鼻咽癌患者放療前后同型半胱氨酸水平檢測的臨床意義

呂　蓉

(中山市中醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東中山 528400)

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·論著·

鼻咽癌患者放療前后同型半胱氨酸水平檢測的臨床意義

呂蓉

(中山市中醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東中山 528400)

摘要:目的探討檢測鼻咽癌患者放療前后同型半胱氨酸水平的臨床意義。方法2013年9月至2014年9月于該院確診的鼻咽癌患者62例納入觀察組，60例體檢健康者納入對照組。采集對照組1次靜脈血，采集觀察組鼻咽癌患者放療前及放療開始后1周、1月靜脈血，并采用循環(huán)酶法檢測同型半胱氨酸水平后進(jìn)行比較。結(jié)果放療前各分期鼻咽癌患者同型半胱氨酸水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=0.15，P=0.86)。觀察組患者放療前及放療后1周同型半胱氨酸水平均明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-12.1，P=0.00；t=-7.32，P=0.00)，放療后1月同型半胱氨酸水平與對照組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-1.45，P=0.15)。放療后1周及1月鼻咽癌患者同型半胱氨酸水平明顯降低，與放療前比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-5.22，P=0.00；t=-13.56，P=0.00)。結(jié)論鼻咽癌患者體內(nèi)同型半胱氨酸水平明顯升高，隨著放療的進(jìn)行，同型半胱氨酸水平呈下降趨勢，提示其對鼻咽癌的診斷及治療具有一定的指導(dǎo)價(jià)值，但不同分期鼻咽癌患者同型半胱氨酸水平無明顯差異。

關(guān)鍵詞:循環(huán)酶法；同型半胱氨酸；鼻咽癌

同型半胱氨酸是蛋氨酸分解的中間產(chǎn)物，主要通過再甲基化和分解代謝途徑進(jìn)行代謝。相關(guān)研究資料表明，同型半胱氨酸是高血壓、冠心病等心腦血管疾病的獨(dú)立危險(xiǎn)因子[1-3]，并且有學(xué)者提出其水平變化可能與某些免疫性疾病、精神分裂癥及糖尿病血管病變等有關(guān)[4-6]。目前，對于同型半胱氨酸與惡性腫瘤的關(guān)系也有了初步進(jìn)展，多數(shù)學(xué)者認(rèn)為同型半胱氨酸可能是惡性腫瘤的標(biāo)志物之一。本文通過循環(huán)酶法檢測同型半胱氨酸水平，探討其與鼻咽癌發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系，以及其在放療前后的變化，為臨床診斷及治療提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。

1資料與方法

1.1一般資料2013年9月至2014年9月本院確診的鼻咽癌患者62例納入觀察組，其中男46例，女16例，年女比例2.8∶1.0，年齡31～76歲，平均(48.5±12.5)歲，納入患者均結(jié)合臨床癥狀、體征、影像學(xué)及病理學(xué)檢查明確診斷，且未經(jīng)化療，排除患有其他惡性腫瘤，高血壓、腦血栓及心肌梗死等心腦血管疾病，精神分裂等神經(jīng)系統(tǒng)疾病，糖尿病，系統(tǒng)性紅斑狼瘡等免疫風(fēng)濕性疾病，以及其他基礎(chǔ)疾病者。按照中國鼻咽癌臨床分期工作委員會(huì)制定的中國2008分期系統(tǒng)進(jìn)行鼻咽癌分期[7]，其中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期患者分別為20、6、11、25例。另外選擇60例體檢健康者納入對照組，其中男44例，女16例，男女比例為2.6∶1.0，年齡31～71歲，平均(47.1±11.6)歲，均無高血壓、糖尿病等基礎(chǔ)疾病。2組受試者性別、年齡比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.008，P=0.930;t=-5.03，P=0.62)，具有可比性。

1.2方法觀察組鼻咽癌患者在放療前及放療開始后1周、1月均采集靜脈血，采集對照組受試者靜脈血1次，所有血液標(biāo)本均采用循環(huán)酶法檢測同型半胱氨酸水平，檢測儀器為日立7600全自動(dòng)生化分析儀，試劑盒由北京九強(qiáng)生物技術(shù)有限公司提供，所有操作均按儀器及試劑盒說明書進(jìn)行。

2結(jié)果

2.1不同分期鼻咽癌患者放療前同型半胱氨酸水平比較Ⅰ期鼻咽癌患者放療前同型半胱氨酸水平為(23.41±4.80)μmol/L，Ⅱ、Ⅲ期鼻咽癌患者放療前同型半胱氨酸水平為(22.75±5.74)μmol/L，Ⅳ期鼻咽癌患者放療前同型半胱氨酸水平為(22.47±4.84)μmol/L，放療前各分期鼻咽癌患者同型半胱氨酸水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=0.15，P=0.86)。

2.2鼻咽癌患者放療前后同型半胱氨酸水平比較觀察組患者放療前同型半胱氨酸水平明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-12.1，P=0.00)。觀察組患者放療后1周同型半胱氨酸水平明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-7.32，P=0.00)。放療后1周及1月鼻咽癌患者同型半胱氨酸水平明顯降低，與放療前比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-5.22，P=0.00；t=-13.56，P=0.00)。隨著放療的進(jìn)行，同型半胱氨酸水平呈下降趨勢，至放療后1月同型半胱氨酸水平與對照組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-1.45，P=0.15),2組同型半胱氨酸水平見表1。

表1　　鼻咽癌患者放療前后同型半胱氨酸水平與對照組

*：P<0.05，與對照組比較；#：P<0.05，與放療前比較。

3討論

同型半胱氨酸的檢測方法有很多種。其中ELISA法和熒光偏振免疫法是目前臨床上常用的方法。ELISA法操作方便、快捷、重復(fù)性較好，但是大部分操作需手工操作，耗時(shí)耗力[8]。熒光偏振免疫法檢測同型半胱氨酸精密度好、快速、準(zhǔn)確、穩(wěn)定性好，符合臨床需求，但檢測儀器及試劑價(jià)格昂貴[9]。高效液相色譜法由于具有較高的效率及靈敏度，曾作為臨床常用檢測方法，但由于其操作復(fù)雜，費(fèi)用較高，不能進(jìn)行大樣本檢測[10]。符俊超等[10]對循環(huán)酶法檢測同型半光氨酸的性能進(jìn)行了驗(yàn)證，認(rèn)為該方法在批內(nèi)重復(fù)性、批間精密度、分析測量范圍、抗干擾性、準(zhǔn)確度分析、正常參考范圍驗(yàn)證等方面均滿足臨床檢測要求，并且循環(huán)酶法操作簡單、快速，不需特殊設(shè)備，且可以對大批量標(biāo)本進(jìn)行同時(shí)自動(dòng)化分析。本研究采用循環(huán)酶法檢測同型半胱氨酸，提高了檢測的精密度及結(jié)果的準(zhǔn)確度，降低了成本，節(jié)約了檢測時(shí)間。

同型半胱氨酸是甲硫氨酸代謝的中間產(chǎn)物，參與了體內(nèi)多種疾病的發(fā)生、發(fā)展。同型半胱氨酸的代謝途徑主要有兩條[11-12]：(1)再甲基化途徑，此過程中需以維生素B12作為輔酶，N5-CH3-FH4提供甲基變?yōu)樗臍淙~酸，同型半胱氨酸獲得甲基重新形成蛋氨酸。(2)分解代謝途徑，此過程需以維生素B6為輔酶。以上兩種途徑均在肝臟進(jìn)行。同型半胱氨酸升高與體內(nèi)多種腫瘤的發(fā)生呈相關(guān)性。Aleksic等[12]研究了46例惡性腫瘤患兒及6例良性腫瘤患兒，發(fā)現(xiàn)惡性腫瘤患兒體內(nèi)同型半胱氨酸水平明顯高于良性腫瘤患兒，認(rèn)為同型半胱氨酸可以作為兒童惡性腫瘤的篩查標(biāo)志物。張少華等[13]檢測了93例原發(fā)性肝癌患者體內(nèi)同型半胱氨酸水平，Pirouzpanah等[14]檢測了141例乳腺癌患者體內(nèi)同型半胱氨酸水平，均發(fā)現(xiàn)其較健康者明顯升高。本研究中，鼻咽癌患者體內(nèi)同型半胱氨酸水平明顯高于健康者，與以上文獻(xiàn)報(bào)道一致。同時(shí)，研究發(fā)現(xiàn)放療后患者體內(nèi)同型半胱氨酸水平呈下降趨勢，并趨于正常，考慮與鼻咽癌患者腫瘤有所控制、病情好轉(zhuǎn)有關(guān)。以上結(jié)果提示同型半胱氨酸對鼻咽癌的診斷及治療具有一定的指導(dǎo)價(jià)值。

魏凱等[15]研究了42例非小細(xì)胞肺癌患者血清同型半胱氨酸、葉酸及維生素B12的水平，發(fā)現(xiàn)與健康者相比，非小細(xì)胞肺癌患者的同型半胱氨酸水平明顯升高，而葉酸及維生素B12明顯降低。因此，該研究者推測惡性腫瘤患者處于高代謝狀態(tài)，其代謝消耗大量葉酸及維生素B12，葉酸及維生素B12缺乏阻斷了同型半胱氨酸的再甲基化途徑，使同型半胱氨酸在體內(nèi)蓄積，從而導(dǎo)致同型半胱氨酸水平明顯升高。本研究結(jié)果驗(yàn)證了上述推測，由此可以提出假設(shè)，增加惡性腫瘤葉酸及維生素B12的攝入或許可作為惡性腫瘤的輔助治療方法，但目前國內(nèi)外對這方面的研究報(bào)道較少。

同型半胱氨酸通過多種途徑增加了血液的高凝狀態(tài)，促進(jìn)血栓形成，從而促進(jìn)惡性腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移。研究表明，同型半胱氨酸可通過增加內(nèi)皮素，降低一氧化氮及一氧化氮合酶水平，減少內(nèi)皮細(xì)胞蛋白質(zhì)巰基亞硝基化修飾等途徑對血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷，內(nèi)皮細(xì)胞損傷可促進(jìn)其脂質(zhì)蛋白氧化、炎性反應(yīng)和平滑肌細(xì)胞增生，從而促進(jìn)血栓形成[16-17]。同時(shí)，同型半胱氨酸所產(chǎn)生的過氧化氫可降低血液的抗凝活性，其衍生物可激活凝血因子，破壞機(jī)體的凝血-纖溶系統(tǒng)，增加血液的高凝狀態(tài)[18]。此外，同型半胱氨酸可增加血小板聚集性，使機(jī)體處于血栓前狀態(tài)。李志強(qiáng)等[19]研究了35例高同型半胱氨酸血癥患者及33例健康者，發(fā)現(xiàn)高同型半胱氨酸血癥患者血小板最大聚集率明顯高于健康者，認(rèn)為可能是同型半胱氨酸沉積于血管壁，通過炎性反應(yīng)激發(fā)血小板聚集。同型半胱氨酸再甲基化過程的中間產(chǎn)物S-腺苷蛋氨酸高度活化，廣泛參與體內(nèi)的甲基化反應(yīng)，其缺乏可影響DNA甲基化，影響DNA整合及修復(fù)等功能，激活原癌基因引起腫瘤生成。由此可見，同型半胱氨酸與惡性腫瘤相互作用，互為因果，促進(jìn)了腫瘤的生長、發(fā)展。本研究檢測了不同分期鼻咽癌患者同型半胱氨酸水平，發(fā)現(xiàn)各期同型半胱氨酸水平無明顯差異，表明同型半胱氨酸與鼻咽癌的發(fā)生關(guān)系密切，但其檢測值的高低不能提示鼻咽癌的發(fā)展程度。

綜上所述，鼻咽癌患者體內(nèi)同型半胱氨酸水平明顯升高，隨著放療的進(jìn)行，同型半胱氨酸水平呈下降趨勢，提示其對鼻咽癌的診斷及治療具有一定的指導(dǎo)價(jià)值，但不同鼻咽癌分期同型半胱氨酸水平無明顯差異，其水平不能提示鼻咽癌患者病情的進(jìn)展。

參考文獻(xiàn)

[1]王寧，余振球，周子杰．原發(fā)性高血壓患者血漿同型半胱氨酸與頸動(dòng)脈粥樣硬化的關(guān)系研究[J]．中國全科醫(yī)學(xué)，2010，13(12)：1263-1265．

[2]Shenoy V,Mehendale V,Prabhu K,et al.Correlation of serum homocysteine levels with the severity of coronary artery disease[J].Indian J Clin Biochem,2014,29(3):339-344.

[3]Qin X,Huo Y,Xie D,et al.Homocysteine-lowering therapy with folic acid is effective in cardiovascular disease prevention in patients with kidney disease:a meta-analysis of randomized controlled trials[J].Clinical nutrition (Edinburgh,Scotland),2013,32(5):722-727.

[4]Motegi S,Toki S,Yamada K,et al.Elevated plasma homocysteine level is possibly associated with skin sclerosis in a series of Japanese patients with systemic sclerosis[J].J Dermatol,2014,41(11):986-991.

[5]Nishi A,Numata S,Tajima A,et al.Meta-analyses of blood homocysteine levels for gender and genetic association studies of the MTHFR C677T polymorphism in schizophrenia[J].Schizophr Bull,2014,40(5):1154-1163.

[6]中國鼻咽癌臨床分期工作委員會(huì)．鼻咽癌′92分期修訂工作報(bào)告[J]．中華放射腫瘤學(xué)雜志，2009，18(1)：2-6．

[7]白鵬，羅雁，李英，等．基于濾紙微孔板的酶聯(lián)免疫吸附測定方法研究[J]．分析化學(xué)，2013，41(1)：20-24．

[8]鄢盛愷，宋耀虹，張春玲，等．熒光偏振免疫法檢測血漿同型半胱氨酸水平的臨床評價(jià)[J]．中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2001，24(1)：11-14．

[10]符俊超，邸玉瑋，鄭衛(wèi)東，等．循環(huán)酶法檢測同型半胱氨酸的性能驗(yàn)證分析[J]．中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2014(13)：1913-1915．

[11]顧炳權(quán)，王多寧．血漿同型半胱氨酸水平及臨床診斷意義[J]．中國血液流變學(xué)雜志，2004，14(4)：630-634．

[12]Aleksic D,Djokic D,Golubicic I,et al.The importance of the blood levels of homocysteine,folic acid and vitamin B12 in children with malignant diseases[J].J BUON,2013,18(4):1019-1025.

[13]張少華，梁健智，黃雄偉．血清同型半胱氨酸水平變化在原發(fā)性肝癌中的臨床價(jià)值[J]．現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2012，20(12)：2580-2581．

[14]Pirouzpanah S,Taleban FA,Mehdipour P,et al.Plasma total homocysteine level in association with folate,pyridoxine,and cobalamin status among iranian primary breast cancer patients[J].Nutr Cancer,2014,66(7):1097-1108.

[15]魏凱，黃毅超．血漿同型半胱氨酸、葉酸和維生素B12水平與非小細(xì)胞肺癌的關(guān)系[J]．國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2012，33(6)：699．

[16]薛莉，陳樹蘭，賈紹斌，等．同型半胱氨酸與冠心病的相關(guān)性及其機(jī)制探討[J]．中華心血管病雜志，2002，30(9)：11-15．

[17]Chen Y,Zhao S,Wang Y,et al.Homocysteine reduces protein S-nitrosylation in endothelium[J].Int J Mol Med,2014,34(5):1277-1285.

[18]董燕燕，陳光亮．高同型半胱氨酸血癥危害及致病機(jī)制研究進(jìn)展[J]．中國藥理學(xué)通報(bào)，2014，30(9)：1205-1208．

[19]李志強(qiáng)，張建平，趙明．高同型半胱氨酸血癥患者超敏C反應(yīng)蛋白水平、血小板聚集率與同型半胱氨酸水平的相關(guān)性研究[J]．中國實(shí)用神經(jīng)疾病雜志，2014(13)：38-40．

Clinical significance of homocysteine level detection before and after radiotherapy in patients with nasopharynx cancer

LvRong

(DepartmentofClinicalLaboratory,ZhongshanMunicipalHospitalofTraditional

ChineseMedicine,Zhongshan,Guangdong528400,China)

Abstract:ObjectiveTo investigate the clinical significance of detecting the homocysteine (Hcy) level by enzymatic cycling assay before and after radiotherapy in nasopharynx cancer.Methods62 cases of definitely diagnosed nasopharynx cancer in our hospital from September 2013 to September 2014 were included into the observation group and 60 individuals undergoing the physical examination were enrolled as the control group.The venous blood was collected once in the control group and was collected before radiotherapy and at 1 week,1 month after the radiotherapy beginning in the observation group.The enzymatic cycling assay was used to test the Hcy level.Then the detection results were compared between the two groups.ResultsThe Hcy level had no statistically significantly difference among different stages of nasopharynx cancer before radiotherapy(F=0.15，P=0.86).The Hcy level before radiotherapy and at 1 week after radiotherapy in the observation group were significantly higher than that in the control group,the difference was statistically significant(t=-12.1,P<0.05;t=-7.32,P=0.00).The Hcy level at 1 month after radiotherapy in the observation group had no statistical difference compared with that in the control group(t=-1.45，P=0.15).The Hcy level at 1 week and 1 month after radiotherapy in the observation group was significantly reduced,which showed statistical difference compared with before radiotherapy (t=-5.22，P=0.00；t=-13.56，P=0.00).ConclusionThe Hcy level in the patients with nasopharynx cancer is significantly increased,whereas with the conducting radiotherapy,which shows the decreasing trend,indicating that the Hcy level has certain guidance value for the diagnosis and treatment of nasopharynx cancer,but the Hcy level has no obvious difference among different stages of nasopharynx cancer.

Key words:enzymatic cycling assay;homocysteine;nasopharynx cancer

(收稿日期：2015-09-28)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.03.017

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1673-4130(2016)03-0331-03

作者簡介：呂蓉，女，主管技師，主要從事臨床檢驗(yàn)研究。