BLCAP基因在急性髓系白血病中的表達(dá)及意義

董小林，張少君，楊潔

(湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬人民醫(yī)院健康體檢中心，湖北 十堰 442000)

BLCAP基因在急性髓系白血病中的表達(dá)及意義

董小林，張少君，楊潔

(湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬人民醫(yī)院健康體檢中心，湖北 十堰 442000)

目的 探討膀胱癌相關(guān)蛋白(BLCAP)基因在急性髓系白血病(AML)中的表達(dá)及其與治療療效和預(yù)后的關(guān)系。方法收集我院血液科2008年1月至2012年12月收治的138例原發(fā)性急性髓系白血病患者的病理資料，利用實(shí)時定量PCR(RQ-PCR)法檢測AML患者骨髓液BLCAP基因的表達(dá)，并分析其表達(dá)與AML臨床病理指標(biāo)及治療療效、預(yù)后的關(guān)系。結(jié)果AML患者均表達(dá)BLCAP，BLCAP的表達(dá)在AML患者不同年齡、白細(xì)胞(WBC)、血紅蛋白(Hb)等指標(biāo)間比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；AML治療后緩解及治療后無事件生存的患者，其BLCAP表達(dá)高于治療后未緩解及治療后復(fù)發(fā)、病情進(jìn)展及死亡的患者，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論BLCAP基因在AML患者中的表達(dá)與其治療療效及預(yù)后相關(guān)，有望成為AML病情評估及療效預(yù)測的指標(biāo)。但這一結(jié)論尚需進(jìn)一步的研究予以證實(shí)。

膀胱癌相關(guān)蛋白；急性髓系白血?。活A(yù)后；病理指標(biāo)

急性髓系白血病(Acute myeloid leukemia，AML)為造血系統(tǒng)的惡性腫瘤，其治療效果差、復(fù)發(fā)率高，目前除了常規(guī)指標(biāo)外，臨床尚缺乏其他有效的治療效果預(yù)測指標(biāo)[1]。膀胱癌相關(guān)蛋白(BLCAP)基因的表達(dá)與膀胱癌、宮頸癌等多種惡性腫瘤的不良預(yù)后相關(guān)。但BLCAP基因在AML患者中的表達(dá)及其與治療療效和預(yù)后的關(guān)系，國內(nèi)外尚未見相關(guān)報道。本文通過分析BLCAP基因在急性髓系白血病中的表達(dá)情況，初步明確BLCAP能否成為AML療效預(yù)測、預(yù)后評估的指標(biāo)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 整理我院血液科2008年1月至2012年12月收治的原發(fā)性急性髓系白血病病例共149例，剔除3例放棄治療，5例臨床資料不完整，3例治療后失訪，最終入選138例。所有患者均簽署知情同意書并經(jīng)我院倫理委員會討論通過。入選138例患者中，男性71例，女性67例。中位年齡47歲(16～78歲)。M1型21例，M2型41例，M3型53例，M4型23例。AML的診斷及療效判斷標(biāo)準(zhǔn)參照2011年版指南[2]。138例患者均為正常核型，治療方案以柔紅霉素+阿糖胞苷(DA)為主的誘導(dǎo)化療。查閱患者住院病歷及門診隨訪資料，記錄患者接受治療前血紅蛋白水平、血小板數(shù)等臨床資料。隨訪方式為定期門診或住院復(fù)查。總生存(Overall survival，OS)為確診日至患者死亡或隨訪截止的時間。無事件生存(Event free survival，EFS)為患者確診日至復(fù)發(fā)、病情進(jìn)展及隨訪截止日。

1.2 檢測方法 常規(guī)方法抽取患者骨髓液2mL，首先分離骨髓液單個核細(xì)胞進(jìn)行RNA提取，cDNA合成按照試劑盒說明(上海生物工程技術(shù)服務(wù)有限公司)并參照文獻(xiàn)進(jìn)行[3-4]。實(shí)驗(yàn)中BLCAP基因上、下游引物為5'-GCAGAATTCATGTATTGCCTCCAGTG-3'，5'-GCGGATCTTAGGTGCCCACAACGC-3'。BLCAP基因RQ-PCR實(shí)驗(yàn)由我院中心實(shí)驗(yàn)室完成。將RQ-PCR的△△CT值進(jìn)行Log轉(zhuǎn)換便于統(tǒng)計分析[4]。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS13.0軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。BLCAP基因表達(dá)與臨床病理指標(biāo)間的關(guān)系為計數(shù)資料，采用χ2檢驗(yàn)，BLCAP基因表達(dá)與預(yù)后的關(guān)系用Kaplan-meier法、Log-rank檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 BLCAP基因表達(dá)及其與臨床病理指標(biāo)的關(guān)系 入選AML病例均可檢出BLCAP基因表達(dá)，中位表達(dá)6 523(110～193 224)。參照文獻(xiàn)將BLCAP基因表達(dá)水平10 000以下定義為低表達(dá)，10 000以上定義為高表達(dá)[4-5]。BLCAP基因表達(dá)與患者年齡、M分型、血小板、血紅蛋白等指標(biāo)間比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，而與患者性別無關(guān)(P＞0.05)，見表1。

表1 BLCAP表達(dá)與AML患者臨床病理指標(biāo)的關(guān)系(例)

2.2 BLCAP基因表達(dá)與療效的關(guān)系 138例入選患者，緩解(CR)共126例(91.3%)，無緩解(NR)12例(8.7%)。緩解組BLCAP基因高表達(dá)89例(70.6%)，低表達(dá)37例(29.4%)；無緩解組BLCAP基因高表達(dá)4例(33.3%)，低表達(dá)8例(66.7%)。BLCAP基因高表達(dá)患者治療后緩解率高于低表達(dá)者，兩組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=5.145，P＜0.05)。

2.3 BLCAP基因表達(dá)與AML患者預(yù)后的關(guān)系 138例患者隨訪截止2012年12月，中位隨訪30個月。隨訪期間，復(fù)發(fā)、病情進(jìn)展67例，死亡19例。BLCAP基因在52例病情穩(wěn)定患者中高表達(dá)41例(78.8%)，低表達(dá)11例(21.2%)；BLCAP基因在86例病情復(fù)發(fā)、進(jìn)展患者中高表達(dá)33例(38.4%)，低表達(dá)53例(61.6%)；在隨訪期間19例死亡患者中高表達(dá)8例(42.1%)，低表達(dá)11例(57.9%)。生存分析顯示，BLCAP基因表達(dá)在復(fù)發(fā)、病情進(jìn)展及死亡患者中的表達(dá)水平低于病情穩(wěn)定的患者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，見圖1、2。

圖1 BLCAP與AML患者總生存的關(guān)系

圖2 BLCAP與AML患者無事件生存的關(guān)系

3 討 論

BLCAP基因的確切功能目前尚不明確，早在1999年Gromova等[6]研究提示BLCAP基因可能是新的抑癌基因。此后有大量相關(guān)研究證實(shí)，BLCAP基因的表達(dá)與膀胱癌、乳腺癌、宮頸癌、骨肉瘤等惡性疾病相關(guān)[7-10]。但BLCAP基因表達(dá)與AML患者治療療效及預(yù)后的關(guān)系，目前國內(nèi)外未見報道。本文利用實(shí)時定量PCR(RQ-PCR)法檢測BLCAP基因表達(dá)，并回顧性分析AML患者的臨床病理資料。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果明確，入組AML患者均表達(dá)BLCAP基因，BLCAP基因的表達(dá)與年齡、血紅蛋白等指標(biāo)間有相關(guān)性，但與患者性別無相關(guān)，≤40歲患者BLCAP基因陽性表達(dá)明顯高于＞40歲患者，分析患者的療效并結(jié)合文獻(xiàn)，推測這與年輕患者的緩解率高相關(guān)，這也與AML常規(guī)臨床預(yù)后的的判斷與預(yù)測相一致[11]。

此外，生存分析明確，BLCAP基因高表達(dá)患者，EFS及OS率均明顯高于BLCAP基因低表達(dá)者，與文獻(xiàn)推測BLCAP基因可能是抑癌基因的結(jié)論相符合[12]。但BLCAP基因的表達(dá)和惡性病患者預(yù)后的關(guān)系，目前的研究結(jié)論并不一致。例如Moreira等[7]的研究發(fā)現(xiàn)，在Ewing's肉瘤中，BLCAP基因通過誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡而發(fā)揮雙向調(diào)節(jié)的作用。

總之，本研究初步明確，BLCAP基因的表達(dá)與AML患者的年齡等常規(guī)臨床預(yù)后指標(biāo)相關(guān)，年輕AML患者BLCAP基因的表達(dá)水平較高，臨床治療緩解率也較高。此外，BLCAP基因的表達(dá)與AML患者的療效及預(yù)后相關(guān)：其在治療后緩解者的表達(dá)高于未緩解者；治療后復(fù)發(fā)、病情進(jìn)展及死亡患者的BLCAP表達(dá)明顯低于治療后病情穩(wěn)定者。據(jù)此推測，檢測BLCAP基因在AML患者中的表達(dá)并結(jié)合常規(guī)臨床病理資料，可作為AML患者病情評估、療效預(yù)測的指標(biāo)。但確切的結(jié)論及BLCAP基因在AML患者中的作用機(jī)制，尚需深入研究明確。

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Expression and significance of BLCAP gene in patients with acute myeloid leukemia.

DONG Xiao-lin,ZHANG Shao-jun,YANG Jie.Physical Examination Center,People's Hospital Affiliated to Hubei Medicine College,Shiyan 442000, Hubei,CHINA

ObjectiveTo investigate the expression of bladder cancer associated protein(BLCAP)gene in patients with acute myeloid leukemia(AML)and its relationship with the curative effect and prognosis.MethodsThe pathological data of 138 patients with primary AML in Department of Hematology in our hospital from January 2008 to December 2012 were collected.The expression of BLCAP gene in bone marrow of AML patients were detected by real-time quantitative PCR(RQ-PCR),and the relationships between the expression of AML gene,clinical pathological indexes and therapeutic effect,prognosis were analyzed.ResultsBLCAP was expressed in AML patients,and BLCAP expression in AML patients with different ages,white blood cells(WBC),hemoglobin(Hb)and other indicators showed statistically significant differences(P＜0.05).The BLCAP expression of patients with remission after AML treatment and event-free survival was significantly higher than that of the patients without remission after AML treatment and patientswith relapse,disease progression and death(P＜0.05).ConclusionThe expression of BLCAP gene in patients with AML is related to the therapeutic effect and prognosis,and it is expected to be the index of AML's disease evaluation and curative effect prediction.However,this conclusion still needs further research to confirm.

Bladder cancer associated protein(BLCAP);Acute myeloid leukemia(AML);Prognosis;Pathological indexes

R733.71

A

1003—6350(2016）09—1409—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2016.09.012

2005-10-29)

楊潔。E-mail:146653354@qq.com