一測(cè)多評(píng)法在中藥質(zhì)量控制中的應(yīng)用進(jìn)展

王 欣， 覃 瑤， 王德江， 卿大雙， 姚林才， 李隆云， 羅維早*

（1.成都中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，四川成都610072；2.重慶市中藥研究院，重慶400065；3.太極集團(tuán)有限公司，重慶401147）

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一測(cè)多評(píng)法在中藥質(zhì)量控制中的應(yīng)用進(jìn)展

王 欣1，2， 覃 瑤2，3， 王德江1，2， 卿大雙1，2， 姚林才1，2， 李隆云2， 羅維早2*

（1.成都中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，四川成都610072；2.重慶市中藥研究院，重慶400065；3.太極集團(tuán)有限公司，重慶401147）

摘要:總結(jié)、歸納近年來一測(cè)多評(píng)法在中藥質(zhì)量控制中的實(shí)例，探討其在中藥不同類型成分定量分析中的最新研究進(jìn)展。該方法采用易得、價(jià)廉的對(duì)照品來測(cè)定多個(gè)活性成分，適合中藥多成分、多功效作用的評(píng)價(jià)模式，其簡(jiǎn)單、可行，將有利于提高中藥質(zhì)量控制的水平。

關(guān)鍵詞:一測(cè)多評(píng)法（QAMS）；質(zhì)量控制；中藥

dol:10.3969/j.issn.1001-1528.2016.02.035

中藥質(zhì)量評(píng)價(jià)是中藥現(xiàn)代化的基礎(chǔ)，與單一指標(biāo)相比，多指標(biāo)的質(zhì)量評(píng)價(jià)模式更符合中藥多成分、多功效的特點(diǎn)。由于對(duì)照品緊缺和檢測(cè)費(fèi)高昂，多指標(biāo)的質(zhì)量評(píng)價(jià)模式多用于科學(xué)研究，而較少用于實(shí)際質(zhì)量監(jiān)督中。一測(cè)多評(píng)法（quantitative ana1ysis of mu1ti-comPonents by Sing1e Marker，QAMS）是利用中藥有效成分之間的內(nèi)在函數(shù)和比例關(guān)系，通過測(cè)定一個(gè)成分（對(duì)照品易于得到）而實(shí)現(xiàn)多個(gè)成分（對(duì)照品難以得到或供應(yīng)）的同步測(cè)定，是適合中藥特點(diǎn)的多指標(biāo)質(zhì)量評(píng)價(jià)模式。本文將介紹一測(cè)多評(píng)法的原理及特點(diǎn)，概述近年來其在中藥質(zhì)量控制的應(yīng)用進(jìn)展。

1 一測(cè)多評(píng)法的概述

一測(cè)多評(píng)法是在內(nèi)標(biāo)法、外標(biāo)法及校正因子法等分析方法的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的。文乾映等［1］報(bào)道，《美國(guó)藥典》34版中25個(gè)天然藥物及制劑、《歐洲藥典》7.0版中9個(gè)天然藥物的質(zhì)量評(píng)價(jià)均運(yùn)用該方法，而《中國(guó)藥典》2010年版中［2］黃連藥材生物堿及銀杏葉總黃酮醇苷的含有量測(cè)定計(jì)算也均采用該方法。2006年，王智民等［3］最早建立了一測(cè)多評(píng)法在中藥評(píng)價(jià)中的方法學(xué)考察模式，該研究思路在木通藥材中皂苷成分的含有量測(cè)定中得到驗(yàn)證。一測(cè)多評(píng)法適用于對(duì)照品制備難度大、成本高或?qū)φ掌凡环€(wěn)定的多成分質(zhì)量控制。

1.1 基本原理［3-4]在一定線性范圍內(nèi)，組分的量（質(zhì)量或濃度）與檢測(cè)器響應(yīng)值成正比。在多指標(biāo)質(zhì)量評(píng)價(jià)中，以廉價(jià)、易得的對(duì)照品為內(nèi)參物，建立與其他待測(cè)組分之間的相對(duì)校正因子（fs/k，RCF），通過測(cè)定內(nèi)參物的含有量，根據(jù)相對(duì)校正因子（RCF）計(jì)算其他組分的含有量，公式如下。

1.2 一測(cè)多評(píng)法的技術(shù)要求［4-6]在檢測(cè)指標(biāo)方面，首先選擇藥材或制劑中藥理作用比較明確的有效成分，或與臨床功效相關(guān)的指標(biāo)性成分作為檢測(cè)指標(biāo)，HPLC色譜條件的優(yōu)化和方法學(xué)考察分別參照《中國(guó)藥典》2010年版（一部）附錄VID和X VIII的要求。驗(yàn)證、方法再驗(yàn)證要求的樣本量分別為30、10批，待測(cè)成分色譜峰定位考察內(nèi)容包括色譜條件（流動(dòng)相組成、PH值、柱溫、流量等）、色譜儀、色譜柱、實(shí)驗(yàn)室及操作人員等。

2 一測(cè)多評(píng)法的應(yīng)用

自從一測(cè)多評(píng)法［7］應(yīng)用于中藥材和制劑的多成分定量分析以來，已發(fā)表相關(guān)研究論文達(dá)100多篇，在2012—2014年間，每年發(fā)表都在40篇以上，其已逐漸被中藥行業(yè)認(rèn)可，在中藥質(zhì)量評(píng)價(jià)研究和日常質(zhì)量監(jiān)督中都得到了一定范圍的應(yīng)用。一測(cè)多評(píng)法不僅可用于同類型化學(xué)成分，還可用于一些紫外吸收相近的不同類型化學(xué)成分的定量分析，如皂苷、黃酮、醌類、生物堿、香豆素、萜類及酚酸等。

2.1 一測(cè)多評(píng)法在藥材及飲片中的應(yīng)用

一測(cè)多評(píng)法已運(yùn)用于黃連、淫羊藿、人參、三七、丹參和大黃等40多種藥材的多成分質(zhì)量控制中，見表1。

表1　一測(cè)多評(píng)法在藥材及飲片中的應(yīng)用情況

續(xù)表1　

一測(cè)多評(píng)法可用于藥材及飲片中同類型化學(xué)成分的質(zhì)量控制?？锲G輝［8］以黃連為研究對(duì)象，建立小檗堿與巴馬汀、黃連堿、表小檗堿、藥根堿的RCF，測(cè)定小檗堿的含有量，再以RCF計(jì)算巴馬汀、黃連堿、表小檗堿、藥根堿的含有量。與外標(biāo)法相比，一測(cè)多評(píng)法所得5個(gè)生物堿的含有量與實(shí)測(cè)值之間無明顯差異（RSD＜5％），可用于黃連藥材和飲片的質(zhì)量控制。陳靜等［12］建立了氧化苦參堿與其他4種生物堿間的RCF，只用一個(gè)對(duì)照品就可測(cè)定苦參中多個(gè)生物堿類成分的含有量，解決了苦參藥材質(zhì)量控制中對(duì)照品不足的問題。該方法只需測(cè)定苦參中氧化苦參堿的含有量，經(jīng)計(jì)算得到其余生物堿含有量，實(shí)現(xiàn)多指標(biāo)的同時(shí)測(cè)定，其結(jié)果與外標(biāo)法實(shí)測(cè)值無明顯差異，可用于苦參藥材和飲片的質(zhì)量控制。Li等［17］以淫羊藿為研究對(duì)象，以藥材中5個(gè)黃酮類化合物為指標(biāo)，以RCF計(jì)算淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C和寶藿苷I的含有量，同時(shí)采用外標(biāo)法測(cè)定藥材中5種生物堿的含有量，并比較計(jì)算值與實(shí)測(cè)值的差異，驗(yàn)證一測(cè)多評(píng)法的準(zhǔn)確性和可行性。結(jié)果表明，該方法控制淫羊藿藥材的質(zhì)量是可行、準(zhǔn)確的。Cao等［18］以木蝴蝶的黃芩苷為內(nèi)參物，建立其分別與黃芩苷元、黃芩苷元-7-O-龍膽二糖苷、白楊素-7-O-龍膽二糖苷、黃芩苷元-7-O-葡萄糖苷、白楊素-7-O-葡萄糖醛酸、白楊素的RCF，測(cè)定黃芩苷，再計(jì)算其余6個(gè)成分的含有量，結(jié)果無顯著性差異（P＞0.05），即一測(cè)多評(píng)法可用于木蝴蝶藥材的質(zhì)量控制。另外還發(fā)現(xiàn)，以上7個(gè)成分的含有量與樣品的形態(tài)有一定關(guān)系，即具有光滑表面的黃綠色木蝴蝶含有較多黃酮。朱晶晶等［22］通過建立人參皂苷Rb1與另外8種皂苷的RCF，實(shí)現(xiàn)用一個(gè)對(duì)照品測(cè)定人參和三七藥材中多個(gè)人參皂苷成分的含有量，解決了人參等藥材質(zhì)量控制中對(duì)照品供應(yīng)不足的問題。結(jié)果表明，兩種藥材中一測(cè)多評(píng)法與外標(biāo)法所得結(jié)果均無顯著性差異（P＞0.05），可用于人參、三七藥材及其相關(guān)產(chǎn)品的定量分析及質(zhì)量評(píng)價(jià)。李樹翠等［28］分別以蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚和大黃素甲醚為內(nèi)參物，計(jì)算大黃及其制劑中其余4種成分的含有量，發(fā)現(xiàn)以大黃素為內(nèi)參物時(shí)，其余4種成分含有量與外標(biāo)法所測(cè)得的結(jié)果無明顯差異（P＞0.05），可作為大黃及其制劑中蒽醌類成分的質(zhì)量評(píng)價(jià)。馮偉紅等［29］以中藥秦皮為研究對(duì)象，分別建立秦皮甲素與秦皮乙素、秦皮苷和秦皮素的RCF，外標(biāo)法測(cè)定秦皮甲素的含有量，以RCF計(jì)算其余3個(gè)成分的含量，發(fā)現(xiàn)與外標(biāo)法比較，一測(cè)多評(píng)法計(jì)算得到的含有量值無顯著性差異（P＞0.05），可用于秦皮中香豆素成分的質(zhì)量評(píng)價(jià)。

一測(cè)多評(píng)法可用于藥材及飲片中不同類型化學(xué)成分的質(zhì)量控制。何兵等［50］以綠原酸為參照物，建立與其余9個(gè)成分的RCF，并計(jì)算其含有量。因10個(gè)成分中有不同的結(jié)構(gòu)類型，故在外標(biāo)法中，參考各類型成分的紫外最大吸收波長(zhǎng)，分段變波長(zhǎng)測(cè)定各成分。結(jié)果與外標(biāo)法比較，6批款冬花中10個(gè)成分的計(jì)算值與實(shí)測(cè)值之間無顯著性差異（P＞0.05），可用于款冬花的質(zhì)量控制。Lou等［52］將一測(cè)多評(píng)法用于分析日曬當(dāng)歸和硫磺當(dāng)歸中阿魏酸、洋川芎內(nèi)酯A、蒿本內(nèi)酯含有量的差異，發(fā)現(xiàn)化學(xué)分類法區(qū)分不同炮制方法的當(dāng)歸飲片是一種有效的途徑。Pan［53］等建立一測(cè)多評(píng)法，以牡荊素-4"-O-葡萄糖苷為內(nèi)參物，以RCF計(jì)算其余不同類型成分的含有量、方法耐用性和系統(tǒng)適應(yīng)性評(píng)價(jià)（RSD＜5％），結(jié)果無顯著性差異（P＞0.05），表明一測(cè)多評(píng)法具有可行性。

2.2 一測(cè)多評(píng)法在成方制劑中的應(yīng)用

一測(cè)多評(píng)法已應(yīng)用于小檗堿咳喘寧片、金雞膠囊、丹參注射液、硫磺解毒片和速效救心丸等30多種成方制劑的多成分質(zhì)量控制中，見表2。

表2　一測(cè)多評(píng)法在成方制劑中的應(yīng)用情況

續(xù)表2　

一測(cè)多評(píng)法可用于成方制劑中同類型化學(xué)成分的質(zhì)量控制。劉永利等［58］以嗎啡為對(duì)照品，建立咳喘寧片中嗎啡與磷酸可待因、鹽酸麻黃堿及鹽酸偽麻黃堿的RCF，以其計(jì)算磷酸可待因、鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿的含有量，同時(shí)用外標(biāo)法進(jìn)行比較。結(jié)果表明，以RCF計(jì)算的含有量值與外標(biāo)法之間沒有明顯差異（P＞0.05），可用于咳喘寧片的質(zhì)量控制。楊菲等［60］以銀黃制劑為研究對(duì)象，建立黃芩苷與漢黃芩苷、黃芩素和漢黃芩素間的RCF，分別采用外標(biāo)法和一測(cè)多評(píng)法測(cè)定銀黃制劑中4種黃酮類成分的含有量。結(jié)果表明，一測(cè)多評(píng)法的計(jì)算結(jié)果與外標(biāo)法之間無顯著性差異（P＞0.05），可作為銀黃制劑中黃酮類成分的含有量測(cè)定。李安平等［66］以原兒茶醛為內(nèi)參物，采用外標(biāo)法同時(shí)測(cè)定丹參注射液中丹參素鈉、原兒茶酸、原兒茶醛、香草酸、阿魏酸、迷迭香酸、丹酚酸B 7個(gè)水溶性酚酸類成分的含有量，建立原兒茶醛與其他6個(gè)成分的RCF進(jìn)行計(jì)算。結(jié)果，與外標(biāo)法比較，一測(cè)多評(píng)法與其之間無顯著性差異（P＞0.05），可為全面控制丹參注射液的內(nèi)在質(zhì)量提供參考。林青等［33］以消炎利膽片為研究對(duì)象，以穿心蓮內(nèi)酯為內(nèi)參物，建立一測(cè)多評(píng)法計(jì)算其余3種成分的含有量。結(jié)果，與外標(biāo)法比較，計(jì)算值與實(shí)測(cè)值無顯著性差異（P＞0.05），可用于消炎利膽片中二萜內(nèi)酯類成分的質(zhì)量控制。

一測(cè)多評(píng)法可用于成方制劑中不同類型化學(xué)成分的質(zhì)量控制。何兵等［81］以雙青咽喉片為研究對(duì)象，采用3種校正方法分別建立沒食子酸與其余9個(gè)成分的RCF，計(jì)算成分含有量。結(jié)果，與外標(biāo)法和回歸方程法比較，一測(cè)多評(píng)法所得結(jié)果無顯著差別（P＞0.05），可用于雙青咽喉片中多個(gè)不同類型成分的質(zhì)量控制。Sun等［82］以毛蕊異黃酮為內(nèi)參物，建立黃芪制劑中其與毛蕊異黃酮苷、染料木苷、芒柄花苷、金雀異黃酮、芒柄花黃素、美迪紫檀素、黃芪甲苷IV的RCF，一測(cè)多評(píng)法計(jì)算7個(gè)成分的含有量，同時(shí)采用外標(biāo)法，測(cè)定黃芪制劑中8個(gè)成分的含有量，發(fā)現(xiàn)一測(cè)多評(píng)法可作為黃芪制劑的質(zhì)量控制方法。Xiong等［87］以丹參滴丸和丹參片為研究對(duì)象，采用UPLC-DAD技術(shù)，以丹參素、人參皂苷Rg1和隱丹參酮為內(nèi)參物，建立丹參素與原兒茶酸、原兒茶醛、咖啡酸、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、丹酚酸A及丹酚酸C的RCF，以及人參皂苷Rg1與三七皂苷R1、人參皂苷Re的RCF，建立隱丹參酮與丹參酮ⅡA的RCF，可用于同時(shí)測(cè)定不同類型的3組成分的含有量。

3 展望

一測(cè)多評(píng)法作為一種多指標(biāo)質(zhì)量控制方法，當(dāng)各待測(cè)成分含有量差距懸殊時(shí)，其有一定局限性，可用對(duì)照品外標(biāo)法彌補(bǔ)，隨著一測(cè)多評(píng)法研究體系的逐步完善，可客觀評(píng)價(jià)中藥的整體質(zhì)量。該方法具有操作成本低、簡(jiǎn)單、快捷的優(yōu)點(diǎn)，適用于藥效成分復(fù)雜多樣的中藥，符合中藥多成分、多功效的作用特點(diǎn)。另外，一測(cè)多評(píng)法既能用于同類型成分中藥的質(zhì)量控制，也能用于一些紫外吸收相近的不同類型成分中藥的質(zhì)量控制，是中藥多成分質(zhì)量評(píng)價(jià)模式的發(fā)展方向之一。

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［29］ 馮偉紅，王智民，張啟偉，等.一測(cè)多評(píng)法測(cè)定秦皮藥材與飲片中香豆素類成分的含量［J］.中國(guó)中藥雜志，2011， 36（13）: 1782-1789.

［30］ 楊 芳，萬 麗，胡一晨，等.一測(cè)多評(píng)法測(cè)定川白芷藥材中3種香豆素成分的含量［J］.中國(guó)中藥雜志，2012，37 （7）: 956-960.

［31］ 孟 江，盧國(guó)勇，程軒軒，等.一測(cè)多評(píng)法同時(shí)測(cè)定干姜中4種姜酚類成分的含量［J］.中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2012，18（7）: 77-80.

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［33］ 林 青，匡艷輝，黃 琳，等.一測(cè)多評(píng)法測(cè)定穿心蓮及其制劑中內(nèi)酯類成分［J］.中草藥，2012，43（12）: 2406-2411.

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［36］ 段吉平，馮 麗，劉永利，等.一測(cè)多評(píng)法測(cè)定當(dāng)藥中獐牙菜苦苷、龍膽苦苷和當(dāng)藥苷的含量［J］.中藥材，2014，37（4）: 624-626.

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*通信作者:羅維早，男，博士，研究員，博士生導(dǎo)師，主要從事中藥化學(xué)及新劑型方向的研究。Te1:（023）89029026，E-mai1: 1oweizao@163.com

作者簡(jiǎn)介:王 欣，男，博士生，主要從事中藥化學(xué)研究。Te1: 13883867645，E-mai1: wangxin_ cq386@sina.com

基金項(xiàng)目:重慶市科委項(xiàng)目（2015）；國(guó)家科技惠民計(jì)劃項(xiàng)目（2013GS500102）

收稿日期:2015-04-21

中圖分類號(hào):R284.1

文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A

文章編號(hào):1001-1528（2016）02-0395-08