微波消解-原子熒光分光光度法測(cè)定蔥頭荷耳片中砷、汞含量

楊曉虹，趙昱瑋，南敏倫，呂娜，赫玉芳※

(1．吉林大學(xué)，長春?130012；?2．吉林省中醫(yī)藥科學(xué)院，長春?130012；3．吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)，長春?130118)

蔥頭荷耳片是以分蘗蔥頭、荷葉及木耳為主要原料開發(fā)而成的具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的降血脂功能復(fù)方中藥制劑。分蘗蔥頭主要含有黃酮類和硫化物，具有降壓、減肥降脂、抑制血栓素A2合成等作用[1]。荷葉堿是中藥荷葉的主要成分，荷葉中的生物堿和黃酮都具有調(diào)血脂活性[2]。黑木耳中的多糖成分也具有降血脂等作用[3]。因此，該中藥復(fù)方制劑具有減肥降脂作用。重金屬是中藥的重要污染物之一，在體內(nèi)積聚而引起中毒，引發(fā)血液系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、皮膚、呼吸系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)等疾病，對(duì)人體健康產(chǎn)生危害[4，5]，砷、汞均為重要的檢測(cè)項(xiàng)目，參照國家對(duì)中藥復(fù)方制劑中有害金屬及有害物質(zhì)進(jìn)行了限定，其中規(guī)定砷的限量為1.0mg/kg、汞的限量為0.3mg/kg。

本試驗(yàn)采用微波消解法進(jìn)行樣品前處理，對(duì)蔥頭荷耳片中砷和汞進(jìn)行測(cè)定分析，為有效控制蔥頭荷耳片中重金屬及有害元素提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

蔥頭荷耳片(吉林大學(xué)藥學(xué)院藥化教研室自制)；硝酸、30%過氧化氫(優(yōu)級(jí)純，北京化工廠)；砷標(biāo)準(zhǔn)溶液[標(biāo)準(zhǔn)值為1000μg/mL，GBW(E)080117]、汞標(biāo)準(zhǔn)溶液[標(biāo)準(zhǔn)值為1000μg/mL，GBW(E)080124](中國計(jì)量科學(xué)研究院)；水為自制超純水。

1.2 儀器與設(shè)備

AFS-8220型原子熒光光度計(jì)(砷、汞空心陰極燈，北京吉天儀器有限公司)；XT-9912智能微波消解儀(上海新拓分析儀器科技有限公司)；AL204電子分析天平(梅特勒-托利多公司)；Direct-Pure UP超純水及RO純水機(jī)(上海樂楓生物科技有限公司)。

2 方法與結(jié)果

2.1 測(cè)定依據(jù)[4，5]

按GB/T 5009.11-2003《食品中總砷及無機(jī)砷的測(cè)定》和GB/T 5009.17-2003《食品中總汞及有機(jī)汞的測(cè)定》中原子熒光分光光度法測(cè)定蔥頭荷耳片中砷和汞的含量。

2.2 樣品處理

取蔥頭荷耳片，研細(xì)，取0.5g，精密稱定，置微波消解灌中，加入硝酸10mL，過氧化氫1mL，放置過夜。將消解灌放入微波爐消解系統(tǒng)中，啟動(dòng)儀器至消解完全(消解程序?yàn)椋?階段，300s內(nèi)升溫至120℃，壓力5kg，功率300W；2階段，500s內(nèi)升溫至140℃，壓力10kg，功率900W；3階段，500s內(nèi)升溫至180℃，壓力20kg，功率1300W)。取出消解灌，加熱至消解液約為1mL，放冷，轉(zhuǎn)移至25mL量瓶中，用水少量多次洗滌罐，洗液合并于容量瓶中，搖勻，備用。

2.3 儀器條件

砷的測(cè)定：光電倍增管電壓270V；砷空心陰極燈電流60mA；原子化器高度8mm；氬氣流速：載氣300mL/min；測(cè)量方式：濃度直讀；讀數(shù)方式：峰面積；讀數(shù)延遲時(shí)間1s；讀數(shù)時(shí)間10s；標(biāo)準(zhǔn)液或樣品液加入體積0.5mL。

汞的測(cè)定：光電倍增管電壓270V；汞空心陰極燈電流30mA；原子化器溫度300℃；原子化器高度8.0mm；氬氣流速：載氣300mL/min；測(cè)量方式：濃度直讀；讀數(shù)方式：峰面積；讀數(shù)延遲時(shí)間1.0s；讀數(shù)時(shí)間10.0s；標(biāo)準(zhǔn)液或樣品液體積0.5mL。

2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

取25mL比色管5支，依次準(zhǔn)確加入100.0ng/mL的砷標(biāo)準(zhǔn)溶液0.5mL、1.0mL、1.5mL、2.0mL、2.5mL，各加(1+9)硫酸12.5mL、50g/L硫脲2.5mL，補(bǔ)加水至刻度，混勻(相當(dāng)于砷濃度分別為2.0ng/mL、4.0ng/mL、6.0ng/mL、8.0ng/mL、10.0ng/mL)，備用。

取25mL比色管5支，依次準(zhǔn)確加入100.0ng/mL的汞標(biāo)準(zhǔn)溶液0.5mL、1.0mL、1.5mL、2.0mL、2.5mL，用硝酸溶液(1+9)稀釋至刻度，混勻(相當(dāng)于汞濃度分別為2.0ng/mL、4.0ng/mL、6.0ng/mL、8.0ng/mL、10.0ng/mL)，備用。

在最佳測(cè)定條件下，用原子熒光分光光度法分別測(cè)定吸光值，計(jì)算回歸方程。結(jié)果表明，各元素的吸光度與濃度之間均呈良好的線性關(guān)系(表1)。

表1砷、汞的標(biāo)準(zhǔn)曲線和線性范圍

Table1Theresultforstandardcurveandlinearrelationshipofarsenicandmercury

成分Component線性范圍Linearrange標(biāo)準(zhǔn)曲線RegressionequationrAs0ng/mL～100ng/mLA=2211814C-36548309984Hg0ng/mL～100ng/mLA=6841079C+34842109989

2.5 精密度試驗(yàn)

取蔥頭荷耳片，研細(xì)，取0.5g，精密稱定，按“2.2”項(xiàng)下方法分別制備供試品溶液，連續(xù)測(cè)定6次，分別測(cè)定、計(jì)算砷和汞的含量及RSD。結(jié)果表明，微波消解法測(cè)定砷、汞的含量分別為0.37mg/kg和0.08mg/kg，RSD分別為1.81%和1.59%，表明儀器精密度良好。

2.6 重復(fù)性試驗(yàn)

取蔥頭荷耳片，研細(xì)，取0.5g，精密稱定，按上述實(shí)驗(yàn)方法平行試驗(yàn)6份，分別測(cè)定、計(jì)算砷、汞的含量及RSD。結(jié)果表明，微波消解法測(cè)定砷、汞的含量分別為0.36mg/kg和0.08mg/kg，RSD分別為2.05%和1.74%，表明微波消解法具有良好的重復(fù)性。

2.7 加樣回收率試驗(yàn)

取蔥頭荷耳片(含砷、汞分別為0.36mg/kg、0.08mg/kg)，研細(xì)，取0.25g，精密稱定，每個(gè)元素共6份，分別精密加入砷、汞標(biāo)準(zhǔn)品溶液，按“2.2”項(xiàng)下方法操作，測(cè)定，計(jì)算加樣回收率，結(jié)果見表2。

表2微波消解加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果

Table 2The result for the recovery result

從表2可知，砷的加樣回收率為97.86%～100.35%，汞的加樣回收率為98.49%～102.59%，表明微波消解法具有良好的準(zhǔn)確度，符合元素分析的要求。

2.8 消解方法及測(cè)定方法驗(yàn)證

試驗(yàn)材料采用“2.2”項(xiàng)的方法進(jìn)行微波消解、原子熒光分光光度法分別對(duì)小麥粉成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(GBW08503B)中的砷(標(biāo)準(zhǔn)值為0.32μg/g±0.07μg/g)及大米粉中汞成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(GBW08508)中的汞(標(biāo)準(zhǔn)值為0.038μg/g±0.003μg/g)進(jìn)行測(cè)定。測(cè)定結(jié)果表明，小麥粉成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中砷為0.311μg/g、大米粉中汞成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中汞為0.033μg/g，結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)值相近，說明消解方法及測(cè)定方法可行。

3 討論

樣品前處理方法分為干法灰化、濕法消解、微波消解，干法灰化能灰化大量的樣品，可加大取樣量，消化過程長，不需要使用大量試劑，空白值小，但容易導(dǎo)致被測(cè)成分元素可能與容器起反應(yīng)，被氧化或被吸收，導(dǎo)致回收率低；濕法消解適用于各種不同的食物樣品，但試劑用量大，空白值高；微波消解法則可以避免以上問題，具有空白值低、試劑用量少、消解時(shí)間短等優(yōu)點(diǎn)，樣品處理更簡便、更快捷，結(jié)果更準(zhǔn)確。

實(shí)驗(yàn)表明，本試驗(yàn)采用微波消解-原子熒光分光光度法測(cè)定蔥頭荷耳片中砷、汞的含量，具有較好的精密度和準(zhǔn)確度，適用于蔥頭荷耳片中砷、汞含量的測(cè)定。

[1]姚智卿.鉛對(duì)人體健康的危害[J].微量元素與健康研究,2011,28(5):67-68.

[2]關(guān)懷,樸豐源.砷神經(jīng)發(fā)育毒性及機(jī)制研究進(jìn)展[J].中國公共衛(wèi)生,2015,31(4):538-540.

[3]GB 16740-2014,食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)?保健食品[S].

[4]GB/T5009.11-2003,食品中總砷及無機(jī)砷的測(cè)定[S].

[5]GB/T5009.17-2003,食品中總汞及有機(jī)汞的測(cè)定[S].