HPLC法測(cè)定沙日毛都-8中梔子苷的含量

田利明（烏蘭察布市食品藥品檢驗(yàn)所　烏蘭察布　012000）

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HPLC法測(cè)定沙日毛都-8中梔子苷的含量

田利明（烏蘭察布市食品藥品檢驗(yàn)所烏蘭察布012000）

摘要：目的：探討沙日毛都-8中梔子苷的含量測(cè)定方法。方法：用A11tech C18色譜柱，以乙腈—水（12∶88）為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為238nm。結(jié)果：梔子苷在0.1167～0.6503μg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，平均回收率99.87%（n=6）。結(jié)論：用HPLC法測(cè)定沙日毛都-8中梔子苷的含量，方法簡(jiǎn)便易行，準(zhǔn)確可靠。

關(guān)鍵詞：HPLC沙日毛都-8梔子苷

沙日毛都-8是傳統(tǒng)的蒙藥制劑，由黃柏、香墨、梔子、甘草、紅花、蓽撥、牛膽粉、黑云香8味中藥組成的復(fù)方蒙藥制劑。梔子是方中主藥，梔子含有梔子苷、羥異梔子苷等化合物，梔子苷是梔子的有效成分，故控制其含量有實(shí)際意義。本文采用高效液相色譜法精確快速地測(cè)定制劑中梔子的含量。

1　儀器與試藥

1.1儀器：日本島津LC-20AT型高壓雙泵、SIL-20A自動(dòng)進(jìn)樣閥、SPD-20AT紫外-可見檢測(cè)器、CTO-20A柱箱、LCsolution色譜數(shù)據(jù)工作站；KQ-100型超聲波清洗器；電子天平BS210S（d= 0.1mg）。

1.2試劑與試藥：梔子苷對(duì)照品中國(guó)藥品生物制品檢定所批號(hào)：110749-200512；甲醇、乙腈為色譜純，水為超純水。沙日毛都-8（包頭市達(dá)茂旗蒙醫(yī)院制劑室）。

2　方法與結(jié)果

2.1色譜條件：采用Zorhax C1（84.6mm×250mm）色譜柱；柱溫25℃；流動(dòng)相：乙腈—水（12∶88）。檢測(cè)波長(zhǎng)238nm。流速：1.0mL/min；進(jìn)樣量20μL。

2.2對(duì)照品溶液的制備：精密量取梔子苷對(duì)照品，置于25mL容量瓶中，加流動(dòng)相定容，制成30g/mL的溶液，作為對(duì)照品溶液。

2.3供試品溶液的制備：精密稱定本品約0.3g，置具塞容量瓶中,精密加入甲醇25mL，密閉，稱定重量，經(jīng)超聲波處理30min，放冷，再次稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減少的重量，搖勻，取上清液過0.45m微孔濾膜濾過，取濾液，備用。

2.4陰性對(duì)照溶液的制備：取自制不含梔子的空白制劑樣品，按處方制備方法制成陰性對(duì)照溶液。

2.5系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)：在“2.1”色譜條件下，分別吸取對(duì)照品溶液、供試品溶液、陰性對(duì)照液各10μL注入色譜儀，記錄色譜圖，沙日毛都-8中其他組分在梔子苷峰上無干擾，結(jié)果見圖1、2、3。

2.6線性關(guān)系：精密吸取梔子苷對(duì)照品溶液2、4、6、8、10、12μL溶液分別進(jìn)樣，按“2.1”建立的色譜條件測(cè)定，以梔子苷濃度（μg/mL）為縱坐標(biāo)，峰面積為橫坐標(biāo)作圖，繪制工作曲線。表明梔子苷在0.1167～0.6503μg范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系。以對(duì)照品進(jìn)樣量（μg）為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo),線性回歸方程：Y= 1384583.2-12021.7X，r=0.9998.

2.7精密度試驗(yàn)：準(zhǔn)確吸取30g/mL的對(duì)照品溶液10μL，重復(fù)6次進(jìn)樣，相對(duì)偏差RSD=0.44%，說明本實(shí)驗(yàn)精密度良好。

2.8重現(xiàn)性試驗(yàn)：取同一批樣品6份，按“2.1”建立的色譜條件測(cè)定梔子苷的含量，樣品平均含量為2.86mg/g，RSD=0.763%，結(jié)果表明，本方法重復(fù)性良好。

2.9穩(wěn)定性試驗(yàn)：取同一供試品溶液，每間隔4h進(jìn)樣1次，在12h內(nèi)梔子苷峰面積無變化，RSD為0.34%，結(jié)果表明，本方法穩(wěn)定性良好。

2.10加樣回收率試驗(yàn)：精密稱定供試品（含量為1.896mg/g）0.5g，依法操作6份；分別精密加入梔子苷對(duì)照品溶液5mL（濃度為0.1324mg/mL），再分別精密加入甲醇20mL，按供試品溶液含量測(cè)定項(xiàng)下的方法操作，本方法平均回收率為99.95%，RSD= 0.79%。結(jié)果見表1。

表1　梔子苷加樣回收試驗(yàn)結(jié)果

2.11樣品含量測(cè)定：以本文方法分別測(cè)定供試品6批，結(jié)果分別為1.959、1.985、2.031、1.978、2.019、1.973mg/g。

3　討　論

本文參考《中國(guó)藥典》2015年版一部梔子苷的含量測(cè)定方法，采用高效液相色譜法測(cè)定沙日毛都-8中梔子苷的含量，方法快捷，結(jié)果準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好。

參考文獻(xiàn)

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).《中國(guó)藥典》.2015年版.一部.

中圖分類號(hào)：R927.2

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1672-8351（2016）04-0003-01