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；(3)CD27+γδT細(xì)胞IL-17A的分泌水平顯著高于CD27-γδT細(xì)胞(P<0.01)，且其在胃癌組織中明顯高于正常胃組織(P<0.05)，在Ⅲ/Ⅳ期胃癌組織明顯高于Ⅰ/Ⅱ期胃癌組織(P<0.05)。結(jié)論 (1)胃癌組織中的γδT細(xì)胞分泌IL-17A明顯增高；(2)CD27+γδT細(xì)胞亞群是胃癌組織中γδT細(xì)胞的優(yōu)勢(shì)亞群，并可能通過(guò)分泌細(xì)胞因子IL-17A參與胃癌的發(fā)生、發(fā)展。

胃癌；γδT細(xì)胞；CD27；IL-17A

根據(jù)T細(xì)胞受體(T cell receptor，TCR)的不同人體內(nèi)T細(xì)胞分為兩大類(lèi)，即γδT細(xì)胞和αβT細(xì)胞。γδT細(xì)胞多為CD4-CD8-的雙陰性T細(xì)胞(少部分為CD8+)，由TCR信號(hào)途徑調(diào)節(jié)表達(dá)的鋅指轉(zhuǎn)錄因子ThPOK控制著γδT細(xì)胞的發(fā)育和成熟[1-2]。目前關(guān)于γδT細(xì)胞與腫瘤之間關(guān)系的研究已受到廣泛關(guān)注。但關(guān)于胃癌微環(huán)境中γδT細(xì)胞的功能活性的研究報(bào)道較少，因此，本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)了人胃癌組織中γδT細(xì)胞及其亞群的變化。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取徐州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院2013年7月-2014年8月住院行手術(shù)治療的胃癌患者21例，標(biāo)本采集之前患者均未進(jìn)行過(guò)放、化療，且無(wú)HIV、病毒性肝炎及自身免疫性疾病史，未使用過(guò)免疫抑制劑。所有患者術(shù)后均經(jīng)病理診斷證實(shí)為胃癌。男14例，女7例，年齡33～79歲，中位年齡58歲。所有患者均按照國(guó)際抗癌協(xié)會(huì)臨床TNM分期標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分期，其中TNM Ⅰ/Ⅱ期組9例，TNM Ⅲ/Ⅳ期組12例。

1.2 主要試劑和儀器Ⅱ型膠原酶、透明質(zhì)酸酶及DNA酶Ⅰ(Sigma公司)；FITC標(biāo)記的鼠抗人穿孔素、CD107A、IFN-γ，APC標(biāo)記的鼠抗人γδTCR，Percp-Cy5.5標(biāo)記的鼠抗人CD27，PE標(biāo)記的鼠抗人IL-17A、顆粒酶 B、淋巴細(xì)胞活化劑、固定劑及破膜劑(以上抗體均為BD Biosciences公司)；RPMI 1640培養(yǎng)基、胎牛血清(Gibco公司)；流式細(xì)胞儀(BD Biosciences公司)。

1.3 方法

1.3.1 單細(xì)胞懸液的制備：由手術(shù)切除的胃癌患者胃組織中獲取約2 g新鮮胃癌組織和2 g正常胃組織(距離癌灶邊緣>5 cm)標(biāo)本，在超凈臺(tái)上去除脂肪和組織表面的血液和黏液。分析天平稱(chēng)重并記錄組織重量，無(wú)菌生理鹽水清洗，剪刀剪碎，放置于RPMI 1640培養(yǎng)液中，加入Ⅱ型膠原酶、透明質(zhì)酸酶及DNA酶Ⅰ，37 ℃恒溫水浴箱中振蕩消化，3～5 min振蕩一次，30 min后提取已消化的細(xì)胞懸液，200目濾網(wǎng)過(guò)濾，取濾過(guò)液離心，棄上清，RPMI 1640液洗滌后加入Percoll分離液中，1 800 r/min離心15 min，分別吸取各密度層的細(xì)胞，RPMI 1640液洗滌2次，收集細(xì)胞進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究。

1.3.2 γδT細(xì)胞(及CD27+/-γδT細(xì)胞)穿孔素、粒酶B、CD107a的檢測(cè)：采用RPMI 1640培養(yǎng)液(含100 ml/L小牛血清)將淋巴細(xì)胞層的細(xì)胞調(diào)整為1×109/L，離心后加入APC Mouse Anti-Human γδTCR 5 μl和PerCP-Cy5.5 Mouse Anti-Human CD27 5 μl，重懸后室溫避光孵育15 min，再依次加入Fix&Perm中的Reagent A、B各100 μl，重懸后室溫避光孵育15 min，PBS液洗滌，分別加入PE Mouse Anti-Human Granzyme B 5 μl、FITC Mouse Anti-Human Perforin 20 μl和FITC Mouse Anti-Human CD107a 5 μl，重懸并室溫避光孵育15 min，PBS液洗滌后流式細(xì)胞儀檢測(cè)，BD FACS Diva軟件分析。

1.3.3 γδT細(xì)胞(及CD27+/-γδT細(xì)胞)IL-17A和IFN-γ的檢測(cè)：RPMI 1640培養(yǎng)液(含100 ml/L小牛血清)將淋巴細(xì)胞層的細(xì)胞調(diào)整為1×109/L，加入BD LEUKO ACTVTN GolgiPlug 2 μl置于37 ℃，5% CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)4～6 h，然后按順序分別加入APC Mouse Anti-Human γδTCR 5 μl、PerCP-Cy5.5 Mouse Anti-Human CD27 5 μl、Fix&Perm Reagent A、B各100 μl并重懸室溫避光孵育，加入PE Mouse Anti-Human IL-17A 20 μl和FITC Mouse Anti-Human IFN-γ 2 μl，室溫避光孵育后用PBS液洗滌，流式細(xì)胞儀檢測(cè)，BD FACS Diva軟件分析。

2 結(jié)果

2.1 胃癌組織和正常胃組織中γδT細(xì)胞及其亞群的比例胃癌組織中CD27+γδT細(xì)胞比例(68.40±1.94)%明顯高于正常胃組織(58.98±3.46)%，CD27-γδT細(xì)胞比例(31.60±1.94)%則明顯低于正常胃組織(41.02±3.46)%(P<0.05)。胃癌組織中CD27+γδT細(xì)胞比例較CD27-γδT細(xì)胞比例明顯升高(P<0.01)。但胃癌組織中γδT細(xì)胞比例(11.91±0.81)%與正常胃組織中γδT細(xì)胞比例(11.74±0.98)%比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05，見(jiàn)圖1A)。

2.2 胃癌組織和正常胃組織中γδT細(xì)胞顆粒酶B、穿孔素和CD107a表達(dá)水平的比較胃癌組織中γδT細(xì)胞顆粒酶B(18.19±1.06)%、穿孔素(7.99±0.88)%和CD107a(90.52±1.11)%的表達(dá)水平與正常胃組織中γδT細(xì)胞顆粒酶B(15.48±1.98)%、穿孔素(5.62±1.10)%和CD107a(86.10±1.35)%比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05，見(jiàn)圖1B)。胃癌不同臨床分期之間CD27+γδT細(xì)胞和CD27-γδT細(xì)胞上述三種效應(yīng)分子表達(dá)水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

2.3 胃癌組織和正常胃組織中γδT細(xì)胞IL-17A和IFN-γ分泌水平的比較胃癌組織中γδT細(xì)胞IL-17A(7.54±1.37)%的分泌水平明顯高于正常胃組織(3.47±0.69)%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.01)。胃癌組織與正常胃組織中γδT細(xì)胞IFN-γ的分泌水平分別為(15.32±2.39)%和(13.22±1.42)%，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05，見(jiàn)圖1C)。

注：N：正常胃組織，T：胃癌組織，GrB：顆粒酶B，PFP：穿孔素。*P<0.05，**P<0.01，NS：P>0.05。

2.4 胃癌組織和正常胃組織中CD27+γδT細(xì)胞與CD27-γδT細(xì)胞的功能比較胃癌組織中CD27+γδT細(xì)胞IL-17A(7.44±1.52)%的分泌水平明顯高于CD27-γδT細(xì)胞(1.24±0.43)%及正常胃組織CD27+γδT細(xì)胞(3.17±0.63)%(P<0.05)。正常胃組織內(nèi)CD27+γδT細(xì)胞IL-17A的分泌水平顯著高于CD27-γδT細(xì)胞(0.50±0.14)%(P<0.01)。然而，顆粒酶B、穿孔素、CD107a和IFN-γ的表達(dá)水平在CD27+γδT細(xì)胞亞群與CD27-γδT細(xì)胞亞群之間比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05，見(jiàn)圖2)。

注：CD27+：CD27+γδT細(xì)胞，CD27-：CD27-γδT細(xì)胞，N：正常胃組織，T：胃癌組織。*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001，NS：P>0.05。

圖2 CD27+γδT細(xì)胞與CD27-γδT細(xì)胞IL-17A、IFN-γ水平的比較 A：正常胃組織；B：胃癌組織；C：胃癌組織與正常胃組織

Fig 2 Comparison of the levels of IL-17A and IFN-γ between CD27+γδT cells and CD27-γδT cells A: normal gastric tissue; B: gastric cancer tissue; C: normal gastric tissue and gastric cancer tissue

2.5 γδT細(xì)胞及其亞群IL-17A、IFN-γ水平與胃癌臨床分期之間的關(guān)系γδT細(xì)胞IL-17A的分泌水平在Ⅲ/Ⅳ期胃癌組織內(nèi)(9.29±2.10)%顯著高于正常胃組織(4.12±0.88)%(P<0.05)。Ⅰ/Ⅱ期胃癌組織內(nèi)CD27+γδT細(xì)胞IL-17A(4.14±0.80)%的分泌水平低于Ⅲ/Ⅳ期胃癌組織(P<0.05)；但CD27-γδT細(xì)胞IL-17A的分泌水平在胃癌不同臨床分期之間比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；另外，IFN-γ的分泌水平在胃癌不同臨床分期之間及CD27+γδT細(xì)胞和CD27-γδT細(xì)胞之間比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05，見(jiàn)表1)。

表1 γδT細(xì)胞IL-17A、IFN-γ水平與胃癌臨床分期之間的關(guān)系

注：與Ⅲ/Ⅳ期胃癌組織CD27+γδT細(xì)胞組相比，aP<0.05；與正常胃組織相比，bP<0.05。

3 討論

關(guān)于γδT細(xì)胞的分群方法，目前尚無(wú)相關(guān)共識(shí)，Ribot等[3]研究發(fā)現(xiàn)，γδT細(xì)胞在胸腺分化過(guò)程中就已經(jīng)形成具有不同功能特性的γδT細(xì)胞亞群，這種分化與多種分子機(jī)制有關(guān)；他們認(rèn)為CD27可以作為區(qū)分小鼠IFN-γ陽(yáng)性γδT細(xì)胞和IL-17陽(yáng)性γδT細(xì)胞的表面標(biāo)志，即CD27+γδT細(xì)胞主要分泌IFN-γ，CD27-γδT細(xì)胞主要分泌IL-17。從胰腺、淋巴結(jié)和其他組織中(如肺和腸道)分離得到的CD27+γδT細(xì)胞刺激后可以分泌IFN-γ，而CD27-γδT細(xì)胞刺激后主要分泌IL-17[4]。然而，關(guān)于CD27能否作為人體內(nèi)γδT細(xì)胞的表面標(biāo)志的研究少有報(bào)道。我們檢測(cè)了人胃癌組織和正常胃組織內(nèi)γδT細(xì)胞及其亞群的比例變化，結(jié)果顯示γδT細(xì)胞的比例在胃癌組織與正常胃組織內(nèi)無(wú)明顯差異，但是，胃癌組織中CD27+γδT細(xì)胞亞群的比例顯著高于CD27-γδT細(xì)胞亞群及正常胃組織CD27+γδT細(xì)胞亞群，即CD27+γδT細(xì)胞亞群為人胃癌組織內(nèi)主要的γδT細(xì)胞亞群。

顆粒酶B、穿孔素和CD107a作為淋巴細(xì)胞細(xì)胞毒活性的標(biāo)志[5-7]，其表達(dá)水平可以反映淋巴細(xì)胞的抗腫瘤活性。本實(shí)驗(yàn)采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)人胃癌組織與正常胃組織中γδT細(xì)胞及其亞群顆粒酶B、穿孔素和CD107a的表達(dá)水平。結(jié)果顯示，胃癌組織中的γδT細(xì)胞(包括CD27+γδT細(xì)胞亞群和CD27-γδT細(xì)胞亞群)和NK細(xì)胞、NKT細(xì)胞及CD8+T細(xì)胞等細(xì)胞毒細(xì)胞類(lèi)似，也能表達(dá)顆粒酶B、穿孔素及CD107a，且胃癌組織中γδT細(xì)胞及其亞群顆粒酶B、穿孔素和CD107a的表達(dá)水平與正常胃組織比較，無(wú)明顯降低，表明在胃癌微環(huán)境中γδT細(xì)胞及其亞群并沒(méi)有表現(xiàn)出與其細(xì)胞毒活性相關(guān)的免疫抑制。

IL-17家族是人體內(nèi)重要細(xì)胞因子，尤其是IL-17A已被廣泛研究，其多由CD4+T細(xì)胞分泌，但也有研究發(fā)現(xiàn)γδT細(xì)胞也是體內(nèi)IL-17A的重要來(lái)源[8]。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)γδT細(xì)胞在牛結(jié)核分枝桿菌卡介苗刺激后IL-17A表達(dá)升高，并可促進(jìn)中性粒細(xì)胞在腫瘤灶的聚集和抑制腫瘤生長(zhǎng)[9]。但是也有研究發(fā)現(xiàn)，在小鼠纖維肉瘤模型中，腫瘤浸潤(rùn)的γδT細(xì)胞表達(dá)的IL-17A能促進(jìn)腫瘤血管生成并促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)[10]。在另一個(gè)包含多種不同腫瘤模型的研究中，發(fā)現(xiàn)化療后的瘤體內(nèi)分泌IL-17A的γδT細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞與抑制腫瘤生長(zhǎng)有關(guān)[11]。我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，胃癌組織中γδT細(xì)胞IL-17A的分泌水平比正常組織明顯升高，而Ⅰ/Ⅱ期胃癌組織中γδT細(xì)胞IL-17A的分泌水平低于Ⅲ/Ⅳ期胃癌組織，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(這也可能與病例數(shù)少有關(guān))，然而，Ⅲ/Ⅳ期胃癌組織內(nèi)γδT細(xì)胞IL-17A的分泌水平顯著高于正常胃組織。另外，胃癌組織及正常胃組織中CD27+γδT細(xì)胞IL-17A的分泌水平均高于CD27-γδT細(xì)胞，且CD27+γδT細(xì)胞IL-17A的分泌水平還表現(xiàn)為胃癌組織高于正常胃組織、Ⅲ/Ⅳ期胃癌組織高于Ⅰ/Ⅱ期胃癌組織。CD27+γδT細(xì)胞IL-17A的分泌水平與胃癌的發(fā)展呈現(xiàn)出明顯的一致性。以上結(jié)果表明，隨著胃癌的形成和進(jìn)展，γδT細(xì)胞及CD27+γδT細(xì)胞亞群IL-17A的分泌水平是增加的。這種高表達(dá)可能與胃腸道黏膜的炎癥-癌變發(fā)展途徑密切相關(guān)[6]。

我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)人胃癌組織內(nèi)CD27+γδT細(xì)胞亞群和CD27-γδT細(xì)胞亞群雖然IL-17A的分泌水平存在明顯差異，但I(xiàn)FN-γ的分泌水平?jīng)]有明顯區(qū)別，與此前小鼠體內(nèi)的相關(guān)研究結(jié)果并不相同。因此，在人體內(nèi)不能簡(jiǎn)單地用CD27作為γδT細(xì)胞的表面標(biāo)志。然而，根據(jù)上述相關(guān)結(jié)果可以認(rèn)為CD27+γδT細(xì)胞亞群是人胃癌組織中γδT細(xì)胞的優(yōu)勢(shì)亞群，且γδT細(xì)胞及CD27+γδT細(xì)胞亞群可能通過(guò)分泌IL-17A參與了胃癌的發(fā)生、發(fā)展。

[1]Park K, He X, Lee HO, et al. TCR-mediated ThPOK induction promotes development of mature (CD24-) gammadelta thymocytes [J]. EMBO J, 2010, 29(14): 2329-2341.

[2] Zarin P, Wong GW, Mohtashami M, et al. Enforcement of γδ-lineage commitment by the pre-T-cell receptor in precursors with weak γδ-TCR signals [J]. Proc Natl Acad Sci U S A, 2014, 111(15): 5658-5663.

[3] Ribot JC, Ribeiro ST, Correia DV, et al. Human γδ thymocytes are functionally immature and differentiate into cytotoxic type 1 effector T cells upon IL-2/IL-15 signaling [J]. J Immunol, 2014, 192(5): 2237-2243.

[4] Ribot JC, deBarros A, Pang DJ, et al. CD27 is a thymic determinant of the balance between interferon-gamma- and interleukin 17-producing gammadelta T cell subsets [J]. Nat Immunol, 2009, 10(4): 427-436.

[5] He J, Li L, Wei W, et al. Expression of perforin and granzyme-B in peripheral blood lymphocyte in patients with prostate cancer and the clinical significance [J]. Zhong Nan Da Xue Xue Bao Yi Xue Ban, 2015, 40(4): 387-391.

[6] Aktas E, Kucuksezer UC, Bilgic S, et al. Relationship between CD107a expression and cytotoxic activity [J]. Cell Immunol, 2009, 254(2): 149-154.

[7] Viel S, Charrier E, Marcais A, et al. Monitoring NK cell activity in patients with hematological malignancies [J]. Oncoimmunology, 2013, 2(9): e26011.

[8] Cai Y, Shen X, Ding C, et al. Pivotal role of dermal IL-17-producing γδT cells in skin inflammation [J]. Immunity, 2011, 35(4): 596-610.

[9] Takeuchi A, Dejima T, Yamada H, et al. IL-17 production by γδ T cells is important for the antitumor effect of Mycobacterium bovis bacillus Calmette-Guérin treatment against bladder cancer [J]. Eur J Immunol, 2011, 41(1): 246-251.

[10]Wakita D, Sumida K, Iwakura Y, et al. Tumor-infiltrating IL-17-producing gammadelta T cells support the progression of tumor by promoting angiogenesis [J]. Eur J Immunol, 2010, 40(7): 1927-1937.

[11] Ma Y, Aymeric L, Locher C, et al. Contribution of IL-17-producing gamma delta T cells to the efficacy of anticancer chemotherapy [J]. J Exp Med, 2011, 208(3): 491-503.

(責(zé)任編輯：馬 軍)

The significance of γδT cell from the tumor tissue of human gastric carcinoma

CHEN Xinfu1, LIU Jian2, LIU Junquan3, CHEN Guangxia1, LV Xiaoting3, ZHU Yun3, FEI Sujuan4

1. Department of Gastroenterology, Xuzhou First People’s Hospital, Xuzhou 221002; 2. Department of Hematology, the Sixth People’s Hospital of Xuzhou; 3. Department of Gastroenterology, Biological Therapy Center, the 97th Hospital of PLA; 4. Department of Gastroenterology, the Affiliated Hospital of Xuzhou Medical College, China

Objective To investigate the significance of γδT cells by detecting the level of γδT and its effector molecules and secreting different cytokines in human gastric cancer tissues. Methods Freshly excised gastric tumor tissues and normal gastric tissues (being greater than 5 cm from the tumor edge) from gastric carcinoma patients were selected and incubated them with the solution containing collagen Ⅱ and made them into single cell suspensions. A flow cytometer was used to detect the levels of Granzyme B, Perforin, CD107a, IL-17A and IFN-γ. Results Firstly, the proportion of CD27+γδT cells subtype was higher than that of CD27-γδT cells subtype in the gastric carcinoma tissue and it was also higher than the proportion of CD27+γδT cells subtype from normal gastric tissue (P<0.05). Secondly, the level of IL-17A that γδT cells secreted in the gastric tumor tissues was obviously higher than that in the normal gastric mucosa (P<0.05). But, there were no differences in the proportions of Granzyme B, Perforin, CD107a between the gastric tumor tissue and the normal gastric tissue (P>0.05). Thirdly, in the gastric carcinoma tissue and normal gastric tissue, the proportion of CD27+γδT cells subtype secreting IL-17A was obviously higher than that of CD27-γδT cells subtype secreting (P<0.01). Additionally, the proportion of CD27+γδT cells subtype from gastric carcinoma tissue secreting IL-17A was also higher than that of CD27+γδT cells subtype from normal gastric tissue (P<0.05). The proportion of CD27+γδT cells subtype from the Ⅲ/Ⅳ stage gastric carcinoma tissue secreting IL-17A was higher than that from the Ⅰ/Ⅱ stage gastric carcinoma tissue secreting (P<0.05). Conclusion Firstly, in gastric tumor tissue, the level of γδT cells secreting cytokines IL-17A is significantly increased. Secondly, the CD27+γδT cells subtype is the major functional active cells subtype of γδT cells in the gastric carcinoma tissue. Additionally, it may take part in the appearance and development of gastric cancer by secreting cytokines IL-17A.

Gastric carcinoma; γδT cell; CD27; IL-17A

南京軍區(qū)醫(yī)學(xué)科技創(chuàng)新課題(011Z009)

陳新孚，碩士，主治醫(yī)師，研究方向：消化道腫瘤的基礎(chǔ)與臨床。E-mail： 626014646@qq.com

朱云，碩士，主任醫(yī)師，碩士生導(dǎo)師，研究方向：平戰(zhàn)時(shí)部隊(duì)官兵消化性潰瘍致病因素及防治。E-mail： xxfwb@cumt.edu.cn；費(fèi)素娟，碩士，主任醫(yī)師，碩士生導(dǎo)師，研究方向：消化道腫瘤的基礎(chǔ)及臨床研究。E-mail： xyfyfeisj99@163.com

10.3969/j.issn.1006-5709.2016.01.005

R735.2

A

1006-5709(2016)01-0020-04

2015-05-05