EpCAM作為腫瘤診斷標(biāo)志物的研究進(jìn)展

司琳琳　楊玉秀

(鄭州大學(xué)人民醫(yī)院 消化內(nèi)科　河南 鄭州　450003)

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EpCAM作為腫瘤診斷標(biāo)志物的研究進(jìn)展

司琳琳楊玉秀

(鄭州大學(xué)人民醫(yī)院 消化內(nèi)科河南 鄭州450003)

【關(guān)鍵詞】上皮細(xì)胞黏附分子；腫瘤；診斷；預(yù)后

上皮細(xì)胞黏附分子(epithelial cell adhesion molecule，EpCAM)最早發(fā)現(xiàn)于結(jié)腸癌中，是一種單次跨膜糖蛋白，參與調(diào)節(jié)細(xì)胞黏附、增殖、 分化、 遷移及信號傳導(dǎo)。大量研究報(bào)道發(fā)現(xiàn)EpCAM除在正常上皮細(xì)胞中表達(dá)，還在許多人類腫瘤中異常表達(dá)，同時(shí)在一些腫瘤中其表達(dá)水平與疾病預(yù)后相關(guān)。EpCAM作為腫瘤診斷標(biāo)志物受到越來越多的關(guān)注。

1EpCAM的結(jié)構(gòu)與功能

1.1EpCAM的結(jié)構(gòu)EpCAM又稱TACSTD1(tumor-associated calcium signal transducer protein 1)，按白細(xì)胞分化抗原為CD326，屬單次跨膜Ⅰ型糖蛋白。EpCAM基因位于人染色體2p21，基因長度14 kbp，相對分子量40 kDa，其分子結(jié)構(gòu)由胞外結(jié)構(gòu)域、單次跨膜結(jié)構(gòu)域和胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域3部分構(gòu)成[1]，其主要編碼一種腫瘤相關(guān)抗原，多數(shù)表達(dá)于正常上皮細(xì)胞和上皮源性惡性腫瘤細(xì)胞。

1.2EpCAM的功能及與腫瘤發(fā)生的關(guān)系EpCAM參與調(diào)節(jié)細(xì)胞間黏附、遷移、增殖及信號傳導(dǎo)。EpCAM的過表達(dá)可能導(dǎo)致Wnt-β-連環(huán)蛋白信號通路這一經(jīng)典的腫瘤信號傳導(dǎo)通路的激活，通過Wnt級聯(lián)反應(yīng)激活原癌基因e-myc和cyclin A/E的表達(dá)，誘導(dǎo)細(xì)胞的增殖[2]。

2EpCAM在一些惡性腫瘤中的表達(dá)

2.1EpCAM在食管癌中的表達(dá)EpCAM在正常食管上皮中呈陰性，但在原發(fā)性食管鱗狀細(xì)胞癌中，約80%有不同程度的異常表達(dá)，且與預(yù)后有關(guān)。一項(xiàng)早期系統(tǒng)疾病食管癌研究中，檢測EpCAM的表達(dá)，結(jié)果顯示大多數(shù)原發(fā)食管癌具有高水平EpCAM表達(dá)，而轉(zhuǎn)移癌細(xì)胞中低表達(dá)[3]。

一項(xiàng)通過免疫組化法對74例食管鱗狀細(xì)胞癌組織樣本的研究中，結(jié)果顯示EpCAM的過表達(dá)與較差的生存預(yù)后(P=0.026)有關(guān)。多因素Cox回歸分析表明，EpCAM的過表達(dá)是手術(shù)治療食管癌(P=0.004)一獨(dú)立的預(yù)后因素。EpCAM有助于細(xì)胞增殖和腫瘤的產(chǎn)生[4]。

2.2EpCAM在胃癌中的表達(dá)EpCAM在胃癌組織和細(xì)胞系中呈高表達(dá)，通過RNA干擾下調(diào)EpCAM可以導(dǎo)致細(xì)胞增殖的減少和細(xì)胞周期停止[5]。在一項(xiàng)有關(guān)L1CAM和EpCAM的回顧性研究中，對601例胃癌非黏膜樣本用免疫組化方法檢測EpCAM蛋白水平，結(jié)果顯示在247(41.1%)例的腫瘤中檢測到EpCAM蛋白質(zhì)高表達(dá)。同時(shí)EpCAM的表達(dá)與腫瘤部位、浸潤程度、淋巴結(jié)、遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移有關(guān)。L1CAM與EpCAM均高表達(dá)的患者累積5年生存率明顯更低[6]。

Kroepil等[7]檢測163例原發(fā)性胃癌中EpCAM的瘤內(nèi)表達(dá)，腫瘤中陽性率77%，相應(yīng)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶有85%檢測到EpCAM高表達(dá)。結(jié)果分析EpCAM高表達(dá)與較高比例的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P=0.03)和較低的中位總生存期(P=0.001)有關(guān)。我國亦有類似研究證實(shí)了EpCAM在胃癌中的高表達(dá)及其預(yù)后的關(guān)聯(lián)性。

2.3EpCAM在結(jié)直腸腫瘤中的表達(dá)EpCAM最早于1979年發(fā)現(xiàn)于結(jié)腸癌中。用免疫組化方法對樣本組織芯片進(jìn)行的一項(xiàng)研究中，1 186例(97.1%)結(jié)腸癌中，7例(0.6%)呈弱陽性，1 152例呈強(qiáng)陽性，即EpCAM陽性表達(dá)率總計(jì)為97.7%，表明EpCAM在結(jié)腸癌中的高水平表達(dá)[8]。研究發(fā)現(xiàn)，EpCAM的高水平表達(dá)與腫瘤發(fā)展有關(guān)，高水平EpCAM表達(dá)者多預(yù)后不良[9]。在Lynch綜合征相關(guān)的回顧性研究中，對樣本進(jìn)行基因缺失與多重連接探針擴(kuò)增(MLPA)以及蛋白水平檢測，結(jié)果顯示EpCAM蛋白表達(dá)的缺失常出現(xiàn)于EpCAM生殖系缺失的患者中。3’外顯子缺失的EpCAM基因與MSH2啟動(dòng)子甲基化有關(guān)，3’外顯子缺失可明顯誘發(fā)突變Lynch綜合征。EpCAM亦可以作為鑒別EpCAM生殖缺失的Lynch綜合征的工具[10-11]。

2.4EpCAM在肝癌中的表達(dá)在肝癌研究中，EpCAM+細(xì)胞具有自我更新分化的能力及較高的侵襲性。Yamashita等[12]將肝細(xì)胞癌根據(jù)EpCAM及AFP表達(dá)的不同分為4型：EpCAM+AFP+、EpCAM-AFP-、EpCAM+AFP-、EpCAM-AFP+，分析各型特點(diǎn)顯示EpCAM+AFP+患者TNM分期晚，多伴門脈受侵，預(yù)后差。在一項(xiàng)123例肝癌細(xì)胞系研究中，應(yīng)用cell Search系統(tǒng)對肝癌患者EpCAM陽性的循環(huán)腫瘤細(xì)胞(circulating tumor cells，CTC)進(jìn)行檢測，結(jié)果顯示CTC在HCC患者中檢出率為66.67%[13]。Schulze等[14]用同樣方法研究檢測了79例樣本，其中59例肝癌，20例肝硬化或良性腫瘤，結(jié)果分析發(fā)現(xiàn)CTC≥1在肝癌中占 18/59，對照組僅1/19，在EpCAM CTCs陽性群體中總生存期更短(460比746 d)(P=0.017)。在不同巴塞羅那分期，CTCs檢出率有所差異：BCLC級A 1/9，B 6/31和C 11/19(P=0.006)。EpCAM陽性細(xì)胞的存在與腫瘤侵襲性和轉(zhuǎn)移相關(guān)。

Yu等[15]用COX比例分析模型，研究結(jié)果顯示，合并門靜脈癌栓的肝癌患者EpCAM的單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphisms，SNPs)變異與較差的生存數(shù)OS顯著相關(guān)，論證了SNP rs1126497的基因EpCAM作為合并門靜脈癌栓的非手術(shù)肝癌患者預(yù)后的獨(dú)立生物標(biāo)志物的可能性。正常肝細(xì)胞中EpCAM不表達(dá)，用免疫組化法分析肝活檢組織，33例慢性乙肝，69例慢性丙肝，12例正常肝組織，并對其進(jìn)行纖維化程度分度及分期，結(jié)果顯示EpCAM陽性細(xì)胞在早期肝炎組織中罕見，而在肝炎后期顯著增高同時(shí)伴隨有膽管反應(yīng)。在肝硬化組織中，EpCAM的異常表達(dá)提示EpCAM存在于受損肝細(xì)胞中[16]。

2.5EpCAM在乳腺癌中的表達(dá)Osta等[17]在研究中發(fā)現(xiàn)，原發(fā)性乳腺癌組織中EpCAM的表達(dá)高于正常組織100倍，同時(shí)在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶中EpCAM表達(dá)水平高于正常約810倍。Soysal等[18]檢測1 365例乳腺癌，其中660例(48%)中EpCAM呈陽性表達(dá)，且在不同亞型中表達(dá)不同，分析EpCAM與臨床病例特征聯(lián)系，結(jié)果顯示EpCAM異常表達(dá)與較差存活率顯著相關(guān)。

EpCAM可以調(diào)節(jié)NF-κB轉(zhuǎn)錄因子活性在乳腺癌組織中IL-8的表達(dá)，證實(shí)EpCAM在調(diào)節(jié)乳腺癌侵襲信號中的作用[19]。對194個(gè)連續(xù)淋巴結(jié)陰性乳腺癌患者進(jìn)行長期隨訪，分析EpCAM表達(dá)對無病生存(DFS)、無轉(zhuǎn)移生存(MFS)和乳腺癌特異性總生存期(OS)的預(yù)后意義，結(jié)果提示在未處理淋巴結(jié)陰性乳腺癌中，EpCAM的RNA表達(dá)與較低的MFS相關(guān)[20]。

3結(jié)語

多項(xiàng)研究證據(jù)表明，EpCAM在多種腫瘤組織中呈高水平表達(dá)，可能對腫瘤生物學(xué)的很多方面有一定影響。盡管EpCAM表達(dá)水平的檢測手段與評估方法不盡相同，EpCAM在人類惡性腫瘤中表達(dá)水平升高毋庸置疑，包括頭頸部腫瘤、結(jié)腸癌、胰腺癌、食管癌、胃癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌，且多數(shù)研究提示EpCAM在其中扮演著重要角色，也與一些重要的臨床病理學(xué)指標(biāo)相關(guān)。

迄今的數(shù)據(jù)也證明了EpCAM在一些惡性腫瘤中可以作為有價(jià)值的預(yù)后判斷指標(biāo)。在食管鱗癌、胃癌、結(jié)腸癌、乳腺癌、肝癌中，EpCAM的過表達(dá)與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移及不良預(yù)后有關(guān)。而在低分化甲狀腺癌、腎透明細(xì)胞癌中，EpCAM高表達(dá)者可能有較高的生存率，與良好的預(yù)后有關(guān)[21]。然而，多數(shù)實(shí)驗(yàn)研究中對EpCAM的表達(dá)水平用陽性率來評價(jià)，因此確立一個(gè)精準(zhǔn)的臨界值對評價(jià)其表達(dá)水平至關(guān)重要，這樣才可能將其應(yīng)用于常規(guī)的臨床試驗(yàn)中。此外，一些研究中樣本數(shù)較小，造成誤差可能，多點(diǎn)更大樣本數(shù)的實(shí)驗(yàn)證據(jù)需要進(jìn)一步研究。

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【中圖分類號】R 730.2

doi:10.3969/j.issn.1004-437X.2016.05.029

(收稿日期：2015-12-01)