奶牛子宮內(nèi)膜炎病原菌的分離鑒定及藥敏試驗(yàn)

魏有芳

(新疆克州畜禽繁育改良站，新疆 克州 845350)

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奶牛子宮內(nèi)膜炎病原菌的分離鑒定及藥敏試驗(yàn)

魏有芳

(新疆克州畜禽繁育改良站，新疆 克州 845350)

摘要：為了使奶牛子宮內(nèi)膜炎病原菌的研究更加細(xì)致，在具體研究過(guò)程中，選取了某奶牛場(chǎng)的20只患有子宮內(nèi)膜炎的病牛進(jìn)行研究。取得這20只病牛的子宮內(nèi)分泌物，并對(duì)這些子宮分泌物進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)、細(xì)菌分離并純化等技術(shù)，同時(shí)使用最新的微生物鑒定儀和藥敏分析儀對(duì)提取出來(lái)的子宮分泌物進(jìn)行鑒定與藥敏實(shí)驗(yàn)。進(jìn)行生化鑒定的結(jié)果表明：患病奶牛的子宮分泌物中有多種不同的細(xì)菌。而隨后對(duì)這些提取物進(jìn)行藥敏實(shí)驗(yàn)的結(jié)果則表明：慶大霉素和妥布霉素對(duì)從病牛體內(nèi)采取的子宮分泌物中的細(xì)菌起到很好的抑制作用，所以以這兩種抗生素為主要原料生產(chǎn)的藥物治療患有子宮內(nèi)膜炎的奶牛能夠收到比較理想的療效。

關(guān)鍵詞：奶牛；子宮內(nèi)膜炎；病原菌分離；鑒定；藥敏試驗(yàn)

1子宮內(nèi)膜炎的危害

子宮內(nèi)膜炎是指奶牛身體內(nèi)的炎癥僅僅發(fā)生在子宮內(nèi)膜的一種疾病，這種疾病給整個(gè)飼養(yǎng)奶牛的行業(yè)都帶來(lái)了很大的困擾。[1]奶牛在成長(zhǎng)的過(guò)程中若感染子宮內(nèi)膜炎，會(huì)對(duì)生產(chǎn)能力造成非常嚴(yán)重的影響，情況嚴(yán)重的甚至?xí)?dǎo)致奶牛不孕不育癥。而患有子宮內(nèi)膜炎的奶牛，其產(chǎn)奶量也會(huì)受到影響，不僅產(chǎn)奶的數(shù)量減少，產(chǎn)奶的質(zhì)量也因患病而大大降低。以上這些影響都極大地增加了飼養(yǎng)者在飼養(yǎng)過(guò)程中所需要投入的成本，與此同時(shí)，奶牛因患病而淘汰率也大大提高，給整個(gè)飼養(yǎng)奶牛的產(chǎn)業(yè)帶來(lái)非常巨大的損失。按照臨床對(duì)奶?；加凶訉m內(nèi)膜炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)，選取出患病的奶牛進(jìn)行研究，主要是為了避免在治療過(guò)程中因?yàn)E用抗生素類藥物而使奶牛體內(nèi)產(chǎn)生耐藥菌株，造成其他不必要損失，同時(shí)也為治療子宮內(nèi)膜炎提供了更多的理論依據(jù)。

2采取樣本、細(xì)菌鑒定

準(zhǔn)備好試驗(yàn)過(guò)程中所需要的試劑和設(shè)備，對(duì)選取的20頭患有子宮內(nèi)膜炎的奶牛提取其子宮的分泌物。在提取之前，應(yīng)先將患病奶牛的陰部進(jìn)行徹底的清洗，然后再由專業(yè)人士對(duì)奶牛進(jìn)行直腸檢察，用手將奶牛的子宮頸部握住，以使患病奶牛子宮內(nèi)的黏液能夠流出陰道。最初流出的黏液因其在取得之前就已與空氣接觸可能會(huì)有些雜質(zhì)，因而不便于對(duì)其進(jìn)行鑒定，所以應(yīng)收集在中間或者最后流出的黏液。在收集的過(guò)程中為使其污染達(dá)到最小，應(yīng)用事先準(zhǔn)備好的青霉素瓶快速的收集，收集完成后及時(shí)密封，并迅速將收集到的黏液帶到實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行分離鑒定。[2]

盡量保持整個(gè)實(shí)驗(yàn)的過(guò)程中取得的黏液不被空氣中細(xì)菌感染。將取得的黏液取出適量與事先準(zhǔn)備好的無(wú)菌生理鹽水進(jìn)行1∶9的混合，然后再用一定的方法將混合好的黏液稀釋液稀釋成1∶100和1∶1000不同的比例。然后取同樣數(shù)量的1∶1000的稀釋液分別涂在普通瓊脂培養(yǎng)皿和鮮血瓊脂培養(yǎng)皿中，在同樣的環(huán)境下進(jìn)行培養(yǎng)、觀察和記錄。再用顯微鏡觀察，找出不純的菌落并對(duì)其進(jìn)行進(jìn)一步的純化，將純化后的菌落移入液體培養(yǎng)皿中繼續(xù)培養(yǎng)，并用甘油對(duì)其進(jìn)行保存。將培養(yǎng)皿中的細(xì)菌進(jìn)行分類和編號(hào)，并對(duì)這些不同編號(hào)的細(xì)菌分別進(jìn)行不同的試驗(yàn)鑒定。例如氫化酶試驗(yàn)、接觸酶試驗(yàn)等能鑒定出不同細(xì)菌的類型。[3]

3分離培養(yǎng)提取的細(xì)菌并進(jìn)行藥敏試驗(yàn)

對(duì)2個(gè)不同培養(yǎng)皿中的菌落進(jìn)行了測(cè)試和鑒定之后發(fā)現(xiàn)，患有子宮內(nèi)膜炎奶牛的子宮黏液中，主要致病菌為大腸埃希菌，還有一些致病菌為科氏葡萄球菌、干燥棒狀桿菌、魯氏不動(dòng)桿菌，除此之外患病奶牛的子宮黏液中還有些極少量的其他細(xì)菌。藥敏試驗(yàn)結(jié)果：慶大霉素和妥布霉素能夠有效的對(duì)抗大腸桿菌，而培氟沙星對(duì)大腸桿菌的療效遠(yuǎn)遠(yuǎn)不如前兩種抗生素。但是培氟沙星對(duì)魯氏桿菌卻有很好的抵制作用，而對(duì)黏液中其他細(xì)菌的抑制作用最強(qiáng)的是慶大霉素，其次是四環(huán)素、左氟沙星和利福平等抗生素。所以，在臨床對(duì)患病奶牛進(jìn)行治療的時(shí)候，應(yīng)該根據(jù)其黏液中的細(xì)菌情況選擇合適的藥物，以免病牛造成不必要的傷害。

4結(jié)論

在對(duì)病牛子宮黏液中的細(xì)菌進(jìn)行分離鑒定和藥敏試驗(yàn)的過(guò)程中，用2個(gè)不同的培養(yǎng)皿對(duì)其細(xì)菌進(jìn)行培養(yǎng)、觀察和記錄，發(fā)現(xiàn)2個(gè)不同培養(yǎng)皿中細(xì)菌的生長(zhǎng)數(shù)量幾乎沒(méi)有差異，試驗(yàn)結(jié)果表明，黏液內(nèi)的細(xì)菌對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)沒(méi)有特殊的要求。在試驗(yàn)的過(guò)程中，檢測(cè)到黏液內(nèi)有多種不同的致病菌，有的細(xì)菌在其他的地區(qū)甚至沒(méi)有被發(fā)現(xiàn)和提及過(guò)。所以，很可能是不同地區(qū)的環(huán)境差異造成，奶牛的生長(zhǎng)環(huán)境由多種不同的因素組成，而這些不同的因素下形成了不同的致病菌。此外，研究人員在進(jìn)行試驗(yàn)時(shí)，采取試驗(yàn)方法的微小差異也可能出現(xiàn)這種情況。隨后的藥敏試驗(yàn)結(jié)果表明，臨床上可以用慶大霉素、妥布霉素和培氟沙星等抗生素對(duì)患有子宮內(nèi)膜炎的奶牛進(jìn)行治療。

參考文獻(xiàn)：

[1] 王爽,和翀翼,劉文,等.黑龍江地區(qū)奶牛子宮內(nèi)膜炎病原菌的分離鑒定與藥物敏感性試驗(yàn)[J].中國(guó)獸藥雜志，2008(05)：65.

[2] 李世宏,楊國(guó)林,楊銳樂(lè),等.奶牛子宮內(nèi)膜炎研究進(jìn)展[J].中國(guó)奶牛，2007(01):22.

[3] 趙紅瓊,黃燕,陳杖榴,等.新疆地區(qū)奶牛子宮內(nèi)膜炎病原菌的分離鑒定及其對(duì)抗菌藥的敏感性試驗(yàn)[J].中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志，2005(02)：53.

收稿日期:2016-01-15

作者簡(jiǎn)介：魏有芳(1971-)，女，大專，畜牧師，主要從事畜牧相關(guān)工作。

中圖分類號(hào)：S858.23

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B

文章編號(hào)：2095-9737(2016)06-0161-01