• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    HSP70—1基因多態(tài)性與2型糖尿病易感性關(guān)系研究

    2016-02-27 12:00楊毅楊陽
    中國現(xiàn)代醫(yī)生 2015年26期
    關(guān)鍵詞:攜帶者易感性多態(tài)性

    楊毅+楊陽

    [摘要] 目的 探討HSP70-1(+190G/C)基因多態(tài)性與2型糖尿病易感性關(guān)系。 方法 收集2013年1月~2015年1月在河南省上蔡縣人民醫(yī)院內(nèi)分泌科住院及健康體檢的人群資料,依照納入與排除標準,確定研究對象共480例,其中2型糖尿病患者(病例組)240例,男132例,女108例;健康人群(對照組)240例,男124例,女116例。對研究對象進行問卷調(diào)查、體格檢查和實驗室指標的測定,并采用PCR-RFLP技術(shù)檢測HSP70-1基因+190位點多態(tài)性。 結(jié)果 2型糖尿病病例組和對照組的HSP70-1各基因型及等位基因頻率差異無統(tǒng)計學意義(χ2=1.386,P>0.05;χ2=1.260,P>0.05);C/C基因型攜帶者的體質(zhì)指數(shù)明顯高于G/G基因型攜帶者,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。結(jié)論 HSP70-1基因+190位點基因多態(tài)性可能與糖尿病易感性無關(guān);C/C基因型增加了攜帶者患肥胖病的風險。

    [關(guān)鍵詞] 2型糖尿??;熱應(yīng)激蛋白70-1;+190位點;基因多態(tài)性

    [中圖分類號] R587.1 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-9701(2015)26-0001-03

    Heat stress protein 70-1 gene polymorphisms and the risk of type 2 diabetes

    YANG Yi1 YANG Yang2

    1.Department of Emergency, People's Hospital of Shangcai County in Henan Province, Shangcai 463800, China; 2.Department of Nosocomial Infection, the First Affiliated Hospital of Zhengzhou University, Zhengzhou 450052, China

    [Abstract] Objective To explore the association between HSP70-1 gene polymorphisms and type 2 diabetes. Methods According to the inclusion and exclusion criteria, a total of 480 population who received medical health examination and patients with type 2 diabetes in people's hospital of Shangcai from January 2013 to January 2015 were enrolled in the study. 240 patients were identified as a case group, including 108 women and 132 men, randomly selected 240 healthy people as a control group with 124 men and 116 women. Data was analyzed by physical examination, questionnaire and laboratory examination, and polymerasechain reaction-restrained fragment length polymorphism technique was used to analysed the polymorphisms of HSP70-1+190. Results There was no significant difference in the distribution of allele and genotypes frequencies of HSP70-1 between the type 2 diabetic group and control group (χ2=1.386,P>0.05; χ2=1.260, P>0.05); CC carriers had a higher level of BMI than GG carriers in HSP70-1 gene(P<0.05). Conclusion There is no significant correlation between HSP70-1+190 and type 2 diabetes;C/C genotype of HSP70-1(+190) is related to obesity,CC carrier had increased the susceptibility of obesity.

    [Key words] Type 2 diabetes; Heat shock protein 70-1 gene; +190 site; Gene polymorphism

    2型糖尿?。╰ype 2 diabetes mellitus,T2DM)是由多種病因引起的內(nèi)分泌代謝紊亂疾病, 其特點是胰島素相對或絕對分泌不足及其周圍組織發(fā)生胰島素抵抗,可造成蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物代謝紊亂,導(dǎo)致各種器官發(fā)生慢性損傷及功能障礙衰竭[1]。有較多數(shù)據(jù)表明[2],糖尿病可能與遺傳因子的易感性有關(guān),糖尿病易感性與相關(guān)候選基因多態(tài)性關(guān)系已成為目前研究的熱點。熱休克蛋白70(heat shock protein 70, HSP70)是指機體細胞在高溫下或受到其他有害因素刺激時,適應(yīng)性合成的一類結(jié)構(gòu)上高度保守的多肽,它能幫助恢復(fù)細胞的結(jié)構(gòu)與功能,并提高對應(yīng)激因素的抵抗力[3]。有研究報道[4],HSP70家族基因多態(tài)性與一些疾病的易感性密切相關(guān),HSP70基因多態(tài)性可能是2型糖尿病發(fā)病的重要機制之一。因此,本研究觀察并分析HSP70家族中HSP70-1基因多態(tài)性,探討2型糖尿病是否與HSP70-1(+190G/C)基因多態(tài)性有關(guān),為尋找人群易感生物標志物提供一定的思路和線索,現(xiàn)報道如下。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料

    采用病例-對照研究方法,依照納入與排除標準,選取2013年1月~2015年1月在河南省上蔡縣人民醫(yī)院內(nèi)分泌科及門診健康體檢的人群資料共480例作為研究對象。2型糖尿病患者(病例組)240例,男132例,女108例,平均年齡(56.9±7.6)歲;健康人群(對照組)240例,男124例,女116例,平均年齡(55.1±7.1)歲。

    1.2 診斷標準

    依照WHO1999年制訂的DM新的診斷標準[5]:糖尿病癥狀+空腹血漿血糖(FBG)≥7.0 mmol/L或餐后2 h隨機血漿血糖≥11.1 mmol/L或口服葡萄糖耐量試驗中,2 h血漿葡萄糖水平(P2BG)≥11.1 mmol/L。研究對象的籍貫均為河南省,且相互之間無血緣關(guān)系,并排除患有精神疾病、惡性腫瘤及拒絕配合等調(diào)查者的人群資料。

    1.3 方法

    1.3.1 一般情況及生化指標檢測 對調(diào)查對象進行問卷調(diào)查、體格檢查和實驗室指標的測定。通過問卷了解研究對象的一般情況,如性別、年齡、民族、疾病史、家族史等。體格檢查主要是進行身高、體重、血壓、腰圍、臀圍等指標檢測,并分析腰臀比值(WHR)和體質(zhì)指數(shù)(BMI)。生化指標檢測內(nèi)容:收集調(diào)查對象的血液樣本,進行空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(P2BG)、糖化血紅蛋白(HbA1C)、收縮壓(SBP)、舒張壓(DBP)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)等。

    1.3.2 HSP70-1基因多態(tài)性的檢測 采用PCR-RFLP技術(shù)測定HSP70-1(+190G/C)基因多態(tài)性。以抽提全血中DNA為模板,進行目的基因擴增,擴增目的片段為325bp。PCR擴增反應(yīng)引物序列:上游引物:5- TCCGGCGTCCGGAAGGACC-3;下游引物:5- TGCGGCCAATCAGGCGCTT-3。PCR擴增反應(yīng)條件:95℃預(yù)變性5 min→95℃變性35 s→58℃退火35 s→72℃延伸45 s,上述步驟共循環(huán)35次,最后72℃延伸10 min。然后取PCR擴增產(chǎn)物10 μL,加入限制性內(nèi)切酶(BsrBⅠ)進行酶切反應(yīng),根據(jù)目的蛋白分子量用3%瓊脂糖配置凝膠,在膠孔中加入8 μL酶切產(chǎn)物,于100 V恒壓下電泳25~30 min。在凝膠成像系統(tǒng)下觀察電泳結(jié)果,酶切反應(yīng)后G/G基因型酶切片段為171、70、84 bp,C/C基因型酶切片段為241、84 bp,G/C基因型酶切片段為241、70、84、171 bp。

    1.3.3 等位基因頻率計算 假設(shè)G/G基因型、G/C基因型、C/C基因型個數(shù)分別為a、b、c,基因型個數(shù)為N,基因型頻率分別為A、B、C。則A=a/N;B=b/N;C=c/N。G基因頻率=A+2/B;C基因頻率=C+2/B。

    1.4 統(tǒng)計學分析

    Epidata 3.2軟件錄入數(shù)據(jù),統(tǒng)計數(shù)據(jù)的分析使用SPSS19.0軟件。直接計數(shù)法計算各基因型的頻率,依據(jù)遺傳平衡定律的二項式公式分析各等位基因頻率;采用RxC的χ2檢驗分析各組基因型及等位基因頻率分布情況;多組間的比較采用單因素的方差分析。取檢驗水準α=0.05。

    2 結(jié)果

    2.1 兩組研究對象一般情況比較

    由表1可見,與對照組相比,病例組的FPG、P2BG、HbA1C、BMI、SBP、DBP、TG和LDL-C水平明顯增高,而HDL-C水平明顯降低,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。兩組性別、年齡、WHR和TC水平差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

    表1 病例組和對照組一般情況比較(x±s,n=240)

    注:與對照組比較,(1)P<0.05

    2.2 HSP70-1基因+190位點PCR擴增和酶切產(chǎn)物電泳結(jié)果

    HSP70-1基因+190位點的PCR擴增后,片段長度為325 bp,見封三圖1中1~6游道。HSP70-1的酶切產(chǎn)物進行瓊脂糖凝膠電泳后可見C/C基因型為241、84 bp 2個片段(第1泳道),G/G基因型攜帶者為70、84、171 bp 3個片段(第2泳道),G/C基因型為241、70、84、171 bp 4個片段(第3泳道)。見封三圖2。

    2.3 HSP70-1基因各個基因型及等位基因頻率的比較

    HSP70-1基因+190位點基因型頻率在病例組和對照組中分布差異無統(tǒng)計學意義(χ2=1.386,P>0.05);病例組與對照組的等位基因頻率分布差異無統(tǒng)計學意義(χ2=1.260,P>0.05)。見表2。

    2.4 HSP70-1基因+190位點不同基因型間的臨床資料比較

    在本次調(diào)查對象中,G/G基因型的攜帶者為260例,G/C基因型的攜帶者為187例,C/C基因型的攜帶者為26例。由表3可見,在BMI水平上,+190位點的不同基因型間差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),而不同基因型間的其他臨床指標差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。通過組間兩兩比較,結(jié)果發(fā)現(xiàn),與G/G基因攜帶者相比,C/C基因型攜帶者的BMI水平明顯增高,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

    表3 HSP70-1基因+190位點不同基因型間的臨床資料比較(x±s)

    注:與G/G基因型比較,(1)P<0.05

    3 討論

    熱休克蛋白又稱為熱應(yīng)激蛋白[6],機體細胞在高溫下或受到其他有害因素刺激時,會適應(yīng)性合成的一類結(jié)構(gòu)上高度保守的多肽,其中最為重要、誘導(dǎo)產(chǎn)生最強的是熱應(yīng)激蛋白70。人類HSP70基因定位于多條染色體上[7,8],其中HSP70-1、HSP70-2、HSP70-hom共同編碼分子量從66kD-78kD一類具有高度相關(guān)性的蛋白質(zhì)。有學者研究報道[9,10],HSP70基因多態(tài)性可能在2型糖尿病及其微血管病變的發(fā)病過程中起到重要作用。目前國內(nèi)研究中,有關(guān)2型糖尿病易感性與HSP70基因多態(tài)性關(guān)系尚缺乏較為完善的臨床證據(jù)。因此,本研究以內(nèi)分泌科2型糖尿病患者和體檢人群為調(diào)查對象,觀察2型糖尿病患者與正常人群的HSP70-1基因+190位點基因多態(tài)性的分布差異,以探討HSP70-1基因+190位點基因多態(tài)性與2型糖尿病易感性關(guān)系。

    有學者研究證實[11],HSP70-1基因-110位點和+190位點多態(tài)性均與2型糖尿病腎病相關(guān),而其是否與2型糖尿病有關(guān)尚不明確。本次研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),HSP70-1(+190G/C)的各基因型和等位基因頻率在2型糖尿病組與對照組中的分布差異無統(tǒng)計學意義,提示HSP70-1基因+190多態(tài)性可能與2型糖尿病易感性無關(guān)。通過genebank檢索報道,HSP70-1基因在120、190、438和-110等位點具有多態(tài)性,以上位點是否與2糖尿病易感性有關(guān)有待進一步證實。

    以往有學者研究報道[12],HSP70-1基因+190位點多態(tài)性可能與噪聲性耳聾、高原性反應(yīng)、多環(huán)芳烴類化合物等有關(guān),考慮可能由于190位點存在G→C的突變,引起HSP70-1肽結(jié)構(gòu)的改變,使之無法完成分子伴侶的功能,從而機體不能生成或轉(zhuǎn)運相應(yīng)蛋白以抵抗應(yīng)激,故C/C基因型可能與某些疾病易感性相關(guān)[13-15]。本研究分析了HSP70-1(+190G/C)的不同基因型攜帶者間臨床指標水平,結(jié)果顯示,與G/G基因攜帶者相比,C/C基因型攜帶者的BMI水平明顯增高,差異有統(tǒng)計學意義。BMI是常用的衡量肥胖的依據(jù),其是反應(yīng)全身性性肥胖的一個較好依據(jù)。本次研究結(jié)果提示,HSP70-1基因的C/C基因型可能與全身性肥胖關(guān)系密切,其可能明顯升高了攜帶者患肥胖病的風險。

    綜上所述,HSP70-1基因+190位點多態(tài)性與本次研究人群的2型糖尿病易感性無關(guān)。然而,C/C基因型可能與肥胖相關(guān),其增加了攜帶者患全身性肥胖的風險。熱休克蛋白70作為一個多基因家族,其在生物進化中可能同時存在遺傳和變異,而HSP70-1、HSP70-2和HSP70-hom等基因位點多態(tài)性是否與2型糖尿病及其相關(guān)指標有關(guān),尚需大量研究加以證實,以期為尋找糖尿病及其相關(guān)疾病易感生物標志物提供線索。

    [參考文獻]

    [1] Chogtu B,Magazine R,Bairy KL. Statin use and risk of diabetes mellitus[J]. World J Diabetes,2015,6(2):352-357.

    [2] Li Q,Qiao ZR,Liu DB,et al. Relationship between serum GAD-Ab and the genetic polymorphisms of GAD2 and type 2 diabetes mellitus[J]. Genet Mol Res,2015,14(2):3002-3009.

    [3] Habich C,Sell H. Heat shock proteins in obesity:Links to cardiovascular disease[J]. Horm Mol Biol Clin Investig,2015,21(2):117-24.

    [4] Nakhjavani M,Morteza A,Nargesi AA,et al. Appearance of leptin-HSP70 correlation,in type 2 diabetes[J]. Meta Gene,2013,8(1):1-7.

    [5] 錢榮立. 關(guān)于糖尿病的新診斷標準與分型[J]. 中國糖尿病雜志,2000,1(8):5-7.

    [6] Banerjee S,Mitra T,Purohit GK,et al. Immunomodulatory effect of arsenic on cytokine and HSP gene expression in Labeo rohita fingerlings[J]. Fish Shellfish Immunol,2015, 44(1):43-49.

    [7] Bianchi A,Moulin D,Hupont S,et al. Oxidative stress-induced expression of HSP70 contributes to the inhibitory effect of 15d-PGJ2 on inducible prostaglandin pathway in chondrocytes[J]. Free Radic Biol Med,2014,76(9):114-126.

    [8] Porto I,Leone AM,Crea F,et al. Inflammation,genetics,and ischemic heart disease:Focus on the major histocompatibility complex(MHC) genes[J]. Cytokine,2005,29(5):187-196.

    [9] Tessari P,Puricelli L,Iori E,et al. Altered chaperone and protein turnover regulators expression incultured skin fibroblasts from type 1 diabetes mellitus with nephropathy[J].J Proteome Res,2007,6(3):976-986.

    [10] Giacconi R,Caruso C,Lio D,et al. 1267 HSP72 polymorphism as a risk factor for carotid plaque rupture and cerebral ischemia in old type 2 diabetes:Atherosclerotic patients[J]. Mech Ageing Dev,2005,126(8):866-873.

    [11] Garbuz DG,Astakhova LN,Zatsepina OG,et al. Functional organization of hsp70 cluster in camel(Camelus dromedarius) and other mammals[J]. PLoS One,2011,6(11):e27205.

    [12] Rohan S,Ryan SC,Sarah LE,et al. Hsp70 Architecture: The formation of novel polymeric structures of Hsp70.1 and Hsc70 after Proteotoxic Stress[J]. PLoS One,2012,7(12):e52351.

    [13] Lindsey AM,Inga IK,Carlene SB,et al. Inner ear supporting cells protect hair cells by secreting HSP70[J]. J Clin Invest,2013,123(8):3577-3587.

    [14] Berka N,Bland GN,Erabhaoiel H,et al. Heat-stress protein gene is not associated with type-1 diabetes in African Americans[J]. J Natl Med Assoc,2007,99(7):715-716.

    [15] Yang X,Yuan J,Sun J,et al. Association between heat-stress protein 70 gene polymorphisms and DNA damage in peripheral blood lymphocytes among coke-oven workers[J]. Mutat Res,2008,649(1-2):221-229.

    (收稿日期:2015-06-04)

    猜你喜歡
    攜帶者易感性多態(tài)性
    艾滋病病毒攜帶者的社會支持研究進展
    單核苷酸多態(tài)性與中醫(yī)證候相關(guān)性研究進展
    乙肝病毒攜帶者需要抗病毒治療嗎?
    NRG1-ErbB4基因多態(tài)性與局灶性癲癇易感性的關(guān)系
    我國女性艾滋病毒攜帶者的生育權(quán)選擇探析
    與細菌攜帶者決戰(zhàn)
    馬鈴薯cpDNA/mtDNA多態(tài)性的多重PCR檢測
    GlobalFiler~? PCR擴增試劑盒驗證及其STR遺傳多態(tài)性
    CD14啟動子-260C/T基因多態(tài)性與胃癌易感性的Meta分析
    α1抗胰蛋白酶基因多態(tài)性與肺癌易感性的研究
    伊人久久国产一区二区| 国国产精品蜜臀av免费| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 男女边摸边吃奶| 欧美区成人在线视频| 波野结衣二区三区在线| av天堂中文字幕网| 免费大片黄手机在线观看| 国产伦在线观看视频一区| 伦理电影大哥的女人| 精品少妇黑人巨大在线播放| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 欧美+日韩+精品| 黄色一级大片看看| 1000部很黄的大片| 边亲边吃奶的免费视频| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| av播播在线观看一区| 91aial.com中文字幕在线观看| 亚洲精品日韩av片在线观看| 最新中文字幕久久久久| 国产不卡一卡二| 国产一区二区在线观看日韩| 亚洲国产精品专区欧美| 日韩人妻高清精品专区| 精品熟女少妇av免费看| 精品人妻偷拍中文字幕| eeuss影院久久| 日韩伦理黄色片| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 2018国产大陆天天弄谢| av又黄又爽大尺度在线免费看| av又黄又爽大尺度在线免费看| www.色视频.com| 亚洲精品日韩av片在线观看| 草草在线视频免费看| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 午夜福利网站1000一区二区三区| 在线a可以看的网站| 亚洲人成网站高清观看| 美女被艹到高潮喷水动态| 精品久久久噜噜| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 久久久久性生活片| 国产精品久久久久久久久免| 国产一级毛片在线| 欧美丝袜亚洲另类| 亚洲最大成人手机在线| 国产人妻一区二区三区在| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 三级毛片av免费| 国产视频内射| 成年人午夜在线观看视频 | 你懂的网址亚洲精品在线观看| 大香蕉久久网| 网址你懂的国产日韩在线| 黄色配什么色好看| 国产黄片美女视频| 网址你懂的国产日韩在线| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 日本-黄色视频高清免费观看| 国产成人精品久久久久久| 一区二区三区高清视频在线| 欧美人与善性xxx| 欧美激情久久久久久爽电影| 国产淫语在线视频| 国产欧美日韩精品一区二区| 看黄色毛片网站| 午夜精品国产一区二区电影 | 超碰97精品在线观看| 亚洲无线观看免费| 欧美潮喷喷水| 午夜免费男女啪啪视频观看| 18禁动态无遮挡网站| 男女那种视频在线观看| 久久久欧美国产精品| 十八禁网站网址无遮挡 | 男女下面进入的视频免费午夜| av免费观看日本| av免费观看日本| 亚洲av男天堂| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 在线观看一区二区三区| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 久久久成人免费电影| 久久久久久伊人网av| 国产成人免费观看mmmm| 最近最新中文字幕免费大全7| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 少妇人妻一区二区三区视频| 久久这里只有精品中国| 日日撸夜夜添| 97超视频在线观看视频| 五月玫瑰六月丁香| 五月玫瑰六月丁香| 精品久久国产蜜桃| 国产亚洲最大av| 午夜亚洲福利在线播放| 欧美成人a在线观看| 久久国内精品自在自线图片| 97精品久久久久久久久久精品| 欧美日韩亚洲高清精品| 国产大屁股一区二区在线视频| 国产伦理片在线播放av一区| 黄色配什么色好看| 成人毛片60女人毛片免费| 国产黄频视频在线观看| 精品国产三级普通话版| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 中国国产av一级| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 国产亚洲精品久久久com| 国产精品国产三级国产专区5o| 国产精品蜜桃在线观看| 高清在线视频一区二区三区| 久久草成人影院| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 99久国产av精品| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 日韩视频在线欧美| 97超碰精品成人国产| 九草在线视频观看| 精品熟女少妇av免费看| 久久99精品国语久久久| 久久这里只有精品中国| 男女边摸边吃奶| av免费观看日本| 国产精品一及| 久久久久久国产a免费观看| 两个人视频免费观看高清| 2021少妇久久久久久久久久久| 久久精品久久久久久久性| 99久久人妻综合| 特大巨黑吊av在线直播| 国产乱人偷精品视频| 秋霞伦理黄片| 成年版毛片免费区| 麻豆久久精品国产亚洲av| 我的老师免费观看完整版| 国产 一区精品| 97超视频在线观看视频| 国产综合精华液| 性色avwww在线观看| 午夜激情欧美在线| 高清毛片免费看| 十八禁国产超污无遮挡网站| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 国产毛片a区久久久久| 国产免费一级a男人的天堂| 日韩中字成人| 久久久久久久久久黄片| 91久久精品国产一区二区三区| 一区二区三区四区激情视频| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 99热全是精品| 九九爱精品视频在线观看| 亚洲美女搞黄在线观看| 秋霞伦理黄片| 亚洲最大成人中文| 肉色欧美久久久久久久蜜桃 | 欧美日韩亚洲高清精品| 成人美女网站在线观看视频| 久久久久免费精品人妻一区二区| 欧美人与善性xxx| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 九草在线视频观看| 麻豆久久精品国产亚洲av| 中文字幕免费在线视频6| 精品人妻一区二区三区麻豆| 免费人成在线观看视频色| 不卡视频在线观看欧美| 免费观看在线日韩| 亚洲欧美日韩无卡精品| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 色综合站精品国产| 欧美一区二区亚洲| 国模一区二区三区四区视频| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 亚洲天堂国产精品一区在线| 91精品一卡2卡3卡4卡| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 身体一侧抽搐| 少妇丰满av| 久久精品综合一区二区三区| 在线观看免费高清a一片| 久久精品夜色国产| 观看免费一级毛片| 亚洲在线自拍视频| 人妻一区二区av| av.在线天堂| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 男女下面进入的视频免费午夜| 97在线视频观看| 国产成人a∨麻豆精品| 三级国产精品片| 男女那种视频在线观看| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 精品人妻偷拍中文字幕| 又大又黄又爽视频免费| 麻豆国产97在线/欧美| 一夜夜www| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 久久久久性生活片| 免费少妇av软件| 免费大片黄手机在线观看| 日韩av在线免费看完整版不卡| 精品久久久久久久久亚洲| 日韩三级伦理在线观看| 精品国产三级普通话版| 少妇的逼好多水| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 国产精品女同一区二区软件| 乱人视频在线观看| 一区二区三区乱码不卡18| 亚洲精品成人av观看孕妇| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 内射极品少妇av片p| av网站免费在线观看视频 | 精品人妻视频免费看| 777米奇影视久久| 一二三四中文在线观看免费高清| 18禁在线播放成人免费| 婷婷色综合www| 嘟嘟电影网在线观看| 亚洲丝袜综合中文字幕| 亚洲成色77777| 黄片无遮挡物在线观看| 男女边吃奶边做爰视频| 精品久久久精品久久久| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 九九爱精品视频在线观看| 91精品国产九色| 久久亚洲国产成人精品v| 免费观看在线日韩| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 婷婷色麻豆天堂久久| 黑人高潮一二区| 精品一区二区免费观看| 综合色丁香网| 久99久视频精品免费| 久久久久久久久久久丰满| 少妇的逼水好多| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 最新中文字幕久久久久| 亚洲av.av天堂| 精品久久国产蜜桃| 免费观看的影片在线观看| 成人鲁丝片一二三区免费| 老女人水多毛片| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 老司机影院成人| 久久久久久久国产电影| 国产午夜精品一二区理论片| 看免费成人av毛片| 日韩精品青青久久久久久| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 亚洲精品久久午夜乱码| 午夜激情福利司机影院| 国产色爽女视频免费观看| 久久久久久久久久久免费av| 亚洲熟女精品中文字幕| 舔av片在线| 在线免费十八禁| 建设人人有责人人尽责人人享有的 | av在线观看视频网站免费| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 午夜老司机福利剧场| 女人被狂操c到高潮| 欧美97在线视频| av福利片在线观看| 永久网站在线| 欧美精品一区二区大全| 久久久久久伊人网av| 亚洲国产欧美人成| 春色校园在线视频观看| 亚洲av在线观看美女高潮| 亚洲人成网站在线观看播放| 国产一级毛片七仙女欲春2| 99久久精品热视频| 午夜亚洲福利在线播放| 国产成人aa在线观看| 99热这里只有是精品50| 亚洲av二区三区四区| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 亚洲av成人av| 美女cb高潮喷水在线观看| 日本三级黄在线观看| 亚洲色图av天堂| 亚洲精品成人久久久久久| 一级毛片 在线播放| 亚洲精品影视一区二区三区av| 熟妇人妻不卡中文字幕| 久久久久久久久久成人| 国产精品福利在线免费观看| 成人漫画全彩无遮挡| 久久精品国产亚洲网站| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 免费无遮挡裸体视频| 午夜福利在线在线| 久久久精品94久久精品| 精品一区二区三区视频在线| 日韩欧美精品免费久久| 晚上一个人看的免费电影| 中文资源天堂在线| 亚洲精品亚洲一区二区| 少妇的逼好多水| 午夜福利视频1000在线观看| 欧美成人午夜免费资源| 国产毛片a区久久久久| 久久国产乱子免费精品| 精品一区在线观看国产| 2021少妇久久久久久久久久久| 最近最新中文字幕大全电影3| 久久久久久久久久成人| 国产精品一区二区在线观看99 | 波多野结衣巨乳人妻| 国产毛片a区久久久久| 日韩av在线免费看完整版不卡| 看非洲黑人一级黄片| 久久久成人免费电影| 青春草亚洲视频在线观看| 国产精品国产三级国产专区5o| 亚洲av在线观看美女高潮| 伦理电影大哥的女人| 免费高清在线观看视频在线观看| 美女黄网站色视频| 国产精品久久视频播放| 午夜福利成人在线免费观看| 欧美潮喷喷水| 国产精品综合久久久久久久免费| 国产精品一区二区三区四区久久| 一级毛片我不卡| 亚洲av电影不卡..在线观看| 少妇熟女aⅴ在线视频| av播播在线观看一区| 深爱激情五月婷婷| 国产视频内射| 午夜免费观看性视频| 日本黄大片高清| 日韩三级伦理在线观看| 毛片女人毛片| 十八禁国产超污无遮挡网站| 欧美激情国产日韩精品一区| 深夜a级毛片| 一二三四中文在线观看免费高清| 亚洲精品456在线播放app| 亚洲欧美日韩东京热| 少妇被粗大猛烈的视频| 亚洲精品影视一区二区三区av| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 日本免费在线观看一区| 国产成年人精品一区二区| 中文乱码字字幕精品一区二区三区 | 国产成人aa在线观看| 国产又色又爽无遮挡免| 汤姆久久久久久久影院中文字幕 | or卡值多少钱| 韩国av在线不卡| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 亚洲精品视频女| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 国产一级毛片在线| 一个人看的www免费观看视频| 亚洲成人中文字幕在线播放| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 又爽又黄无遮挡网站| 少妇高潮的动态图| 色综合亚洲欧美另类图片| 在现免费观看毛片| 中文字幕av在线有码专区| 亚洲成人精品中文字幕电影| 成人午夜高清在线视频| 亚洲久久久久久中文字幕| 国产精品1区2区在线观看.| 国内揄拍国产精品人妻在线| 男女视频在线观看网站免费| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 成年女人在线观看亚洲视频 | 少妇裸体淫交视频免费看高清| 麻豆av噜噜一区二区三区| 国产高清不卡午夜福利| av在线天堂中文字幕| 亚洲av不卡在线观看| 成年版毛片免费区| 搡女人真爽免费视频火全软件| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 精品久久久久久久久久久久久| 老司机影院毛片| 我的女老师完整版在线观看| 亚洲最大成人手机在线| av在线老鸭窝| 国内精品美女久久久久久| 久久久久久国产a免费观看| 日韩一区二区三区影片| 十八禁网站网址无遮挡 | 九九爱精品视频在线观看| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 内地一区二区视频在线| 精品不卡国产一区二区三区| 午夜激情久久久久久久| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 国产一区二区三区综合在线观看 | 嫩草影院精品99| 亚洲精品中文字幕在线视频 | 婷婷色综合www| 成人一区二区视频在线观看| freevideosex欧美| 亚洲国产欧美在线一区| 男人和女人高潮做爰伦理| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 成人亚洲欧美一区二区av| 国产一区亚洲一区在线观看| 99九九线精品视频在线观看视频| 99热这里只有精品一区| 欧美日韩综合久久久久久| 99久久中文字幕三级久久日本| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 97在线视频观看| 久久99热6这里只有精品| 国产精品.久久久| 少妇被粗大猛烈的视频| 性色avwww在线观看| 少妇的逼水好多| 91av网一区二区| 亚洲欧美清纯卡通| 日韩一区二区视频免费看| 精华霜和精华液先用哪个| 国产免费视频播放在线视频 | 国产午夜福利久久久久久| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 免费人成在线观看视频色| 黄片无遮挡物在线观看| 亚洲精品国产av成人精品| 国产亚洲av片在线观看秒播厂 | 可以在线观看毛片的网站| 国产极品天堂在线| 六月丁香七月| 国产午夜精品一二区理论片| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 久久久久久久久久黄片| 成年av动漫网址| 久久99蜜桃精品久久| 亚洲精品成人av观看孕妇| 国产免费福利视频在线观看| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 麻豆成人av视频| 国产黄a三级三级三级人| 国产 一区 欧美 日韩| 26uuu在线亚洲综合色| 秋霞在线观看毛片| 国产高潮美女av| 日韩成人av中文字幕在线观看| 国产一区有黄有色的免费视频 | 国产探花极品一区二区| 在线免费观看的www视频| 久久久久性生活片| 国产精品人妻久久久久久| 亚洲伊人久久精品综合| 国产乱来视频区| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 国产精品福利在线免费观看| 精品久久久久久久久av| 亚洲国产最新在线播放| 黄色欧美视频在线观看| 精品人妻偷拍中文字幕| 青青草视频在线视频观看| 中文在线观看免费www的网站| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 国产免费视频播放在线视频 | 男女那种视频在线观看| 亚洲精品,欧美精品| 97热精品久久久久久| 成年av动漫网址| 欧美精品一区二区大全| 一级二级三级毛片免费看| 高清毛片免费看| 91久久精品电影网| 国精品久久久久久国模美| 可以在线观看毛片的网站| 成年版毛片免费区| 亚洲自偷自拍三级| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 成人高潮视频无遮挡免费网站| 亚洲av中文av极速乱| 亚洲欧洲日产国产| 2021少妇久久久久久久久久久| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久 | 大陆偷拍与自拍| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 丝瓜视频免费看黄片| 特级一级黄色大片| 色吧在线观看| 青春草国产在线视频| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 亚洲乱码一区二区免费版| 久久午夜福利片| 午夜福利成人在线免费观看| 午夜视频国产福利| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 日日撸夜夜添| 99热全是精品| 十八禁国产超污无遮挡网站| 中文字幕av成人在线电影| 一级毛片久久久久久久久女| 国产成人精品一,二区| 亚洲成人中文字幕在线播放| 三级毛片av免费| 国产毛片a区久久久久| 国产精品三级大全| 又爽又黄无遮挡网站| 人妻夜夜爽99麻豆av| 亚洲国产精品成人综合色| 日韩视频在线欧美| 国产精品1区2区在线观看.| 精品人妻偷拍中文字幕| 国产综合精华液| 啦啦啦韩国在线观看视频| 精品久久久久久久久亚洲| 高清日韩中文字幕在线| 成人av在线播放网站| 99re6热这里在线精品视频| 亚洲欧洲国产日韩| 少妇人妻精品综合一区二区| 在线a可以看的网站| 日韩强制内射视频| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 麻豆乱淫一区二区| 在线a可以看的网站| 国产高清国产精品国产三级 | 免费观看的影片在线观看| 十八禁国产超污无遮挡网站| 五月伊人婷婷丁香| 久久精品久久精品一区二区三区| 国产高清三级在线| 深夜a级毛片| 婷婷色综合www| 精品少妇黑人巨大在线播放| 亚洲自偷自拍三级| 97热精品久久久久久| 不卡视频在线观看欧美| 国产男人的电影天堂91| 婷婷色av中文字幕| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 一级毛片我不卡| 国产成人精品福利久久| 高清av免费在线| 亚洲av在线观看美女高潮| 亚洲乱码一区二区免费版| 国产精品一区www在线观看| 大香蕉久久网| av在线天堂中文字幕| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 五月玫瑰六月丁香| 久久久久九九精品影院| 亚洲成色77777| 欧美另类一区| 成人特级av手机在线观看| av在线老鸭窝| 99热网站在线观看| 大片免费播放器 马上看| 看免费成人av毛片| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 在线免费观看不下载黄p国产| 欧美一级a爱片免费观看看| 午夜福利高清视频| 大香蕉97超碰在线| 人体艺术视频欧美日本| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 中文字幕亚洲精品专区| 亚洲国产精品sss在线观看| 人妻系列 视频| 看十八女毛片水多多多| 日本与韩国留学比较| 丰满少妇做爰视频| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久 | 听说在线观看完整版免费高清| 国产毛片a区久久久久| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 麻豆成人av视频| 丰满少妇做爰视频| 欧美精品一区二区大全| 三级国产精品片| 精品国产三级普通话版| 久久精品夜色国产| 哪个播放器可以免费观看大片| 直男gayav资源| 日韩欧美精品v在线| 亚洲国产欧美人成| 亚洲精品一区蜜桃| 亚洲av国产av综合av卡| 国产精品久久视频播放| 97热精品久久久久久| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 欧美精品国产亚洲| 亚洲精品日本国产第一区| 中文在线观看免费www的网站| 亚洲av.av天堂| 精品久久久久久成人av| 国产 亚洲一区二区三区 | 久久久久九九精品影院| 欧美激情久久久久久爽电影| 69av精品久久久久久| 九草在线视频观看| 免费观看a级毛片全部| 婷婷色av中文字幕| 久久久亚洲精品成人影院| 日韩 亚洲 欧美在线| 国产精品99久久久久久久久| av在线天堂中文字幕| 中文在线观看免费www的网站| 欧美极品一区二区三区四区|