頭孢噻肟鈉相關物質高效液相色譜分析

李慧思 趙陽

摘 要：頭孢噻肟鈉是一種運用范圍廣泛的抗生素，它的抗菌譜廣。在臨床醫(yī)學中的作用有治療沒出現并發(fā)癥的急性尿路感染，和尚未發(fā)生并發(fā)癥的肺炎鏈球菌。然而在我國的藥典中對于有關的物質檢測，并沒有相應的記錄。本文借助高效液相色譜法，進一步分析和研究頭孢噻肟鈉相關物質。

關鍵詞：頭孢噻肟鈉；高效液相色譜法；相關物質；分析

人們通常會使用高效液相色譜法來做醫(yī)學和其他專業(yè)方面的試驗。高效液相色譜法會把液體當做流動相，這是一種高壓輸液體系。具體的是將溶液或者混合溶液倒進色譜柱中，當溶液在柱中實現分離后，會自主流到檢測器皿內，進行各種檢測，因此可以展開分析試樣的工作。當前，我國對高效液相色譜法的運用在逐漸地變廣，會涉及到不少領域，比如醫(yī)學、工學等等。除此之外，高效液相色譜法還具備一定的優(yōu)勢。特別是他們的高效、高速、高壓以及非常高的靈敏度，同時高效液相色譜法運用的領域很廣泛。

同時，高效液相色譜法也存在一定的缺陷，其中最明顯的是“柱外效應”，如果與氣相色譜比較，其靈敏度較低。因此，為了更順利的進行試驗，有關人員一般都會同時利用高效液相色譜法與氣相色譜法，使二者互相補充。本文主要是通過高效液相色譜法來進一步分析和研究頭孢噻肟鈉的相關物質。

1 儀器與試驗

島津2010高效液相色譜儀。頭孢噻肟峰鑒定用標準品（含雜質A、B、C、E、F），由EPCRS提供。頭孢噻肟對照品，由中國生物制品檢定所提供。甲醇為色譜純，其他試劑均為分析純。

色譜條件與系統適用性：研究者選擇應用十八烷基硅烷鍵合硅膠充當填充劑，色譜柱則是3.9mm×150mm（5m）。流動相A：實驗溶液是磷酸二氫鈉溶液，濃度為7.1g/l，PH要求達到6.25。流動相B：甲醇（見表1）

表1流動相B：甲醇。流速1.0ml/min；檢測波長235nm；進樣量10μL；柱溫30℃。

2 溶液調配

溶液A：流動相A：流動相B，B為14：86。

試驗溶劑：運用精密、準確的儀器選取40mg的頭孢噻肟鈉，然后投入到規(guī)格為50ml的量瓶內，然后再倒入溶液A，使其充分溶解后稀釋到規(guī)定的刻度。

對比溶劑（a）：運用精密、準確的儀器選取頭孢噻肟鈉約8mg，，作為對照品，然后將其投入到量瓶內，然后再倒入溶液A，使其充分溶解后稀釋到規(guī)定的刻度。

對比溶劑（b）：運用精密、準確的儀器選取樣品溶劑，1.0ml左右，然后將其投入到規(guī)格為100ml的量瓶內，然后再加入固定容量的溶液A，充分溶解后稀釋到規(guī)定的刻度。

對比溶劑（c）：運用精密、準確的儀器選取樣品試劑，4.0ml左右，然后將1.0ml的硒酸鹽投入到樣品試劑中，待其溫度上升到40℃時，將溶液加熱，加熱時間為兩個小時。之后在投入PH值為5ml的沖液和1.0ml容量的稀氫氧化鈉溶液。如圖1。

對比溶劑（d）：運用精密、準確的儀器選取頭孢噻肟鈉，明確是標準品。同時頭孢噻肟鈉中含有一定量的雜質（A、B、C、E、F），選擇運用溶液A與頭孢噻肟鈉相互溶解，并需要稀釋成5ml的溶液。如圖2。

圖2

3 方法

本次試驗會將供試品溶劑對比溶劑（b）、和標準溶液（b）、對比溶劑（c）、對照溶液（d），分別投入到色譜柱內，然后將各種溶劑的色譜柱圖做好記錄。保留頭孢噻肟峰的時間為13分鐘左右。運用頭孢噻肟峰來研究和鑒別標準品譜圖，同時還需要通過頭孢噻肟鈉來分析對比溶劑（d），也需要應用頭孢噻肟峰再對對照溶液（d）的色相譜圖進行研究，來鑒別雜質A、B、C、E、F。頭孢噻肟中含有雜質各有差異，雜質峰的保留時間也會有所不同。與頭孢噻肟相比，各種雜質峰的保留時間需要具有一定的順序規(guī)律。雜質B保留的時間應該為0.3min；雜質A保留的時間應該為0.5min；雜質E保留的時間應該為0.6min；雜質C保留的時間應該為1.9min；雜質D保留的時間應該為2.3min；雜質F保留的時間應該為2.4min；雜質G保留的時間應該為3.1min。

評價系統的適用性：本次試驗會選取對比試劑（c），將它投入到液相色譜儀器內，然后記錄下呈現的色譜圖。頭孢噻肟與雜質E峰之間的分離度大于3.5；頭孢噻肟峰的對稱因子不應該超過2.0。

4 結果與討論

4.1 對于所含雜質數量的運算規(guī)則：在運算所含雜質數量的過程中，峰面積與對比溶劑（b）的主峰相比時，峰面積小于對比試劑（b）的主峰。而且，峰面積是對比試劑（b）的0.05倍。在這種情況下，統計數據的過程中完全可以忽略不計。

4.2 對于所含雜質的確定。本次試驗按照檢測的色譜圖對測量出的雜質進行分析。不僅需要定性的分析，還需要定量的分析。已經測量出來的雜質包括A、B、C、D、E、F，它們都不能高于對比試劑（b）主峰面積的1%。而任何一種雜質，都不能高出對照溶液（b）主峰面積0.2%；所有雜質的總和不能高出對照溶液（B）主峰面積的3%。

4.3 試驗過程中，若分離度未能滿足試驗要求，研究者可以適當的對流動相A的PH值進行調整，調整幅度大約在PH6.25±0.1，以此滿足色譜系統適用性條件。

4.4 色譜柱的溫度能夠改變雜質峰具體的保留時間，檢驗期間，溫度達到30℃時，主峰能夠保留13.2min，待到溫度為25℃、40℃時，所得到的結果有一定的差異。該法容易受到溫度的影響，因此檢驗期間，必須對溫度進行良好控制。

4.5 頭孢噻肟鈉是第三代頭抱類抗生素，具有殺菌作用強，抗菌譜廣，耐酶，高效，低毒，價廉等優(yōu)點，現已廣泛用于一些嚴重和危重感染，如敗血癥、腦膜炎，重癥肺炎等癮臨床應用發(fā)現，頭孢噻肟鈉發(fā)生變態(tài)反應性休克搶救成功與否，與皮試、變態(tài)反應性休克判斷、搶救藥物應用順序有關。頭孢噻肟鈉引起的變態(tài)反應性休克報道在逐年增多，醫(yī)生認為使用前應當皮試，既使皮試陰性者，使用過程中，尤其是使用后Smin應當密切注意患者用藥反應，一旦發(fā)生頭抱曝腸鈉變態(tài)反應性休克前兆，應當首選0.1%腎上腺素lml肌注，同時吸氧，然后靜推氫化可的松等，隨后再進行一系列對癥處理搶救措施若此時誤診為輸液反應，首先應用地塞米松靜推則有可能貽誤搶救時機，造成患者發(fā)生變態(tài)反應性休克導致死亡。

參考文獻

[1]張人福，宋曉園.高效液相色譜在藥學的應用概況和最近進展[J].中國當代醫(yī)藥，2013（21）.

[2]洪玲娟，鄭葉敏，湯有堅，鐘為慧.頭孢噻肟酸的環(huán)境友好合成工藝[J].浙江化工，2010（3）.

[3]趙霞，胡昌勤.HPLC法測定注射用頭孢噻肟鈉的有關物質[J].中國抗生素雜志，2008（12）.

[4]劉軍霞，李文杰.淺析高效液相色譜在藥物分析中的應用[J].生物技術世界，2014（1）.

[5]董麗，孫祥德，李琴.高效液相色譜雙波長檢測法測定維C銀翹片中4種組分的含量[J].色譜，2010（2）.