• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    血清M30抗原水平對HBV相關(guān)慢加急性肝衰竭的預(yù)后評估價值

    2016-04-14 02:36:44陳榕曹竹君王云項曉剛安寶燕謝青王暉郭清
    肝臟 2016年2期
    關(guān)鍵詞:乙型肝炎病毒細(xì)胞凋亡

    陳榕 曹竹君 王云 項曉剛 安寶燕 謝青 王暉 郭清

    200025 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬瑞金醫(yī)院感染科

    ?

    ·論著·

    血清M30抗原水平對HBV相關(guān)慢加急性肝衰竭的預(yù)后評估價值

    陳榕曹竹君王云項曉剛安寶燕謝青王暉郭清

    200025上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬瑞金醫(yī)院感染科

    【摘要】目的探索HBV感染后不同疾病階段的肝細(xì)胞凋亡水平及其對HBV相關(guān)慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)預(yù)后的評估價值。方法前瞻性納入40例慢性乙型肝炎(CHB)、40例乙型肝炎肝硬化(HBV-LC)以及54例HBV-ACLF患者,同時設(shè)立40例健康對照(HC)。針對HBV-ACLF患者隨訪3個月,根據(jù)隨訪結(jié)果分為存活組及死亡組。檢測所有研究對象血清角蛋白18凋亡特異性裂解片段M30抗原水平作為反映肝細(xì)胞凋亡水平的間接指標(biāo)。結(jié)果CHB、HBV-LC及HBV-ACLF組血清M30抗原水平分別為145.24(IQR 86.31,206.39)U/L,213.42(IQR 147.30,391.28)U/L及762.67(IQR 492.45,1395.24)U/L,均顯著高于HC組[60.34(IQR 50.58,67.64)U/L](P<0.01)。隨著疾病嚴(yán)重程度升高,血清M30抗原呈現(xiàn)遞增趨勢,尤以HBV-ACLF組最高,顯著高于CHB(P<0.01)及HBV-LC組(P<0.01)。M30抗原與ALT、AST、TBil、PT、INR以及HBV DNA呈顯著正相關(guān)(均P<0.01),與Alb呈顯著負(fù)相關(guān)(P<0.01)。HBV-ACLF 隨訪3個月死亡組患者血清M30抗原水平[1175.18(IQR 756.57,3224.94)U/L]顯著高于存活組患者[491.39(IQR 264.23,657.17)U/L](P<0.01)。血清M30抗原能夠良好地預(yù)測HBV-ACLF患者3個月預(yù)后情況,曲線下面積為0.86(95% CI 0.75~0.96,P<0.01)。結(jié)論肝細(xì)胞凋亡水平與HBV感染后的疾病嚴(yán)重程度密切相關(guān),血清M30抗原可能成為HBV相關(guān)慢加急性肝衰竭早期預(yù)后的候選指標(biāo)。

    【關(guān)鍵詞】慢加急性肝衰竭;乙型肝炎病毒;細(xì)胞凋亡;預(yù)后

    乙型肝炎的重癥化演變是乙型肝炎相關(guān)慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)最終發(fā)生的原因所在,是一個累及多因素、多器官、多階段的復(fù)雜過程,其中肝細(xì)胞的大量死亡是HBV-ACLF發(fā)展過程的核心事件,貫穿整個疾病進(jìn)程[1]。越來越多的研究表明,肝細(xì)胞凋亡在慢加急性肝衰竭疾病進(jìn)展過程中扮演重要角色,但其具體作用尚不明確。角蛋白18(Keratin-18, K-18)是肝細(xì)胞最主要的中間纖維蛋白,作為骨架結(jié)構(gòu)支撐并維持肝實質(zhì)細(xì)胞正常的形態(tài)[2]。肝細(xì)胞凋亡過程中,K-18經(jīng)由凋亡蛋白酶家族一系列CASPASE蛋白切割后,形成擁有凋亡特異性抗原點位的裂解片段(M30抗原)并釋放入循環(huán)血,循環(huán)血M30抗原的水平可反映肝細(xì)胞凋亡水平[3]。本研究旨在探討HBV-ACLF患者的循環(huán)血肝細(xì)胞凋亡水平特點及其臨床意義。

    資料和方法

    一、病例來源

    研究對象為瑞金醫(yī)院2013年2月至2014年8月就診的134例患者,男性109例,女性25例,年齡19~70歲,平均年齡為(45.6±1.0)歲。其中CHB患者40例,HBV-LC患者40例,HBV-ACLF患者54例。同時納入健康志愿者40名作為健康對照。CHB診斷標(biāo)準(zhǔn)參考2010年慢性乙型肝炎防治指南[4],HBV-ACLF診斷標(biāo)準(zhǔn)參考2009年亞太肝病學(xué)會慢加急性肝衰竭(ACLF)共識[5]。排除合并HCV、HDV、HEV或HIV感染、明確的脂肪性肝病、威爾森氏癥、自身免疫性肝病及酒精性肝病等。

    二、方法

    1. 血清樣本及臨床數(shù)據(jù)采集:入組HBV-ACLF患者血清均為入院當(dāng)日留取,CHB患者、HBV-LC及健康志愿者在入組當(dāng)日采集血清。所有血清樣本于-20 ℃凍存?zhèn)溆?。對?yīng)錄入所有入組對象基線人口學(xué)、外周血生物化學(xué)指標(biāo)、血常規(guī)、凝血功能、病毒學(xué)指標(biāo)以及影像學(xué)檢查結(jié)果等。

    2. 血清M30抗原的測定:血清M30抗原定量采用酶聯(lián)免疫吸附試驗的方法,試劑盒為M30-Apoptosenses ELISA kit (PEVIVA AB, Bromma, Sweden)。所有操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。

    3. 肝衰竭患者預(yù)后評估:計算CTP評分[6]、MELD評分[7]及MELD-NA評分[8]。

    三、統(tǒng)計學(xué)處理

    統(tǒng)計分析采用SAS 9.0及Sigmaplot 12.5軟件。血清M30抗原水平以中位數(shù)(上下四分位數(shù))表示,其余計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤表示。正態(tài)分布的計量資料組間比較采用t檢驗;非正態(tài)分布的計量資料組間比較采用曼惠特尼U檢驗;計數(shù)資料采用χ2檢驗,相關(guān)性分析采用Spearman相關(guān)檢驗。各類指標(biāo)對HBV-ACLF患者的短期預(yù)后評估的診斷效能用受試者工作特征曲線下面積(ROC)來評價。雙側(cè)P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

    結(jié)果

    一、研究對象基本資料

    本研究共納入134例患者及40例健康志愿者,患者分3組,分別為CHB、HBV-LC以及HBV-ACLF組。所有研究對象入組時各指標(biāo)檢測結(jié)果見表1。54例HBV-ACLF患者隨訪3個月后,存活22例,死亡32例。

    二、各組血清M30抗原水平

    健康對照組血清M30抗原水平為60.34 U/L(50.58 U/L, 67.64 U/L),顯著低于患者組水平302.52 U/L(151.07 U/L, 695.62 U/L;P<0.01)。見圖1A。患者組中,隨著疾病嚴(yán)重程度升高,血清M30抗原呈現(xiàn)遞增趨勢,尤以HBV-ACLF組最高,各組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。見圖1B。

    三、患者血清M30抗原與肝功能評估指標(biāo)及病毒載量的相關(guān)性

    患者血清M30抗原與肝功能指標(biāo)(ALT、AST、GGT、TBil、Alb)、凝血功能指標(biāo)(PT、INR)以及病毒載量HBV DNA的相關(guān)性見表2。

    四、基線血清M30抗原水平在HBV-ACLF患者中的預(yù)后價值

    隨訪3個月死亡組基線M30抗原水平明顯高于存活組,見圖2A。ROC曲線結(jié)果顯示,血清M30抗原水平具有預(yù)測HBV-ACLF患者短期預(yù)后的能力,且AUC大于傳統(tǒng)的肝衰竭預(yù)后評估模型CTP評分、MELD評分以及MELD-NA評分,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義,見圖2B。血清M30抗原Cut-off值定為>750.47 U/L時,預(yù)判HBV-ACLF患者死亡的靈敏度和特異度最好,特異度為86.36%,靈敏度為78.13%,陰性預(yù)測值為73.08%,陽性預(yù)測值為89.29%。

    表1 各組患者基線特征

    注:1A. 血清M30抗原在患者組水平明顯高于健康人群。1B. 血清M30抗原水平在疾病組中隨著疾病嚴(yán)重程度進(jìn)行性升高,在HBV-ACLF患者組水平最高,顯著高于CHB及HBV-LC組

    圖1血清M30抗原水平在健康人群及患者中的水平

    注:2A為存活組與死亡組患者M(jìn)30抗原水平比較;2B為血清M30與其他肝衰竭預(yù)后評估模型的ROC曲線

    變量相關(guān)系數(shù)P值A(chǔ)LT0.53<0.01AST0.72<0.01GGT0.160.06TBil0.69<0.01Alb-0.42<0.01PT0.64<0.01INR0.64<0.01HBVDNA0.270.002

    討論

    HBV-ACLF病程進(jìn)展較快,目前治療措施有限,療效不能令人滿意,病死率仍較高,嚴(yán)重威脅我國人民的生命健康。根據(jù)HBV-ACLF內(nèi)在的機(jī)制特點,建立行之有效的病情評價及預(yù)后評估體系,繼而指導(dǎo)臨床治療決策是降低病死率的關(guān)鍵所在。目前國內(nèi)尚無針對HBV-ACLF的預(yù)后評估系統(tǒng),臨床主要以傳統(tǒng)的終末期肝病模型MELD及CTP評分作為替代,對HBV-ACLF患者進(jìn)行早期預(yù)后評估,同時針對病情制定不同治療策略。然而由于各評分系統(tǒng)都存在著各自的不足,直接將其應(yīng)用于HBV-ACLF仍有一些問題存在[9]。國外Jalan等[10]針對ACLF構(gòu)建的CLIF-C ACLF評分在預(yù)測ACLF患者短期及長期預(yù)后方面的準(zhǔn)確率明顯高于傳統(tǒng)的MELD評分、MELD-NA評分以及CTP評分,但其研究對象以酒精性肝硬化導(dǎo)致的ACLF為主。雖然不同病因?qū)е碌腁CLF主要臨床特點類似,但這一系統(tǒng)能否直接應(yīng)用到我國HBV-ACLF群體仍需多中心研究的驗證。

    本研究通過檢測血清中K-18凋亡特異性裂解片段M30抗原的表達(dá)情況,以探究肝細(xì)胞凋亡水平在HBV-ACLF患者中的特點。同時對比分析其水平在健康人群、慢性乙型肝炎以及乙型肝炎肝硬化患者中的差異,結(jié)果發(fā)現(xiàn)血清M30抗原水平在HBV-ACLF患者中顯著高于健康人群以及其他疾病階段的患者,并與ALT、AST、TBil、PT、INR、HBV DNA等呈正相關(guān)性,與白蛋白呈負(fù)相關(guān)性,表明升高的M30抗原與病情程度緊密相關(guān)。此外,血清M30抗原水平能夠有效區(qū)分HBV-ACLF存活組和死亡組患者,死亡組患者的M30抗原水平顯著高于存活組患者。ROC曲線分析表明血清M30抗原對HBV-ACLF患者3個月預(yù)后具有良好的評估作用,曲線下面積達(dá)0.86,大于傳統(tǒng)的CTP、MELD以及MELD-NA評分,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義。這表明血清M30抗原水平在一定程度上能夠評價病情嚴(yán)重程度以及評估疾病預(yù)后情況。目前,少有研究針對性分析HBV-ACLF病程中特定肝細(xì)胞死亡模式,比如肝細(xì)胞凋亡、壞死甚至是凋亡性壞死的作用。慢性HBV感染所引起持續(xù)的宿主免疫損傷、肝內(nèi)微循環(huán)障礙以及腸源性內(nèi)毒素血癥等均可造成大量肝細(xì)胞死亡[11]。死亡肝細(xì)胞及其釋放的細(xì)胞內(nèi)容物作為炎性刺激因子,上調(diào)各類促炎因子促使原本較為穩(wěn)定的慢性乙型肝炎、肝硬化狀態(tài)暴發(fā)急性肝功能失代償進(jìn)而發(fā)展為肝衰竭[5]。

    本研究進(jìn)一步闡明了HBV-ACLF患者血清肝細(xì)胞凋亡水平在反映病情嚴(yán)重程度以及預(yù)后評估方面的重要作用。但尚不能得出HBV-ACLF患者中顯著升高的肝細(xì)胞凋亡水平對疾病本身的作用,今后將進(jìn)一步針對HBV-ACLF開展動態(tài)研究,以期探討高水平的肝細(xì)胞凋亡在HBV-ACLF疾病進(jìn)展中的作用,并同時建立多中心、前瞻性、大樣本量臨床隊列驗證血清M30抗原作為HBV-ACLF病情及預(yù)后評價指標(biāo)的作用。

    參考文獻(xiàn)

    1 Guicciardi ME, Malhi H, Mott JL, et al. Apoptosis and necrosis in the liver. Compr Physiol, 2013, 3:977-1010.

    2 Omary MB, Ku NO, Strnad P, et al. Toward unraveling the complexity of simple epithelial keratins in human disease. J Clin Invest, 2009, 119:1794-1805.

    3 H?gg M, Bivén K, Ueno T, et al. A novel high-through-put assay for screening of pro-apoptotic drugs. Invest New Drug, 2002, 20:253-259.

    4 中華醫(yī)學(xué)會肝病學(xué)分會,中華醫(yī)學(xué)會感染病學(xué)分會. 慢性乙型肝炎防治指南 (2010年版). 肝臟, 2011, 16: 2-16.

    5 Sarin SK, Kumar A, Almeida JA, et al. Acute-on-chronic liver failure: consensus recommendations of the Asian Pacific Association for the Study of the Liver (APASL). Hepatol Int, 2009, 3:269-282.

    6 Pugh RNH, Murray-Lyon IM, Dawson JL, et al. Transection of the oesophagus for bleeding oesophageal varices. Brit J Surg, 1973, 60:646-649.

    7 Kamath PS,Kim W. The model for end-stage liver disease (MELD). Hepatology, 2007, 45:797-805.

    8 Biggins SW, Kim W, Terrault NA, et al. Evidence-based incorporation of serum sodium concentration into MELD. Gastroenterology, 2006, 130:1652-1660.

    9 Xia Q, Dai X, Zhang Y, et al. A modified MELD model for Chinese pre-ACLF and ACLF patients and it reveals poor prognosis in pre-ACLF patients. PLoS One, 2013, 8:e64379.

    10Jalan R, Saliba F, Pavesi M, et al. Development and validation of a prognostic score to predict mortality in patients with acute-on-chronic liver failure. J Hepatol, 2014, 61: 1038ú1047.

    11Jalan R, Yurdaydin C, Bajaj JS, et al. Toward an improved definition of acute-on-chronic liver failure. Gastroenterology, 2014, 147:4-10.

    (本文編輯:錢燕)

    The prognostic value of serum M30-antigen levels in patients with HBV-related acute-on-chronic liver failureCHENRong,CAOZhu-jun,WANGYun,XIANGXiao-gang,ANBao-yan,XIEQing,WANGHui,GUOQing.DepartmentofInfectiousDiseases,RuijinHospital,Shanghai200025,China

    【Abstract】ObjectiveTo investigate the apoptotic level of hepatocytes in patients with chronic hepatitis B virus (HBV) infection at different stages, and to evaluate its prognostic value on HBV-related acute-on-chronic liver failure (HBV-ACLF). MethodsA prospective study was carried out in 174 patients including 40 chronic hepatitis B (CHB), 40 HBV-related liver cirrhosis (HBV-LC), 54 HBV-ACLF patients and 40 healthy controls (HC). HBV-ACLF group were followed up for 3 months and classified into survival and death group. Apoptotic levels of hepatocytes were measured by detecting keratin-18 associated caspase-cleaved fragment, M30-antigen. ResultsSerum M30-antigen levels in CHB, HBV-LC and HBV-ACLF were 145.24 [interquartile range (IQR 86.31-206.39) U/L, 213.42 (IQR 147.30-391.28) U/L and 762.67 (IQR 492.45-1395.24) U/L respectively, which were significantly (P<0.01) higher than those in HC group [60.34 (IQR 50.58-67.64)U/L]. Moreover, serum M30-antigen levels were gradually elevated as disease severity increased, reaching to peek in HBV-ACLF group, which was significantly higher (P<0.01) than those in CHB and HBV-LC group. M30-antigen level was significantly positively correlated with alanine aminotransferase (ALT), aspartate transaminase (AST), total bilirubin (TBil), prothrombin time (PT), international normalized ratio (INR) and HBV-DNA (all P<0.01), while reversely correlated with albumin (P<0.01). More importantly, serum levels of M30-antigen in the death group [1175.18 (IQR 756.57-3224.94) U/L] were significantly (P<0.01) higher than those in the survival group [491.39 (IQR 264.23-657.17) U/L]. Receiver operating characteristic (ROC) curve analysis demonstrated that serum M30-antigen could well predict 3-month outcome of HBV-ACLF patients, as the area under the curve (AUROC) was 0.86 (95% CI 0.75-0.96, P<0.01). ConclusionHepatocyte apoptosis is closely associated with the disease severity of chronic HBV infection and markedly elevated in patients with HBV-ACLF. Hepatocytes apoptosis biomarker, M30-antigen, might be a potential indicator for the early prognosis of HBV-ACLF.

    【Key words】Acute-on-chronic liver failure; Hepatitis B virus; Apoptosis; Prognosis

    (收稿日期:2015-11-05)

    Corresponding author:GUO Qing,Email:13901922856@163.com

    通信作者:郭清,Email:13901922856@163.com

    基金項目:國家自然科學(xué)基金(81570560);“十二五”重大專項資助項目(2012ZX10005004-002);上海市科學(xué)技術(shù)委員會科技支撐項目(13401902903);上海市衛(wèi)生和計劃生育委員會重點項目(20134004);國家臨床重點專科建設(shè)項目(2012ZX09303-001-001);蘇州市醫(yī)療器械與新藥專項(ZXY2013003)

    猜你喜歡
    乙型肝炎病毒細(xì)胞凋亡
    木犀草素對對乙酰氨基酚誘導(dǎo)的L02肝細(xì)胞損傷的保護(hù)作用
    乙肝病毒檢測在臨床應(yīng)用的研究進(jìn)展
    乙型肝炎人免疫球蛋白聯(lián)合乙肝疫苗阻斷乙肝病毒母嬰傳播的療效觀察
    老年乙肝及HBV相關(guān)肝硬化患者外周血Th17細(xì)胞水平與IL—17、α—SMA及肝功能的相關(guān)性研究
    妊娠合并乙型肝炎病毒感染的觀察與護(hù)理
    17102例乙型肝炎、丙型肝炎、艾滋病、梅毒檢測結(jié)果分析
    傳染性法氏囊病致病機(jī)理研究
    科技視界(2016年15期)2016-06-30 12:27:37
    G—RH2誘導(dǎo)人肺腺癌A549細(xì)胞凋亡的實驗研究
    乙型肝炎病毒DNA定量檢測與臨床的關(guān)系
    山東體育學(xué)院學(xué)報(2015年3期)2015-08-14 20:30:25
    一级a爱视频在线免费观看| 国产av国产精品国产| 欧美少妇被猛烈插入视频| 中文字幕色久视频| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 欧美日韩一级在线毛片| av片东京热男人的天堂| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 亚洲国产av影院在线观看| 黑人欧美特级aaaaaa片| 秋霞在线观看毛片| 免费看不卡的av| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 国产精品久久久久久久久免| 黄片小视频在线播放| 国产精品 国内视频| 精品久久蜜臀av无| 欧美国产精品va在线观看不卡| 亚洲精品国产av蜜桃| 欧美激情 高清一区二区三区| 制服丝袜香蕉在线| 精品午夜福利在线看| 久久韩国三级中文字幕| 纯流量卡能插随身wifi吗| 久久亚洲国产成人精品v| 国产成人精品久久二区二区91 | 人人妻人人澡人人看| 在线观看美女被高潮喷水网站| 一级毛片我不卡| 晚上一个人看的免费电影| 亚洲人成网站在线观看播放| 老鸭窝网址在线观看| 欧美精品国产亚洲| 青青草视频在线视频观看| 黄色毛片三级朝国网站| 亚洲精品第二区| 在线观看一区二区三区激情| 国产在线免费精品| 男女啪啪激烈高潮av片| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 久久久久国产一级毛片高清牌| 亚洲内射少妇av| 国产男女超爽视频在线观看| 精品人妻偷拍中文字幕| 婷婷色综合大香蕉| 日本色播在线视频| 美女主播在线视频| av片东京热男人的天堂| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 一本色道久久久久久精品综合| 在线观看三级黄色| 伦理电影免费视频| 一二三四中文在线观看免费高清| 好男人视频免费观看在线| 春色校园在线视频观看| 亚洲国产精品成人久久小说| 一边摸一边做爽爽视频免费| 午夜精品国产一区二区电影| 在线观看免费视频网站a站| 好男人视频免费观看在线| 色哟哟·www| 青草久久国产| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 一级a爱视频在线免费观看| 久久久久久人人人人人| 国产野战对白在线观看| 另类亚洲欧美激情| 五月开心婷婷网| 高清黄色对白视频在线免费看| 免费高清在线观看视频在线观看| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 少妇的丰满在线观看| 久久久久久久久免费视频了| 精品国产国语对白av| 热99国产精品久久久久久7| 久久久国产欧美日韩av| 日韩av不卡免费在线播放| 亚洲综合色网址| 国产老妇伦熟女老妇高清| 波多野结衣av一区二区av| 国产av码专区亚洲av| 色婷婷av一区二区三区视频| 九色亚洲精品在线播放| 久久久久国产网址| 亚洲美女视频黄频| 在线 av 中文字幕| 伦精品一区二区三区| 国产精品国产三级专区第一集| 中文字幕人妻熟女乱码| 丰满迷人的少妇在线观看| 国产精品嫩草影院av在线观看| 日韩 亚洲 欧美在线| 精品视频人人做人人爽| 制服诱惑二区| 美女福利国产在线| 日韩视频在线欧美| 国产福利在线免费观看视频| 国产熟女午夜一区二区三区| 99香蕉大伊视频| 18禁国产床啪视频网站| 成年人免费黄色播放视频| 国产av精品麻豆| 18在线观看网站| 少妇的丰满在线观看| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 亚洲,一卡二卡三卡| 国产精品99久久99久久久不卡 | 欧美日韩精品网址| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 男女无遮挡免费网站观看| 岛国毛片在线播放| 大话2 男鬼变身卡| 亚洲av成人精品一二三区| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 午夜老司机福利剧场| 超碰97精品在线观看| 国产成人精品福利久久| 精品午夜福利在线看| 热99国产精品久久久久久7| 国产精品香港三级国产av潘金莲 | 久久久国产精品麻豆| 亚洲av.av天堂| 美国免费a级毛片| 精品国产一区二区三区四区第35| 亚洲一区二区三区欧美精品| 久久97久久精品| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 最近最新中文字幕大全免费视频 | 日日撸夜夜添| 9热在线视频观看99| 国产精品不卡视频一区二区| 国产精品国产三级专区第一集| 精品第一国产精品| 乱人伦中国视频| 国产成人精品久久久久久| xxx大片免费视频| 9热在线视频观看99| 亚洲男人天堂网一区| 最新中文字幕久久久久| 国产成人aa在线观看| 欧美黄色片欧美黄色片| 久久久久久伊人网av| 咕卡用的链子| 成年动漫av网址| 青草久久国产| 天天躁日日躁夜夜躁夜夜| 日韩电影二区| 99热国产这里只有精品6| 日韩免费高清中文字幕av| 在线观看免费视频网站a站| 青草久久国产| 亚洲综合精品二区| 人妻一区二区av| 精品一区二区三区四区五区乱码 | 亚洲精品乱久久久久久| 性色av一级| 国产男女超爽视频在线观看| 国产视频首页在线观看| 熟妇人妻不卡中文字幕| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 久久青草综合色| 国产乱人偷精品视频| 久久女婷五月综合色啪小说| 26uuu在线亚洲综合色| 亚洲精品乱久久久久久| 精品少妇内射三级| 香蕉精品网在线| 日本黄色日本黄色录像| 国产精品国产三级专区第一集| 一本色道久久久久久精品综合| 午夜日韩欧美国产| 晚上一个人看的免费电影| 欧美在线黄色| 蜜桃在线观看..| 久久免费观看电影| 欧美精品国产亚洲| 精品少妇内射三级| 老汉色∧v一级毛片| 18禁国产床啪视频网站| 亚洲av欧美aⅴ国产| 亚洲男人天堂网一区| 人成视频在线观看免费观看| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 精品少妇久久久久久888优播| 97精品久久久久久久久久精品| 久久久a久久爽久久v久久| 日韩电影二区| av国产精品久久久久影院| 9热在线视频观看99| 老司机影院成人| 国产成人欧美| 成年女人在线观看亚洲视频| 熟女电影av网| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 一区二区三区四区激情视频| 国产精品久久久久久久久免| 国产av一区二区精品久久| 国产免费福利视频在线观看| 久久久久久伊人网av| 亚洲,一卡二卡三卡| 飞空精品影院首页| 伦精品一区二区三区| 视频在线观看一区二区三区| 国产高清国产精品国产三级| 日韩一区二区三区影片| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 电影成人av| 啦啦啦在线免费观看视频4| 欧美97在线视频| 免费观看a级毛片全部| 性色avwww在线观看| 国产成人午夜福利电影在线观看| 久久久久久伊人网av| 水蜜桃什么品种好| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 久久人人97超碰香蕉20202| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 黑人欧美特级aaaaaa片| 在线观看一区二区三区激情| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 99久久精品国产国产毛片| 丝袜喷水一区| 久久国产精品大桥未久av| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 亚洲精品一区蜜桃| 精品人妻在线不人妻| 大陆偷拍与自拍| 性少妇av在线| av电影中文网址| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 久久久久精品久久久久真实原创| 日日爽夜夜爽网站| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 色94色欧美一区二区| 国产一区二区在线观看av| 精品国产国语对白av| 老女人水多毛片| 90打野战视频偷拍视频| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 午夜老司机福利剧场| 极品少妇高潮喷水抽搐| 视频在线观看一区二区三区| 欧美国产精品va在线观看不卡| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 超碰97精品在线观看| 永久免费av网站大全| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 亚洲第一av免费看| 日本vs欧美在线观看视频| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 大陆偷拍与自拍| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 久久这里只有精品19| 国产亚洲一区二区精品| 人成视频在线观看免费观看| 99久久精品国产国产毛片| 人妻一区二区av| 国产男人的电影天堂91| 男人舔女人的私密视频| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 久久国内精品自在自线图片| 亚洲中文av在线| 男女国产视频网站| 久久久久久久亚洲中文字幕| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 人妻系列 视频| 国产精品av久久久久免费| 在线观看美女被高潮喷水网站| 久久久久久久亚洲中文字幕| 人人妻人人澡人人看| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 最近中文字幕2019免费版| 黄片播放在线免费| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 国产男人的电影天堂91| 高清在线视频一区二区三区| 欧美bdsm另类| 麻豆精品久久久久久蜜桃| av.在线天堂| 久久99热这里只频精品6学生| 精品一区二区三卡| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 一级黄片播放器| 满18在线观看网站| 日韩免费高清中文字幕av| 女性生殖器流出的白浆| 一二三四中文在线观看免费高清| 欧美黄色片欧美黄色片| av天堂久久9| 日韩电影二区| 2018国产大陆天天弄谢| 国产成人精品一,二区| 视频区图区小说| 另类精品久久| 青草久久国产| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 最近最新中文字幕大全免费视频 | 国产又色又爽无遮挡免| 国产男女内射视频| 少妇精品久久久久久久| 久久久久久伊人网av| 免费看av在线观看网站| 日韩av不卡免费在线播放| 亚洲精品国产av成人精品| 老汉色av国产亚洲站长工具| 在线观看美女被高潮喷水网站| 亚洲国产看品久久| 大码成人一级视频| 久久久国产欧美日韩av| 亚洲综合色惰| 亚洲av在线观看美女高潮| 免费观看a级毛片全部| 97精品久久久久久久久久精品| 国产免费现黄频在线看| av在线播放精品| 久久久久久久大尺度免费视频| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 日本vs欧美在线观看视频| 国精品久久久久久国模美| 国产精品三级大全| 麻豆乱淫一区二区| 美女国产视频在线观看| 午夜日韩欧美国产| 日韩电影二区| 国产极品天堂在线| 在线观看国产h片| 男人舔女人的私密视频| 国产免费福利视频在线观看| 国产视频首页在线观看| 美女视频免费永久观看网站| 99精国产麻豆久久婷婷| 精品一区在线观看国产| 18禁观看日本| 男女下面插进去视频免费观看| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 亚洲综合精品二区| 国产精品不卡视频一区二区| 波多野结衣一区麻豆| 欧美人与性动交α欧美软件| 欧美激情 高清一区二区三区| 成人国产麻豆网| av女优亚洲男人天堂| 不卡视频在线观看欧美| 久久久久人妻精品一区果冻| 亚洲国产精品999| www.熟女人妻精品国产| 国产伦理片在线播放av一区| 午夜免费鲁丝| 成年人免费黄色播放视频| xxxhd国产人妻xxx| 亚洲国产日韩一区二区| 日本av手机在线免费观看| 日韩欧美一区视频在线观看| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 亚洲av男天堂| 新久久久久国产一级毛片| 久久这里只有精品19| 丝瓜视频免费看黄片| 26uuu在线亚洲综合色| 亚洲精品中文字幕在线视频| 欧美人与性动交α欧美精品济南到 | av不卡在线播放| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 青青草视频在线视频观看| 1024香蕉在线观看| 久久综合国产亚洲精品| a级片在线免费高清观看视频| xxx大片免费视频| 美女午夜性视频免费| 亚洲综合色网址| 美女中出高潮动态图| 国产男女内射视频| 亚洲视频免费观看视频| 亚洲精品乱久久久久久| 色婷婷久久久亚洲欧美| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 下体分泌物呈黄色| 亚洲成av片中文字幕在线观看 | 精品久久久精品久久久| 制服丝袜香蕉在线| 欧美日韩精品网址| 只有这里有精品99| 久久精品久久久久久久性| 1024视频免费在线观看| 婷婷色av中文字幕| 欧美人与性动交α欧美精品济南到 | 久久精品aⅴ一区二区三区四区 | 波多野结衣av一区二区av| 可以免费在线观看a视频的电影网站 | 欧美变态另类bdsm刘玥| 伦理电影免费视频| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀 | 大片电影免费在线观看免费| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 免费黄频网站在线观看国产| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 久久狼人影院| 在线观看国产h片| 91精品三级在线观看| 国精品久久久久久国模美| 成人亚洲精品一区在线观看| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 欧美精品人与动牲交sv欧美| 国产精品免费视频内射| 1024视频免费在线观看| 久久国内精品自在自线图片| 久久久精品区二区三区| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 成人毛片a级毛片在线播放| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 最近2019中文字幕mv第一页| 欧美激情极品国产一区二区三区| 亚洲av.av天堂| 一区二区三区激情视频| 免费观看av网站的网址| 国产免费视频播放在线视频| 亚洲精品一二三| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 亚洲精品在线美女| 天堂中文最新版在线下载| 一区二区三区四区激情视频| 国产av一区二区精品久久| 成人国语在线视频| 青春草国产在线视频| 亚洲av欧美aⅴ国产| 又黄又粗又硬又大视频| 国产精品一区二区在线观看99| 男人舔女人的私密视频| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 水蜜桃什么品种好| 国产成人精品久久久久久| 91精品伊人久久大香线蕉| 在线天堂中文资源库| 人人澡人人妻人| 国产免费福利视频在线观看| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 2018国产大陆天天弄谢| 国产免费又黄又爽又色| 精品久久蜜臀av无| 婷婷成人精品国产| 国产精品 国内视频| 久久久久网色| 90打野战视频偷拍视频| 国产av国产精品国产| 午夜福利,免费看| 久久ye,这里只有精品| 久久婷婷青草| 日韩av免费高清视频| 精品人妻在线不人妻| 亚洲国产欧美在线一区| 国产精品久久久久久久久免| 日韩人妻精品一区2区三区| 中文字幕精品免费在线观看视频| 亚洲在久久综合| 欧美精品国产亚洲| 国产乱人偷精品视频| 五月伊人婷婷丁香| 热99国产精品久久久久久7| 香蕉丝袜av| 中文字幕av电影在线播放| 日韩av免费高清视频| 在线观看人妻少妇| 日本vs欧美在线观看视频| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 欧美人与性动交α欧美软件| 叶爱在线成人免费视频播放| 午夜福利视频精品| 美女高潮到喷水免费观看| av卡一久久| 欧美日本中文国产一区发布| 成人漫画全彩无遮挡| 国产xxxxx性猛交| av又黄又爽大尺度在线免费看| 久久狼人影院| 日本爱情动作片www.在线观看| 久久久久久久久久久免费av| 99久久精品国产国产毛片| 老鸭窝网址在线观看| 国产成人欧美| xxx大片免费视频| 亚洲国产精品999| videossex国产| 亚洲一码二码三码区别大吗| 欧美亚洲日本最大视频资源| 爱豆传媒免费全集在线观看| 国产精品国产av在线观看| 日本爱情动作片www.在线观看| 成人亚洲精品一区在线观看| 黄色视频在线播放观看不卡| 精品国产乱码久久久久久小说| 男女午夜视频在线观看| 久久久久人妻精品一区果冻| 黑丝袜美女国产一区| 狂野欧美激情性bbbbbb| 久久久久精品久久久久真实原创| 一级爰片在线观看| 久久久久久久久免费视频了| 中文字幕人妻丝袜制服| 国产乱来视频区| 亚洲美女视频黄频| 精品人妻在线不人妻| 日日摸夜夜添夜夜爱| 国产有黄有色有爽视频| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 免费在线观看黄色视频的| 少妇精品久久久久久久| av网站在线播放免费| 国产成人午夜福利电影在线观看| 国产视频首页在线观看| 午夜免费男女啪啪视频观看| 国产精品三级大全| 欧美变态另类bdsm刘玥| 男女高潮啪啪啪动态图| 人妻 亚洲 视频| 97在线视频观看| 天天影视国产精品| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 亚洲少妇的诱惑av| 少妇的丰满在线观看| 精品视频人人做人人爽| www.熟女人妻精品国产| 久久这里有精品视频免费| 亚洲av福利一区| 两个人免费观看高清视频| 男女高潮啪啪啪动态图| 亚洲精品一二三| 国产成人av激情在线播放| 国产在线视频一区二区| 中文字幕av电影在线播放| 色94色欧美一区二区| 日韩欧美精品免费久久| 国产成人精品福利久久| 午夜福利视频精品| 久久久久久久久久久免费av| 亚洲国产欧美网| 边亲边吃奶的免费视频| 水蜜桃什么品种好| 国产精品 国内视频| 亚洲av综合色区一区| 少妇被粗大猛烈的视频| 午夜精品国产一区二区电影| 色婷婷av一区二区三区视频| tube8黄色片| 国产精品 欧美亚洲| 国产成人午夜福利电影在线观看| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久 | 亚洲综合色惰| 国产乱人偷精品视频| 亚洲综合色惰| av在线老鸭窝| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 午夜影院在线不卡| 亚洲欧洲日产国产| 考比视频在线观看| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 国产精品.久久久| av国产久精品久网站免费入址| 99精国产麻豆久久婷婷| 国产片特级美女逼逼视频| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 日韩中文字幕欧美一区二区 | 波多野结衣av一区二区av| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 国产xxxxx性猛交| 伦理电影免费视频| 女性生殖器流出的白浆| 咕卡用的链子| av网站免费在线观看视频| 麻豆乱淫一区二区| 国产精品一国产av| 亚洲精品一区蜜桃| 2018国产大陆天天弄谢| 亚洲,欧美精品.| 热re99久久国产66热| 在线看a的网站| 国产精品免费视频内射| 五月伊人婷婷丁香| 免费黄频网站在线观看国产| 久久久国产一区二区| 久久久欧美国产精品| www.熟女人妻精品国产| 国产欧美亚洲国产| 日本欧美国产在线视频| 中文天堂在线官网| 国产精品久久久久久精品电影小说| 亚洲一码二码三码区别大吗| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 欧美人与性动交α欧美精品济南到 | 熟妇人妻不卡中文字幕| 中文字幕色久视频| 欧美97在线视频| 我的亚洲天堂| 黄频高清免费视频| 一级黄片播放器| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 国产在线一区二区三区精| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 日韩精品免费视频一区二区三区| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久 | 啦啦啦中文免费视频观看日本| 成年人免费黄色播放视频| 亚洲综合精品二区| 电影成人av| 国产精品久久久久久精品古装|