HACH速測(cè)法與國(guó)標(biāo)法測(cè)定對(duì)蝦養(yǎng)殖水體氮磷含量的比較

徐　煜，曹煜成，文國(guó)樑，王善龍，李卓佳，徐武杰，胡曉娟

(中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院南海水產(chǎn)研究所，農(nóng)業(yè)部南海漁業(yè)資源開發(fā)利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，

廣東省漁業(yè)生態(tài)環(huán)境重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣州　510300)

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HACH速測(cè)法與國(guó)標(biāo)法測(cè)定對(duì)蝦養(yǎng)殖水體氮磷含量的比較

徐煜，曹煜成，文國(guó)樑，王善龍，李卓佳，徐武杰，胡曉娟

(中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院南海水產(chǎn)研究所，農(nóng)業(yè)部南海漁業(yè)資源開發(fā)利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，

廣東省漁業(yè)生態(tài)環(huán)境重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣州510300)

摘要：為探討HACH速測(cè)法檢測(cè)對(duì)蝦養(yǎng)殖水體氮磷含量的可行性，應(yīng)用HACH速測(cè)法和國(guó)標(biāo)法(GB 17378.4-2007) 檢測(cè)對(duì)蝦池塘水體NH3-N、NO2--N和PO43-含量，分析兩種方法測(cè)定結(jié)果及其相互關(guān)系；并研究了對(duì)蝦養(yǎng)殖池塘水樣直接過濾測(cè)定、過濾低溫凍存和低溫凍存過濾三種處理方法對(duì)NH3-N、NO2--N和PO43-檢測(cè)結(jié)果的影響。結(jié)果顯示，HACH速測(cè)法檢測(cè)NH3-N、NO2--N和PO43-的標(biāo)準(zhǔn)曲線線性良好，檢測(cè)結(jié)果與國(guó)標(biāo)法檢測(cè)結(jié)果差異顯著(P<0.05)，但兩者之間有顯著的線性關(guān)系，線性方程分別為Y(NH3-N)=0.891X(NH3-N)-0.006；Y(NO2--N)=1.657X(NO2--N)+0.004；Y(PO43-)=0.901X(PO43-)-0.018(Y為國(guó)標(biāo)法檢測(cè)值，X為HACH速測(cè)法檢測(cè)值)；HACH速測(cè)法檢測(cè)養(yǎng)殖水體的結(jié)果利用建立的函數(shù)方程進(jìn)行換算，獲得的計(jì)算值與國(guó)標(biāo)法檢測(cè)值無顯著性差異；經(jīng)三種方法處理后的對(duì)蝦池塘水體NH3-N、NO2--N檢測(cè)值之間無顯著差異，但經(jīng)凍存處理兩組水樣的PO43-含量顯著低于直接過濾檢測(cè)組PO43-含量，凍存處理組之間PO43-含量無明顯差異。結(jié)果表明，HACH速測(cè)法可用于檢測(cè)養(yǎng)殖水體NH3-N、NO2--N和PO43-含量，但檢測(cè)結(jié)果需要經(jīng)函數(shù)轉(zhuǎn)化；為保證水樣檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，待檢水樣需要采取合適的保存方式或者立即進(jìn)行測(cè)定。

關(guān)鍵詞：對(duì)蝦養(yǎng)殖水體；NH3-N；NO2--N；PO43-；HACH速測(cè)法；水樣保存

Comparison of nitrogen and phosphorus detection results of

“養(yǎng)殖先養(yǎng)水”，水產(chǎn)養(yǎng)殖過程中，水質(zhì)對(duì)養(yǎng)殖動(dòng)物具有重要的影響。隨著養(yǎng)殖密度急劇增加和飼料投喂量大幅度上升，養(yǎng)殖水體的水質(zhì)越來越差。而養(yǎng)殖水體的主要污染源來自氮、碳、磷、硫等物質(zhì)，其中，氨氮(NH3-N)、亞硝酸鹽氮(NO2--N)對(duì)水生動(dòng)物具有極強(qiáng)的神經(jīng)性毒害[1-2]。研究表明，養(yǎng)殖水體高濃度的NH3-N和NO2--N會(huì)增加病毒的感染度[3-4]，同時(shí)也會(huì)降低對(duì)蝦的免疫能力甚至引起養(yǎng)殖動(dòng)物中毒死亡[5]。磷通常被認(rèn)為是限制養(yǎng)殖池塘初級(jí)生產(chǎn)力的重要元素之一[6-8]，而與生物效應(yīng)相關(guān)的磷的存在形態(tài)是水溶性活性磷酸鹽(PO43-)[9]。因此，定期檢測(cè)養(yǎng)殖水體NH3-N、NO2--N和PO43-的濃度，并及時(shí)控制在適宜的濃度范圍內(nèi)，對(duì)養(yǎng)殖動(dòng)物的健康生長(zhǎng)是十分重要的。

目前，檢測(cè)NH3-N、NO2--N和PO43-的方法有質(zhì)譜法、色譜法、電化學(xué)法、比色法、分光光度法等[10-12]。質(zhì)譜法和色譜法檢測(cè)結(jié)果精確，且適宜大批量樣品檢測(cè)，但是需要昂貴的儀器設(shè)備和專業(yè)的技術(shù)操作[10]，不適宜在養(yǎng)殖場(chǎng)使用；電化學(xué)法反應(yīng)靈敏，操作簡(jiǎn)便，但易受高濃度離子的影響，尤其是待測(cè)溶液含有的有機(jī)成分會(huì)對(duì)測(cè)定造成較大影響[13]，因此不適宜檢測(cè)有機(jī)物含量豐富的養(yǎng)殖水體；比色法操作簡(jiǎn)單，反應(yīng)快速，但是檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確度低，宜用于粗略判斷水質(zhì)；分光光度法檢測(cè)結(jié)果穩(wěn)定且準(zhǔn)確，所需的成本也較便宜，是漁業(yè)水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)、海洋監(jiān)測(cè)規(guī)范、海洋調(diào)查規(guī)范等多項(xiàng)中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法(下文簡(jiǎn)稱“國(guó)標(biāo)法”)檢測(cè)NH3-N、NO2--N和PO43-采用的方法[14-16]。國(guó)標(biāo)法檢測(cè)操作步驟相對(duì)繁雜，所需準(zhǔn)備的試劑品種多樣，其中某些試劑要求現(xiàn)用現(xiàn)配，操作人員需經(jīng)過一定時(shí)間的培訓(xùn)才能準(zhǔn)確掌握，因此更適宜為實(shí)驗(yàn)室所采用。大多數(shù)養(yǎng)殖從業(yè)者配置的水質(zhì)檢測(cè)設(shè)施相對(duì)簡(jiǎn)單，無法滿足國(guó)標(biāo)法監(jiān)測(cè)水質(zhì)的要求，亟需建立便捷且準(zhǔn)確的水質(zhì)檢測(cè)方法，滿足生產(chǎn)應(yīng)用的實(shí)際需求。HACH速測(cè)法是美國(guó)哈希公司研發(fā)的一種適用于野外快速檢測(cè)水質(zhì)的方法，目前國(guó)內(nèi)外已有學(xué)者采用HACH速測(cè)法檢測(cè)生活用水、工業(yè)廢水和湖泊等水體的水質(zhì)[17-22]。對(duì)此，本研究以HACH分光光度計(jì)為檢測(cè)平臺(tái)，使用HACH配套試劑包，檢測(cè)對(duì)蝦養(yǎng)殖池塘水體NH3-N、NO2--N和PO43-的含量，同時(shí)以國(guó)標(biāo)法-海洋監(jiān)測(cè)規(guī)范(GB 17378.4-2007)進(jìn)行測(cè)定，分析兩種方法所測(cè)結(jié)果的數(shù)量關(guān)系，探討HACH速測(cè)法測(cè)定養(yǎng)殖水體氮磷含量的可行性；并就池塘水樣直接采樣測(cè)定、過濾低溫凍存和低溫凍存過濾三種處理方法對(duì)NH3-N、NO2--N和PO43-檢測(cè)結(jié)果的影響進(jìn)行分析。以期為水產(chǎn)養(yǎng)殖生產(chǎn)建立準(zhǔn)確快速測(cè)定水體氮磷指標(biāo)的方法提供參考。

1材料與方法

1.1水樣

標(biāo)準(zhǔn)溶液：依照《海洋監(jiān)測(cè)規(guī)范：海水分析》(GB 17378.4-2007)，以硫酸銨、亞硝酸鈉和磷酸二氫鉀分別配制不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液[15]。

養(yǎng)殖水樣：參考李奕雯等[23]的采樣方法，用有機(jī)玻璃柱狀采水器在中山大學(xué)珠海海洋生物技術(shù)研究開發(fā)中心的養(yǎng)殖池塘進(jìn)行水樣采集。水樣分別經(jīng)過三種方式進(jìn)行處理，TⅠ為采集的水樣經(jīng)0.45 μm濾膜過濾后立即測(cè)定；TⅡ?yàn)樗畼咏?jīng)濾膜過濾后置于-20 ℃凍存10 d，解凍后再行測(cè)定；TⅢ為水樣直接置于-20 ℃凍存10 d，解凍后經(jīng)濾膜過濾后測(cè)定。水體鹽度為5 g/L，溫度為23 ℃。

1.2試劑與儀器

HACH速測(cè)法所采用的試劑均購(gòu)于美國(guó)HACH公司，型號(hào)分別為Ammonia cyanurate 和Ammonia salicylate reagent(檢測(cè)NH3-N)，Nitriver 3 Nitrite reagent(檢測(cè)NO2--N)，phosver 3 phosphate reagent(檢測(cè)PO43-)。國(guó)標(biāo)法檢測(cè)所用試劑嚴(yán)格依照GB 17378.4-2007測(cè)定NH3-N、NO2--N和PO43-的要求進(jìn)行配制。

儀器：HACH DR/2400型分光光度計(jì)(HACH，美國(guó))。

1.3方法

HACH速測(cè)法(Rapid detection method,RDM)根據(jù)產(chǎn)品說明書選擇水楊酸分光光度法(#8155)、重氮偶氮法(#8507)和抗壞血酸法(#8048)分別測(cè)定水樣中NH3-N、NO2--N和PO43-的含量[2]。國(guó)標(biāo)法(National standard method,NSM)依照GB 17378.4-2007的要求，以靛酚藍(lán)分光光度法、萘乙二胺分光光度法和磷鉬藍(lán)分光光度法分別測(cè)定水樣中NH3-N、NO2--N和PO43-的含量[15]。

參照GB 17378.4-2007配制標(biāo)準(zhǔn)溶液。其中，硫酸銨標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為0.000 mg/L、0.030 mg/L、0.060 mg/L、0.090 mg/L、0.120 mg/L、0.150 mg/L；亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為0.000 mg/L、0.010 mg/L、0.020 mg/L、0.030 mg/L、0.040 mg/L、0.050 mg/L；磷酸二氫鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為0.000 mg/L、0.030 mg/L、0.060 mg/L、0.120 mg/L、0.180 mg/L、0.240 mg/L。分別使用RDM和NSM方法檢測(cè)，并以吸光值為X軸，濃度為Y軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

以硫酸銨、亞硝酸鈉和磷酸二氫鉀分別隨機(jī)配制5個(gè)不同濃度的溶液作為待測(cè)樣品，分別以HACH速測(cè)法與GB 17378.4-2007檢測(cè)NH3-N、NO2--N和PO43-的濃度，分析兩種方法檢測(cè)結(jié)果之間的差異，并構(gòu)建兩者的函數(shù)關(guān)系。

采集對(duì)蝦養(yǎng)殖池塘水樣，經(jīng)0.45 μm濾膜過濾，分別使用HACH速測(cè)法與GB 17378.4-2007檢測(cè)NH3-N、NO2--N和PO43-的含量，并驗(yàn)證上述構(gòu)建的函數(shù)方程。

對(duì)蝦養(yǎng)殖池塘水樣采集后，依照1.1三種方法處理，然后使用HACH速測(cè)法檢測(cè)水質(zhì)。分析不同的水樣處理方式對(duì)NH3-N、NO2--N和PO43-檢測(cè)結(jié)果的影響。

1.4數(shù)據(jù)處理與分析

測(cè)定結(jié)果以Excel 2007和SPSS 16.0進(jìn)行處理與分析。對(duì)兩種方法所測(cè)得標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光值進(jìn)行Pearson相關(guān)系數(shù)檢驗(yàn)；對(duì)養(yǎng)殖水樣的HACH速測(cè)法測(cè)定結(jié)果及其轉(zhuǎn)化值與國(guó)標(biāo)法測(cè)定結(jié)果分別進(jìn)行T-檢驗(yàn)；對(duì)三種預(yù)處理方式下養(yǎng)殖水樣的HACH速測(cè)法測(cè)定結(jié)果進(jìn)行單因素方差分析(ANOVA)，并用Duncan檢驗(yàn)法進(jìn)行多重比較，差異顯著水平為0.05。

2結(jié)果與分析

2.1檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)曲線

如圖1所示，HACH速測(cè)法檢測(cè)NH3-N、NO2--N和PO43-標(biāo)準(zhǔn)曲線的擬合度系數(shù)(R2)分別等于0.997、0.995和 0.996，國(guó)標(biāo)法檢測(cè)NH3-N、NO2--N和PO43-標(biāo)準(zhǔn)曲線的R2分別等于0.998、0.999和0.998。HACH速測(cè)法以及國(guó)標(biāo)法標(biāo)準(zhǔn)曲線的擬合度系數(shù)都不低于0.995，說明標(biāo)準(zhǔn)曲線的使用價(jià)值較高。

2.2HACH速測(cè)法與國(guó)標(biāo)法檢測(cè)參比水樣結(jié)果的相關(guān)性分析

HACH速測(cè)法與國(guó)標(biāo)法檢測(cè)NH3-N、NO2--N和PO43-的吸光值之間存在較大差異，它們之間的相對(duì)偏差如表1所示，NH3-N為11.7%~29.2%，NO2--N為37.8%~44.3%，PO43-為16.6%~83.6%。分析兩種方法檢測(cè)值間的數(shù)量關(guān)系，結(jié)果如圖2所示，NH3-N、NO2--N和PO43-HACH速測(cè)法與國(guó)標(biāo)法檢測(cè)值之間的回歸擬合方程分別為Y(NH3-N)=0.891X(NH3-N)-0.006，Y(NO2--N)=1.657X(NO2--N)+0.004，Y(PO43-)=0.901X(PO43-)-0.018，其中，Y為國(guó)標(biāo)法檢測(cè)值，X為HACH速測(cè)法檢測(cè)值。曲線擬合度系數(shù)R2分別為0.998、0.994、0.995(圖2)，說明HACH速測(cè)法檢測(cè)值與國(guó)標(biāo)法檢測(cè)值之間存在良好的線性關(guān)系。

2.3HACH速測(cè)法與國(guó)標(biāo)法檢測(cè)養(yǎng)殖水樣結(jié)果及兩者間函數(shù)關(guān)系驗(yàn)證

如表2所示，池塘水樣NH3-N含量最高，NO2--N和PO43-的含量相對(duì)較低。NH3-N和PO43-的HACH速測(cè)法檢測(cè)值高于國(guó)標(biāo)法檢測(cè)值，而NO2--N的HACH速測(cè)法檢測(cè)值低于國(guó)標(biāo)法檢測(cè)值。分析三個(gè)指標(biāo)HACH速測(cè)法和國(guó)標(biāo)法檢測(cè)值之間的差異，結(jié)果顯示，兩種方法檢測(cè)NH3-N吸光值無顯著性差異(P>0.05)，NO2--N和PO43-兩種方法的檢測(cè)值之間具有顯著性差異(P<0.05)。將NH3-N、NO2--N和PO43-HACH速測(cè)法檢測(cè)值通過本文2.2中的曲線方程轉(zhuǎn)換獲得轉(zhuǎn)化值，分析轉(zhuǎn)化值與國(guó)標(biāo)法檢測(cè)值的差異性，發(fā)現(xiàn)它們之間不存在顯著性差異(P>0.05)。NH3-N的HACH速測(cè)法檢測(cè)值雖然與國(guó)標(biāo)法檢測(cè)值無明顯差異，但轉(zhuǎn)換后的數(shù)值(0.381)與國(guó)標(biāo)法檢測(cè)值更接近(0.379)。

圖1　HACH速測(cè)法與國(guó)標(biāo)法檢測(cè)NH3-N、NO2--N和PO43-標(biāo)準(zhǔn)曲線

組別NH3-NNO2--NPO43-RDMNSM相對(duì)偏差RDMNSM相對(duì)偏差RDMNSM相對(duì)偏差樣品10.1070.08722.9%0.0390.06943.4%0.0900.04983.6%樣品20.1780.14829.2%0.0860.13938.1%0.1610.10061.0%樣品30.2710.23117.3%0.1260.20839.4%0.2670.19934.1%樣品40.3460.30015.3%0.1620.29144.3%0.3790.32516.6%樣品50.4290.38411.7%0.2230.35937.8%0.4920.41618.2%

圖2　NH3-N、NO2--N和PO43-HACH速測(cè)法與國(guó)標(biāo)法檢測(cè)值的關(guān)系

檢測(cè)指標(biāo)速測(cè)法檢測(cè)值國(guó)標(biāo)法檢測(cè)值轉(zhuǎn)化值P1P2NH3(0.434±0.021)mg/L(0.379±0.001)mg/L0.381mg/L0.0690.917NO2-(0.081±0.003)mg/L(0.140±0.013)mg/L0.142mg/L0.019*0.881PO43-(0.103±0.006)mg/L(0.068±0.001)mg/L0.069mg/L0.029*0.386

注：轉(zhuǎn)化值為速測(cè)法值經(jīng)函數(shù)轉(zhuǎn)換后的計(jì)算值；P1代表HACH速測(cè)法與國(guó)標(biāo)法檢測(cè)值差異性，P2代表轉(zhuǎn)化值與國(guó)標(biāo)法檢測(cè)值差異性；*表示存在顯著性差異，P<0.05。

2.4水樣不同處理方式對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響

對(duì)蝦養(yǎng)殖池塘水樣經(jīng)三種不同方式處理后，使用HACH速測(cè)法檢測(cè)NH3-N、NO2--N和PO43-的含量。如表3所示，三個(gè)處理組的 NH3-N檢測(cè)值差異不顯著(P>0.05)，NO2--N檢測(cè)值亦無明顯差別(P>0.05)，而立即過濾立即檢測(cè)組水樣(TⅠ組)PO43-的檢測(cè)值則明顯高于冷凍保存10 d 后水樣PO43-的檢測(cè)值(TⅡ組及TⅢ組)(P<0.05)。

表3　水樣經(jīng)不同方式處理后的檢測(cè)值

注：*表示存在差異顯著，P<0.05。

3結(jié)論與討論

漁業(yè)水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)(GB11607-89)規(guī)定檢測(cè)的水質(zhì)指標(biāo)包括：pH值、溶解氧、生物需氧量、總大腸桿菌、非離子氨、滴滴涕、重金屬等有害物質(zhì)，其中非離子氨的檢測(cè)采用納氏試劑分光光度法或水楊酸分光光度法。由于漁業(yè)水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)制定年份較早，許多水質(zhì)指標(biāo)如NO2--N、PO43-等并未包含，所以本研究國(guó)標(biāo)法未采用漁業(yè)水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)。海洋監(jiān)測(cè)規(guī)范(GB 17378.4-2007)可用于海洋環(huán)境監(jiān)測(cè)、常規(guī)水質(zhì)監(jiān)測(cè)、近岸淺水區(qū)環(huán)境污染調(diào)查監(jiān)測(cè)等，且檢測(cè)的水質(zhì)指標(biāo)較為全面。因此，本研究的國(guó)標(biāo)法采用的是海洋監(jiān)測(cè)規(guī)范(GB 17378.4-2007)。GB 17378.4-2007檢測(cè) NH3-N的方法為靛酚藍(lán)分光光度法，HACH速測(cè)法檢測(cè)NH3-N所采用的方法為水楊酸分光光度法。兩種方法的檢測(cè)原理都是在弱堿性介質(zhì)中，水中的氨、銨離子與苯酚和次氯酸鹽在亞硝酰鐵氰化鈉的催化作用下反應(yīng)生成藍(lán)色化合物，在640 nm處用分光光度計(jì)測(cè)定吸光值[15,24]。

GB 17378.4-2007檢測(cè)NO2--N的方法為萘乙二胺分光光度法，其原理為在酸性介質(zhì)中亞硝酸鹽與磺胺進(jìn)行重氮化反應(yīng)，其產(chǎn)物再與鹽酸萘乙二胺偶合生成紅色偶氮染料，在543 nm波長(zhǎng)測(cè)定吸光值[15]。由于檢測(cè)過程發(fā)生重氮化反應(yīng)，所以HACH速測(cè)法稱之為重氮或偶氮法(Diazotization Method)。HACH速測(cè)法與GB 17378.4-2007檢測(cè)PO43-均采用磷鉬藍(lán)分光光度法，其原理是在酸性介質(zhì)中，活性磷酸鹽與鉬酸銨反應(yīng)生成磷鉬黃，用抗壞血酸還原為磷鉬藍(lán)后，于882 nm波長(zhǎng)測(cè)定吸光值[15]，也稱為抗壞血酸法[24]或者抗壞血酸還原磷鉬藍(lán)法[16]。本研究結(jié)果顯示，HACH速測(cè)法與GB 17378.4-2007檢測(cè)NH3-N、NO2--N-、PO43-標(biāo)準(zhǔn)曲線的擬合程度都較高，擬合系數(shù)R2均不低于0.995，說明HACH速測(cè)法與GB 17378.4-2007檢測(cè)系統(tǒng)都較為穩(wěn)定，均可用于養(yǎng)殖水質(zhì)的監(jiān)測(cè)。有學(xué)者提出不同檢測(cè)方法測(cè)定同一水質(zhì)指標(biāo)的吸光值會(huì)存在一定偏差，如于立婷等[17]指出HACH速測(cè)法與采用《水和廢水監(jiān)測(cè)分析方法》檢測(cè)NH3-N結(jié)果的平均偏差值為20.23%；周婷等[18]也提出采用HACH速測(cè)法檢測(cè)濃度較高或有機(jī)物含量較高的工業(yè)廢水的總磷含量結(jié)果與水質(zhì)總磷測(cè)定方法(GB 11893-89)檢測(cè)結(jié)果有較大差異。我們研究同樣發(fā)現(xiàn)HACH速測(cè)法與GB 17378.4-2007檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)溶液的結(jié)果之間也存在較大的偏差，NH3-N為11.7%~29.2%，NO2--N為37.8%~44.3%，PO43-為16.6%~83.6%，但是它們之間有良好線性關(guān)系，線性方程分別為Y(NH3-N)=0.891X(NH3-N)-0.006，Y(NO2--N)=1.657X(NO2--N)+0.004，Y(PO43-)=0.901X(PO43-)-0.018，Y為國(guó)標(biāo)法檢測(cè)值，X為HACH速測(cè)法檢測(cè)值，曲線擬合度系數(shù)R2分別為0.998、0.994、0.995。此外，本研究發(fā)現(xiàn)直接采用HACH速測(cè)法和GB 17378.4-2007檢測(cè)對(duì)蝦養(yǎng)殖池塘水體NO2--N和PO43的結(jié)果也存在顯著性差異，不過通過線性方程將HACH速測(cè)法檢測(cè)養(yǎng)殖水體的結(jié)果進(jìn)行轉(zhuǎn)換，發(fā)現(xiàn)所得的數(shù)值與GB 17378.4-2007檢測(cè)值無顯著差異，說明HACH速測(cè)法檢測(cè)養(yǎng)殖池塘水體NH3-N、NO2--N和PO43-的數(shù)值經(jīng)特定的函數(shù)校驗(yàn)和轉(zhuǎn)換計(jì)算，可獲得準(zhǔn)確結(jié)果。

科學(xué)的樣品保存方法對(duì)保證所測(cè)水質(zhì)指標(biāo)的準(zhǔn)確性具有重要的意義。有學(xué)者指出，水體氮磷營(yíng)養(yǎng)鹽含量在常溫下會(huì)隨時(shí)間發(fā)生較大的波動(dòng)，在低溫、冷凍、加入保護(hù)劑(如酸、堿、氯仿、氯化汞、甲 醛等)等條件下保存相對(duì)較穩(wěn)定[2]。林晶等[25]認(rèn)為冷凍和冷藏更適用于營(yíng)養(yǎng)鹽的短期保存，氯仿、甲醛等試劑不但毒性大，而且加入這些保護(hù)劑會(huì)影響樣品的檢測(cè)結(jié)果，酸化處理的樣品檢測(cè)前還需校正酸堿度。本研究探討了三種不同水樣處理方法對(duì)NH3-N、NO2--N和PO43-檢測(cè)結(jié)果的影響，結(jié)果顯示，三個(gè)處理組的NH3-N和NO2--N的檢測(cè)結(jié)果間不存在顯著性差異，表明樣品經(jīng)過-20 ℃冷凍10 d不會(huì)對(duì)NH3-N和NO2--N的檢測(cè)結(jié)果造成明顯影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)了多數(shù)學(xué)者的觀點(diǎn)：冷凍處理能較好保持水樣的穩(wěn)定性[25-26]。研究發(fā)現(xiàn)冷凍樣品的PO43-檢測(cè)值明顯降低，與以往的報(bào)道相似[27]，推測(cè)可能是因?yàn)樗畼釉诶鋬龊徒鈨鲞^程中，磷元素發(fā)生化學(xué)反應(yīng)形成沉淀或其他聚合物，導(dǎo)致PO43-的濃度降低。因此，冷凍處理不適宜檢測(cè)磷水樣的保存。徐志標(biāo)等[28]研究表明，對(duì)于磷樣品，在4 ℃加入氯仿，樣品的保存效果最好。在條件允許的情況下，為確保所檢測(cè)水質(zhì)指標(biāo)的準(zhǔn)確性，水樣最好能及時(shí)處理和檢測(cè)，對(duì)確實(shí)需要保存的樣品，則應(yīng)根據(jù)所需檢測(cè)指標(biāo)選擇適宜的保存方法。

本研究以HACH DR/2400分析儀為檢測(cè)平臺(tái)，分析了HACH速測(cè)法測(cè)定水質(zhì)結(jié)果的準(zhǔn)確性及其與國(guó)標(biāo)法測(cè)定結(jié)果的相互關(guān)系，建立了兩者間的函數(shù)換算方程，形成了快速檢測(cè)并獲得準(zhǔn)確檢測(cè)結(jié)果的技術(shù)措施。目前，HACH速測(cè)法在國(guó)內(nèi)外已被應(yīng)用于湖泊、河流等淡水水質(zhì)檢測(cè)[17,20]，但在水質(zhì)檢測(cè)中，離子的濃度和種類組成對(duì)檢測(cè)結(jié)果影響較大，本研究所檢測(cè)的養(yǎng)殖池塘水體為低鹽度海水，后續(xù)還需要研究針對(duì)高鹽度水體檢測(cè)的技術(shù)，進(jìn)一步完善HACH速測(cè)法在養(yǎng)殖生產(chǎn)中的應(yīng)用和推廣，為實(shí)現(xiàn)“測(cè)水養(yǎng)殖”提供技術(shù)支持。

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(責(zé)任編輯：張紅林)

shrimp aquatic water by HACH rapid detection method

and national standard method

XU Yu,CAO Yu-cheng,WEN Guo-liang,WANG Shan-long,LI Zhuo-jia,

XU Wu-jie,HU Xiao-juan

(SouthChinaSeaFisheriesResearchInstitute,ChineseAcademyofFisherySciences/

KeyLaboratoryofSouthChinaSeaFisheryResearchExploitation&Utilization,MinistryofAgriculture,P.R.China/

KeyLaboratoryofGuangdongFisheriesEcologicalEnvironment)

Abstract：HACH rapid detection method and national standard method (GB 17378.4-2007) were employed to detect the concentrations of ammonia nitrogen,nitrite and phosphate in shrimp ponds water,and their quantitative relationships of detection results were analyzed.Moreover,the effects of three different treatment methods of water sample on the detection results were also analysed,which included only filtrated,forzen for ten days at -20 ℃ and then filtrated,and filtrated and then forzen for ten days at -20 ℃.The results showed that the standard curves of HACH rapid detection method had high linearity.The HACH detection results were significantly different from those measured by national standard method (P<0.05).However,there were good linear relationships between the results of both methods,and the linear equations were Y(NH3-N)=0.891X(NH3-N)-0.006,Y(NO2--N)=1.657X(NO2--N)+0.004,Y(PO43-)=0.901X(PO43-)-0.018 (Y presents the detection results by national standard method,X presents the detection results by HACH rapid detection method).The HACH rapid detection results of shrimp aquatic water were modified by these particular equations to get new calculated values,which were not significantly different from the detection results by national standard method (P>0.05).Ammonia nitrogen and nitrite concentrations of water sample were not significantly changed under the three water sample treatment methods.Phosphate concentration reduced obviously in frozen water samples.In conclusion,HACH rapid detection methods could be used to measure the concentrations of nitrogen and phosphorus compounds in aquatic water,and the detection results need to be recalculated through particular equations.Besides,the water samples should be measured immediately after the collection.

Key words：shrimp aquatic water;ammonia;nitrite;phosphate;HACH rapid detection method;water preservation method

中圖分類號(hào)：S932.9

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1000-6907-(2016)01-0059-07

作者簡(jiǎn)介：第一徐煜(1987-)，男，研究實(shí)習(xí)員，主要從事養(yǎng)殖環(huán)境調(diào)控研究。E-mail:xuyublq@163.com通訊作者：李卓佳。E-mail:zhuojiali609@163.com

收稿日期：2015-02-06；

修訂日期：2015-06-23

資助項(xiàng)目：蝦產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系專項(xiàng)(CARS-47)；公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(xiàng)(201103034)；廣東省科技計(jì)劃(2012B020308003)；南海水產(chǎn)研究所中央級(jí)科研院所基本科研專項(xiàng)(2015TS13)；農(nóng)業(yè)科技成果轉(zhuǎn)化項(xiàng)目(2014GB2E2 00118)