• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    護卵顆粒對重復(fù)制動應(yīng)激致卵巢功能減退模型大鼠的影響

    2016-04-06 12:40:08黃雪君孫冬梅陳玉興甘海寧黃琳趙靜宇廣東省中醫(yī)藥工程技術(shù)研究院廣東省中醫(yī)藥研究開發(fā)重點實驗室廣州50095廣州中醫(yī)藥大學(xué)廣州50006
    世界中醫(yī)藥 2016年3期

    黃雪君孫冬梅陳玉興甘海寧黃 琳趙靜宇(廣東省中醫(yī)藥工程技術(shù)研究院,廣東省中醫(yī)藥研究開發(fā)重點實驗室,廣州,50095;廣州中醫(yī)藥大學(xué),廣州,50006)

    ?

    護卵顆粒對重復(fù)制動應(yīng)激致卵巢功能減退模型大鼠的影響

    黃雪君1孫冬梅1陳玉興1甘海寧1黃 琳2趙靜宇2
    (1廣東省中醫(yī)藥工程技術(shù)研究院,廣東省中醫(yī)藥研究開發(fā)重點實驗室,廣州,510095;2廣州中醫(yī)藥大學(xué),廣州,510006)

    摘要目的:觀察護卵顆粒對重復(fù)制動應(yīng)激致大鼠卵巢功能減退的治療作用。方法:模型組采用性周期規(guī)律的雌性SD大鼠置于特制的束縛制動筒內(nèi),固定身體使之不能隨意活動,制動應(yīng)激1次/d,連續(xù)15 d建立卵巢早衰大鼠模型,每天陰道圖片觀察大鼠動情周期變化,造模成功后分為6組:模型對照組、補佳樂組、調(diào)經(jīng)促孕丸組及護卵顆粒高、中、低劑量組,另取10只作為空白對照組,連續(xù)給藥4周。給藥結(jié)束后經(jīng)開野行為測定后腹主動脈采血,冰臺上取大鼠下丘腦,留取卵巢組織標本。測定血清雌二醇(Estradiol in serum,E2)、促卵泡激素(Follicle-stimulating Hormone,F(xiàn)SH)、黃體生成素(Luteinizing Hormone LH)、孕酮(Progesterone,PROG)水平及檢測下丘腦多巴胺(Dopamine,DA)、去甲腎上腺素(Noradrenaline,NA)、五羥色胺(Hydroxytryptamine,5-HT)含量,觀察卵巢濕重變化及組織學(xué)改變。結(jié)果:護卵顆粒各劑量組能明顯提高重復(fù)制動應(yīng)激致卵巢早衰大鼠的水平和垂直活動得分,能提高卵巢早衰大鼠血清E2、PROG水平和降低FSH、LH水平,降低卵巢早衰大鼠下丘腦DA、NA及5-HT含量,與模型組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0. 05或P<0. 01)。與模型組比較,護卵顆粒高、中劑量組大鼠卵巢內(nèi)各級卵泡數(shù)增多,卵巢指數(shù)增加。結(jié)論:護卵顆??梢蕴岣呗殉补δ軠p退模型大鼠水平活動和垂直活動,增加E2、PROG及NA的分泌,增加卵巢指數(shù),促進卵巢功能減退大鼠的卵泡生長,恢復(fù)受損卵巢的內(nèi)分泌功能。

    關(guān)鍵詞護卵顆粒;卵巢功能減退;重復(fù)制動應(yīng)激;開野行為

    Effect of HuLuanKeLi on Diminished Ovarian Reserve Rats with Repeated Immobilization Stress

    Huang Xuejun1,Sun Dongmei1,Chen Yuxing1,Gan Haining1,Huang Lin2,Zhao Jingyu2
    (1 Guangdong Research Institute of Traditional Chinese Medicine(TCM)Manufacturing Technology,Guangdong Province Key Laboratory of TCM Research and Development,Guangzhou 510095,China;2 Guangzhou University of Chinese Medicine,Guangzhou 510006,China)

    Abstract Objective:To observe the effects of HuLuanKeLi on diminished ovarian reserve in rats of repeated immobilization. Methods:The adult female rats with regular cycle in model group were exposed to the scheduled daily repeated immobilization for 15 days,one time per day. The duration of immobilization was progressively increased with the subsequent episode. Daily vaginal smears were permfored to follow the estrous cycle in rats. After molding,60 rats were subdivided into 6 groups(n =10):Model group,BuJiaLe group,TiaoJingCuYunWan group,high-dose、middle-dose and low-dose group,treated for 4 weeks respectively. After Openfield testing,blood samples were obtained from abdominalaorta,and samples of ovarian tissues were harvested. Serum levels of Estradiol(E2),F(xiàn)ollicle-stmiulating hormone(FSH),Luteinizing hormone(LH),Progesterone(PROG)and hypothalamus content of Dopamine(DA),Norepinephrine(NA),Serotonin(5-HT)were measured by ELISA,and the changes of wet weight and histology of ovary were observed. Results:Compared with the model group,HuLuanKeLi increased serum level of E2,PROG and decreased FSH,LH;and decreased hypothalamus content of DA,NA,5-HT(P<0. 05or P<0. 01);and the wet weight of ovary increased in each dose of HuLuanKeLi groups. Conclusion:HuLuanKeLi can promote follicle growth in rats with premature ovarian failure,increase secretion of ovarian E2,PROG,and improve endocrine function of damaged ovaries.

    Key Words HuLuanKeLi;premature ovarian failure;repeated immobilization;openfield

    卵巢產(chǎn)生卵子能力減弱,卵泡質(zhì)量下降,導(dǎo)致女性生育能力下降及性激素的缺乏,稱卵巢功能減退即卵巢儲備功能下降(Diminished Ovarian Reserve, DOR)。DOR臨床表現(xiàn)可無癥狀,或僅表現(xiàn)為生育力的下降,或輕微的月經(jīng)改變等,若患者診斷不及時而延誤治療,容易發(fā)展為卵巢早衰(Premature Ovari-an Failure,POF),而增加了治療的難度。中醫(yī)的“肝”是機體調(diào)節(jié)心理應(yīng)激反應(yīng)的核心,在心理應(yīng)激的狀態(tài)下,最先受到影響的是人體的氣機,中醫(yī)肝主疏泄與心理應(yīng)激狀態(tài)下導(dǎo)致的神經(jīng)內(nèi)分泌紊亂、免疫功能異常等密切相關(guān)。肝氣郁結(jié)證是主要中醫(yī)證型之一,中醫(yī)藥治療已經(jīng)取得較好的療效,而且副作用?。?-3]。

    護卵顆粒(加減益經(jīng)顆粒)是由加減益經(jīng)湯經(jīng)現(xiàn)代工藝制成的中成藥制劑。護卵顆粒是根據(jù)《傅青主女科》的學(xué)術(shù)思想,在益經(jīng)湯的基礎(chǔ)上加減而成,應(yīng)用于DOR患者,取得了較好的療效。它由熟地黃、菟絲子、當歸、丹參、黨參、柴胡、白芍等中藥組成,方中以熟地黃、菟絲子、杜仲補腎之陰陽,柴胡調(diào)達肝氣以實肝用,當歸白芍補血養(yǎng)肝以養(yǎng)肝陰,全方補腎疏肝兼以活血健脾。本實驗通過建立重復(fù)制動應(yīng)激致肝郁型卵巢功能減退大鼠模型,觀察護卵顆粒對卵巢功能減退大鼠的治療作用,為臨床治療提供實驗依據(jù)。

    1 資料與方法

    1. 1 一般資料

    1. 1. 1 藥物 護卵顆粒(加減益經(jīng)顆粒),由廣東省中醫(yī)研究所制劑實驗室提供,批號為131003。戊酸雌二醇片(補佳樂),法國DELPHARM Lille S. A. S公司產(chǎn)品,批號251A2。調(diào)經(jīng)促孕丸,北京同仁堂股份有限公司同仁堂制藥廠,批號2035224。

    1. 1. 2 動物 SPF級雌性SD大鼠,體重180~220 g,由廣東省醫(yī)學(xué)實驗動物中心提供,實驗生產(chǎn)合格證號和動物合格證號分別為SCXK(粵)2008-0002 和NO 44007200010888。實驗設(shè)施使用許可證號:SYXK(粵)2010-0059。

    1. 1. 3 試劑 ELISA Kit for Rat E2,Batch No. 1406251;ELISA Kit for Rat FSH,Batch No. 1406251;ELISA Kit for Rat LH,Batch No. 1407252;ELISA Kit for Rat PROG,Batch No. 1407261;ELISA Kit for Rat Dopamine,Batch No. 1407181;ELISA Kit for Rat NA,Batch No. 1407101;ELISA Kit for Rat Serotonin,Batch No. 1407271;以上均為上海西唐生物科技有限公司產(chǎn)品。

    1. 1. 4 儀器 JJ3000動物電子稱,G&G公司產(chǎn)品;BS224S萬分之一電子天平,德國SARTORIUS產(chǎn)品;Bio-RAD 680酶標儀,美國伯樂公司產(chǎn)品;YD-AB型攤烘烤片機,YD62型石蠟包埋機,YD-6L型智能冰凍包埋機,浙江金華益迪產(chǎn)品;Leica RM2235輪式切片機,Leica TP 1020型全自動脫水機,德國萊卡公司產(chǎn)品;Shandon Gemini染色機,德國Thermo公司產(chǎn)品;DHG-9203型電熱恒溫干燥鼓風(fēng)干燥箱,上海精密實驗設(shè)備廠產(chǎn)品;Olympus DP2-BSW型病理圖像采集系統(tǒng),日本奧林巴斯公司產(chǎn)品。

    1. 2 方法

    1. 2. 1 劑量設(shè)置 劑量換算方法參考《中藥藥理研究方法學(xué)》“體表面積比”換算動物等效劑量[4]。護卵顆粒:臨床日用量65. 50 g生藥,大鼠等效劑量為5. 895 g生藥/kg,設(shè)為中劑量。高、中、低劑量組分別對應(yīng)護卵顆粒11. 790 g生藥/kg、5. 895 g生藥/kg、2. 9475 g生藥/kg。戊酸雌二醇片:臨床日用量1 mg,大鼠等效劑量為0. 09 mg/kg。調(diào)經(jīng)促孕丸:臨床日用量10 g,大鼠等效劑量為0. 9 g/kg。

    1. 2. 2 造模方法 SD大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后,行陰道脫落細胞涂片檢查,1次/d,連續(xù)10 d,篩選出動情期為4~5 d,并連續(xù)出現(xiàn)2個動情周期的大鼠。將有規(guī)律性周期的雌性大鼠取10只作為空白組,其余大鼠為模型組,按照文獻方法[5-6],應(yīng)激時間安排在9:00 AM~5:00 PM之間,大鼠置于特制的束縛制動筒內(nèi),固定身體與尾部,使之不能隨意活動,制動應(yīng)激1次/d,連續(xù)15 d,第1~3天每天制動應(yīng)激2 h,以后每3 d延長應(yīng)激時間1 h。

    1. 2. 3 分組及給藥 應(yīng)激結(jié)束后大鼠取血測定血清E2含量,以低于180 pg/mL為造模成功,除空白組10只大鼠外,取造模成功大鼠60只隨機分為6組,分別為模型組、補佳樂組、調(diào)經(jīng)促孕丸組及護卵顆粒高、中、低劑量組,每組10只。護卵顆粒各劑量組及補佳樂、調(diào)經(jīng)促孕丸組大鼠按劑量灌胃給藥,10 mL/kg,1次/d,連續(xù)4周,空白組、模型組大鼠給予等體積蒸餾水。

    1. 2. 4 檢測指標 1)陰道脫落細胞檢查[7]:開始造模后,每天進行大鼠陰道細胞學(xué)涂片蘇木素伊紅染色后鏡檢觀察其動情周期變化。2)開野行為測定(Open-field)[8]:在方形木箱(80 cm×80 cm×40 cm)進行,周壁為黑色,底面分為均勻的方格。實驗時在安靜的房間將大鼠放在木箱正中,以大鼠三爪以上跨入鄰格的次數(shù)為水平活動得分,兩前肢離地或攀附墻壁1 cm以上的次數(shù)為垂直活動得分。每只大鼠每次測定時間為5 min,徹底清潔木箱后觀察下一大鼠。3)血清指標檢測:大鼠腹主動脈取血,分離血清,血清置于-20℃保存待測。以酶聯(lián)免疫法測定大鼠血清中E2、FSH、LH、PROG水平的變化。4)神經(jīng)遞質(zhì)的檢測:斷頭處死大鼠,冰臺上打開顱腔,取下丘腦,液氮速凍后入低溫冰箱保存。生理鹽水研磨10%勻漿,酶聯(lián)免疫法檢測下丘腦DA、NA、5-HT含量。5)卵巢稱重:完整取出大鼠卵巢及子宮,去掉筋膜及脂肪組織,電子天平稱重,將稱得的卵巢濕重、子宮濕重分別除以體重,按以下公式計算:卵巢指數(shù)=卵巢濕重(mg)/體重(g)×100%,子宮指數(shù)=子宮濕重(mg)/體重(g)×100%。6)卵巢組織形態(tài)學(xué)觀察:稱重后置福爾馬林固定,梯度酒精脫水,石蠟包埋,切片,行組織形態(tài)學(xué)觀察。

    1. 2. 5 統(tǒng)計學(xué)方法 所有計量資料以均數(shù)加減標準差(±s)表示。多組間均數(shù)的比較采用單因素方差分析(One-Way ANOVA),組間均數(shù)兩兩比較,方差齊時采用SNK法;方差不齊時采用Dunnett's T3法。由SPSS 15. 0軟件完成。

    2 結(jié)果

    2. 1 對大鼠動情周期的影響 通過陰道涂片觀察所得,各大鼠造模前動情周期變化規(guī)律,周期約4~5 d。除空白對照組外其余各組大鼠自身免疫造模后大鼠出現(xiàn)動情周期改變,停止于動情間期;空白對照組仍有規(guī)律的動情周期。模型對照組造模后4周內(nèi)動情周期紊亂;補佳樂組、護卵顆粒高、中劑量組給藥后14~15 d出現(xiàn)完整的動情周期;低劑量組給藥后19~20 d左右開始出現(xiàn)動情前期,持續(xù)8~10 d,至給藥4周結(jié)束前出現(xiàn)動情期;調(diào)經(jīng)促孕丸組給藥后15~17 d出現(xiàn)動情周期,周期時間延長。

    2. 2 對重復(fù)制動應(yīng)激大鼠開野行為的影響 由表1可見,各組大鼠Open-Field法測定水平活動,與空白對照組相比,模型對照組的大鼠水平活動得分顯著低于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0. 01),護卵顆粒高、中、低劑量組與補佳樂組、調(diào)經(jīng)促孕丸組大鼠水平活動得分明顯高于模型對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0. 05或P<0. 01)。

    各組大鼠Open-Field法測定垂直活動,與空白對照組相比,模型對照組的大鼠水平活動得分顯著低于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0. 01),護卵顆粒高劑量組與調(diào)經(jīng)促孕丸組大鼠垂直活動得分明顯高于模型對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0. 05或P <0. 01)。

    2. 3 對大鼠血清E2、FSH、LH、PROG的影響 由表2可知,給藥4周后,模型對照組大鼠E2及PROG與空白對照組比較明顯降低,護卵顆粒各劑量組與補佳樂組、調(diào)經(jīng)促孕丸組大鼠E2及PROG與模型對照組比較顯著增加,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0. 05或P <0. 01)。模型對照組大鼠FSH、LH與空白對照組比較明顯增高,護卵顆粒各劑量組與補佳樂組、調(diào)經(jīng)促孕丸組大鼠FSH與模型對照組比較顯著降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0. 01),護卵顆粒各劑量組大鼠LH與模型對照組比較顯著降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0. 05)。

    2. 4 對大鼠垂體DA、NA、5-HT的影響 由表3可知,給藥4周后,模型對照組大鼠DA、NA、5-HT與空白對照組比較明顯增高,護卵顆粒高劑量組與補佳樂組大鼠DA與模型對照組比較顯著降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0. 01),護卵顆粒高、中劑量組與補佳樂組、調(diào)經(jīng)促孕丸組大鼠NA與模型對照組比較顯著降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0. 01或P<0. 05),護卵顆粒各劑量組與補佳樂組、調(diào)經(jīng)促孕丸組大鼠5-HT與模型對照組比較顯著降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0. 01或P<0. 05)。

    2. 5 對大鼠卵巢指數(shù)、子宮指數(shù)的影響 由表4可知,大鼠給藥4周后,模型對照組大鼠卵巢指數(shù)與空白對照組比較明顯下降,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0. 01)。護卵顆粒各劑量組與補佳樂組、調(diào)經(jīng)促孕丸組大鼠卵巢指數(shù)與模型組比較顯著增加,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0. 05)。各給藥組與空白對照組及模型對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0. 05)。

    表1 護卵顆粒對重復(fù)制動應(yīng)激大鼠水平活動、垂直活動的影響(±s,n=10)

    表1 護卵顆粒對重復(fù)制動應(yīng)激大鼠水平活動、垂直活動的影響(±s,n=10)

    注:與空白對照組比較,*P<0. 05,**P<0. 01;與模型對照組比較,#P<0. 05,##P<0. 01。

    組別  劑量  水平活動得分  垂直活動得分空白對照組-69. 60±6. 69 32. 20±10. 23模型對照組 - 32. 00±7. 60** 13. 40±5. 50**補佳樂組 0. 09 mg/kg 41. 00±8. 41**?!?7. 60±4. 72**調(diào)經(jīng)促孕丸組 0. 9 g/kg 53. 40±10. 97**#?!?2. 60±8. 17*#護卵顆粒高劑量組 11. 79 g/kg生藥 63. 70±11. 03## 29. 60±5. 10##護卵顆粒中劑量組 5. 895g/kg生藥 60. 30±13. 38#?!?5. 10±9. 31##護卵顆粒低劑量組 2. 9475 g/kg生藥 47. 80±10. 70**#?!?1. 80±6. 48*#

    表2 護卵顆粒對卵巢功能減退模型大鼠E2、FSH、LH、PROG的影響(±s,n=10)

    表2 護卵顆粒對卵巢功能減退模型大鼠E2、FSH、LH、PROG的影響(±s,n=10)

    注:與空白對照組比較,*P<0. 05,**P<0. 01;與模型對照組比較,#P<0. 05,##P<0. 01。

    組別  劑量 E2(pg/mL) FSH(ng/mL) LH(ng空白對照組 - 273. 01±60. 72 1. 06±0. 52 1. 45±0模型對照組 - 116. 27±58. 82** 3. 76±0. 75** 4. 38±1補佳樂組 0. 09 mg/kg 210. 24±49. 68?!?. 26±0. 58**#?!?. 46±0調(diào)經(jīng)促孕丸組 0. 9 g/kg 181. 68±53. 30*?!?. 82±0. 58**## 2. 04±1護卵顆粒高劑量組 11. 79 g生藥/kg  239. 25±91. 27#?!?. 35±0. 55**#?!?. 66±1護卵顆粒中劑量組 5. 895 g生藥/kg  211. 68±73. 47?!?. 39±0. 33**#?!?. 44±0護卵顆粒低劑量組 2. 9475 g生藥/kg  198. 12±52. 64?!?. 77±0. 41**#?!?. 60±0 /mL) PROG(ng/mL). 60 424. 71±47. 85 . 92* 286. 19±79. 72**. 99 363. 76±69. 72#. 06 377. 85±63. 50#. 04# 384. 69±75. 66#. 53?!?67. 84±48. 56#. 76?!?56. 80±83. 75#

    表3 護卵顆粒對卵巢功能減退模型大鼠DA、NA、5-HT的影響(±s,n=10)

    表3 護卵顆粒對卵巢功能減退模型大鼠DA、NA、5-HT的影響(±s,n=10)

    注:與空白對照組比較,*P<0. 05,**P<0. 01;與模型對照組比較,#P<0. 05,##P<0. 01。

    組別  劑量 DA(pg/mL) NA(ng/mL) 5-HT(ng/mL)空白對照組-42. 42±10. 93 4. 88±1. 35 25. 94±3. 55模型對照組 - 87. 47±19. 69** 13. 66±3. 43** 50. 77±7. 69**補佳樂組 0. 09 mg/kg 45. 21±6. 88#?!?. 46±1. 64## 34. 48±2. 34**##調(diào)經(jīng)促孕丸組 0. 9 g/kg 73. 97±17. 73** 8. 57±2. 47*?!?9. 88±6. 00**#護卵顆粒高劑量組 11. 79 g生藥/kg 52. 32±11. 82## 7. 66±1. 88*#?!?4. 56±5. 54*##護卵顆粒中劑量組 5. 895 g生藥/kg 64. 54±20. 08 7. 73±2. 72#?!?7. 27±7. 00**#護卵顆粒低劑量組 2. 9475 g生藥/kg 80. 90±22. 84** 10. 64±3. 61* 39. 64±5. 78**#

    表4 護卵顆粒對卵巢功能減退模型大鼠卵巢指數(shù)的影響(±s,n=10)

    表4 護卵顆粒對卵巢功能減退模型大鼠卵巢指數(shù)的影響(±s,n=10)

    注:與空白對照組比較,*P<0. 05,**P<0. 01;與模型對照組比較,#P<0. 05,##P<0. 01。

    組別  劑量  卵巢指數(shù)mg/g%  子宮指數(shù)mg/g%空白對照組-50. 70±3. 43 211. 84±64. 40模型對照組 - 39. 32±3. 63** 165. 59±38. 78補佳樂組 0. 09mg/kg 46. 96±6. 40?!?07. 08±60. 78調(diào)經(jīng)促孕丸組 0. 9g/kg 45. 15±4. 67?!?96. 69±67. 04護卵顆粒高劑量組 11. 79g生藥/kg 47. 09±5. 13?!?02. 16±32. 55護卵顆粒中劑量組 5. 895g生藥/kg 46. 87±6. 51?!?95. 61±52. 41護卵顆粒低劑量組 2. 9475g生藥/kg 45. 24±5. 92#175. 65±25. 15

    圖1 護卵顆粒卵巢功能減退模型大鼠卵巢結(jié)構(gòu)形態(tài)學(xué)影響(HE,×100)

    2. 6 對大鼠卵巢結(jié)構(gòu)形態(tài)學(xué)變化 空白對照組卵巢可見各級卵泡及黃體分布,形態(tài)正常,成熟卵泡體積較大,卵泡液較多。模型對照組卵巢生長卵泡減少,原始卵泡較多,黃體數(shù)量少,閉鎖卵泡多。補佳樂組與調(diào)經(jīng)促孕丸組初級卵泡、生長卵泡增多,成熟卵泡可見。護卵顆粒高、中劑量組生長卵泡較模型對照組增多,出現(xiàn)較大直徑的卵泡,閉鎖卵泡減少。護卵顆粒低劑量組生長卵泡、成熟卵泡可見。結(jié)果見圖1。

    3 討論

    社會、心理因素對女性生殖健康的影響越來越受到關(guān)注,婦女易受身心應(yīng)激的影響而導(dǎo)致月經(jīng)失調(diào)閉經(jīng)等婦科疾病發(fā)生。有調(diào)查研究心理因素是導(dǎo)致DOR及POF的中藥原因之一,且長期的社會心理壓力可能比短期的壓力更能影響卵巢的功能[9-10]。肝主謀慮,性喜條達而惡抑郁,肝健則情志調(diào)暢,肝與情志密切相關(guān)。陳修園在《婦科要旨·種子篇》中云:婦人無子,皆由經(jīng)水不調(diào),經(jīng)水所以不調(diào)者,皆由內(nèi)有七情之傷,外有六淫之感,或氣血偏盛,陰陽相乖所致。有學(xué)者提出心理應(yīng)激從中醫(yī)臟象理論分析當主要責(zé)之于肝[11],肝氣郁結(jié)證的客觀化研究也提示[12],肝氣郁結(jié)證存在心理應(yīng)激的障礙病理機制,涉及神經(jīng)內(nèi)分泌等調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)。軀體和心理應(yīng)激均能在下丘腦-垂體-卵巢軸(Hypothalamicpituitary-ovarianaxis,HPO)水平抑制或損害女性卵巢功能,導(dǎo)致女性生殖內(nèi)分泌功能紊亂或下降,甚至卵巢早衰。肝郁主要由應(yīng)激產(chǎn)生的一系列神經(jīng)內(nèi)分泌的變化來體現(xiàn)的,尤其是HPO在卵巢內(nèi)分泌活動的周期性變化調(diào)控中居關(guān)鍵地位,并可能以單胺類遞質(zhì)的調(diào)節(jié)來實現(xiàn)在情志與生殖內(nèi)分泌之間呈雙向調(diào)節(jié)作用。

    本實驗采用重復(fù)制動應(yīng)激建立肝郁型卵巢功能減退大鼠模型,慢性制動應(yīng)激使動物自由行動受限,情緒受抑,比較接近中醫(yī)“情志不遂”的病因。模型組大鼠水平活動及垂直活動減少,動情周期紊亂,血清中E2、PROG的含量顯著降低,F(xiàn)SH、LH水平明顯升高,下丘腦DA、NA、5-HT含量升高,提示應(yīng)激狀態(tài)下升高DA、NA、5-HT影響了中樞性腺對激素的分泌,引起了大鼠內(nèi)分泌功能受損,說明造模成功。慢性應(yīng)激能使大鼠活動減少,血清E2水平降低及FSH水平升高,能使大鼠卵巢各級卵泡數(shù)及黃體數(shù)減少[5,13-14]。在行為學(xué)研究中,曠場實驗常用來考察動物在新奇環(huán)境中的活動度、探究行為、恐懼緊張狀態(tài)及警覺性,肝郁證動物活動度明顯減少[15]。HPO軸應(yīng)激性紊亂與下丘腦-垂體-腎上腺軸(Hypothalamic - pituitary - adrenal Axis,HPA)軸應(yīng)激性亢進密切相關(guān),心理應(yīng)激能激活HPA軸,并在下丘腦、垂體、卵巢3個水平影響女性生殖內(nèi)分泌功能[16],而兒茶酚胺類和5-HT被認為是應(yīng)激最重要的神經(jīng)遞質(zhì)[17-18]。FSH水平升高在卵巢功能下降時出現(xiàn),它隨卵巢功能及受孕能力的降低而升高[19]。E2可能是比FSH更早反應(yīng)卵巢功能下降的指標[20]。實驗結(jié)果表明,護卵顆粒各劑量組均能增加大鼠水平活動和垂直活動得分,明顯降低下丘腦DA、NA、5-HT含量,并明顯地升高DOR大鼠血清中E2、PROG的含量,降低FSH、LH水平,提示護卵顆粒可能通過參與調(diào)節(jié)HPO的內(nèi)分泌功能,調(diào)節(jié)紊亂的單胺類遞質(zhì)水平,促進卵巢分泌E2,抑制下丘腦和垂體FSH和LH的分泌。病理結(jié)果亦表明,護卵顆粒各劑量組生長卵泡數(shù)和成熟卵泡數(shù)增多,閉鎖卵泡明顯減少。

    參考文獻

    [1]張凌媛,康潔,丁珊珊,等.圍絕經(jīng)期綜合征患者舌苔脫落細胞EGFR表達與中醫(yī)肝郁分級相關(guān)性的研究[J].中國醫(yī)學(xué)創(chuàng)新,2014,11(6):14-16.

    [2]王方圓,王楠,何賽萍. Engel模式疏肝方法對肝郁型卵巢早衰干預(yù)的臨床研究[J].浙江中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報,2014,38(3):274-276,282.

    [3]王方圓,王楠,何賽萍.疏肝通絡(luò)方抗大鼠卵巢早衰作用的研究[J].浙江中醫(yī)雜志,2013,48(10):711-712.

    [4]陳奇.中藥藥理研究方法學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2000:1103.

    [5]連曉媛,丁巖,陳奇,等.重復(fù)制動應(yīng)激對雌性大鼠卵巢功能的影響[J].中藥新藥與臨床藥理,2004,15(6):373-376.

    [6]姚懿,姚琴琴,潘小玲,等.心理應(yīng)激與卵巢儲備功能下降的相關(guān)性研究[J].南昌大學(xué)學(xué)報:醫(yī)學(xué)版,2012,52(3):11-13,16.

    [7]鄒移海,徐志偉,蘇鋼強.實驗動物學(xué)[M].北京:科學(xué)出版社,2004:84.

    [8]BiesalskiHK. Free radical theory of aging[J]. Curr Opin Clin NutrMetab Care,2002,5(1):5.

    [9]許小鳳,范春.卵巢早衰與卵巢儲備功能下降的相關(guān)發(fā)病因素探討[J].中國循證醫(yī)學(xué)雜志,2011,11(4):400-403.

    [10]Pal L,Bevilacqua K,Santoro NF. Chronic psychosocial stressors are detrimental to ovarian reserve:a study of infertile women[J]. J Psychosom Obstet Gynaecol,2010,31(3):130-139.

    [11]羅來成,王建紅,馬娜,等.心理應(yīng)激對生殖軸內(nèi)分泌網(wǎng)絡(luò)影響的因子分析模型[J].生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)雜志,2006,25(6):1368-1371.

    [12]黎萍,郭錫永.應(yīng)激影響女性生殖內(nèi)分泌功能機制的研究進展[J].中國婦幼健康研究,2006,17(3):215-217.

    [13]鄭源,張瀲,張良圣,等.慢性焦慮刺激對成年雌性大鼠性激素水平的影響[J].湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報,2015,35(1):26-27,31.

    [14]徐彩,金哲,林曉華,等.慢性精神應(yīng)激對雌性大鼠卵巢儲備功能的影響研究[J].疑難病雜志,2013,12(2):124-126.

    [15]沈建英,丁珊珊,賴新梅,等.圍絕經(jīng)期綜合征肝郁大鼠模型的建立及評價[J].中國醫(yī)學(xué)創(chuàng)新,2015,12(22):5-8.

    [16]畢天成,胡文曉,俞超芹.應(yīng)激對下丘腦-垂體-卵巢軸的影響機制及中藥對應(yīng)激動物模型作用的研究進展[J].泰山醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2014,35(7):708-710.

    [17]黃慶軍,趙魏峰,劉少文,等.腦室注射白介素-1β對大鼠行為及腦內(nèi)單胺氧化酶和單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的影響[J].中國行為醫(yī)學(xué)科學(xué),2006,15(11):973-975.

    [18]Southwick SM,Vythilingam M,Ehamey DS. The psychobiology of depression and resilience to stress:implications for prevention and treatment[J]. Annu Rev Clin Psychol,2005(1):255-291.

    [19]Sherman B M,West J H,Korenman S G,et al. The menopausal transition:analysis of LH,F(xiàn)SH,estradiol,and progesterone concentrations during menstrual cycles of older women[J]. J Clin Endocrinol,1976,42(4):629-636.

    [20]梁琳琳.卵巢功能評估研究現(xiàn)狀[J].中華實用診斷與治療雜志,2012,26(3):213-215.

    (2015 -05 -13收稿 責(zé)任編輯:張文婷)

    中圖分類號:R285. 5

    文獻標識碼:A

    doi:10. 3969/j. issn. 1673 -7202. 2016. 03. 035

    通信作者:孫冬梅(1969—),女,碩士,博士生導(dǎo)師,主任中藥師,研究方向:從事中藥配方顆粒劑及中藥新藥研發(fā),E-mail:tcmgdp@163. com

    作者簡介:黃雪君(1981—),女,博士,副主任中藥師,研究方向:從事中藥藥理及毒理研究,Tel:(020)83576735,E-mail:sharon510@126. com

    基金項目:廣州市越秀區(qū)科技計劃項目(編號:2013-CY-003)

    高清日韩中文字幕在线| 高清毛片免费看| 18+在线观看网站| 亚洲中文字幕日韩| 最近最新中文字幕免费大全7| 最近中文字幕高清免费大全6| 国产麻豆成人av免费视频| 观看免费一级毛片| 欧美区成人在线视频| 欧美日韩精品成人综合77777| 亚洲av电影在线观看一区二区三区 | 国产高清视频在线观看网站| 欧美区成人在线视频| av在线蜜桃| 亚洲av中文av极速乱| 日本与韩国留学比较| 婷婷色综合大香蕉| eeuss影院久久| www.色视频.com| 99热网站在线观看| 国产高清视频在线观看网站| 舔av片在线| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 亚洲最大成人手机在线| 少妇熟女欧美另类| 亚洲美女搞黄在线观看| 联通29元200g的流量卡| 国产成人一区二区在线| 三级经典国产精品| 51国产日韩欧美| 亚洲国产色片| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 国产成人午夜福利电影在线观看| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 亚洲精品日韩av片在线观看| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 有码 亚洲区| 免费大片18禁| 好男人视频免费观看在线| 亚洲人与动物交配视频| 国产精品永久免费网站| 久久精品国产亚洲av涩爱| 日本免费一区二区三区高清不卡| 99久久精品热视频| 国产精品爽爽va在线观看网站| 日韩av在线大香蕉| 国产片特级美女逼逼视频| 国产精品久久久久久久久免| 久久这里有精品视频免费| av福利片在线观看| 欧美成人一区二区免费高清观看| 午夜免费激情av| 99久国产av精品| av专区在线播放| 国产黄片美女视频| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 国内揄拍国产精品人妻在线| 亚洲最大成人av| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 好男人在线观看高清免费视频| 51国产日韩欧美| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 乱码一卡2卡4卡精品| 99久久精品一区二区三区| 中国美白少妇内射xxxbb| 九草在线视频观看| av.在线天堂| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 热99在线观看视频| 国产黄a三级三级三级人| 久久精品久久精品一区二区三区| 久久久国产成人免费| 中文字幕亚洲精品专区| 亚洲成人av在线免费| 亚洲综合色惰| 成人av在线播放网站| 一级毛片aaaaaa免费看小| 午夜福利高清视频| 视频中文字幕在线观看| 亚洲精品一区蜜桃| 最近中文字幕2019免费版| 国产私拍福利视频在线观看| 国产人妻一区二区三区在| 国产激情偷乱视频一区二区| 少妇人妻一区二区三区视频| videossex国产| 亚洲国产精品国产精品| 91久久精品电影网| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 如何舔出高潮| 亚洲第一区二区三区不卡| 免费观看a级毛片全部| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 国产在视频线精品| 欧美成人免费av一区二区三区| 一个人看视频在线观看www免费| 成人三级黄色视频| 一区二区三区乱码不卡18| 丝袜喷水一区| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 最近视频中文字幕2019在线8| 桃色一区二区三区在线观看| 亚洲经典国产精华液单| 99久久中文字幕三级久久日本| 男插女下体视频免费在线播放| 午夜精品一区二区三区免费看| 午夜福利网站1000一区二区三区| 日韩强制内射视频| 国产一级毛片在线| 夫妻性生交免费视频一级片| 国产一区二区在线av高清观看| 99热全是精品| 成年版毛片免费区| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 亚洲成人久久爱视频| 国产精品不卡视频一区二区| 亚洲欧美成人综合另类久久久 | 亚洲国产高清在线一区二区三| 99在线人妻在线中文字幕| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 国产伦理片在线播放av一区| 久久这里只有精品中国| 男插女下体视频免费在线播放| 欧美潮喷喷水| eeuss影院久久| 日韩欧美精品免费久久| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品 | 少妇人妻一区二区三区视频| 久久国内精品自在自线图片| 尾随美女入室| 免费电影在线观看免费观看| 麻豆乱淫一区二区| 老司机影院毛片| 亚洲国产欧美在线一区| 久热久热在线精品观看| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 国产亚洲午夜精品一区二区久久 | 亚洲欧美一区二区三区国产| 伦理电影大哥的女人| 高清日韩中文字幕在线| 成年免费大片在线观看| 国产av码专区亚洲av| 少妇的逼好多水| 麻豆乱淫一区二区| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 九色成人免费人妻av| 亚洲av免费高清在线观看| 99热6这里只有精品| 久久久精品94久久精品| 欧美一区二区亚洲| 99热6这里只有精品| 波多野结衣巨乳人妻| 在线a可以看的网站| 我的老师免费观看完整版| 神马国产精品三级电影在线观看| 只有这里有精品99| 在线观看一区二区三区| 少妇的逼好多水| 丰满乱子伦码专区| 亚洲va在线va天堂va国产| 一级av片app| 中文字幕av在线有码专区| 99视频精品全部免费 在线| av在线观看视频网站免费| 国产精品,欧美在线| 久久99热这里只频精品6学生 | 国产淫片久久久久久久久| 亚洲在久久综合| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 亚洲精品成人久久久久久| 91久久精品国产一区二区三区| 国产精品熟女久久久久浪| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 国产v大片淫在线免费观看| 看片在线看免费视频| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 嫩草影院入口| 日韩在线高清观看一区二区三区| www.色视频.com| 最近2019中文字幕mv第一页| 三级经典国产精品| 久久久久久大精品| 国产69精品久久久久777片| 又爽又黄a免费视频| 美女内射精品一级片tv| 久99久视频精品免费| 国产色爽女视频免费观看| 高清视频免费观看一区二区 | 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 国产亚洲精品久久久com| 亚洲精品一区蜜桃| 白带黄色成豆腐渣| 国产亚洲5aaaaa淫片| 一边亲一边摸免费视频| videossex国产| 国产色爽女视频免费观看| 国产一级毛片七仙女欲春2| a级毛片免费高清观看在线播放| 特大巨黑吊av在线直播| 日本免费一区二区三区高清不卡| 色播亚洲综合网| 免费观看精品视频网站| 亚洲综合色惰| 国产v大片淫在线免费观看| 日本黄色视频三级网站网址| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 国产淫语在线视频| 日韩制服骚丝袜av| 麻豆av噜噜一区二区三区| 成人亚洲欧美一区二区av| 九九热线精品视视频播放| 成年av动漫网址| 国产熟女欧美一区二区| 黑人高潮一二区| 国产精品一二三区在线看| 在线播放无遮挡| 国产av在哪里看| 国产在视频线精品| 99久久九九国产精品国产免费| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 亚洲欧美精品综合久久99| 我的老师免费观看完整版| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 秋霞伦理黄片| 国产精品av视频在线免费观看| 最近的中文字幕免费完整| 夫妻性生交免费视频一级片| 乱人视频在线观看| 成人一区二区视频在线观看| 日韩大片免费观看网站 | 永久免费av网站大全| 日日摸夜夜添夜夜爱| 波多野结衣巨乳人妻| 日韩精品有码人妻一区| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 波野结衣二区三区在线| 嫩草影院新地址| 国产探花在线观看一区二区| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 国产精品一二三区在线看| av天堂中文字幕网| 午夜亚洲福利在线播放| 18+在线观看网站| 国产精品久久久久久精品电影| 人妻系列 视频| 国产熟女欧美一区二区| 亚洲五月天丁香| 日韩在线高清观看一区二区三区| 国产一区二区在线av高清观看| 久久精品国产亚洲av天美| 2022亚洲国产成人精品| 亚洲综合精品二区| 国语自产精品视频在线第100页| 中文字幕熟女人妻在线| 一级毛片aaaaaa免费看小| 亚洲欧美成人综合另类久久久 | 免费观看a级毛片全部| 亚洲欧美一区二区三区国产| 亚洲精品aⅴ在线观看| 国产精品久久久久久av不卡| 国产探花极品一区二区| 丰满乱子伦码专区| 成人欧美大片| 国产精品人妻久久久影院| 18禁动态无遮挡网站| 男人舔奶头视频| 久久久久九九精品影院| 欧美激情久久久久久爽电影| 男女国产视频网站| 午夜精品一区二区三区免费看| 少妇被粗大猛烈的视频| 久久精品久久久久久久性| 精品一区二区三区人妻视频| 亚洲五月天丁香| 欧美日韩国产亚洲二区| 一级毛片电影观看 | 亚洲精品成人久久久久久| 国产精品一区www在线观看| 亚洲成人av在线免费| 搡老妇女老女人老熟妇| 国产精品人妻久久久久久| 亚洲自偷自拍三级| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 少妇人妻一区二区三区视频| 免费看av在线观看网站| 黄片无遮挡物在线观看| 国产乱来视频区| 日本黄大片高清| 国产免费视频播放在线视频 | 97人妻精品一区二区三区麻豆| 精品人妻熟女av久视频| 男的添女的下面高潮视频| 亚洲综合精品二区| 三级经典国产精品| 天美传媒精品一区二区| 欧美日韩国产亚洲二区| 一级毛片久久久久久久久女| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 男女国产视频网站| 国产精品电影一区二区三区| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 国产精品永久免费网站| 日韩制服骚丝袜av| 午夜福利成人在线免费观看| 久久99精品国语久久久| 欧美zozozo另类| 99热这里只有是精品50| 麻豆久久精品国产亚洲av| 一边亲一边摸免费视频| 国产69精品久久久久777片| 伦理电影大哥的女人| 美女国产视频在线观看| 亚洲av免费高清在线观看| 看黄色毛片网站| av免费观看日本| 日日摸夜夜添夜夜爱| 日韩欧美国产在线观看| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 久久精品综合一区二区三区| 午夜福利视频1000在线观看| 可以在线观看毛片的网站| 村上凉子中文字幕在线| 色播亚洲综合网| 久久久精品大字幕| 免费看a级黄色片| 99久久无色码亚洲精品果冻| 欧美97在线视频| 久久国产乱子免费精品| 春色校园在线视频观看| 黄色一级大片看看| 麻豆国产97在线/欧美| 99久国产av精品| 亚洲乱码一区二区免费版| 少妇人妻精品综合一区二区| 欧美又色又爽又黄视频| 色视频www国产| 亚洲精品久久久久久婷婷小说 | 欧美日韩综合久久久久久| 一个人观看的视频www高清免费观看| 亚洲欧美日韩东京热| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 欧美精品国产亚洲| 联通29元200g的流量卡| 97在线视频观看| 秋霞伦理黄片| 中文字幕熟女人妻在线| 伦精品一区二区三区| 欧美性感艳星| 久久久久久久久久成人| 最近中文字幕高清免费大全6| 欧美激情国产日韩精品一区| 亚洲av熟女| 看免费成人av毛片| 91久久精品国产一区二区成人| 日韩国内少妇激情av| 日本免费a在线| 内射极品少妇av片p| 青青草视频在线视频观看| 色5月婷婷丁香| 我要看日韩黄色一级片| 欧美日韩国产亚洲二区| 免费观看性生交大片5| 亚洲最大成人中文| 亚洲国产精品成人综合色| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 亚洲高清免费不卡视频| 一级黄色大片毛片| 久久久久九九精品影院| 1000部很黄的大片| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 国产乱人视频| 人妻系列 视频| 汤姆久久久久久久影院中文字幕 | 性插视频无遮挡在线免费观看| 中文字幕av在线有码专区| www.色视频.com| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 国产伦精品一区二区三区视频9| 亚洲人成网站在线播| 中文欧美无线码| 国产麻豆成人av免费视频| 精品人妻偷拍中文字幕| 性色avwww在线观看| av.在线天堂| 在现免费观看毛片| 日本免费一区二区三区高清不卡| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 久久99精品国语久久久| 超碰97精品在线观看| 亚洲欧美日韩无卡精品| 中文字幕亚洲精品专区| 久久久久久久久大av| 中文在线观看免费www的网站| 亚州av有码| 黄色欧美视频在线观看| 国产视频首页在线观看| 免费看光身美女| 日日干狠狠操夜夜爽| 免费无遮挡裸体视频| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 国产探花极品一区二区| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 国产探花极品一区二区| 六月丁香七月| 欧美三级亚洲精品| 亚洲欧美一区二区三区国产| 国产真实伦视频高清在线观看| 一级av片app| 少妇丰满av| 亚洲国产精品久久男人天堂| 亚洲av成人精品一二三区| 乱码一卡2卡4卡精品| 亚洲国产欧美在线一区| 国产精品人妻久久久久久| 免费看美女性在线毛片视频| 欧美激情久久久久久爽电影| 一本久久精品| 精品人妻偷拍中文字幕| 成人二区视频| 国产成人91sexporn| 最近最新中文字幕大全电影3| 国产高清视频在线观看网站| kizo精华| 国产高清有码在线观看视频| 成人亚洲欧美一区二区av| 99久久精品国产国产毛片| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 久久久国产成人免费| 久久久久久九九精品二区国产| 国产美女午夜福利| 精品人妻视频免费看| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 国产成人91sexporn| 亚洲在线自拍视频| 日韩强制内射视频| 久久久久国产网址| 亚洲高清免费不卡视频| 身体一侧抽搐| 色视频www国产| 国内揄拍国产精品人妻在线| 成人美女网站在线观看视频| 我要看日韩黄色一级片| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 午夜福利视频1000在线观看| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 午夜精品国产一区二区电影 | 久久精品91蜜桃| 日韩 亚洲 欧美在线| 中文欧美无线码| 日本三级黄在线观看| 日韩欧美三级三区| 日韩在线高清观看一区二区三区| 国产黄色小视频在线观看| 麻豆成人av视频| 性插视频无遮挡在线免费观看| 免费av不卡在线播放| 亚洲四区av| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 免费看日本二区| 99热网站在线观看| 国产在线男女| 丝袜美腿在线中文| 天堂中文最新版在线下载 | 久久综合国产亚洲精品| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 午夜精品在线福利| 国产亚洲5aaaaa淫片| 免费黄网站久久成人精品| 亚洲18禁久久av| 国产精品不卡视频一区二区| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 边亲边吃奶的免费视频| 青春草国产在线视频| 3wmmmm亚洲av在线观看| 国产高清三级在线| 激情 狠狠 欧美| 岛国毛片在线播放| 免费观看的影片在线观看| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 男人狂女人下面高潮的视频| 日韩大片免费观看网站 | 国产成人91sexporn| av专区在线播放| 日本爱情动作片www.在线观看| 99视频精品全部免费 在线| 国产美女午夜福利| 男女下面进入的视频免费午夜| 亚洲在线观看片| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 女人久久www免费人成看片 | 国产精品无大码| 高清在线视频一区二区三区 | 亚洲在线自拍视频| 久久综合国产亚洲精品| 在线天堂最新版资源| 秋霞在线观看毛片| 精品一区二区免费观看| 国产伦精品一区二区三区四那| 91在线精品国自产拍蜜月| 国产午夜福利久久久久久| 国产亚洲一区二区精品| 国产精品一及| 久久久久免费精品人妻一区二区| 神马国产精品三级电影在线观看| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 长腿黑丝高跟| 精品少妇黑人巨大在线播放 | 人人妻人人澡欧美一区二区| 亚洲人成网站在线播| 一边亲一边摸免费视频| 岛国毛片在线播放| 国产精品一区www在线观看| 3wmmmm亚洲av在线观看| 成人一区二区视频在线观看| 日日摸夜夜添夜夜爱| 午夜福利网站1000一区二区三区| 久热久热在线精品观看| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 一个人看视频在线观看www免费| 99久久精品国产国产毛片| 村上凉子中文字幕在线| 99热这里只有是精品50| 一夜夜www| 三级国产精品欧美在线观看| 久热久热在线精品观看| 日韩三级伦理在线观看| 不卡视频在线观看欧美| 国内精品宾馆在线| 婷婷色综合大香蕉| 夜夜爽夜夜爽视频| 国产高清有码在线观看视频| 日韩欧美 国产精品| 亚洲国产成人一精品久久久| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 国产精品国产高清国产av| av女优亚洲男人天堂| 亚洲精品成人久久久久久| 青春草视频在线免费观看| 欧美zozozo另类| 22中文网久久字幕| 99久久人妻综合| 色综合站精品国产| 女人久久www免费人成看片 | 国产精品无大码| 成人美女网站在线观看视频| 听说在线观看完整版免费高清| 亚洲色图av天堂| 最近的中文字幕免费完整| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 免费一级毛片在线播放高清视频| 欧美成人a在线观看| 欧美又色又爽又黄视频| 久久人妻av系列| 一级毛片久久久久久久久女| 国产免费福利视频在线观看| 老司机福利观看| 床上黄色一级片| 黄色日韩在线| 人妻系列 视频| 爱豆传媒免费全集在线观看| 日韩国内少妇激情av| 国产人妻一区二区三区在| 精品久久久久久久久亚洲| 精品久久久久久成人av| 亚洲最大成人av| 亚洲电影在线观看av| 久热久热在线精品观看| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 国产黄片美女视频| 三级国产精品片| 精品午夜福利在线看| 少妇高潮的动态图| 久久人人爽人人片av| 久久99热这里只有精品18| 国产午夜精品论理片| 久久久久网色| 精品国产三级普通话版| 97超碰精品成人国产| 久久久久九九精品影院| www日本黄色视频网| 久久这里有精品视频免费| 成人无遮挡网站| 国产 一区精品| 免费人成在线观看视频色| 精品久久久久久久末码| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 国产日韩欧美在线精品| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 永久免费av网站大全| av线在线观看网站| av在线天堂中文字幕| 成人毛片60女人毛片免费| 亚洲图色成人| 18禁在线播放成人免费| 国产高潮美女av| 亚洲图色成人| 午夜亚洲福利在线播放| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 观看免费一级毛片| 日日摸夜夜添夜夜爱| 国产av在哪里看| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 卡戴珊不雅视频在线播放| 日韩一本色道免费dvd| 最近最新中文字幕大全电影3| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 男女啪啪激烈高潮av片| 十八禁国产超污无遮挡网站| 卡戴珊不雅视频在线播放| av播播在线观看一区| 国产精品野战在线观看|