淺談提高病理常規(guī)HE制片質(zhì)量的體會

●張金龍

淺談提高病理常規(guī)HE制片質(zhì)量的體會

●張金龍

對于病理診斷病理標(biāo)本的檢查應(yīng)包括大體和顯微鏡下觀察兩個方面，而正確的診斷往往取決于準(zhǔn)確的顯微鏡下觀察。因此，制片質(zhì)量的好與差，直接影響診斷結(jié)果的準(zhǔn)確性，質(zhì)量差的切片甚至?xí)礤e誤的結(jié)果。

HE切片；固定；包埋盒；脫水

一張高質(zhì)量的HE切片與標(biāo)本的固定、取材、脫水、透明、包埋、切片、烤片、脫蠟、染色、封片等有密切的關(guān)系。我從事病理技術(shù)工作六年來，從標(biāo)本的接受、試劑的獨(dú)立配置和完成優(yōu)質(zhì)HE切片都認(rèn)真、用心去做，制作的切片也多次受到上級單位老師表揚(yáng)。從日常工作出現(xiàn)的問題及問題解決中，我總結(jié)了一點(diǎn)體會。

1 組織固定

固定是制作優(yōu)質(zhì)病理切片的前提，標(biāo)本需及時(shí)和固定足夠。固定不佳會造成HE染色的細(xì)胞核染色發(fā)灰；細(xì)胞核與細(xì)胞漿界限不清。如果標(biāo)本過大，需切開固定。我病理科常規(guī)固定液為10%的福爾馬林；液體為標(biāo)本總體積的10倍量，固定液更換要及時(shí)，并確保甲醛的有效濃度；如果標(biāo)本固定不良，可采用取材后的二次固定。

2 組織取材

組織的取材厚薄、大小對組織的脫水及以后的處理都有很大的影響，取材要做到大小適宜，厚薄均勻；一般標(biāo)本取材應(yīng)在1.5cmX1.5cmX0.2cm之間。[1]

3 組織脫水、透明

我科室采用武漢俊杰雙吊籃脫水機(jī)，工作缸試劑及時(shí)間分配為：第1缸10%的甲醛 2小時(shí)； 第二缸80%的乙醇 3小時(shí)； 第三缸95%的乙醇（1） 2小時(shí)；第四缸95%的乙醇（2） 1小時(shí)；第五缸 無水乙醇 1小時(shí)；第六缸 無水乙醇 1小時(shí)；第七缸二甲苯（1） 15分鐘；第八缸 二甲苯（2） 15分鐘；第九缸石蠟（1） 1小時(shí)；第十缸石蠟(2) 1小時(shí)；第十一缸石蠟（3） 1小時(shí)。[1]

4 組織包埋

在組織的包埋過程中，應(yīng)注以下幾點(diǎn)。

4.1 一個標(biāo)本有多個小點(diǎn)組織要把他們靠近并包埋在同一平臺上；

4.2 注意組織結(jié)構(gòu)并采取不同的包埋方式；

4.3 石蠟的選擇：在長期石蠟過程中出現(xiàn)蠟塊易凍裂或切片黏在一起無法展開等現(xiàn)象，針對這些問題，我做了一些嘗試，最后采用了：熔點(diǎn)為58-60度的石蠟2-2.5份和熔點(diǎn)為56-58度的石蠟1份混合起來使用，就可以有效的減少由石蠟原因而出現(xiàn)以上的問題。

4.4 包埋盒的選擇：包埋盒最好選擇矩形孔的，矩形孔的包埋盒可以有效增加盒內(nèi)外石蠟的接觸面積，增強(qiáng)包埋盒內(nèi)外石蠟的粘合力，從而降低蠟塊被凍裂和切片時(shí)的破碎的幾率，而使得切片無法進(jìn)行。

5 切片、撈片、烤片

切片機(jī)轉(zhuǎn)動要勻速，不易過快或過慢，以免造成切片的皺縮或厚薄不均勻；切片刀要鋒利，切片厚度為4-6；撈片要選擇厚薄均勻，組織完整的切片；撈片水溫不易過高，一般在40-42度之間即可；烤片為80-90度烤片機(jī)內(nèi)15分鐘即可，溫度不易過高。

6 脫蠟、染色、脫水及透明

脫蠟至水與脫水至透明過程中，試劑及時(shí)更換，保證試劑的有效和徹底，并嚴(yán)格按照程序進(jìn)行。染色時(shí)注意觀察，直至切片的最佳顏色。

7 封片、貼標(biāo)簽

封片時(shí)中性樹膠用量要適中，蓋玻片要有點(diǎn)角度斜著蓋下去防止氣泡產(chǎn)生；標(biāo)簽要干凈，無污染并貼正。

總之，在從事病理工作的過程中，一切要細(xì)心、對出現(xiàn)的問題一定要用心思考，找出原因并解決，才能安心。

（作者單位：安徽省合肥市第八人民醫(yī)院病理科 ）

[1]臨床病理學(xué)技術(shù)/梁英杰等編著[M]北京：人民衛(wèi)生出版社,2011.12.