施灸赫依三穴對失眠模型大鼠鎮(zhèn)靜催眠作用機(jī)理研究

高玉峰

(內(nèi)蒙古民族大學(xué)附屬醫(yī)院，內(nèi)蒙古 通遼 028007)

施灸赫依三穴對失眠模型大鼠鎮(zhèn)靜催眠作用機(jī)理研究

高玉峰

(內(nèi)蒙古民族大學(xué)附屬醫(yī)院，內(nèi)蒙古 通遼 028007)

以蒙醫(yī)灸療法為處理因素，探尋施灸赫依三穴對睡眠紊亂模型大鼠行為學(xué)及腦組織神經(jīng)細(xì)胞因子的影響。方法：將50只大鼠分為空白、模型、頂會穴、赫依穴、黑白際穴等5組，每組10只，空白與模型組大鼠經(jīng)腹腔注射對氯苯丙胺酸(PCPA)使大鼠睡眠節(jié)律紊亂，頂會穴、赫依穴、黑白際穴組分別施灸相應(yīng)穴位。觀察各組大鼠腹腔注射戊巴比妥鈉后的睡眠時間。檢測大鼠腦組織NO與NOS含量。結(jié)果：(1)各組大鼠對戊巴比妥鈉睡眠時間比較：治療后與模型組比較空白組和治療組均有顯著性差異(P<0.05)；(2)各組大鼠腦組織中NO含量和NOS活性比較:與模型組比較空白對照組、頂會穴組和赫依穴組均有顯著性差異(P<0.05)，黑白際穴組無明顯差異(P>0.05)。結(jié)論：施灸赫依三穴對睡眠紊亂模型大鼠具有鎮(zhèn)靜催眠作用，頂會穴與赫依穴可能是通過抑制腦組織一氧化氮合酶(NOS)誘導(dǎo)產(chǎn)生過量的一氧化氮(NO)，降低神經(jīng)細(xì)胞的興奮性，起到神經(jīng)保護(hù)作用，黑白際穴組對腦組織中NO與NOS無影響，可能是通過其他途徑起到神經(jīng)調(diào)節(jié)作用。

蒙醫(yī)灸療；赫依三穴；鎮(zhèn)靜催眠作用；機(jī)理研究

失眠是指患者對睡眠時間或質(zhì)量不滿足并影響白天社會功能的一種主觀體驗。失眠會引起人的全身不適、疲勞感、不安、無精打采，反應(yīng)遲緩、記憶力不集中等癥狀，它的最大影響是精神方面的，嚴(yán)重一點會導(dǎo)致精神分裂。現(xiàn)如今，失眠癥的發(fā)生率逐年增高，我國失眠障礙患者比例已超過20%。因睡眠質(zhì)量問題導(dǎo)致的多種社會問題及事故發(fā)生幾率較睡眠正常人高出2倍。

在市場上治療失眠癥的藥物諸多?？诜魉庪m能迅速入眠，但容易成依賴或成癮。因此人們越來越追求傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)治療失眠癥的方法[1]。

灸法是蒙醫(yī)傳統(tǒng)“五療”的重要內(nèi)容之一。蒙醫(yī)灸法是以蒙醫(yī)基礎(chǔ)理論為指導(dǎo)，經(jīng)過長期的、大量的臨床實踐經(jīng)驗積累而形成的一種獨(dú)特的非藥物療法。是在人體各部相關(guān)的固定穴位或不定穴位上通過“灼熱”或“溫?zé)帷贝碳ざ_(dá)到調(diào)節(jié)氣血、增強(qiáng)體質(zhì)、防治疾病和保健的目的[2]。該法具有適應(yīng)范圍廣，療效卓著，見效快，復(fù)發(fā)率低，副作用小，經(jīng)濟(jì)方便等優(yōu)點。對失眠癥、健忘癥、消化不良、胃火衰敗、浮腫、癲狂等多中疾病療效顯著[3]。

赫依三穴是指頂會穴(位于從兩眉正中，往上劃一線，再從兩耳葉上緣正中往上劃一線，此二線在頭頂之交叉處便是，即中醫(yī)之百會穴)、赫依穴(位于第七頸椎棘突與第一胸椎棘突間隙窩中。即中醫(yī)之大椎穴)、黑白際穴(位于兩乳正中對直的心窩處，即中醫(yī)之膻中穴。)等3個穴位。臨床上針灸該3個穴位對赫依偏盛引起的疾病(如失眠癥)有較好的療效[3]。

該實驗研究中我們以蒙醫(yī)灸療法為處理因素，選取赫依三穴作用于失眠伴焦慮模型大鼠，對其療效機(jī)理加以驗證，為今后的機(jī)制研究奠定基礎(chǔ)。為臨床辯證施治提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料：采用健康級Wister大鼠50只,體重180± 20g，由吉林大學(xué)實驗動物中心提供，合格證號：SCXK(吉)2011-0004。藥物：對氯苯丙胺酸(PCPA),由北京環(huán)亞太克生物醫(yī)學(xué)技術(shù)有限公司提供，批號：sigma—c6506。NOS與NO試劑盒：上海瀘尚生物科技有限公司提供。艾灸貼(蘇州東方艾絨廠出品)直徑約4mm，長約1cm，灸墊厚度為2mm。

1.2 方法：購買Wister大鼠后在飼料充足、無干擾的正常睡眠狀態(tài)下飼養(yǎng)3d。稱重后隨機(jī)分為空白組、模型組、頂會穴組、赫依穴組、黑白際穴組等5組，每組10只。治療組與模型組：將PCPA用生理鹽水配置成混懸液(45mg/100g)，腹腔注射PCPA 混懸液(1mL/100g)，每日1次，連續(xù)注射2d；空白對照組常規(guī)喂養(yǎng)；當(dāng)動物出現(xiàn)毛皮枯槁，舉肢、理毛、走動次數(shù)明顯，不能安臥等外部特征與文獻(xiàn)報道一致[4],即造模成功。治療組：d3起開始施灸，按參考文獻(xiàn)[5，6]記載在大鼠頂會穴、赫依穴、黑白際穴剪去穴位周圍鼠毛，進(jìn)行施灸，每次行3個艾灸貼，時間5min,共施灸7d。空白組和模型組d3開始按程序抓取不施灸，連續(xù)7d。

1.3 指標(biāo)檢測：于末次灸療1h后，每組大鼠分別給予戊巴比妥鈉40 mg/kg，腹腔注射。記錄大鼠的睡眠時間(以翻正反射消失為入睡時間，從翻正反射消失至恢復(fù)時間為睡眠持續(xù)時間)。之后將各組大鼠斷頭處死，即刻剝離出腦組織備用。腦組織中NO與NOS含量測定分別依據(jù)NOS與NO的測定試劑盒說明書進(jìn)行。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法：數(shù)據(jù)用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件處理，結(jié)果用±S表示，兩組間資料比較采用單因素方差分析，以P<0.05為差異有顯著性意義。

2 結(jié)果

2.1 對大鼠戊巴比妥鈉睡眠時間的影響：模型組與空白組比較，模型組大鼠睡眠時間短(P<0.05)。模型組和3個治療組間比較，3個治療組大鼠的睡眠時間均延長(P<0.05)，見表1。

表1 治療后大鼠對戊巴比妥鈉睡眠時間的影響

注:模型組與空白組比較，◆P<0.05；與各治療組比較●P<0.05，●●P<0.05，●●●P<0.05；

2.2 對大鼠腦組織中NO與NOS的影響：各組大鼠腦組織中NO含量和NOS活性比較: 模型組和空白對照組之間有顯著性差異(P<0.05)。與模型組比較頂會穴組和赫依穴組均有顯著性差異(P<0.05)，黑白際穴組無明顯差異(P>0.05)，見表2

表2 對大鼠腦組織中NO與NOS的影響

注:與空白組比較，◆P<0.05；與模型組比較，●P<0.05，●●P<0.05，●●●P>0.05

3 討論

蒙醫(yī)學(xué)認(rèn)為失眠的主要原因是因赫依與血相搏而導(dǎo)致的，按三根病變說，赫依偏盛紊亂是其基本原因；就發(fā)病部位講，失眠多合并于心、腎病、腦、神經(jīng)病等。因語境行為過度、委屈或興奮、憤怒、急躁等精神刺激、饑餓狀態(tài)下過度勞累、飲食營養(yǎng)和熱能缺乏、年老而心體素衰弱，導(dǎo)致赫依偏盛，與血交搏，侵入心、主脈、神經(jīng)、白脈，導(dǎo)致其功能紊亂而發(fā)病。而施灸赫依三穴具有抑赫依，疏通赫依與血之運(yùn)行路、促進(jìn)白脈傳導(dǎo)、寧心安神的功效。在臨床實踐中也證明了針灸赫依三穴對赫依偏盛引起的疾病有較好的療效[7]。

NO既參與神經(jīng)細(xì)胞間的信息傳遞過程，又參與多種神經(jīng)系統(tǒng)疾病的病理過程。NO在體內(nèi)由NOS催化而產(chǎn)生。由于NO是性質(zhì)活潑的氣體，因此人們多通過NOS合酶來反映NO的含量[8] [9]。NO在神經(jīng)系統(tǒng)的活動中起重要作用，NO增多具有神經(jīng)毒性作用[10]。因此,探尋NO、NOS與失眠癥的關(guān)系具有一定的臨床意義。

本課題通過觀察施灸赫依三穴對睡眠紊亂模型大鼠腹腔注射戊巴比妥鈉后睡眠時間的影響及大鼠腦組織中NO含量和NOS活性比較。進(jìn)一步驗證了灸療法的鎮(zhèn)靜催眠作用 ，為進(jìn)一步機(jī)理研究提供了行為學(xué)依據(jù)。

[1]張鵬，鼓建偉．中醫(yī)療法消除運(yùn)動性失眠的研究進(jìn)展[J]．中醫(yī)藥信息雜志，2014，31(6)：129.

[2] 蒙古學(xué)百科全書總編輯委員會．蒙古學(xué)百科全書(醫(yī)學(xué))[M]．內(nèi)蒙古人民出版社，2012，7：137.

[3] 蒙古學(xué)百科全書編輯委員會．蒙古學(xué)學(xué)百科全書(醫(yī)學(xué))[M]．內(nèi)蒙古人民出版社，2012，7：43.

[4] 李艷琴．實驗性腦損傷中腦組織NO含量、NOS活性的改變及意義[J]．南通大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版)，2012，32(6)：500.

[5]陳英松．蒙醫(yī)實驗療術(shù)學(xué)[M]．內(nèi)蒙古大學(xué)出版社,2008.

[6]斯欽圖,于天源.蒙醫(yī)灸療法抗衰老二三穴組穴配伍規(guī)律實驗研究[J]．世界科學(xué)技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化，2010，12(6)：976-980.

[7]策·蘇榮扎布.蒙醫(yī)內(nèi)科學(xué)[M]．內(nèi)蒙古民族出版社，1986，490-491.

[8]劉學(xué)松，安方玉，等.當(dāng)歸多糖對衰老模型小鼠學(xué)習(xí)記憶能力及NO、NOS表達(dá)水平的影響[J].中醫(yī)醫(yī)學(xué), 2013，26(5)：75.

[9]陽晶晶，嚴(yán)潔，王超，等.針刺對嗎啡戒斷大鼠腦組織一氧化氮合酶基因表達(dá)的影響[J]．中國中醫(yī)急癥，2014，23(7)：1209.

[10]白麗敏，李亞東.神經(jīng)解剖學(xué)[M]．中國中醫(yī)藥出版社，2003，8：190-191.

2016年 8月17日收稿

1.內(nèi)蒙古自然基金項目(2012MS1114)；2.國家自然基金項目(81460762)3.內(nèi)蒙古自治區(qū)衛(wèi)生和計劃生育委員會醫(yī)療衛(wèi)生科研計劃項目(201301077)

高玉峰(1979-)，男(蒙古族)，內(nèi)蒙古興安盟人，副主任醫(yī)師。E-mail：hubaolige@126.com

R291.2

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1006-6810(2016)12-0067-02