甲硝唑口含片的含量測(cè)定

吳瓊 王丹 杜利月 徐振興

摘 要： 目的：建立甲硝唑口含片含量的測(cè)定方法。方法：采用紫外分光光度法測(cè)定甲硝唑口含片的含量，以稀鹽酸（9→1000）為對(duì)照，在277nm波長(zhǎng)測(cè)定吸光度，計(jì)算甲硝唑的含量。結(jié)果：甲硝唑在10.44～

含量實(shí)驗(yàn)是評(píng)價(jià)口服固體制劑內(nèi)在質(zhì)量的一種必要手段，對(duì)保證藥物能從制劑中順利溶出而發(fā)揮療效起到十分重要的作用，也是新藥評(píng)審的重要依據(jù)[1]。甲硝唑（Metronidazole，MNZ）是在20世紀(jì)50年代末人工合成的硝基咪唑類藥物，作為治療厭氧菌的重要藥物，目前上市有普通片劑、泡騰片、注射液、栓劑、膠囊劑等制劑用于臨床疾病的治療[2]。但尚未見(jiàn)有甲硝唑口含片上市，為了方便口腔厭氧菌感染的患者用藥和疾病的治療，豐富MNZ的制劑，筆者采用矯味制劑技術(shù)，將甲硝唑原料制備成了甲硝唑口含片[3]。筆者參考相關(guān)文獻(xiàn)[4-8]，采用紫外分光光度法，測(cè)定了甲硝唑口含片含量，并通過(guò)方法學(xué)驗(yàn)證了含量測(cè)定方法科學(xué)性。

關(guān)鍵詞： 甲硝唑口含片 含量 測(cè)定

中圖分類號(hào)：R943 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1003-9082（2016）05-0282-01

一、材料

1.儀器 Carry-100紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)（美國(guó)瓦里安儀器有限公司）；ZPY1036型旋轉(zhuǎn)式壓片機(jī)（上海天祺制藥機(jī)械有限公司）；DZF-6020真空干燥箱（上?；|試驗(yàn)儀器設(shè)備有限公司）；TE214S型電子分析天平（德國(guó)賽多利斯）。

2.藥品與試劑 甲硝唑?qū)φ掌罚ㄖ袊?guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)：090806，純度：99.90%）；甲硝唑原料（宜昌長(zhǎng)江藥業(yè)有限公司，批號(hào)：20140162）；甲硝唑口含片（自制，規(guī)格：100mg/片）；其他試劑均為分析純。

二、方法與結(jié)果

1.甲硝唑口含片的制備 參照杜利月[3]“甲硝唑口含片制備工藝研究”中制備甲硝唑口含片，取甲硝唑原料和輔料分別粉碎，過(guò)100目篩，備用。按處方量稱取已粉碎好的甲硝唑200g，蔗糖40g，甘露醇10g，阿斯巴甜20g，混合均勻后加入適量的蒸餾水制軟材，20目篩制濕顆粒，60℃減壓干燥，16目篩整粒，邊攪拌邊噴入檸檬香精，密封保存24h，再將其置于混合機(jī)中，加入干顆粒重量0.2%的羧甲基淀粉鈉和0.5%的硬脂酸鎂，混勻后，測(cè)定含量，計(jì)算片重，壓片，備用。重復(fù)制備三批，批號(hào)編訂為：20150501、20150502、20150503。

2.測(cè)定波長(zhǎng)的選擇 精密稱取120℃干燥至恒重的甲硝唑?qū)φ掌?6.1mg置于50ml容量瓶中，以0.1mol/L鹽酸使其溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得1 ml含甲硝唑?qū)φ掌?22.0μg的對(duì)照品標(biāo)準(zhǔn)溶液。精密量取上述甲硝唑標(biāo)準(zhǔn)溶液2.5ml置于25ml容量瓶中，以0.1mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻作為測(cè)試液，以溶劑作為空白對(duì)照，采用瓦里安Carry-100紫外分光光度計(jì)在200～800nm范圍內(nèi)進(jìn)行掃描，確定最大吸收波長(zhǎng)[4，5]。甲硝唑?qū)φ掌返膾呙鑸D見(jiàn)圖1。由圖可知，甲硝唑在277nm波長(zhǎng)處有最大吸收。

圖1 甲硝唑?qū)φ掌纷贤馕諕呙鑸D

3.干擾性試驗(yàn) 分別按處方比例取輔料加入蒸餾水（潤(rùn)濕劑）適量制備成軟材，制濕顆粒，干燥，整粒，加檸檬香精，密閉24h，加入羧甲基淀粉鈉和硬脂酸鎂混合均勻，壓片，制備成不含甲硝唑的空白樣品片，備用。以稀鹽酸（9→1000）為溶劑、轉(zhuǎn)速為100r/min測(cè)定含量。在溶出60min時(shí)，取樣5ml，濾過(guò)，取2ml續(xù)濾液置于適宜的容量瓶中，加稀鹽酸（9→1000）稀釋適宜倍數(shù)，備用。取上述混合液，在200～800 nm的波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行掃描[5，6]。結(jié)果表明在制備甲硝唑口含片過(guò)程中加入的輔料不干擾在277 nm波長(zhǎng)處測(cè)定本品的含量，詳見(jiàn)圖2。

圖2 空白輔料紫外吸收掃描圖

4.線性關(guān)系考察 精密量取本章節(jié)“2.2測(cè)定波長(zhǎng)的選擇”項(xiàng)下制備的標(biāo)準(zhǔn)溶液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0ml于25ml容量瓶中，以0.1mol/L鹽酸溶液定容，測(cè)定吸光度（A），將濃度（C）對(duì)吸光度（A）進(jìn)行線性回歸，得：A=5.554×10-3C + 25.377×10-2，相關(guān)系數(shù)r=0.9995?；貧w方程在研究的濃度范圍10.44～62.64μg/ml，線性關(guān)系良好[6]。

5.精密度試驗(yàn) 連續(xù)測(cè)定“2.4線性關(guān)系考察”項(xiàng)下41.76μg/ml的溶液的吸光度，測(cè)定6次的平均吸光度為0.35（RSD為0.41%，n=6），表明方法精密度好。

6.回收率試驗(yàn) 精密稱定甲硝唑?qū)φ掌愤m量，按照處方比加入一定的輔料和鹽酸（9→1000），搖勻，配置成高、中、低三種不同濃度的甲硝唑?qū)φ掌啡芤海糠N濃度平行配置三份，樣品過(guò)濾后，在最大波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，計(jì)算回收率[7]，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1回收率試驗(yàn)結(jié)果（n=3）

7.穩(wěn)定性試驗(yàn) 取同一批甲硝唑口含片（批號(hào)：20150503）粉末適量，加稀鹽酸（9→1000）稀釋至適宜倍數(shù)，搖勻備用。以稀鹽酸（9→1000）為對(duì)照，在0、2、4、6、8、10、12h時(shí)，取樣在最大吸收波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度[5，7-8]。結(jié)果顯示，甲硝唑在溶出液介質(zhì)中放置0～8h時(shí)吸光度（RSD為0.19%，n=15）基本穩(wěn)定不變，其在8h之內(nèi)的穩(wěn)定性較好。

8.樣品的含量測(cè)定 分別取三批自制甲硝唑口含片粉末適量，每批取6個(gè)樣，加稀鹽酸（9→1000）稀釋至適宜倍數(shù)，搖勻，以稀鹽酸（9→1000）為對(duì)照，在277nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度[5，7-8]。三批甲硝唑口含片的測(cè)定結(jié)果分別為：（99.4±0.22）%（RSD為0.21%，n=6）、（99.9±0.26）% （RSD為0.25%，n=6）、（100.4±0.18）% （RSD為0.23%，n=6）。

三、討論

此種含量測(cè)定方法可以簡(jiǎn)單、快速的測(cè)定出甲硝唑口含片中主藥含量，適合于小批量多批次生產(chǎn)時(shí)的快速含量測(cè)定，含量的成本低，不但設(shè)備操作簡(jiǎn)單易上手，而且相對(duì)于高效液相色普法測(cè)定含量的設(shè)備的投入較少。但是此種含量的定的方法有利于節(jié)約生產(chǎn)企業(yè)的生產(chǎn)成本。此外，本課題組參照中國(guó)藥典中甲硝唑片含量測(cè)定方法[2]，考察了多種含量測(cè)定方法的方法學(xué)驗(yàn)證，包括檢測(cè)波長(zhǎng)、精密度、回收率、線性方程、干擾實(shí)驗(yàn)、穩(wěn)定性等，優(yōu)化了甲硝唑口含片含量的測(cè)定方法。

綜上所述，本試驗(yàn)建立的甲硝唑口含片測(cè)定方法科學(xué)合理、簡(jiǎn)便易行、結(jié)果準(zhǔn)確，可用于甲硝唑口含片的含量測(cè)定。

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