ZNF282蛋白在食管鱗癌中的表達(dá)及預(yù)后的意義

王麗強(qiáng)　金連花　張佰玲　玄延花

(延邊大學(xué)醫(yī)學(xué)院病理學(xué)教研部，吉林　延吉　133002)

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ZNF282蛋白在食管鱗癌中的表達(dá)及預(yù)后的意義

王麗強(qiáng)1金連花2張佰玲玄延花

(延邊大學(xué)醫(yī)學(xué)院病理學(xué)教研部，吉林延吉133002)

摘要〔〕目的探討ZNF282蛋白在食管鱗癌診斷及預(yù)后的臨床病理學(xué)意義。方法采用免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)35例正常食管黏膜組織和93例食管鱗癌中ZNF282蛋白的表達(dá)情況，分析其表達(dá)與患者年齡、性別、腫瘤大小、病理學(xué)分期、分化、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和臨床分期、生存率之間的關(guān)系。結(jié)果在正常食管黏膜組織中ZNF282蛋白主要表達(dá)于基底層細(xì)胞核內(nèi)，在食管鱗癌組織中ZNF282蛋白表達(dá)于鱗癌細(xì)胞核，表達(dá)較強(qiáng)，其陽(yáng)性表達(dá)率為47.3%；ZNF282蛋白表達(dá)在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的鱗癌組明顯高于無(wú)轉(zhuǎn)移組(P<0.05)，有復(fù)發(fā)的鱗癌組明顯高于無(wú)復(fù)發(fā)組(P<0.01)，死亡的鱗癌組明顯高于生存組(P<0.001)；ZNF282陽(yáng)性組患者生存率明顯低于陰性組(P<0.001)；ZNF282蛋白表達(dá)與食管鱗癌患者的年齡、性別、腫瘤大小、分化、T分級(jí)、腫瘤的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移均無(wú)相關(guān)關(guān)系。結(jié)論ZNF282蛋白在食管鱗癌中高表達(dá)，其表達(dá)與鱗癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤復(fù)發(fā)及患者的生存率有密切關(guān)系，可以成為診斷及判定食管鱗癌預(yù)后的重要參考指標(biāo)。

關(guān)鍵詞〔〕ZNF282；食管腫瘤；免疫組織化學(xué)

1吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院內(nèi)鏡中心2延吉市醫(yī)院病理科

第一作者：王麗強(qiáng)(1979-)，女，醫(yī)學(xué)碩士，主治醫(yī)師，主要從事臨床醫(yī)學(xué)研究。

食管癌的早期診斷是決定患者預(yù)后的重要因素〔1〕。鋅指蛋白(ZNF)是一種最重要最典型的DNA結(jié)合蛋白，多數(shù)ZNF具有核定位信號(hào)，在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)的蛋白可穿過(guò)核孔進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)，作為核轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控其他基因的表達(dá)〔2〕。ZNF參與多種信號(hào)通路的轉(zhuǎn)導(dǎo)，而且還與多種疾病的發(fā)生發(fā)展相關(guān)，其中研究較多的ZNF217基因參與多種實(shí)體腫瘤的發(fā)生發(fā)展過(guò)程，如胃癌、前列腺癌、結(jié)直腸癌、乳腺癌等〔3～7〕。目前國(guó)內(nèi)外對(duì)ZNF282蛋白在食管鱗癌中的表達(dá)研究報(bào)道甚少，本研究擬分析ZNF282蛋白與食管鱗癌臨床病理學(xué)特征的關(guān)系，為臨床判定患者預(yù)后提供參考指標(biāo)。

1材料和方法

1.1材料由35例正常食管黏膜組織和93例食管癌組織構(gòu)成的組織芯片標(biāo)本購(gòu)自上海芯超生物科技有限公司。93例患者中，男90例，女3例，年齡<65歲22例，≥65歲71例。根據(jù)AJCC 2009年腫瘤分期標(biāo)準(zhǔn)〔8〕，93例食管鱗癌TNM分期：Ⅰ期15例、Ⅱ期32例、Ⅲ期35例、Ⅳ期11例；無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移 36例，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移 57例。

1.2免疫組織化學(xué)染色免疫組化染色采用二步法，檢測(cè)試劑盒為中杉公司產(chǎn)品，ZNF282抗體為Sigma Aldrich(HPA024374)公司產(chǎn)品。為證明抗體免疫組化檢測(cè)的特異性，應(yīng)用兔IgG代替一抗作為對(duì)照，結(jié)果為陰性。根據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)的比例將染色結(jié)果分為陽(yáng)性與陰性：陽(yáng)性細(xì)胞占0～20%為陰性；陽(yáng)性細(xì)胞占20%以上為陽(yáng)性。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS19.0軟件行χ2檢驗(yàn)，采用Kaplan-Meier法繪制生存曲線，總生存率用Log-rank法進(jìn)行分析。

2結(jié)果

2.1ZNF282蛋白表達(dá)陽(yáng)性率在正常食管黏膜組織ZNF282蛋白主要表達(dá)于基底層細(xì)胞核內(nèi)，但表達(dá)較弱，而且表達(dá)率也較低(2/35,5.7%)。在食管鱗癌組織中，ZNF282蛋白表達(dá)于鱗癌細(xì)胞核，表達(dá)較強(qiáng)，陽(yáng)性表達(dá)率為47.3%(44/93)，明顯高于正常食管黏膜組織(P<0.01)。見圖1。

圖1　ZNF282在正常食管黏膜和食管鱗癌組織中表達(dá)(×400，二步法)

2.2ZNF282蛋白表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系ZNF282蛋白表達(dá)在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的鱗癌組明顯高于無(wú)轉(zhuǎn)移組，有復(fù)發(fā)的鱗癌組明顯高于無(wú)復(fù)發(fā)組；死亡的鱗癌組明顯高于生存組(P<0.05或P<0.01)。ZNF282蛋白表達(dá)與食管鱗癌患者的年齡、性別、腫瘤大小、分化、T分級(jí)、腫瘤的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移均無(wú)相關(guān)關(guān)系，見表1。ZNF282陽(yáng)性組患者生存率明顯低于陰性組(P<0.001)，見圖2。

表1　食管鱗癌中ZNF282的表達(dá)與臨床指標(biāo)的關(guān)系〔n(%)〕

圖2　ZNF282蛋白表達(dá)與食管鱗癌患者總生存率的關(guān)系

3討論

ZNF282屬于C2H2型家族鋅指蛋白，鼠源性同源基因ZNF282蛋白由667個(gè)氨基酸序列組成，其C末端含有5個(gè)串聯(lián)重復(fù)的C2H2型鋅指蛋白結(jié)構(gòu)域，N末端含有Krüppel樣鋅指結(jié)構(gòu)域。多數(shù)C2H2型鋅指蛋白具有核定位信號(hào)，在真核細(xì)胞內(nèi)可穿過(guò)核孔進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)，作為核轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控其他基因的表達(dá)〔9〕。目前關(guān)于ZNF282基因的研究報(bào)道甚少。ZNF282聚集到原有ERa靶向基因的啟動(dòng)子區(qū)，在啟動(dòng)子區(qū)域與CoCoA形成復(fù)合物。ZNF282與CoCoA協(xié)調(diào)并提高ERa的轉(zhuǎn)錄活性，從而展示了ZNF282-CoCoA交互功能的重要性。ZNF282直接涉及E2介導(dǎo)的ERa靶向基因表達(dá)。ZNF282作為ERa的共同激活劑在E2刺激的乳腺癌細(xì)胞增殖和細(xì)胞周期進(jìn)程中起關(guān)鍵作用。ZNF282基因的沉默還降低乳腺癌MCF-7細(xì)胞的細(xì)胞遷移和克隆形成能力，抑制其侵襲能力。在乳腺癌MCF-7細(xì)胞，ZNF282的SUMO化修飾通過(guò)增加對(duì)ERa和CoCoA的親和力，明確調(diào)節(jié)ZNF282的共同激活劑的活性，從而增加ZNF282-CoCoA復(fù)合物形成，促進(jìn)ERa靶向基因表達(dá)〔9〕。本研究說(shuō)明，檢測(cè)ZNF282蛋白對(duì)判定食管癌生物學(xué)行為、預(yù)后和指導(dǎo)治療具有重要意義，可能是治療食管癌的潛在新靶點(diǎn)。

參考文獻(xiàn)4

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〔2015-02-11修回〕

(編輯李相軍)

通訊作者：玄延花(1973-)，女，博士，副教授，主要從事腫瘤分子病理學(xué)研究。

基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81160315，81460390)

中圖分類號(hào)〔〕R735.1〔

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼〕A〔

文章編號(hào)〕1005-9202(2016)01-0101-02；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.01.045