超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法測(cè)定蔬菜中多殺霉素等4種農(nóng)藥殘留

占繡萍，陳建波*,馬　琳，黃蘭淇，趙　莉，余淑紅

(1.上海市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣服務(wù)中心，上?！?01103；2.上饒市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)中心，江西　上饒　333400)

超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法測(cè)定蔬菜中多殺霉素等4種農(nóng)藥殘留

占繡萍1，陳建波1*,馬琳1，黃蘭淇1，趙莉1，余淑紅2

(1.上海市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣服務(wù)中心，上海201103；2.上饒市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)中心，江西上饒333400)

摘要：采用固相萃取/超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(SPE/UPLC-MS/MS)建立了多種蔬菜中4種農(nóng)藥殘留量的分析方法，并對(duì)凈化方法、色譜及質(zhì)譜條件進(jìn)行優(yōu)化。蔬菜樣品經(jīng)乙腈提取、提取液經(jīng)鹽析后，取上清液經(jīng)PC/NH2(或NH2)固相萃取小柱凈化，濃縮后，用甲醇定容并過(guò)膜，采用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)正離子模式進(jìn)行外標(biāo)法定量測(cè)定。結(jié)果表明，4種農(nóng)藥在5～500 μg/L范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(r≥0.999 2)，在8種蔬菜中的檢出限和定量下限分別為0.033～0.167 μg/kg和0.10～0.50 μg/kg 。在10，50，250 μg/kg 3個(gè)濃度加標(biāo)水平下，4種農(nóng)藥的回收率為70.9%～123.4%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)小于15%。方法準(zhǔn)確、靈敏、簡(jiǎn)單、快速，適用于多種蔬菜中多殺霉素等4種農(nóng)藥殘留的同時(shí)測(cè)定。

關(guān)鍵詞：超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用;固相萃?。晦r(nóng)藥殘留；蔬菜

21世紀(jì)以來(lái)，受氣候、種植制度、栽培方式、生態(tài)環(huán)境等因素的綜合影響，植物上的病蟲(chóng)害暴發(fā)頻繁，危害程度加重，防控壓力增大，嚴(yán)重威脅農(nóng)業(yè)生產(chǎn)安全。特別是隨著設(shè)施農(nóng)業(yè)的迅速興起，農(nóng)作物上的病蟲(chóng)害不斷加重，許多新的設(shè)施病蟲(chóng)害不斷發(fā)生。當(dāng)下食品安全越來(lái)越受到人們重視，高效低毒低殘留農(nóng)藥的推廣應(yīng)用必將成為趨勢(shì)。多殺霉素、氟硅唑、噻蟲(chóng)嗪、茚蟲(chóng)威4種農(nóng)藥是近年上海市蔬菜作物重點(diǎn)推薦和補(bǔ)貼的農(nóng)藥新品種，在上海乃至全國(guó)范圍內(nèi)得到了廣泛應(yīng)用。 為了保證蔬菜質(zhì)量安全，各國(guó)對(duì)這些農(nóng)藥殘留實(shí)施了嚴(yán)格的監(jiān)測(cè)，我國(guó)僅規(guī)定了這4種農(nóng)藥在幾種蔬菜中的限量值，歐盟等發(fā)達(dá)國(guó)家的限量值比較完整，如歐盟規(guī)定氟硅唑在所有蔬菜中的限量值均為0.01 mg/kg；多殺霉素的限量值為0.02～10.0 mg/kg；噻蟲(chóng)嗪的限量值為0.05～10.0 mg/kg；茚蟲(chóng)威的限量值為0.02～3.0 mg/kg。目前，這些農(nóng)藥殘留的檢測(cè)方法主要包括氣相色譜[1-2]、液相色譜[3-5]、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用[6-7]、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用[8-11]等，但這些方法的適用范圍小，對(duì)于復(fù)雜基質(zhì)的農(nóng)藥殘留測(cè)定干擾大，不能同時(shí)進(jìn)行這4種農(nóng)藥的多殘留檢測(cè)。

本文通過(guò)反復(fù)比較4種SPE柱(不同淋洗液)和3種QuEChERS凈化劑的凈化效果，選擇2種蔬菜對(duì)UPLC-MS/MS檢測(cè)中的基質(zhì)效應(yīng)、提取效率、回收率進(jìn)行評(píng)估研究，優(yōu)化了空心菜、芹菜、豇豆、黃瓜、番茄、卷心菜、大白菜、絲瓜8種蔬菜中多殺霉素等4種農(nóng)藥的前處理方法，發(fā)現(xiàn)SPE凈化法適合不同品種、大批量樣品的快速檢測(cè)，且該方法的檢出限、回收率以及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均能滿足農(nóng)藥殘留分析要求，能夠較好地為蔬菜中多殺霉素等用量較大的農(nóng)藥殘留監(jiān)測(cè)及農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量控制提供科學(xué)依據(jù)和技術(shù)支持。

1實(shí)驗(yàn)部分

1.1試劑與材料

標(biāo)準(zhǔn)品：多殺霉素、氟硅唑、噻蟲(chóng)嗪、茚蟲(chóng)威(純度>99.0%)，均為德國(guó)Dr.Ehrenstorfer公司提供的有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。

試劑：氯化鈉(分析純)，甲醇、乙腈、甲酸(色譜純)，Milli-Q高純水，十八烷基鍵合硅膠(C18)吸附劑(43～60 μm)，N-丙基乙二胺(PSA)吸附劑(25～100 μm)，石墨化碳黑吸附劑(Carbon SPE bulk sorbent)，無(wú)水硫酸鎂，石墨碳黑-氨基串聯(lián)(PC/NH2)固相萃取柱(500 mg/500 mg/6 mL)，氨基(NH2)固相萃取柱(500 mg/6 mL)，十八烷基鍵合硅膠(C18)固相萃取柱(500 mg/6 mL)，弗羅里硅土(Florisil)固相萃取柱(1 000 mg/6 mL)。凈化小柱和凈化填料由天津博納艾杰爾科技有限公司和美國(guó)安捷倫公司提供。

1.2儀器

Agilent1290 UPLC-Agilent 6460 MS超高效液相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀：配ESI源(美國(guó)安捷倫公司);T25DS25高速勻漿分散器(德國(guó)IKA公司)；GB11240-89電熱恒溫水浴鍋(上海醫(yī)療器械五廠)；AC-40氮吹濃縮器(安徽黃山醫(yī)療器械廠)；國(guó)華SHAC恒溫振蕩器(常州國(guó)華電器有限公司)；TDL-5-A離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠)；Milli-Q制水機(jī)。

1.3樣品前處理

取不少于1 000 g樣品(空心菜、芹菜、豇豆、黃瓜、番茄、卷心菜、大白菜、絲瓜)，去除雜物，取可食部分，將樣品縮分至500 g，經(jīng)制樣機(jī)處理后密封，于4 ℃冷藏保存。

1.3.1樣品提取蔬菜樣品：準(zhǔn)確稱取10 g樣品(精確至0.01 g)加入到100 mL離心管中，加入20 mL乙腈，高速勻漿1 min，以5 000 r/min離心5 min,上清液轉(zhuǎn)移至加入3～5 g 氯化鈉的50 mL離心管中，劇烈振搖1 min，室溫下靜置1 h。

1.3.2樣品凈化空心菜、芹菜、豇豆、黃瓜(色素較深)樣品：移取上清液5 mL至50 mL 小燒杯中，在50 ℃水浴溫度下氮吹至約 1 mL。上樣前，先用5 mL乙腈-甲苯(3∶1，體積比)預(yù)淋PC/NH2串聯(lián)柱，棄去；當(dāng)液面到達(dá)填料頂部時(shí)，迅速將樣品濃縮液轉(zhuǎn)移至凈化柱上，再用5 mL乙腈-甲苯(3∶1)洗滌樣液燒杯，并將洗滌液轉(zhuǎn)移至凈化柱中，再重復(fù)4次洗滌轉(zhuǎn)移，收集上述25 mL洗脫液于100 mL燒杯中，50 ℃水浴溫度下氮吹至干。加入2.5 mL 乙腈混勻定容，經(jīng)0.22 μm微孔有機(jī)濾膜過(guò)濾后，供超高效液相色譜-質(zhì)譜測(cè)定。

番茄、卷心菜、大白菜、絲瓜(色素較淺)樣品：用NH2柱替代PC/NH2串聯(lián)柱，其他相同。

1.4色譜-質(zhì)譜條件

1.4.1色譜條件Poroshell 120 EC-C18反相液相色譜柱(3.0 mm×100 mm,2.7 μm)；流動(dòng)相：A為5 mmol/L乙酸銨水溶液，B為乙腈；流速0.40 mL/min;柱溫40 ℃;進(jìn)樣量2 μL 。梯度洗脫程序：0～0.5 min，95% A；0.5～4.0 min，95%～20% A；4.0～7.0 min，20%～5% A。停止時(shí)間7.0 min 。

1.4.2質(zhì)譜條件離子源：大氣壓電噴霧電離，正離子模式(ESI+)；毛細(xì)管電壓：3.5 kV；離子源干燥氣溫度：300 ℃；鞘氣溫度：350 ℃；鞘氣流量：12 L/min；掃描方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)；5.5 min后加電子倍增管電壓(EMV) 300 V。4種農(nóng)藥的質(zhì)譜分析參數(shù)見(jiàn)表1。

表1　4種農(nóng)藥的多反應(yīng)監(jiān)測(cè)質(zhì)譜分析參數(shù)

*quantitative ion

2結(jié)果與討論

2.1樣品前處理?xiàng)l件的優(yōu)化

2.1.1凈化條件的優(yōu)化蔬菜樣品基質(zhì)中含有較多的有機(jī)酸、維生素以及脂肪等，這些物質(zhì)帶來(lái)的基質(zhì)效應(yīng)將會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性[12]。為降低或消除基質(zhì)效應(yīng)，選擇合適的樣品前處理方法至關(guān)重要[13]。本研究對(duì)固相萃取(SPE) 與基質(zhì)固相分散萃取法兩種凈化技術(shù)進(jìn)行了比較。

采用SPE柱進(jìn)行凈化時(shí)，選擇了NH2，F(xiàn)lorisil，C18,PC/NH24種固相萃取柱，并選擇不同的淋洗液進(jìn)行洗脫。NH2-SPE：二氯甲烷+甲醇(95+5) 4 mL預(yù)淋，10 mL洗脫；Florisil-SPE：丙酮+正己烷(10+90) 4 mL預(yù)淋，10 mL洗脫；C18-SPE：乙腈+甲苯(3+1) 5 mL預(yù)淋，10 mL洗脫；PC/NH2-SPE：乙腈+甲苯(3+1) 5 mL預(yù)淋，10 mL洗脫，收集第1瓶(石墨化碳易吸附農(nóng)藥，所以洗脫液又增加15 mL，收集第2瓶)；分別收集洗脫液，吹干，定容，待測(cè)。

采用基質(zhì)固相分散萃取(類似QuEChERS)凈化法時(shí)，選擇3種不同的凈化填料進(jìn)行篩選：QuE1(0.1 g PSA-0.3 g MgSO4)；QuE2(0.1 g PSA-0.3 g MgSO4-0.05 g Carb)；QuE3(0.3 g MgSO4-0.1 g C18-0.1 g PSA)。其他步驟參照文獻(xiàn)[14]。

以基質(zhì)較復(fù)雜、色素較深的空心菜為例，添加100 μg/kg的混標(biāo)至空心菜空白樣品中，重復(fù)測(cè)定3次，以純標(biāo)計(jì)算得到的回收率結(jié)果如表2所示。

表2　不同凈化條件下空心菜樣品加標(biāo)回收率的比較

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通過(guò)以上7種方法的比較，并綜合去除色素效果和回收率結(jié)果，發(fā)現(xiàn)方法4(淋洗液10+15 mL)既能保證方法回收率，又能除去色素等雜質(zhì)，有利于保護(hù)色譜柱、離子源等，延長(zhǎng)色譜柱、儀器的壽命。

根據(jù)上述試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)淋洗液用乙腈-甲苯混合溶劑，空心菜樣品中5種化合物的回收率和雜質(zhì)的去除效果最佳。

實(shí)驗(yàn)繼續(xù)考察了色素較淺的番茄空白樣添加100 μg/kg標(biāo)樣后的回收率，重復(fù)3次，并篩選了PC/NH2，NH2，C18，QuE3 4種凈化方法,SPE的洗脫液統(tǒng)一用乙腈-甲苯(3∶1，體積比)25 mL，QuE3(0.3 g MgSO4-0.1 g C18-0.1 g PSA)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表3 。

表3　不同凈化方法在番茄空白樣品中加標(biāo)回收率的比較

從表3結(jié)果可知，QuE3法的回收率偏高，去除雜質(zhì)效果有限，基質(zhì)效應(yīng)較明顯;C18-SPE柱中噻蟲(chóng)嗪的回收率偏高，NH2柱和PC/NH2串聯(lián)柱的回收率基本能滿足要求，PC/NH2串聯(lián)柱的回收率比NH2柱的回收率低，可能是由于PC/NH2串聯(lián)柱中的PC較容易吸附農(nóng)藥。NH2柱的價(jià)格低，故從成本和回收率結(jié)果考慮，對(duì)于色素較低的樣品采用NH2柱凈化。

2.1.2SPE方法中淋洗液體積的優(yōu)化選擇PC/NH2-SPE，乙腈-甲苯(3∶1)混合溶劑，考察了不同淋洗液體積(10,15,20,25,30 mL)對(duì)空心菜中噻蟲(chóng)嗪、多殺霉素A、多殺霉素D、氟硅唑、茚蟲(chóng)威回收率(加標(biāo)100 μg/kg)的影響。結(jié)果表明，隨著乙腈-甲苯淋洗劑體積的增大，噻蟲(chóng)嗪、多殺霉素A、多殺霉素D的回收率增加，氟硅唑、茚蟲(chóng)威的回收率增加不明顯。當(dāng)淋洗液體積達(dá)到25 mL時(shí)回收率基本能滿足分析要求；當(dāng)洗脫液在30 mL時(shí)回收率較高，但噻蟲(chóng)嗪的回收率偏高是由于雜質(zhì)干擾增強(qiáng)。所以確定淋洗劑體積為25 mL。

選擇NH2柱，乙腈-甲苯(3∶1)混合溶劑，考察了不同淋洗體積(10,15,20,25,30 mL)對(duì)番茄中噻蟲(chóng)嗪、多殺霉素A、多殺霉素D、氟硅唑、茚蟲(chóng)威回收率(100 μg/kg)的影響。結(jié)果表明，氟硅唑、茚蟲(chóng)威的回收率在10 mL洗脫液時(shí)已能滿足要求；噻蟲(chóng)嗪、多殺霉素A、多殺霉素D的回收率隨著淋洗液的增加而增加，當(dāng)淋洗液體積達(dá)到25 mL時(shí)洗脫液較為澄清，且回收率基本能滿足分析要求；當(dāng)洗脫液在30 mL時(shí)回收率較高，但洗脫液的顏色加深且渾濁，噻蟲(chóng)嗪的回收率明顯偏高，雜質(zhì)干擾增強(qiáng)。因此，確定最佳淋洗劑體積為25mL。

2.2色譜條件的選擇

2.2.1流動(dòng)相的篩選比較了甲醇-水、乙腈-水、甲醇-0.1%甲酸水、乙腈-0.1%甲酸水流動(dòng)相體系的分離效果，由于4種農(nóng)藥均為正離子電離模式，在流動(dòng)相中加入甲酸后4種農(nóng)藥更易于電離，且靈敏度更高，所以選擇水相中加一定的甲酸。有機(jī)溶劑相使用甲醇時(shí)，多殺霉素D和氟硅唑很難分開(kāi)；而用乙腈則可以得到較好地分離，所以最終選擇乙腈-0.1%甲酸水為流動(dòng)相。

2.2.2色譜柱比較了常用的3種超高效液相色譜柱：poroshell 120 EC-C18(3.0 mm×100 mm,2.7 μm)，poroshell 120 EC-C18(3.0 mm×50 mm,2.7 μm)，ZORBAX Eclipse Plus C18(2.1 mm×50 mm,1.8 μm)。發(fā)現(xiàn)100 mm長(zhǎng)柱比50 mm短柱能更好地分離以上4種農(nóng)藥，所以選擇poroshell 120 EC-C18(3.0 mm×100 mm,2.7 μm)進(jìn)行分離。

2.2.3柱溫考察了柱溫(20，30，40 ℃)對(duì)分離效果的影響，發(fā)現(xiàn)4種農(nóng)藥的靈敏度和穩(wěn)定性均變化不明顯。但柱溫高時(shí)，泵壓力較小，樣品溶液中的顆粒不易凝固在柱中，所以選擇溫度40 ℃，以保證樣品溶液順利通過(guò)色譜柱，較好的延長(zhǎng)色譜柱壽命。

圖1　4種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液(5 μg/L)在MRM模式下的UPLC-MS/MS色譜圖Fig.1　UPLC-MS/MS chromatogram of 4 pesticides(5 μg/L)1.thiamethoxam,2.spinosad A,3.spinosad D,4.flusilazole,5.indoxacarb

2.3質(zhì)譜條件的選擇

將4種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液稀釋至500 μg/L，分別進(jìn)行一級(jí)質(zhì)譜掃描以確定各農(nóng)藥的準(zhǔn)分子離子峰；再分別以其準(zhǔn)分子離子進(jìn)行選擇離子監(jiān)測(cè)(MS2SIM)，并優(yōu)化碎裂電壓(Fragment)；再通過(guò)子離子掃描(Product ion scan)確定定量離子和定性離子，最后采用多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)采集模式進(jìn)行碰撞能量的進(jìn)一步優(yōu)化。因?yàn)檐嵯x(chóng)威的靈敏度較低，所以在茚蟲(chóng)威出峰(5.5 min)時(shí)開(kāi)始加電壓(Delta EMV)300 V，可以更好地提高其響應(yīng)值。

2.4檢出限與線性范圍

配制4種農(nóng)藥的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，質(zhì)量濃度分別為5，10，50，100，250，500 μg/L，進(jìn)樣2 μL，以MRM定量離子的色譜峰面積(Y)對(duì)分析物的質(zhì)量濃度(X,μg/L)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，以3倍信噪比(S/N)確定檢出限(LOD)，10倍信噪比(S/N)確定定量下限(LOQ),結(jié)果見(jiàn)表4 。4種農(nóng)藥在5～500 μg/L范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，LOD為0.033～0.167 μg/kg，LOQ為0.10～0.50 μg/kg。圖1為5 μg/L標(biāo)準(zhǔn)品的MRM色譜圖。

表4　4種農(nóng)藥的線性方程、相關(guān)系數(shù)(r)、 檢出限(LOD)和定量下限(LOQ)

2.5回收率與精密度

分別采用空心菜、芹菜、豇豆、黃瓜、番茄、卷心菜、大白菜、絲瓜8種蔬菜進(jìn)行添加回收實(shí)驗(yàn)和精密度實(shí)驗(yàn)，分別以10，50，250 μg/kg 作為3個(gè)添加水平，每個(gè)添加水平做5次平行實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如表5所示。

表5　3個(gè)加標(biāo)水平下農(nóng)藥的回收率及精密度(n=5)

4種農(nóng)藥(5種化合物)的平均回收率為70.9%～123.4%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為0.7%～14.2 %，表明該方法有良好的精密度和準(zhǔn)確度，能達(dá)到殘留分析的要求。圖2為空心菜和番茄添加10 μg/kg樣品的UPLC-MS/MS色譜圖。

2.6蔬菜樣品的檢測(cè)

應(yīng)用本方法對(duì)市售多種蔬菜共100個(gè)樣品進(jìn)行隨機(jī)抽檢。在杭白菜、空心菜、米莧、芹菜、青菜、生菜等12個(gè)樣品中檢出茚蟲(chóng)威(殘留量0.01～0.25 mg/kg)，茼蒿、莧菜、芹菜3個(gè)樣品中檢出噻蟲(chóng)嗪(殘留量0.01～0.16 mg/kg)，莧菜等2個(gè)蔬菜樣品檢出氟硅唑(殘留量0.03～0.04 mg/kg)。查詢國(guó)標(biāo)、CODEX/FAO、歐盟、日本等對(duì)噻蟲(chóng)嗪等4種農(nóng)藥在相應(yīng)蔬菜上最大殘留限量值(MRL)，發(fā)現(xiàn)參照歐盟標(biāo)準(zhǔn)：氟硅唑在所有蔬菜中的MRL為0.01 mg/kg(國(guó)標(biāo)暫未規(guī)定氟硅唑在莧菜中的MRL，規(guī)定其在玉米筍中為0.01 mg/kg，刀豆、番茄0.1 mg/kg，黃瓜1 mg/kg)。本次抽檢的100個(gè)蔬菜樣品中，有2個(gè)莧菜樣品超標(biāo)(氟硅唑參照歐盟蔬菜上的殘留限量值)，需謹(jǐn)慎使用。

參考文獻(xiàn)：

[1]Zhu L P,Dong J,Sun J,Pan S Q.Chin.J.Anal.Lab.(朱麗萍，董靜，孫軍，潘守奇.分析試驗(yàn)室) ，2008,27(8)：79-82.

[2]Lu S M,Wang X C,Zhang J T,Ma Y E.Mod.Agrochem.(陸松茂，汪學(xué)才，張俊濤，馬又娥.現(xiàn)代農(nóng)藥)，2007，6(5)：35-38.

[3]Jian Q,Zhu G Y,Zheng Z T.Agrochemicals(簡(jiǎn)秋,朱光艷,鄭尊濤.農(nóng)藥),2015，54(1)：51-52.

[4]Chen L,Chen J M,Xia F L,Dai L C,Yu P Z.Chin.J.Pestic.(陳莉，陳家梅，夏福利，戴榮彩，余蘋中.農(nóng)藥學(xué)學(xué)報(bào))，2004，6(2)：87-89.

[5]Liu B,Guo D L,Mao J S,Zhao S C,Wang Y T.Agrochemcals(劉賓，郭棟梁，毛江勝，趙善倉(cāng)，王玉濤.農(nóng)藥)，2009，48(9)：667-668,674.

[6]Wang L Z,Wang D F,Zheng J C,Wang R L,Liu Y N.Phys.Test.Chem.Anal.:Chem.Anal.(王連珠，王登飛，鄭俊超，王瑞龍，劉溢娜.理化檢驗(yàn)：化學(xué)分冊(cè)) ，2006，42(12)：1025-1029.

[7]Zhang F,Zhang X Z,Luo F J,Chen Z M,Sun W J,Liu G M,Lou Z Y.J.Instrum.Anal.(張芬，張新忠，羅逢健，陳宗懋，孫威江，劉光明，樓正云.分析測(cè)試學(xué)報(bào))，2013，32(4)：393-400.

[8]GB/T 20769-2008.Determination of 450 Pesticides and Relates Chemicals Residues in Fruits and Vegetables—LC-MS-MS Method(水果和蔬菜中450種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測(cè)定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法.中華人民共和國(guó)標(biāo)準(zhǔn)).

[9]Sun M,Cao Z Y,Liu H,Ma Y N,Chen M X.Chin.J.Anal.Lab.(孫敏，曹趙云，劉慧,馬有寧，陳銘學(xué).分析試驗(yàn)室) ，2010,29(8)：70-74.

[10]Wu Y,Jiang B,Xu Y G,Zhao W,Meng X R,Zhou Y,Yu J H,Zu Y G.Chin.J.Chromatogr.(吳巖，姜冰，徐義剛,趙偉，孟祥瑞，周原，于佳會(huì)，祖元?jiǎng)?色譜) ，2015，33(3)：228-234.

[11]Jiang B W.FoodSci.(江濱煒.食品科學(xué))，2009，30(10)：176-178.

[12]Zhou L,Wang X Q,Xu H,Wang X Y,Liu X C,Liu Z W,Liu Q J,Zhang H.Phys.Test.Chem.Anal.:Chem.Anal.(周莉，王新全，徐浩，王祥云，劉芯成，劉之偉，劉秋菊，章虎.理化檢驗(yàn)：化學(xué)分冊(cè))，2009，28(6)：753-756.[13]Xiang P,Shen M,Zhuo X Y.J.Instrum.Anal.(向平，沈敏，卓先義.分析測(cè)試學(xué)報(bào))，2009，28(6)：753-756.[14]Yi X B,Liang Y S,Huang X Q,Sun H Z,Jiang C,Liu S Q.J.Instrum.Anal.(易錫斌，梁玉樹(shù)，黃曉琴，孫慧珍，江楚，劉世琦.分析測(cè)試學(xué)報(bào))，2015，34(7)：829-835.

Simultaneous Determination of Four Pesticides Residues in Vegetables by Ultra Performance Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry

ZHAN Xiu-ping1,CHEN Jian-bo1*,MA Lin1,HUANG Lan-qi1,ZHAO Li1,YU Shu-hong2

(1.Shanghai Agriculture Technical Extension Service Center,Shanghai201103,China;2.Shangrao Agricultural Product Quality and Safety Testing Center in Jiangxi Province,Shangrao333400,China)

Abstract：A method was developed for the determination of four pesticides residues in a variety of vegetables using solid-phase extraction(SPE) and ultra performance liquid chromatography-triple quadrupole-mass spectrometry(UPLC-MS/MS).The purification methods(solid phase extraction column,QuEChERS method,elution solvent,elution volume),chromatographic conditions(mobile phase type,flow rate and column temperature) and mass spectrometric parameters(fragment,delta EMV) were optimized.The pesticides samples were extracted with acetonitrile,and then cleaned up on a Carbon/NH2(or NH2) SPE column.The eluting solution was evaporated and made up to a definite volumn with methanol,finally analyzed by reversed-phase ultra performance liquid chromatography under multiple reaction monitoring(MRM) of positive ion mode with the external standard method.The calibration curves of four pesticides showed good linearities in the range of 5-500 μg/L with correlation coefficients not less than 0.999 2.The limits of detection(LOD) were in the range of 0.033-0.167 μg/kg and the limits of quantitation(LOQ) were in the range of 0.10-0.50 μg/kg for 4 pesticides spiked in vegetable.The recoveries of 4 pesticides in vegetable sample spiked with three concentration levels of 10,50,250 μg/kg ranged from 70.9% to 123.4% with RSDs less than 15%.The established method was accurate,sensitive and simple,and was suitable for the simultaneous analysis of various pesticides residues.

Key words：ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry(UPLC-MS/MS);solid-phase extraction(SPE)；pesticide residue;vegetable

收稿日期：2015-09-30；修回日期：2015-11-07

基金項(xiàng)目：上海市農(nóng)業(yè)委員會(huì)青年科技基金(滬農(nóng)青字(2014)第4-11號(hào))

*通訊作者：陳建波，碩士，農(nóng)藝師,研究方向：農(nóng)藥質(zhì)量與殘留分析，Tel：021-64059431,E-mail:cjb0123@126.com

doi:10.3969/j.issn.1004-4957.2016.04.018

中圖分類號(hào)：O657.63;F767.2

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A

文章編號(hào)：1004-4957(2016)04-0476-06