溴氰菊酯殘留測定方法及其在金銀花中殘留動態(tài)研究

王玉潔 薛健 顧炎 金紅宇 馬雙成

[摘要]研究溴氰菊酯在金銀花中的殘留動態(tài)規(guī)律，為金銀花安全監(jiān)控及生產(chǎn)中的安全合理使用提供科學依據(jù)。采用田間試驗方法，設(shè)對照、噴施推薦劑量、高倍劑量共3個處理，重復3次。于噴施農(nóng)藥后2 h，1，2，3，4，5，7，9，11，13，15 d，采集樣品。建立氣相色譜測定方法對田間樣品進行測定。結(jié)果表明，建立的金銀花中溴氰菊酯測定法，在3個不同添加水平溴氰菊酯回收率均在764%～869%，RSD小于11%，在5～500 μg·L-1線性關(guān)系良好，符合農(nóng)殘測定要求；田間試驗得到殘留動態(tài)方程為高倍劑量C=5992 2e-0338t，推薦劑量C=1536 9e-031t，殘留動態(tài)符合一級動力學降解規(guī)律，農(nóng)藥半衰期為209～224 d。建議在蚜蟲發(fā)生期按推薦劑量噴施溴氰菊酯乳油，距離采花至少間隔7 d，以保證金銀花藥材安全。

[關(guān)鍵詞]金銀花；溴氰菊酯；殘留動態(tài)；農(nóng)藥安全使用；農(nóng)藥半衰期

[Abstract]This paper reports the residual dynamics of deltamethrin and detection method in Loincerae Japonicae Flos to provide scientific basis for safe and appropriate use of deltamethrin A field experiment was conducted in Fengqiu， Henan Province China The field plots were sprayed with deltamethrin at the recommended dose and a high dose， respectively， and a control was set up， totally being 3 treatments with 3 replications The flowers were picked at 2 hours， 1， 2， 3， 4， 5， 7， 9， 11， 13 and 15 days after pesticide application and then dried The residue of deltamethrin was determined by gas chromatography method with electron capture detector for the above samples Results showed that recoveries of deltamethrin ranged from 764% to 869%，and the relative standard deviation was below 11%，Linearity was observed over a range of 5500 μg·L-1 with correlation coefficient was 0 999 2 The established method meets the requirements of pesticide residue analytical methods The degradation of deltamethrin followed the first order dynamics The residue dynamic equation of the high dose and recommended dose deltamethrin were C=5992 2e-0338t and C=1536 9e-031t respectively， and the halflife of deltamethrin in Loincerae Japonicae Flos was 209224 days， which indicates that deltamethrin is an easily degradable pesticide It is concluded that deltamethrin should be used in aphids occurring period and the safety interval was more than 7 days to ensure the safety of Loincerae Japonicae Flos consuming

[Key words]detalmethrin； Loincerae Japonicae Flos； residual dynamics； safe use of pesticides； halflife of pesticides

doi：10.4268/cjcmm20160811

金銀花是常用的大宗藥材之一，在種植過程中蚜蟲害嚴重[1]。經(jīng)調(diào)研發(fā)現(xiàn)，溴氰菊酯作為一種殺蟲劑對蚜蟲具有良好的防效，在農(nóng)作物上被廣泛使用，但溴氰菊酯屬于限量使用農(nóng)藥，大量接觸溴氰菊酯會抑制免疫系統(tǒng)作用，為保證其在金銀花上的用藥安全，研究其在金銀花上的殘留動態(tài)十分必要。目前，已有溴氰菊酯的殘留動態(tài)報道[24] ，但并未發(fā)現(xiàn)在金銀花生產(chǎn)中使用的相關(guān)研究。本研究采用田間試驗方法對溴氰菊酯在金銀花中的殘留動態(tài)進行了研究，建立氣相色譜法并對金銀花中溴氰菊酯殘留量進行測定，得出殘留動態(tài)并提出安全使用建議，為其在金銀花上的安全使用提供科學依據(jù)，對制定農(nóng)藥在其他藥材中的安全使用規(guī)范也具有指導意義。

1材料

11供試藥材

本實驗樣品由田間試驗獲得，經(jīng)中國醫(yī)學科學院藥用植物研究所張本剛研究員鑒定為忍冬科植物忍冬的干燥花蕾（金銀花）。

12試劑

丙酮、石油醚（60～90 ℃）、乙醚均為分析純，北京化工廠；正己烷為色譜純（Fisher Scientific），溴氰菊酯對照品（100 g·L-1，農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護科研監(jiān)測所，編號：GSB0523102008）；弗羅里硅土（Fluca公司，進口分裝，60～100目，650 ℃中活化4 h，轉(zhuǎn)移至130 ℃烘箱中保持5 h，儲存在不透氣的干燥器中，過夜冷卻?；罨蟮母チ_里硅土中小心加入2%的蒸餾水，在機械搖動器上搖動1 h，放置過夜）

13供試藥劑

溴氰菊酯，商品名：敵殺死，25 g·L-1乳油，拜耳作物科學（中國）有限公司。

14儀器

Agilent 7890A氣相色譜儀，電子捕獲檢測器，美國安捷倫公司；SB2500DT超聲波清洗儀，寧波新芝生物科技股份有限公司。

2方法

21田間試驗

田間試驗在河南省封丘縣進行。試驗地選在封丘縣黃德鎮(zhèn)西于村，金銀花品種為大毛花，平地種植，長勢良好，植株大小一致，三到四年生，行距約90 cm，株距約75 cm，樹冠直徑60～80 cm，樹高50～60 cm。從中選取約1畝（1畝≈667 m2），根據(jù)ny/t 7882004“農(nóng)藥殘留試驗準則”[5]實施，使用25 g·L-1溴氰菊酯（商品名：敵殺死）乳油，按對照、推薦劑量（75 g·hm-2）和高倍劑量（225 g·hm-2）3個處理，每個處理3個重復小區(qū)，試驗小區(qū)面積15 m2（3 m×5 m），每小區(qū)約金銀花18株，每小區(qū)間設(shè)隔離行3 m，按實際濃度配制農(nóng)藥，均勻的噴灑在每一小區(qū)的植株上，分別于施藥后2 h，1，2，3，4，5，7，9，11，13，15 d在每小區(qū)內(nèi)五點法采集金銀花樣品約100 g，40 ℃升溫至60 ℃，烘干處理20 h后，-20 ℃冰箱儲存。

22樣品測定

221色譜條件安捷倫HP5石英毛細管柱（032 mm×30 m，025 μm）；電子捕獲檢測器；載氣為高純氮氣（>99999 2%）；進樣口溫度250 ℃，不分流進樣；檢測器溫度300 ℃；升溫程序：初始溫度150 ℃，保持3 min，以10 ℃·min-1的速度升溫至270 ℃，保持15 min；恒流模式，流速1 mL·min-1；進樣量 1 μL；外標法定量。

222樣品溶液的制備精密稱取金銀花粉末20 g（過2號篩）于100 mL具塞三角瓶中。加入丙酮30 mL超聲提取15 min，靜置，過濾。樣品殘渣再加入丙酮20 mL超聲提取15 min，重復2次，靜置，過濾。合并所有濾液。40～45 ℃水浴旋蒸濃縮至近干。濃縮液傾入用10 mL石油醚預(yù)淋過的玻璃色譜柱（12 mm×250 mm），色譜柱內(nèi)的填料從上至下依次為無水硫酸鈉2 g、含2%水弗羅里硅土4 g、無水硫酸鈉2 g。用石油醚（60～90 ℃）乙醚（4∶1）混合溶液25 mL洗脫，收集洗脫液，于40～45 ℃減壓濃縮至近干。殘渣用石油醚（60～90 ℃）溶解轉(zhuǎn)移至5 mL具塞試管中，定容至3 mL，即得。

223對照品溶液的制備取溴氰菊酯標準溶液（100 g·L-1）1 mL于10 mL茶色量瓶，加色譜純正己烷至刻度，得到10 g·L-1溶液作為母液保存于-20 ℃冰箱。取該母液1 mL，稀釋100倍即得100 mg·L-1對照品溶液。

3結(jié)果與分析

31溴氰菊酯含量測定方法建立

311提取溶劑及凈化方法選擇對于金銀花中溴氰菊酯提取溶劑選擇，對其溶解度較好的溶劑丙酮，和文獻報道的幾種溶劑[乙酸乙酯，石油醚，石油醚丙酮（4∶1）][68]進行考察，結(jié)果表明丙酮、乙酸乙酯、石油醚丙酮（4∶1）、石油醚作為提取溶劑對500 μg·kg-1添加樣品提取回收率依次為836%，623%，512%，413%。故選擇丙酮做為本試驗的提取溶劑。

本實驗曾嘗試標準方法NY/T16032008[8]中的凈化方式，發(fā)現(xiàn)凈化效果不佳。通過比較幾種商品小柱（氨基柱、弗羅里硅土柱、中性氧化鋁柱）和自填玻璃色譜柱（2%弗羅里硅土與中性氧化鋁混合）凈化效果，發(fā)現(xiàn)幾種色譜柱對金銀花均有較好的凈化效果，考慮到經(jīng)濟成本，最終選擇2%水弗羅里硅土填充柱，填料自上而下為2 g無水硫酸鈉，4 g 2%水弗羅里硅土，2 g無水硫酸鈉。凈化效果見圖1，經(jīng)過弗羅里硅土凈化后，圖1中C和B相比，溴氰菊酯出峰位置干擾峰消失，基線明顯降低。

A.對照品；B凈化前空白樣品；C凈化后空白樣品；1 溴氰菊酯。

312溴氰菊酯測定方法學考察線性范圍：將母液稀釋成質(zhì)量濃度分別為5，10，20，50，100，500 μg·L-1系列對照品溶液，分別進樣1 μL，重復2次，以質(zhì)量濃度為橫坐標，峰面積積分值為縱坐標，線性回歸處理，得回歸方程為Y=58474X-30051，相關(guān)系數(shù)R2=0999 2。說明在5～500 μg·L-1溴氰菊酯濃度與峰面積線性關(guān)系良好。

儀器的精密度與靈敏度：取01 mg·L-1標準溶液重復進樣6次，連續(xù)3 d進行GCECD測定，得到溴氰菊酯含量的精密度RSD。以信噪比（S/N）為3測得溴氰菊酯檢出限（LOD）；以信噪比（S/N）為10測定方法的定量限（LOQ）。結(jié)果顯示，日內(nèi)精密度以RSD計為28%，日間精密度為56%，符合測定要求。溴氰菊酯檢出限為1 μg·L-1，定量限為5 μg·L-1。

方法準確度和精密度：精密稱取空白樣品2 g，分別精密添加溴氰菊酯對照品溶液得到500，200，50 μg·kg-1溴氰菊酯添加樣品，按222項下提取，凈化，重復5次，測得峰面積并計算含量，得到各添加濃度回收率及精密度見表1。3個添加濃度回收率均在764%～869%，精密度（以RSD計）小于11%，符合農(nóng)殘測定[5]（回收率在70%～110%，RSD<15%）及本實驗要求。

32金銀花中溴氰菊酯殘留動態(tài)

按21進行田間試驗，采集樣品99個，按22所述方法對樣品進行測定，對照小區(qū)樣品無溴氰菊酯檢出，本試驗設(shè)計的高低2個濃度溴氰菊酯殘留量見表2。

以采樣時間為橫坐標，金銀花中溴氰菊酯殘留量為縱坐標繪制金銀花中溴氰菊酯殘留動態(tài)曲線見圖2。

根據(jù)金銀花取樣時間（t/d）和其溴氰菊酯殘留量（C/mg·kg-1），擬合出高倍劑量和推薦劑量處理殘留動態(tài)方程分別為C=5992 2e-0338t（R2=0993 2），C=1536 9e-031t（R2=0992 2），殘留量隨時間呈指數(shù)關(guān)系，符合一級動力學降解模式。這與文獻報道溴氰菊酯在其他作物[4，6910]上的降解動態(tài)類似。

通過方程可以得出，噴施高倍劑量和推薦劑量溴氰菊酯在金銀花中半衰期分別為205，224 d，噴施15 d都降解98%以上，一般半衰期小于30 d的屬于易降解農(nóng)藥 [11] ，因此溴氰菊酯屬于易降解農(nóng)藥。

4討論

41影響金銀花上溴氰菊酯殘留的因素

本試驗2個處理得到半衰期都小于25 d，這是5月中旬在河南封丘試驗得到的結(jié)果。但是如果施藥時間提前氣溫偏低，則會延長半衰期。另外金銀花的種植密度、噴藥方式、天氣情況如風雨等也會影響殘留量。

42溴氰菊酯在金銀花上的安全使用建議

安全間隔期是指作物最后一次施藥距收獲時所需間隔時間，是自作物最后一次噴藥后到殘留量降到最大殘留限量（MRL）以內(nèi)所需的最短間隔時間[12]。最后一次噴藥與收獲之間必須大于安全間隔期，以規(guī)避安全風險。

目前還沒有金銀花中溴氰菊酯的最大殘留限量標準，我國國家標準“食品安全國家標準食品中農(nóng)藥最大殘留限量 GB27632014” [13]中要求，溴氰菊酯在茶葉中最大殘留限量為10 mg·kg-1，在花類蔬菜花椰菜中最大殘留限量為05 mg·kg-1，莖葉類蔬菜為02 mg·kg-1。若以最嚴的莖葉蔬菜中的02 mg·kg-1為參考標準，本研究中，噴施推薦劑量（75 g·hm-2）農(nóng)藥7 d后，金銀花中的殘留量可達到此標準。金銀花在山東、河南主產(chǎn)區(qū)的采花期一般是5月中旬，因此建議采花前蚜蟲發(fā)生時噴施溴氰菊酯，采用噴霧施藥的方法，噴施劑量為75 g·hm-2，安全間隔期為7 d，即最后一次施藥距離采花至少7 d以上，也就是說如果5月5號噴藥，最早5月12號才能開始采花。如果施藥量增加或施藥次數(shù)增加則相應(yīng)延長間隔期。

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[責任編輯呂冬梅]